TGFβ1基因codon10(Leu＞Pro)变异对肝脏细胞功能的影响

目的观察TGFβ1基因codon10(Leu>Pro)的单核苷酸多态性(SNP)对肝脏细胞功能的影响。方法构建含codon10(Leu>Pro)的TGFβ1(LAP+成熟态单体)真核表达重组体CMV-Leu、CMV-Pro。在HepG2、LX-2细胞中转染pcD-NA3.1空载体、CMV-Leu、CMV-Pro,培养24h后,ELISA检测细胞培养上清液中TGFβ1的分泌量。MTT实验观察HepG2细胞转染后的增殖情况,流式细胞术检测LX-2细胞转染后CD83的表达。结果转染CMV-Leu和CMV-Pro能增加HepG2、LX-2细胞的TGFβ1分泌量,且转染CMV-Pro的细胞TGFβ1分泌量比转染CMV-Leu的细胞高(P<0.05)。转染CMV-Pro能明显增高HepG2细胞的增殖活性(P<0.01),而转染CMV-Leu能明显增加LX-2细胞CD83的表达率(P<0.01)。结论TGFβ1基因codon10(Leu>Pro)的SNP对肝脏细胞TGFβ1的分泌、细胞增殖活性及CD83的表达具有明显影响。     

转化生长因子β_1基因多态性与子痫前期相关性研究进展

子痫前期是妊娠期特发性母体全身动脉内皮细胞激活、进展性炎症反应致多器官功能障碍性疾病,发病机制尚不清楚。转化生长因子β_1(TGF-β_1)是一类含多种生物活性的多肽生长因子,具有调节细胞增殖与分化、胚胎发育、血管生成、免疫抑制等功能。子痫前期与TGF-β_1的表达异常相关,而TGF-β_1基因多态性影响其转录和翻译,可能与子痫前期的发生、发展密切相关。     

秋水仙碱对心肌组织中TGF-β_1的影响

目的 探讨秋水仙碱对压力负荷性大鼠心肌中转化生长因子β_1(TGF-β_1)的影响.方法 利用腹主动脉缩窄的方法 建立压力超负荷性心肌大鼠模型,放射免疫分析法测定局部心肌组织中血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平,RT-PCR法半定量TGF-β_1mRNA的表达变化,免疫组织化学法测定心肌TGF-β_1的表达,同时给予秋水仙碱8周,观察上述指标的变化.结果 与对照组相比,模型组AngⅡ、TGF-β_1 mRNA和TGF-β_1 表达明显增加(P<0.01),秋水仙碱能明显减少上述指标的表达.结论 秋水仙碱可以通过抑制压力负荷性心室重构大鼠RAAS和交感神经系统活性,减少神经内分泌因子AngⅡ生成,减少纤维化因子TGF-β_1的表达.     

TGF—β1对小鼠表皮细胞生长动力学影响的研究

目的探讨离体培养条件下TGF-β1对小鼠表皮细胞生长动力学的影响。方法分离培养c-57小鼠表皮细胞,以每孔5×10^4细胞接种于96孔板,培养72h后,（1）加入不同浓度的TGF—β1,观察其对表皮细胞生长的抑制作用;（2）加入不同浓度抑制剂SB431542,30min后加入10μg／mL TGF-β1,观察其对TGF—β1的拮抗作用。以XTT法测定细胞增殖曲线。以Brdu标记,用DAKO-Brdurd单克隆抗体共孵育,用荧光标记免抗鼠二抗显色,用PI衬染,流式细胞仪分析,计算不同细胞周期比率和细胞周期时间。结果TGF-β1可抑制小鼠表皮细胞的增殖,并有浓度依赖性,且作用时间越长,抑制作用越显著。SB431542能拮抗TGF-β1对表皮细胞的抑制作用,且当10-5mol／L时拮抗作用最强。流式细胞仪分析显示,用10μg,mLTGF-β1作用52h后,G0/G1期细胞百分率显著增加（从47％增加到78％）,Brdu阳性百分率下降95％,Brdu阳性细胞的下降与S期细胞下降平行。结论培养条件下TGF-β1可以使小鼠表皮细胞生长停止于G0／G1期,具有抑制细胞增殖的作用。SB431542可以拮抗TGF-β1对小鼠表皮细胞生长的抑制作用。     

