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目的 探讨不同剂量60Coγ射线对EJ细胞DNA损伤的情况,不同剂量60Coγ 射线照射EJ细胞后诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成,以及与γH2AX表达量的关系。方法 单细胞凝胶电泳检测DNA链断裂损伤情况。免疫荧光法检测不同剂量γ 射线照射后立即、以及2 Gy γ 射线照射后不同时间的EJ细胞中γH2AX焦点的数量。流式细胞分析法检测不同剂量γ 射线照射后EJ细胞中γH2AX 蛋白表达量的变化。结果 单细胞凝胶电泳结果显示,γ射线照射后DNA损伤情况明显加重,随照射剂量的增加,细胞尾矩不断加大,0 Gy组尾矩为0.24,4 Gy照射组尾矩为5.26;免疫荧光结果显示,随着照射剂量的增加,γH2AX焦点数目及大小均明显增加,照射的剂量范围从0.1~4 Gy均可检测,且照射剂量和焦点形成数目之间存在剂量-效应关系,0.1 Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达12.37个,4 Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达46个;2 Gy γ 射线照射后24 h仍可检测到γH2AX焦点,随时间延长焦点数目减少、强度减弱,具有时间依赖性。流式细胞检测结果表明,γ 射线照射后γH2AX 蛋白表达量明显增加,呈现明显量效关系,0.1和4 Gy照射组γH2AX阳性细胞表达率分别为7.4%和29.2%。结论 免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目比其他实验方法更能敏感、直观的反映DNA损伤及修复情况,有望成为检测辐射损伤的理想生物指标。 相似文献
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电离辐射作用机体后可产生自由基,作者以模拟肺癌术中放疗的动物为实验对象,研究了黄芪总黄酮(TFA)可清除自由基功效从而了解其抗辐射损伤作用。结果表明TFA可有效的防止术中放疗所致的组织细胞损伤,使照射后组织的MDA含量下降,SOD活性受到保护,减轻肺组织充血、实交,胸膜粘连和食道粘膜糜烂等反应,并证明肺癌术中放疗可因电离辐射而产生自由基损伤。这种损伤不仅发生在胸腔内直接受照射的组织,在其他远隔部位 相似文献
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目的 观察体外培养的兔动脉平滑肌细胞(SMCs)对7射线照射的剂量效应关系,探讨电离辐射抑制SMCs增殖的细胞生物学机理。方法 静止期SMCs分别给予γ射线2.5,5,10,20及30Gy一次性照射后继续培养4,24或72h。以^3H—TdR掺入法、流式细胞术分析、微核实验和电镜观察γ射线对SMCs的DNA合成、增殖周期和损伤的影响。结果 在2.5Gy以上剂量γ射线一次性照射时,SMCs增殖明显抑制,细胞G0/G1期阻滞,均呈剂量依赖性。2.5Gy以下剂量γ射线照射后24h左右可见细胞凋亡增加,2.5Gy以上剂量7射线照射可使SMCs发生坏死。结论 电离辐射能抑制SMCs增殖,使细胞产生G0/G1期阻滞,并呈剂量依赖关系。SMCs死亡方式与受照射剂量有关。 相似文献
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硒对60Coγ射线照射人胚肺细胞DNA损伤的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
硒对60Coγ射线照射人胚肺细胞DNA损伤的保护作用樊飞跃杨素霞李煜周淑珍刘国廉曹珍山涂开成硒是生物机体必需的微量元素,具有多种生理功能。硒作为谷胱苷肽过氧化物酶的组成成分,通过清除自由基发挥其抗氧化损伤的生理功能[1,2]。本文作者应用分子生物学的... 相似文献
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γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响 总被引:1,自引:2,他引:1
目的观察γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响。方法取正常分娩的新生儿脐带血,体外肝素抗凝,应用常规密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(MNC),计数并调整细胞浓度。Gamma Cell 1000数控细胞照射仪体外照射脐血MNC细胞,吸收剂量率3.72 Gy/min。①采用3H-TdR掺入法测量脐血淋巴细胞增殖:取已分离的单个核细胞,调至细胞浓度1×106个/ml,接受0.248、0.496、0.992、1.984、3.9685、.952、7.936和15.872 Gyγ射线照射。