胚胎隔或隔＋蓝斑联合移植改善单侧穹窿伞损伤的老年大鼠空间记忆

对老年对照、单侧穹窿伞横断、穹窿伞横断＋隔移植及穹窿伞横断＋隔＋蓝斑联合移植等四组大鼠，在完全切断大鼠左侧穹窿伞后１０ｄ，将胚胎隔或隔＋蓝斑移植物的悬浮液注入损伤鼠双侧海马．１６周后分别用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫观察大鼠的学习记忆，用ＣｈＡＴ及ＴＨ染色观察移植物的生长，以ＡＣｈＥ染色观察宿主海马胆碱能纤维密度。结果表明：单侧穹窿伞横断不仅能严重地破坏大鼠的学习记忆功能，同时也使同侧海马的胆碱能纤维大量丧失；隔移植能改善损伤鼠的学习记忆功能，同时也使去胆碱能传入的海马重获胆碱能纤维的支配；隔＋蓝斑联合移植虽也能改善学习记忆功能，但作用不如隔移植，而且联合移植只提高损伤鼠海马ＣＡ１区胆碱能纤维密度，对ＣＡ３区及齿状回无作用，提示胚胎蓝斑不能协同隔移植物起作用。     

蒙古种沙土鼠背海马胆碱能投射来源

应用ＨＲＰ逆行追踪乙酰胆碱酯酶（Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ ＡｃｈＥ）组化技术，研究了２５例蒙古沙土鼠背海马的胆碱能投射来源。将ＨＲＰ引入背海马后行ＡｃｈＥ－ＨＲＰ联合反应，在同侧内侧隔核、斜角带核、视前大细胞核等处（基底大细胞核）出现ＡｃｈＥ－ＨＲＰ双标记神经元胞体，并在背海马局部发现广泛存在着ＡｃｈＥ纤维和末梢，而未见强染色的ＡｃｈＥ阳性胞体。以上结果提示：沙土鼠背海马的乙酰胆碱     

胚胎隔或隔＋蓝斑联合移植改善单侧穹窿伞损伤的老年大鼠空…

对老年对照、单侧穹窿伞横断、穹窿伞横断＋隔移植及穹窿伞横断＋隔＋蓝斑联合移植等四组大鼠，在完全切断左侧穹窿伞后１０ｄ，将胚胎隔或隔＋蓝斑移植物的悬浮液注入损伤鼠双侧海马。１６周后分别用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫观察大鼠的学习记忆，用ＣｈＡＴ及ＴＨ染色观察移植物的生长，以ＡＣｈＥ染色观察宿主海马胆碱能纤维密度。结果表明：单侧穹窿伞横断不仅能严重地破坏大鼠的学习记忆功能，同时也使同侧海马的胆碱能纤维大量丧失；     

毁损Meynert基底核造成皮层及海马的乙酰胆硷酯酶减少行为学和形态学研究(英文)

本研究通过毁损Ｍ ｅｙｎｅｒｔ基底核（ｎｂＭ ）建立Ａｌｚｈｅｉｍ ｅｒ氏病（ＡＤ）动物模型。用乙酰胆硷酯酶（ＡＣｈＥ）细胞化学方法对模型动物大脑皮层及海马进行反应，评价ＡＣｈＥ 与ＡＤ 之间可能存在的关系。将４８ 只大鼠分成对照组及实验组，用Ｍｏｒｒｉｓ 水迷宫（ＭＷ Ｍ ）测定行为学变化。在实验组，以局部注射海人藻酸的方法毁损ｎｂＭ 。术后７ ｄ，再次检测其行为学变化。存活不同时间后，用ＡＣｈＥ 酶细胞化学技术染色脑切片，用图象分析系统测算海马层ＡＣｈＥ阳性神经元及纤维的体积密度。结果显示，毁损ｎｂＭ 鼠皮质及海马的ＡＣｈＥ阳性神经元纤维明显减少，其特征为片层结构缺失。这些变化在毁损ｎｂＭ 鼠３～４ 个月及９～１０ 个月组间无显著差异。本研究证明，毁损ｎｂＭ 出现的ＡＣｈＥ减少与ＡＤ 的发生关系密切，且与同一动物模型β 淀粉样蛋白及τ蛋白过度表达在时间上一致，后者是ＡＤ 病人的特征。     

