不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca^2＋转运功…

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ＾２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化，结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ＾２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ＾２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ＾２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素含量变化与细胞膜Ｃａ＾２＋     

前胡丙素对自发性高血压大鼠心肌受磷蛋白表达及磷酸化水平的影响

目的:探讨前胡丙素对自发性高血压大鼠(SHR)心肌重构的影响及可能机制?方法:SHR 20只,完全随机分为药物组[前胡丙素20 mg/(kg·d)灌胃,n = 10],对照组(n = 10),另设SD大鼠10只为正常组,干预8周,计算心脏质量指数及左室质量指数,光镜观察左心室心肌细胞形态和结构的变化,透射电镜观察心肌细胞超微结构及线粒体损伤情况,然后取左心室心肌制备匀浆,提取RNA,用半定量RT-PCR法测定受磷蛋白的基因表达水平,用液体闪烁计数法测定受磷蛋白的磷酸化水平?结果:与对照组比较,药物组用前胡丙素治疗8周后,心脏及左室质量指数明显下降(P < 0.05),SHR心肌肥厚等病理改变明显改善,左心室心肌受磷蛋白mRNA表达上调 (P < 0.05),心肌受磷蛋白磷酸化水平增加(P < 0.05),差异具有统计学意义?结论:前胡丙素有改善心肌重构作用,可能是通过上调SHR心肌肌浆网受磷蛋白表达及磷酸化水平而实现的?     

肿瘤坏死因子α对心肌细胞内受磷蛋白表达和细胞内钙的调节作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对培养的乳鼠心肌细胞内受磷蛋白(PLB)和肌浆网钙泵蛋白同功酶(SERCA2a)基因表达及细胞内游离钙离子浓度的影响.方法体外培养的乳鼠心肌细胞被随机分成对照组和不同浓度TNFα(1、10、30、50、70μg/L)干预组,用单管一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术,观察TNFα对乳鼠心肌细胞PLB和SERCA2a基因表达的影响.采用Fluo-3/Am荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦显微镜下测定TNFα对单个乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度的影响.结果TNFα浓度依赖性增高PLB mRNA和蛋白质的表达,10、30、50、70μg/L TNFα组PLB mRNA表达量分别较对照组增加66%、106%、141%、189%(P＜0.05),蛋白质的表达分别较对照组提高30%、48%、73%、114%(P＜0.001).而1μg/L TNFα组与对照组PLB mRNA和蛋白质表达差异均无显著性.TNFα不影响SERCA2a的表达.50μg/L TNFα作用细胞24 h,能降低异丙肾上腺素刺激的[Ca2 ]i变化幅度的增高,[Ca2 ]i变化幅度较对照组减少33%(P＜0.01),但对静息状态下[Ca2 ]i变化幅度无影响.结论TNFα可增强心肌细胞内PLB的表达,降低心肌细胞内[Ca2 ]i的变化,这可能与TNFα对心肌细胞的负性肌力作用有关.     

川芎嗪对高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙的影响

目的研究川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响。方法以体外培养的自发性高血压大鼠和正常血压对照大鼠的心肌细胞及动脉平滑肌细胞为实验模型，用Fura-2荧光法检测细胞内游离钙浓度。结果自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度显著高于正常血压对照大鼠。川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度具有显著抑制作用，并呈现量效关系。较高剂量的川芎嗪对正常血压对照大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度也有抑制作用；而较低剂量的川芎嗪不仅无抑制作用，还使正常血压对照大鼠心肌细胞游离钙浓度显著升高。结论川芎嗪具有钙离子拮抗剂的特性，其在高血压防治中的作用，值得进一步探讨。     