血小板源性生长因子和转化生长因子-β_1对大鼠肺成纤维细胞整合素α_5β_1表达的影响

目的观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对大鼠肺成纤维细胞整合素（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）α５β１及其配体纤维连接蛋白（ＦＮ）合成的影响。方法采用细胞培养、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、免疫细胞化学方法。结果经ＰＤＧＦ－ＢＢ、ＴＧＦ－β１作用２ｈ，α５、β１、ＦＮｍＲＮＡ的表达即强于对照组，以后继续增强，其间仅于１８或１２ｈ短暂回落，但仍明显强于对照组。免疫细胞化学显示肺成纤维细胞α５β１和ＦＮ蛋白的表达也明显增强。结论ＰＤＧＦ、ＴＧＦ－β１可以促进ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮ的合成增加，其调控机制之一可能是在转录水平上增强ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮｍＲＮＡ的表达。     

TGFβ1对胃腺癌细胞SGC-7901Bcl-2表达的影响

目的：研究转化生长因子β1（transforminggrowthfactorβ1，TGFβ1）对胃癌细胞Bcl-2表达的影响．方法：TGFβ1作用于人胃癌细胞SGC－7901，48h后收集细胞爬片．用抗Bcl－2mAb和免疫组织化学SABC法及图像分析技术分析Bcl－2．结果：TGFβ1作用的胃腺癌细胞Bcl－2表达量A值122．624±0．385，较对照组细胞108．925±0．094下降显著（P＜0．05）．结论：TGFβ1对胃癌细胞的凋亡诱导作用可能与其影响Bcl－2表达有关．     

转化生长因子β_1与肿瘤关系的研究进展

转化生长因子β1(TGF-β1)是一种具有多功能的多肽类细胞因子,机体几乎所有细胞或组织都能合成和释放TGF-β1并表达相应受体。TGF-β1通过其通路发挥生物学效应,广泛参与体内各种病理生理过程。近年研究表明,在许多肿瘤中TGF-β1高度表达,TGF-β1在肿瘤中的作用极其复杂,在肿瘤发生早期可作为抑癌基因抑制细胞的增殖;但在肿瘤进展期则可促进肿瘤的侵袭和转移。这为肿瘤的防治提供了新的方向。     

原发性及转移性胰腺癌细胞中TGFβ1和TGFβR1的表达

目的 分别对具有原发癌特性的BxPC-3及转移癌特性的AsPC-1胰腺癌细胞株中TGFβ1及其Ⅰ型受体TGFβR1 mRNA及蛋白的表达情况进行研究。方法 采用实时荧光定量RT-PCR及Western blot方法检测AsPC-1和BxPC-3胰腺癌细胞中TGFβ1和TGFβR1 mRNA及蛋白的表达。结果 BxPC-3中TGFβ1和TGFβR1的mRNA和蛋白均呈低表达,AsPC-1中TGFβ1和TGFβR1的mRNA和蛋白呈高表达,两者相比较有显著统计学差异（P<0.05）。结论 TGFβ1和TGFβR1的高表达可能与胰腺癌的远处转移密切相关。     

大肠息肉及大肠癌TGFβ1、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ的表达

目的:探讨转化生长因子β1(TGFβ1)、转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβRⅠ)、Ⅱ在大肠癌发生中的可能作用。方法:免疫组织化学法检测110例大肠息肉(息肉组,其中高危型大肠腺瘤50例)、各期大肠癌(大肠癌组)40例及正常大肠组织(正常组)20例TGFβ1,TGFβRⅠ、TGFβRⅡ的表达。结果:息肉组、大肠癌组和正常组间TGFβ1、TGFβRⅡ表达差异有统计学意义(P0.01),而3组间TGFβRⅠ表达差异无统计学意义(P0.05);高危型大肠腺瘤与Duke's A期大肠癌TGFβ1表达差异有统计学意义(P0.05),而2组间TGFβRⅠ、TGFβRⅡ表达均无统计学意义(P0.05)。结论:TGFβ1、TGFβRⅡ在正常组、息肉组、大肠癌组间有不同,提示该指标可能参与大肠癌发生,TGFβ1可能在大肠腺瘤癌变早期起作用。     