照射后继续培养56 h后加3H-TdR(3.7×107Bq/孔)再培养8 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数(计数/min)。②采用3H-TdR释放法检测脐血NK细胞活性:取传代培养24~48 h的K562细胞为靶细胞,调整浓度1×106个/ml,加入3H-TdR(3.7×108Bq/ml)孵育6 h,洗涤2次去除游离的3H-TdR,再制备成5×105个/ml备用。脐血单个核细胞调整细胞浓度为1×107个/ml作为效应细胞(效靶比20∶1),给以上述不同剂量γ射线照射。将效应细胞与制备好的靶细胞继续培养18 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数。结果在γ射线对脐血淋巴细胞增殖活性影响的研究中,0.248~15.872 Gyγ射线照射显著降低淋巴细胞增殖能力,增殖活性抑制程度与辐射剂量呈正相关(r=0.839,P<0.05);3.968 Gyγ射线照射组增殖活性仅为对照组的30.86%(P<0.01),SI=7.8,其中3.968~15.872 Gyγ射线照射未发现其明显的增殖活性。而γ射线对脐血NK细胞活性的影响的观察中发现0.248~1.984 Gyγ射线照射可引起脐血NK细胞活性显著增高(P<0.01);3.968 Gyγ射线照射保持NK细胞活性,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);5.952~15.872 Gyγ射线可引起脐血淋巴细胞NK细胞活性显著降低(P<0.01)。结论3.968 Gyγ射线照射完全抑制脐血淋巴细胞增殖的同时仍呈现脐血NK细胞抗肿瘤活性。因此,在进行供者淋巴细胞输注或混合脐血移植时,应用3.968 Gyγ射线照射淋巴细胞,再进行过继性细胞免疫治疗可能降低移植物抗宿主病效应,同时不影响移植物抗白血病效应;混合脐血移植时增强移植物抗白血病效应。 相似文献
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不同剂量~(60)Coγ射线照射对小鼠脾细胞DNA含量的影响李子蓉,韩苇,任冬青一般认为,电离辐射对机体细胞的DNA代谢可产生重要的影响,如哈成代谢抑制,分解代谢增强等.脾脏既是机体重要的免疫器官,亦是辐射敏感器官,故由电离辐射引起的脾细胞DNA的变?.. 相似文献
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目的 研究^60Coγ衍生物富勒醇对^60Coγ射线损伤的防护和恢复治疗作用及机制。方法 分别在辐照前和辐照后给小鼠腹腔注射富勒醇,^60Coγ射线全身均匀照射,吸收剂量5.0Gy,测定小鼠体重、脾指数、胸腺指数、血象和SOD含量的变化;取小鼠脾脏并制成脾细胞悬液,应用流式细胞仪(FCM)检测脾脏细胞的周期。结果 辐照损伤后小鼠体重减轻、脾指数和胸腺指数降低、血象中各项指标下降、脾脏细胞周期中S期所占的比例升高。富勒醇可促进上述指标不同程度的恢复,并使脾脏细胞周期中S期恢复正常。加速了脾脏细胞的分裂增殖,从而使脾细胞能较快的得到修复,结论 富勒醇对^60Coγ射线照射小鼠具有一定的防护和恢复治疗的作用。 相似文献
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目的 观察γ射线对小鼠造血功能及外周血T细胞相关细胞因子和脾脏T细胞转录因子的影响,探讨射线引起的造血功能损伤与免疫异常的相关性。方法 将50只BALB/c小鼠用随机数字表法分为两组:照射组(40只)和空白对照组(10只),照射组小鼠予60Co γ射线(1.0 Gy/min,5.5 min)照射,空白对照组予假照射,照射组于照射后4、8、12及20 d,空白对照组于20 d,计数小鼠外周血白细胞和血小板;骨髓病理切片观察骨髓造血组织增生情况;流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测外周血中Th1/Th2/Th17细胞因子含量变化;Western blot法检测脾脏Th1/Th2、Th17/Treg细胞分化特异性转录因子T-bet/GATA-3、RORγt/Foxp3蛋白表达水平。结果 照射组小鼠外周血白细胞和血小板计数较空白对照组显著降低(t白细胞=18.48、15.72、9.79、3.30,t血小板=22.52、19.74、11.78、4.70,P<0.05)。照射组骨髓病理切片与空白对照组相比,骨髓增生显著低下,造血组织面积减少,被脂肪组织大量替代,巨核细胞少见,照射后8 d较20 d骨髓抑制更明显。照后8和12 d,照射组小鼠外周血Th1类细胞因子IFN-γ、TNF-α及Th2类细胞因子IL-4、IL-6含量较空白对照组明显升高,IL-17A含量照射组较空白对照组亦明显升高(tIFN-γ=2.93、3.36,tTNF-α=6.09、8.11、6.43、4.49,tIL-4=4.49、3.18,t IL-6 =5.11、8.67、6.67、8.55,P<0.05)。与空白对照组比较,照射组脾脏RORγt蛋白在照射后4、8和12 d及GATA-3、Foxp3蛋白在各时间点表达水平均降低(tRORγt=6.79、4.31、4.47,tGATA-3=3.88、8.06、2.84,3.23,tFoxp3=10.00、8.06、2.89、5.93,P<0.05)。而照射组T-bet蛋白表达较空白对照组升高(t=5.64、2.75、3.56、4.65,P<0.05)。结论 5.5 Gy γ射线照射后引起小鼠骨髓造血抑制,同时导致Th1/Th2、Th17/Treg细胞亚群功能失衡,提示由射线引起的免疫异常可能参与骨髓造血功能的损伤。 相似文献