保心康对心肌肥大型心力衰竭大鼠血管平滑肌环核苷酸水平的影响

目的：探讨保心康（由人参、附子、毛冬青等组成）对心肌肥大型心力衰竭大鼠血管平滑肌环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟苷（cGMP）水平的影响及其作用机理。方法：大鼠皮下注射异丙肾上腺素共13d以制备心肌肥大型心力衰竭模型，采用放射免疫分析法观察各组动物血管平滑肌cAMP和cGMP水平的变化，同时对大鼠体重和心、肝、肺分别称重，并对心、肝、肺脏器进行组织形态学观察。结果：模型组大鼠血管平滑肌cAMP、cGMP含量及心脏和肝脏的指数均比正常对照组显著升高（P＜0．01）。而中药保心康能明显降低cAMP和cGMP含量及心脏和肝脏的指数（P＜0．05或P＜0．01）。组织形态学观察显示保心康能改善病理状态下大鼠心、肝脏形态结构。结论：保心康对实验性心肌肥大型心力衰竭有较好的防治作用，其作用机理与cAMP、cGMP的调节有关。     

运动训练对急性心肌梗死后心室重构中受磷蛋白和肌浆网钙泵表达的影响

目的 探讨急性心肌梗死(AMI)后运动训练对心室重构的影响及对肌浆网钙摄取的调控机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、心梗对照组(AMI-Sed组)和心梗+运动训练(AMI-Ex组).结扎前降支建立AMI模型,AMI-Ex组进行跑台训练.AMI后9周,测量血液动力学参数及胶原容积分数;提取肌浆网测量摄钙能力,心肌cAMP含量,PKA、SERCA2a、16Ser-PLB及17Thr-PLB蛋白表达量.结果 与AMI-Sed组比较,AMI-Ex组RVWI、肺含水率、LVSP及+dp/dt max显著升高(P＜0.05),LVEDP显著降低(P＜0.05).摄钙能力、PKA、SERCA2a及16Ser-PLB蛋白表达量显著提高(P＜0.05).结论 AMI后运动训练可改善心室重构及左室泵功能障碍.其机制可能与cAMP-PICA-16Ser-PLB-SERCA2a通路有关.     

血灵对大鼠血管平滑肌收缩的影响

目的：证明血灵对血管平滑肌钙通道阻滞作用。方法：用累积浓度法依次加入去甲肾上腺素（NE），得NE引起的血管平滑肌收缩的量效曲线，收缩张力恢复正常后加入血灵，测定给药后量效曲线，观察血灵对NE引起的血管平滑肌收缩的影响；同法观察血灵对KCl、CaCl2引起的血管平滑肌收缩的影响，及对NE引起的依赖于细胞内钙与细胞外钙收缩反应的影响。结果：血灵能够使NE和CaCl2收缩血管平滑肌的量效曲线下移，作用性质与维拉帕米（Ver)相似，呈非竞争性拮抗反应；血灵对NE引起的依赖于细胞内钙收缩有明显的抑制作用，而对外钙收缩则无明显的抑制。结论：血灵的作用类似于钙通道阻滞剂维拉帕米，提示血灵降血压与钙通道阻滞作用有关。     

前胡丙素对自发性高血压大鼠血压及心肌受磷蛋白表达的影响

目的 探讨前胡丙素对自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响及可能机制.方法选择SHR 20只,随机分为药物组(n=10),对照组(n=10),另选SD大鼠10只为SD组.药物组给予前胡丙素20 mg/kg-1·d-1灌胃,其余对照组和SD组同等容积聚乙二醇400灌胃,干预8周,运用透射电镜观察心肌细胞超微结构及线粒体损伤情况,并用半定量反转录PCR(RT-PCR)法测定受磷蛋白(PLB)的基因表达水平.结果 治疗前药物组大鼠的收缩压[(184.3±19.7)mm Hg]与对照组[(183.3±17.2)mm Hg]接近,与SD组相比明显升高,差异有统计学意义,治疗后药物组大鼠收缩压[(149.3     