毁损Meynert基底核造成皮层及海马的乙酰胆硷酯酶减少：行为学 …

本研究通过毁损Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核（ｎｂＭ）建立Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏病（ＡＤ）动物模型。用乙酰胆硷酯酶（ＡＣｈＥ）细胞化学方法对模型动物大脑皮层及海马进行反应,评价ＡｃｈＥ与ＡＤ之间可能存在的关系,将４８只大鼠分成对照组及实验组,用Ｍｏｒｒｉｓ水宫（ＭＷＭ）测定行为学变化,在实验组,以局部注射海人藻酸的方法毁损ｎｂＭ。术后７ｄ,再次检测其行为学变化,存活不同时间后,用ＡＣｈＥ酶细胞化学技术染色脑切     

大鼠重组中枢型乙酰胆碱转移酶单克隆抗体的制备(英文)

利用分子生物学方法制备了大鼠中枢型乙酰胆碱转移酶（ｃＣｈＡＴ）的单克隆抗体并利用免疫组织化学等方法进行了检测。以大鼠纹状体ｃＤＮＡ 为模板，扩增出长度为７１５ ｂｐ 的大鼠ｃＣｈＡＴ 基因片段（含外显子６～１０）。将该片段克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ 载体中进行测序，将碱基序列正确的ｃＣｈＡＴ ｃＤＮＡ 片段定向插入ｐＭ ＡＬ－ｃ２ 载体中，构建成表达载体。利用ＤＮＡ测序对连接部位的阅读框架进行分析，未出现移码突变。将表达载体转化大肠杆菌并经诱导表达了分子量为６９ ｋＤａ 的融合蛋白，其大小与用表达载体的氨基酸序列所推导的分子量一致。用纯化后的融合蛋白作为抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠，并获得了Ｍ ａｂ６７６ 克隆。利用Ｗ ｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法对其进行分析表明该克隆能识别大鼠脑组织提取物中分子量为６２ ｋＤａ 的蛋白成分，这与大鼠脑中ＣｈＡＴ 分子量的大小一致。利用此单克隆抗体进行免疫组织化学反应的阳性结构见于纹状体、苍白球、Ｂｒｏｃａ氏斜角带核、无名质、内侧隔核以及脑干的脑神经运动核等胆碱能神经元的聚集区。上述结果表明本研究所制备的单克隆抗体具有识别大鼠ｃＣｈＡＴ 的特异性。     

缺损运动神经元的大鼠脊髓内胚胎脊髓移植物的存活与生长

ＳＤ大鼠于出生２４ｈ内行左侧坐骨神经钳压术，造成左侧腰段脊髓前角运动神经元缺损。５￣１２周后，作为脊髓移植的受体鼠。供体为胚龄１３￣１４ｄ的ＳＤ大鼠胚胎，取其脊髓腹侧组织块作为移植物，植入受体鼠左侧腰段脊髓的背外侧部。将受体鼠右侧带神经的Ｍｕ长伸肌移放到脊椎旁，神经的断端插入胚胎移植物处。术后动物存活６￣８周，行组织学（包括电镜）、ＡＣｈＥ组织化学、ＣｈＡＴ免疫组织化学和ＨＲＰ逆行追踪等观察。结果     