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胸腺是T淋巴细胞发育、分化和成熟的场所。在T淋巴细胞的发育过程中,只有小部分胸腺细胞完成其发育过程,大部分胸腺细胞未发育成熟而在胸腺中死亡[1],现已证实,未成熟的胸腺细胞主要通过细胞凋亡途径被清除[2],胸腺细胞凋亡已成为机体免疫调节的主要途径之一。 相似文献
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目的 评价不同LET辐射致DNA损伤以及药物的防护作用.方法 分别以60Co γ射线、质子束、7Li重离子束照射溶液状态超螺旋构象质粒DNA,通过琼脂糖凝胶电泳分析DNA分子构象变化,检测DNA损伤程度及VND3207的防护作用.结果 质子和7Li重离子体外所致质粒DNA损伤明显比γ射线严重.药物VND3207能够有效减轻所观察的3种不同LET辐射对质粒DNA的损伤,加药组与不加药组相比,质粒DNA开环构象显著减少,保护效果随着药物浓度的增加更加明显.200 μmol/L浓度对50 Gy γ射线、质粒和7Li重离子辐照质粒DNA损伤的保护效果(质粒超螺旋构象百分比)分别为85.3%(t=3.70,P=0.033)、73.3%(t=10.58,P=0.017)和80.4%(t=8.57,P=0.008).可见VND3207对重离子辐射损伤的保护效应尤为显著,明显优于质子辐照损伤.结论 药物VND3207对辐射DNA损伤具有较好的保护作用,特别是对γ射线和重离子辐射损伤的保护作用更为明显.Abstract: Objective To evaluate the radioprotective effect of vanillin derivative VND3207 on DNA damage induced by different LET ionizing radiation.Methods The plasmid DNA in liquid was irradiated by 60Co γ-rays, proton or 7Li heavy ion with or without VND3207.The conformation changes of plasmid DNA were assessed by agarose gel electrophoresis and the quantification was done using gel imaging system.Results The DNA damage induced by proton and 7Li heavy ion was much more serious as compared with that by 60Co γ-rays, and the vanillin derivative VND3207 could efficiently decrease the DNA damage induced by all three types of irradiation sources, which was expressed as a significantly reduced ratio of open circular form (OC) of plasmid DNA.The radioprotective effect of VND3207 increased with the increasing of drug concentration.The protective efficiencies of 200 μmol/L VND3207 were 85.3% (t =3.70,P =0.033), 73.3% (t = 10.58, P =0.017)and 80.4% (t =8.57,P =0.008)on DNA damage induction by 50 Gy of γ-rays, proton and 7Li heavy ion, respectively.It seemed that the radioprotection of VND3207 was more effective on DNA damage induced by high LET heavy ion than that by proton.Conclusions VND3207 has a protective effect against the genotoxicity of different LET ionizing radiation, especially for γ-rays and 7 Li heavy ion. 相似文献