高血压促进血管平滑肌细胞L型钙离子通道重塑的研究进展

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表达多种离子通道,包括各型钙离子通道,其中L型电压依赖型钙离子通道(L-type voltage-dependent calcium channels,LTCC)对于调节微小动脉血管张力发挥着重要作用。高血压时动脉血管张力异常增高,这种血管张力的变化又会影响LTCC的功能和表达。本篇综述将重点阐述VSMCs上研究较为充分的LTCC。首先,简要介绍LTCC在血管功能调节方面的作用;其次,讨论高血压时VSMCs上LTCC功能和表达变化的最新研究;最后,根据现有研究阐述LTCC作为高血压治疗靶点的应用前景。     

Effects of Total Flavonoids ofHippophae RhamnoidesL.on Intracellular Free Calciumin Cultured Vascular Smooth Muscle Cells of Spontaneously Hypertensive Rats and Wistar-Kyoto Rats

Essential hypertension (EH) has become oneof the main diseases that endanger human healthinmodern society . It has been a key project forscholars at home and abroad to find out howto ef-fectively prevent and cure hypertension andlesionsinits target organs . Total flavonoids ofHippophae rhamnoidesL.(TFH) ,a natural flavonoids ,is extractedfromthe fruit of wild plantHippophae rhamnoidesL.,the great mass of which is quercetin ( Que) andisorhamnetin (Isor) . Research has found thatTFH has di…     

神经肽Y对培养的自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞的影响

应用细胞培养,~3(H-)胸腺嘧啶核苷和~3(H-)亮氨酸的掺入及细胞计数方法,研究缩血管物质神经肽Y(NPY)对血管平滑肌细胞生长的作用。结果发现,用神经肽Y作用48h后可促进离体培养的自发性高血压大鼠(SHR)动脉平滑肌细胞DNA合成增加28.0％,蛋白质合成增加54.6％,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);而细胞数无明显增加(P>0.05)。提示,NPY对培养的SHR动脉平滑肌细胞有促肥大效应;SHR血管壁上NPY分布密度增加是引起高血压时血管壁结构改变的重要因素之一。     

抗高血压因子对正常及高血压动物动脉平滑肌Ca~(2+)内流的影响

通过实验观察到从自发性高血压大鼠(SHR)红细胞提取的抗高血压因子(AHF)可以明显抑制SHR血管平滑肌(VSM)Ca~(2+)内流,呈剂量依赖关系。而对正常血压大鼠(WKY)无影响。这种抑制作用及与剂量的关系在肠系膜动脉比主动脉更明显。结果表明,AHF的降压作用可能与抑制VSM Ca~(2+)内流有关。     

槲皮素对大鼠血管平滑肌肌张力的影响

[目的]观察槲皮素对血管平滑肌肌张力的影响并初步探讨其机制。[方法]Wistar大鼠,取胸主动脉,制成血管环,采用离体血管环灌流法,观察不同浓度的槲皮素对血管平滑肌肌张力的影响。[结果]对于内皮完整的血管环,低浓度（≤10-5mol.L-1）槲皮素可明显抑制去甲肾上腺素或氯化钾引起的血管收缩,且在一定浓度范围内呈剂量依赖性;对于去内皮的血管环,抑制作用则不明显;高浓度（〉10-5mol.L-1）槲皮素,无论是对于内皮完整的还是去内皮的血管环,均可使血管收缩,其收缩作用可被异博定阻断。[结论]槲皮素在低浓度时,对于非内皮损伤所致的高血压具有一定的降压作用;同时槲皮素可激活血管平滑肌L-型钙通道,因此高浓度则表现出相反作用。     