摘除松果体对大鼠学习记忆及基底前脑胆碱能系统的影响

目的　探讨松果体功能减退对大鼠学习记忆及基底前脑胆碱能系统的影响。方法　选用 3月龄SD大鼠 2 4只 ,随机分为对照组、去松果体组和褪黑素 (MT)组。手术摘除松果体。饲养 1个月后用Morris水迷宫测试学习记忆功能 ,同时用组织化学和免疫组化方法测定海马、前额叶皮质AchE纤维和内侧隔核、斜角带核的ChAT神经元的数量。结果　与对照组比较 ,去松果体组逃避潜伏期明显增加 ,海马、前额叶皮质AchE纤维数量明显减少 ,但内侧隔核、斜角带核的ChAT神经元数量变化不明显。结论　大鼠去松果体可引起大鼠学习记忆能力减弱 ,这可能与基底前脑胆碱能神经元的功能下降有关     

高压氧抗移植排斥反应及其机制的研究

目的：探讨高压氧降低细胞免疫功能、抗移植排斥反应的机理。方法：供鼠ＢＡＬＢＣ（Ｈ－２ｄ）,受鼠Ｃ５７ＢＬ６（Ｈ－２ｂ）,皮肤移植后,分对照组、实验组,实验组小鼠用９９－２％氧气,０－２５ＭＰａ,作用１－５ｈ,每日一次,看高压氧对小鼠移植皮片存活时间的影响,分别于术后３ｄ、７ｄ、１４ｄ、２１ｄ检测小鼠脾Ｔｈｙ－２阳性细胞、Ｌ３Ｔ４阳性细胞、Ｌｙｔ－２阳性细胞百分率的变化及ＩＬ－２产生量、对ＩＬ－２Ｒ反应性,同时做ＴｈＴｓ比值变化的比较。另外,于术后１４ｄ,应用免疫组化法检测移植皮片局部ＣＤ＋…     

大鼠海马内胆碱能纤维损伤的侧枝抽芽

目的：观察穿窿海马伞损伤鼠海马胆碱能纤维损伤后的再生状况。方法：切断ＳＤ成年大鼠穹窿海马伞,用染ＡＣｈＥ纤维的组织化学方法结合网格测试,分析术后１、２、３、４周海马ＣＡ１区和齿状回的分子层胆碱能纤维的侧支抽芽。结果：损伤１周时ＣＡ１区和齿状回的分子层胆碱能纤维明显减少,分别减少到６７．５０％和６６．９１％;从第２周开始纤维数量逐渐恢复,至第４周ＣＡ１区分子层纤维恢复到正常的８２．４２％,而龄状回分     

α-二氢麦角隐亭在大鼠缺血性脊髓损伤中作用的探讨

目的 探讨α－二氢麦角隐亭ＤＨＥＣ对脊髓损伤后由血工挛造成２次神经损伤的保护作用。方法 对７２只Ｗｉｓｔａｒ大鼠行阻断腹主动脉２５ｍｉｎ后再灌流,制备成缺血性脊髓损伤模型,大鼠分成,α－二氢麦角隐亭,海得静,尼莫地平和盐水对照组,分别于药物治疗的３ｄ,７ｄ,１４ｄ处死动物,进行ＣＮＴＦ抗体的ＡＢＣ免疫组织化学染色反应。结果 脊髓横切片的ＣＮＴＦ免疫反应结果经图像分析和ＳＡＳ软件处理后表明,在综合对     

新生期大鼠皮下注射谷氨酸单钠后下丘脑—垂体—肾上腺—胸？…

目的：观察弓状核（ＡＲＣ）毁坏后下丘脑－肾上腺－胸腺轴（ＨＰＡＴ）的改变。方法：大鼠出生后第２、４、６、８、１０ｄ皮下注射谷氨酸单钠（ＭＳＧ）４ｍｇ／ｇ，ｂ．ｗ。成年后检测ＨＰＡＴ轴的形态与功能。结果：ＭＳＧ大鼠体重明显轻于生理盐水组，每１００ｇ体重所含垂体高于生理盐水组，肾上腺与胸腺重量未见明显差异；室旁核（ＰＶＮ）促肾上腺皮质激素释放激素阳性细胞、正中隆起（ＭＥ）促肾上腺皮质激素释放激素阳性纤     