转化生长因子β_1基因多态性与消化道恶性肿瘤的相关性

转化生长因子(TGF)β1是TGF-β家族中的一个重要成员,近年来对TGF-β1基因的研究发现,其基因多态性影响蛋白的转录,并与TGF-β1血浆水平相关,在多种疾病的发生、发展中起着重要的调节作用。TGF-β1基因多态性在疾病的发展过程中具有复杂性,并可能具有人群特异性及疾病特异性,其与食管癌、胃癌,结直肠癌等消化道肿瘤的关系也在不断被研究,但研究结果不一。     

肾癌根治术对病人血清转化生长因子-β_1的影响

目的 :探讨血清转化生长因子 β1 (TGF β1 )肾细胞癌侵袭性的作用。方法 :应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法检测 17例正常人血清TGF β1 和 17例肾细胞癌病人根治术前后TGF β1 浓度。结果 :所有肾细胞癌根治术前病人血清TGF β1 浓度明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,根治术后血清TGF β1 浓度明显下降 (P <0 .0 1)。结论 :血清TGF β1 浓度可能成为一种判断肾细胞癌预后的瘤标     

TGFβ1对人血管内皮细胞整合素β3及粘着斑激酶表达的影响

目的　观察转化生长因子 β1 ( TGFβ1 )对培养的人血管内皮细胞表面整合素 β3 表达及粘着斑激酶 ( focal adhesion kinase,FAK)活性的影响。方法　采用细胞 - EL ISA和免疫沉淀 -蛋白质酪氨酸激酶活性测定法。结果　 1ng/ m l、5 ng/ ml及 10 ng/ ml浓度的 TGFβ1 分别作用于培养的人血管内皮细胞 ( ECV30 4) 6、2 4和 48小时后 ,其细胞表面整合素 β3 蛋白的表达均增加 ( P<0 .0 5 ) ,且呈剂量依赖性。 5 ng/ m l和 10 ng/ m l的 TGFβ1 作用于培养的 ECV30 46小时和 2 4小时后 ,细胞中 FAK活性明显增高 ( P<0 .0 5 )。结论　 TGFβ1 促进血管内皮细胞表面整合素 β3 的表达和 FAK活性增高 ,可能是单核细胞和内皮细胞之间粘附功能增加 ,血管增生的机制之一     

中国汉族TGF-β1基因-800G〉A多态性与脑梗死的相关性

目的：探讨转化生长因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）基因多态性与脑梗死的关系。方法：利用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性分析法检测247例脑梗死（cerebral infarction,CI）患者及167例性别、年龄匹配的健康体检者-800G〉A多态位点的基因型,并计算出各等位基因频率在组中的频率分布。结果：中国湖南汉族人群中存在-800G〉A位点多态性。-800G〉A基因型在两个人群中的分布符合Hardy-Weinberg平衡,脑梗死组与对照组相比,基因型及等位基因频率分布无统计学差异（P〉0.05）,Logistic回归分析未发现某种基因型增加或者降低脑梗死发生的风险。结论：TGF-β1-800G〉A基因多态性与中国湖南地区汉族人群脑梗死无明显相关性。     

转化生长因子-β_1在肾细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）在肾细胞癌中的表达部位和程度以及与临床指标间的关系。方法：应用抗ＴＧＦ－β１多克隆抗体对４３例肾细胞癌进行免疫组化研究（同时取１０例尸检正常肾组织作为对照）。结果：ＴＧＦ－β１在肾癌组织中表达阳性率８６．１％（３７／４３）,明显高于正常肾组织（Ｐ＜０．００５）;表达强度与术中见有无周围组织侵袭有相关性（Ｐ＜０．０５）,与肿瘤大小无关。结论：ＴＧＦ－β１表达是肾癌的恶性表型之一,对评估肾癌的预后有重要意义。     

系统性红斑狼疮患者血清转化生长因子β_1的含量变化

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清转化生长因子pl(TGF-81)的含量变化及意义。方法采用双抗体夹心ELISA法检测健康人和SLE患者血清TGF-β_1含量,并分析其与临床相关实验室指标的关系。结果 SLE患者血清中TGF-β_1水平显著低于对照组(P<0.01),但与SLE的其它实验室指标无相关关系,缓解期与活动期SLE患者TGF-β_1水平差异无显著性(P>0.05)。结论 SLE患者血清TGF-β_1水平较正常对照组降低,提示其低水平可能与SLE的发生有关,但它并不能判别SLE的活动程度。     