大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钙激活氯通道与细胞质钙的关系及意义

目的观察大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）膜钙激活氯通道（ClCa）与细胞质钙的关系及意义。方法大鼠PASMCs获取采用急性酶分离法。荧光光度法检测细胞质内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）；全细胞膜片钳技术测定PASMCs钙激活氯电流（ICl（Ca））；等长张力测定法观察ClCa阻滞剂尼氟灭酸（NFA）和Indaryloxyacetic acid（IAA-94）对大鼠肺动脉张力的影响。结果环匹阿尼酸（CPA）和苯福林（PE）均可引起[Ca^2＋]i升高；升高的[Ca^2＋]i可以引出ICl（Ca）；NFA和IAA-94可以舒张CPA、PE引起的肺动脉环收缩。结论生理条件下大鼠PASMCs的ClCa是钙依赖性的；细胞外Ca^2＋内流及细胞质内Ca^2＋释放均可激活该通道，其参与了血管活性药诱导的肺动脉收缩。     

钙拮抗剂和ACEI对主动脉平滑肌细胞增殖的影响

该研究以培养人体血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）为模型，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验观察钙拮抗剂（Ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ、Ａｍｌｏｄｉｐｉｎｅ）和ＡＣＥＩ（Ｃｉｌａｚａｐｒｉｌ、Ｂｅｎａｚａｐｒｉｌ）对细胞增殖效应。结果３种浓度钙拮抗剂都明显抑制细胞增殖（Ｐ＜０．０１），高浓度（１０－５ｍｏｌ／Ｌ、５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）时Ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ抑制程度更好（Ｐ＜０．０５），低浓度（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）以Ａｍｌｏｄｉｐｉｎｅ为佳（Ｐ＜０．０５）。ＡＣＥＩ中发现高浓度时２种药物均能抑制细胞增殖（Ｐ＜０．０１），而低浓度时细胞生长反常地超过对照组（Ｐ＜０．０５）。钙拮抗剂与ＡＣＥＩ比较，前者尤其是Ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ抑制细胞增殖程度较ＡＣＥＩ明显。由此推测小剂量ＡＣＥＩ反而刺激细胞增生是否与药物含量较低时仅抑制血浆ＡＣＥ活性，不能抑制组织ＡＣＥ活性有关。     

N-苄基氟哌啶醇氯化物对大鼠血管平滑肌细胞内钙离子的影响

目的:动态观察N_苄基氟哌啶醇氯化物(F3)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内Ca2+的影响。方法:用Ca2+荧光染料Fluo_3_AM负载大鼠胸主动脉平滑肌细胞,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果:在含CaCl2(1.26mmol/L)的细胞外液中,30 mmol/L KCl使细胞内钙荧光强度(FI)迅速增强,F3可以拮抗KCl诱导钙FI增强作用,并呈量效依赖和时间依赖关系。4种浓度F3(0.01、0.1、1.0、10μmol/L)作用3 min时,使KCl诱导细胞内钙FI从(81±4)%分别降至(71±18)%(n=20,P<0.05)、(51±12)%(n=20,P<0.01)、(39±14)%(n=20,P<0.01)、(28±14)%(n=20,P<0.01)。钙FI变化最快的时程是在给药后的0~30 s。结论:F3通过阻断细胞膜电压依赖性钙通道降低平滑肌细胞内钙浓度,这可能是其扩张血管,改善心肌缺血的机制。     

哇巴因对大鼠血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨哇巴因对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）内Ca2+浓度的影响。方法用组织
块贴壁法进行大鼠胸主动脉VSMCs原代培养,用免疫组织化学方法进行细胞鉴定,采用放射自显影术检测哇巴因对大鼠胸主动
脉VSMCs的结合能力,采用Fluo 3-AM（钙离子荧光探针）法研究哇巴因在短时间内对VSMCs细胞内Ca2+浓度的影响,探讨不同
浓度的钠泵α2亚单位截断性片段的拮抗作用。结果（1）放射自显影术检测结果显示,哇巴因与VSMCs间有一定的结合能力。
在0.1~100 nmol/L浓度范围,随着哇巴因浓度的增加,VSMCs与哇巴因的结合能力增加;（2）Fluo 3-AM检测VSMCs内Ca2+浓度
结果显示：不同浓度的哇巴因在短时间内能够引起VSMCs内Ca2+浓度的变化。在0~3200 nmol/L浓度范围,细胞内Ca2+离子浓
度会随着哇巴因浓度的增加呈现出逐渐升高的趋势;（3）不同浓度的钠泵α2亚单位截断性片段可以拮抗哇巴因引起的VSMCs内
Ca2+浓度的升高作用。结论哇巴因引起的细胞内高钙是高哇巴因高血压发生的细胞学基础,钠泵α2亚单位截断性片段可以拮
抗哇巴因引起的VSMCs内Ca2+浓度的升高作用,为进一步探讨哇巴因的作用机制结高血压的治疗提供了实验依据。
     