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本文报告了60Coγ射线与3-甲基胆蒽体外联合处理诱发二倍体人胚肺细胞系(HEL-8315)转化的某些生物学和形态学特征。结果表明, 当γ射线(1.0Gy)与3-McA(1.0μgg/m1)二者联仑处理时, 细胞转化率明显增加.细胞形态及生物学特性不同于对照组、溶剂(二甲Ⅱ砜)组、McA组及辐射组:(1)染色体畸交率明显增高, 亦见有单体断裂;(2)在半同体琼脂培养基中形成集落能力增强, 集落形成率高于其他组, (3)形成环状转化灶。结果提示二者鞋合处理时有某种程度的协同效应。 相似文献
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目的:研究^60Coγ射线照射人乳头状病毒永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D)的产生的活性氧(ROS)及期 对DNA的氧化损伤,以及纳米硒的保护作用。方法细胞上清中过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子(NO^-2)以及羟自由基(.OH)含量分别用辣根过氧化物酶介导的酚红氧化法、细胞色素C还原法和番红花红退色法进行测定;细胞内H2O2和H^-2分别用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)和氢 相似文献
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稀土在我国应用十分广泛,但其在辐射损伤作用方面研究报道尚少。稀土具有广泛的药理学作用特点,尤其是轻稀土具有抗氧化和清除自由基作用。在人们接触电离辐射机会越来越多的同时,高效低毒的辐射防护剂的研发无论是平时还是事故情况下都迫切需求。为探讨稀土化合物在辐射损伤中的防护作用,笔者选用了氯化铈、氯化镧对受^60Coγ射线照射人白血病细胞凋亡及DNA损伤进行了研究。 相似文献
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经皮腔内冠状动脉成形术 (Percutaneoustransluminalcoro naryangioplasty ,PTCA)是目前治疗冠心病的有效措施之一 ,但其易损伤与剥脱血管内皮 ,导致术后血管平滑肌细胞(VSMC)增生和新生内膜增厚 ,约 30 %~ 50 %的病人半年内发生术后再狭窄 (RS) [1 ] 。一氧化氮 (NO)是调节血管张力和影响血管结构变化的重要因子。PTCA术后血管NO生成紊乱是再狭窄发生的决定因素之一[4] 。本工作拟在培养的大鼠VSMC上观察60 Coγ射线辐射对NO生成系统即L 精氨酸(L Arg)、NO… 相似文献
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目的 探讨电离辐射是否对成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖游走功能具有直接抑制作用及其抑制程度,以及W11-a12的促愈使用。方法 采用培养的单层3T3细胞(小鼠胚胎FBs株)和培养的单层ECV304细胞(人脐静脉内皮细胞株)划痕伤口模型进行离体照射,观察痕隙闭合速度。结果 在6Gy照射后培养的单层3T3细胞与单层L-ECV304细胞划痕“伤口”闭合明显延缓。单层3T3细胞在伤后10h对照组伤口完全闭合,而照射组仅闭合77%;照射组单层ECV304细胞在伤后12h仅为对照组的83.6%。W11-a12用药组对单层3T3细胞与ECV304细胞“划痕”伤口的闭合均有促进作用。结论 放射损伤对成纤维细胞与血管内皮细胞的增殖游走有直接抑制作用,这是伤口难愈的重要原因之一。促进伤口细胞游走和增殖是W11-a12作用的一个重要途径。 相似文献
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本实验采用60Coγ射线源照射C57BL/6小鼠,每日照6小时,每次5.4mGy,累积剂量为32.4,65,130,260,390mGy。在终止照射后29小时受照鼠与对照鼠接受SRBC免疫,免疫后4天采用液相单层PFC技术检测脾脏的PFc反应。实验发现当累积剂量为32.4和65mGy时,PFC反应较对照显著增强,超过65mGy后PFC反应呈现剂量依赖性抑制;按照酸性α-乙酸萘酯酯酶颗粒分型计数T淋巴细胞亚组百分数,照射组与对照组基本相同。在累积剂量为65mGy时,受照鼠胸腺细胞对IL1的反应性和脾细胞对IL2的反应性呈现增强趋势。因而可以推测低水平辐射对PFC反应的刺澈作用可能与免疫增强性淋巴因子参与的免疫网络有关,从而导致免疫效应的增强。 相似文献