转化生长因子-β_1基因L10P多态与结直肠癌遗传易感性的相关性

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β_1基因L10P多态与结直肠癌(CRC)遗传易感性的关系.方法 采用TaqMan方法检测345例CRC患者及670名对照者的TGF-β_1 L10P基因型的分布.结果 两组间TGF-β_1 L10P基因型分布的差异无统计学意义(P=0.213).TNM分层分析结果显示,P是TNM Ⅰ～Ⅱ期CRC发病风险的遗传保护因子,与LL纯合子相比,LP杂合子的CRC发病风险显著降低至0.65(95%CI为0.44～0.95,P=0.027),PP纯合子的CRC发病风险显著降低至0.47(95%CI为0.28～0.78,P=0.004);将LP和PP基因型合并计算,则其CRC发病风险与LL基因型相比,降低至0.59(95%CI为0.41～0.85,P=0.005).结论 TGF-β_1基因L10P多态可能是中国人群TNM Ⅰ～Ⅱ期CRC发病风险的一个遗传保护因素.     

pcDU_6质粒载体介导的TGFβ_1 shRNA抑制TGFβ_1在人腹膜间皮细胞中的表达

目的 :研究pcDU6质粒载体介导的转化生长因子β1短发夹RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)对人腹膜间皮细胞 (HPMCs)转化生长因子 β1(TGFβ1)表达的影响。方法 :针对TGFβ1的以GGCC开始的 2 1碱基大小的片段 ,分别设计 2对寡核苷酸 ,形成双链后将其依次连入带有U6启动子的 pcDNA3.1( )载体 (命名为 pcDU6) ,2对DNA双链通过BamHI酶切位点连接后形成中间由 6碱基序列间隔的反向互补序列 ,构建成TGFβ1短发夹RNA的产生质粒。采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞 ,建立稳定的体外培养模型。用脂质体转染表达转化生长因子β1shRNA的pcDU6载体质粒和表达反义TGFβ1RNA的pcDNA3.1( )的载体质粒入 4 .2 5 %D 葡萄糖和LPS刺激下人腹膜间皮细胞。采用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)半定量分析HPMC中TGFβ1mRNA的表达。采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验检测HPMC培养液中TGFβ1蛋白质水平。结果 :HPMC在 4 .2 5 %D 葡萄糖和LPS的刺激下可明显上调TGFβ1的表达 (P <0 .0 1)。pcDU6载体质粒介导的转化生长因子 β1shRNA干扰组较 pc DU6空载体组明显下调TGFβ1的表达 (P <0 .0 1)。pcDU6载体质粒介导的转化生长因子 β1shRNA干扰组间比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;pcDNA3.1( )的载体质粒介导的反义RNA组与 pcDU     

转化生长因子β_1在输卵管阻塞性不孕发病机制中的作用

目的:探索转化生长因子β1在输卵管阻塞性不孕发病机制中的作用。方法:对本院2007年1月至2007年12月不孕的病例进行临床分析。结果:输卵管不育占不育症的22.8%,TGF-β1在输卵管阻塞性不孕组和子宫肌瘤导致不孕组有明显差异,差异有统计学意义。结论:TGF-β1是导致输卵管阻塞的重要原因,腹腔镜是治疗输卵管不通导致不孕的重要手段,使用TGF-β1活性抑制剂安全可靠,疗效明显。     

慢性肝病患者PBMC及血浆中TGF-β_1的表达水平与肝纤维化程度的关系

目的:探讨慢性肝病患者单个核细胞(PBMC)及血浆中转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平与肝纤维化发生发展的关系。方法:采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测慢性肝病患者PBMC中TGF-β1mRNA含量;ELISA方法检测血浆TGF-β1含量;采用放射免疫方法检测HA,LN,CIV,PCⅢ含量。同时对检测结果进行对比分析,以探讨各检测指标的相关性。结果:慢性乙型肝炎中重度患者及肝炎后肝纤维化患者PBMC中TGF-β1含量及血浆TGF-β1水平均显著高于正常;且与HA,LN,CIV,PCⅢ四项肝纤维化诊断指标呈正相关。结论:慢性肝病患者PBMC及血浆中TGF-β1表达水平可以作为肝纤维化的诊断指标;但能否作为早期诊断的敏感指标,仍需要临床大量试验证实。