凋亡相关基因Bcl-6和Bax在高血压大鼠血管平滑肌细胞中的表达

目的 :探讨高血压病血管平滑肌细胞凋亡相关基因的表达情况。方法 :Wistar大鼠两肾一夹型高血压模型 ,4周后处死 ,采用免疫组织化学方法 ,观察肾细小动脉平滑肌细胞中Bcl- 6和Bax表达。结果 :实验期间 ,高血压组动脉血压从14 9± 2 4kPa(112± 18mmHg)升高到实验结束时的 2 6 4± 4 4kPa(198± 33mmHg) ;高血压组肾脏小叶间动脉Bcl - 6染色阳性率 (12 96 % )明显高于对照组 (5 2 1% ,P <0 0 1) ;入球动脉、小叶间动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)中Bcl - 6阳性率(1 70 %和 5 2 2 % )均高于对照组 (P <0 0 5 ) ;Bax基因蛋白在高血压组肾脏弓形动脉及其VSMC染色阳性率 (分别为1 90 %和 0 90 % )低于对照组 (11 4 3%和 1 6 0 % ) ,P <0 0 5 ;高血压组叶间动脉VSMC中Bax染色阳性率 (2 99%和1 18% )均明显低于对照组 (P <0 0 1) ;在高血压组入球动脉中 ,Bcl- 6和Bax基因蛋白染色之间存在相关性 (χ2 =4 0 0 ,P<0 0 5 ) ;肾细动脉Bcl- 6基因蛋白染色阳性率 (3 0 2 % )明显低于小动脉 (13 6 0 % ) ,P <0 0 1。结论 :两肾一夹型高血压时 ,肾细、小动脉血管平滑肌细胞凋亡相关基因Bcl- 6 /Bax比值升高 ,使得凋亡减少 ,平滑肌细胞数目增多     

高血压大鼠视网膜组织Ca2+-ATP酶组织化学及卡托普利终身治疗的观察

目的探讨高血压视网膜病变的发病机制及卡托普利防治高血压视网膜病的治疗机制. 方法 应用光镜定量酶组织化学方法对正常京都种大鼠(正常组),自发性高血压大鼠(高血压组)和卡托普利终身用药治疗的自发性高血压大鼠(用药组)的视网膜组织的Ca2+-ATP酶的分布和活性进行定量观察. 结果 Ca2+-ATP酶在正常组大鼠视网膜组织中主要分布在杆锥细胞层内节、外核层和节细胞神经纤维层,上述三层Ca2+-ATP酶活性(U/μm2)分别为0.662±0.014, 0.665±0.018和0.525±0.021,在高血压组大鼠视网膜组织中,各层Ca2+-ATP酶活性下降,三层Ca2+-ATP酶活性分别为0.610±0.017, 0.598±0.014和0.481±0.010;在用药组大鼠视网膜组织中,Ca2+-ATP酶活性较高血压组增强,三层Ca2+-ATP酶活性分别为0.650±0.016, 0.650±0.014, 0.519±0.022.结论 Ca2+-ATP酶活性下降,细胞内液Ca2+浓度增加是高血压视网膜病变的原因之一;卡托普利防治高血压视网膜病的机制与增强Ca2+-ATP酶和降低细胞内Ca2+浓度有关.