不同年龄大鼠斜角带核水平支神经元内TrkA和ChAT的表达——免疫组织化学研究

目的 了解大鼠基底前脑斜角带核水平支神经元内酪氨酸激酶Ａ（ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ,Ａ,ＴｒｋＡ）、胆碱乙酰化转移酶（ｃｈｏｌｉｎｅ ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＣｈＡＴ）样阳性神经元的生后发育规律及两乾的相互关系。方法 用免疫组织化学方法结合图像分析仪检测大鼠基底前脑斜角带核水平支ＴｒｋＡ、ＣｈＡＴ样阳性神经元的数量、面积和灰度值。结果 ＴｒｋＡ、ＣｈＡＴ分布于基底前脑神经元。生后１ｄ可见ＴｒｋＡ表达,但生后５ｄ才出现ＣｈＡＴ表达。生后２０ｄＴｒｋＡ、ＣｈＡＴ表达至高峰;生后３０ｄ下调,成年时维持相对较高水平。老年鼠ＴｒｋＡ、ＣｈＡＴ样阳性神经元出现萎缩、数量也分别减少３９．７％、３３．３％;胞体平均面积分别减少１５．７％、１２．８％;平均灰度值分别减少２９．９％、９．９％。同时,不同年龄大鼠Ｔ     

运动对小鼠海马结构和大脑皮质胆碱能纤维的影响

用组织化学方法结合体视学测量研究小鼠海马结构和大脑皮质胆碱能纤维的年龄变化以及长期适量运动（跑转笼）对胆碱能纤维的影响。以同年龄对照组心重／体重比率均值的２倍标准差作为运动有效标准。结果显示，老年鼠（２４月龄）海马ＣＡ１区、ＣＡ３区，齿状回分子层和运动、体感皮质第Ⅲ和Ⅴ层乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）阳性纤维密度明显低于成年鼠（１３月龄）和青年鼠（５月龄）（Ｐ＜０．０１），后两者间除海马ＣＡ３区分子层纤维密度成年鼠稍低外Ｐ＜０．０５），其它各区无显著差异（Ｐ＞０．０５）；５月龄小鼠经过８和１９个月运动后，被检各区ＡＣｈＥ阳性纤维密度均显著高于同年龄对照组（Ｐ＜０．０１）。结果表明从青年开始的长期适量运动能够促进海马和皮质内胆碱能纤维的增生，延缓衰老时胆碱能纤维的丢失。     

骨骼肌提取液对大鼠坐骨神经损伤所致腰段脊髓腹角和背根节神经细胞溃变的影响

用ＣＴ－ＨＲＰ逆行追踪法及ＣｈＡＴ单克隆抗体的ＡＢＣ免疫组织化学技术研究了新生大鼠骨骼肌提取液（ＭＥ，２０～５０ｋＤ）对钳夹大鼠坐骨神经所致的腰骶部脊髓腹角和背根节神经细胞溃变的影响。实验结果显示：注射ＭＥ实验组的脊髓腹角运动神经元和背根节细胞的存活均数与注射盐水的对照组相比，其比值为６：０，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。提示骨骼肌提取液（２０～５０ｋＤ）对脊髓腹角运动神经元和背根节感觉神经细胞的演变有明显的保护作用。     

免疫应答期间大鼠脑内乙酰胆碱酯酶活性的变化

用绵羊红细胞（ＳＲＢｃ）免疫大鼠，在免疫后第３天至第６天，使用光电比色法检测大鼠海马、下丘脑、丘脑、中脑和脑桥内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性的变化。结果表明，海马和下丘脑中ＡＣｈＥ活性在免疫后第３天至第６天均显著低于对照组；而丘脑、中脑和脑侨内ＡＣｈＥ活性与对照组比较均无明显差异。由此提示：在体液免疫应答期间，海马和下丘脑中ＡｃｈＥ活性降低，亦即以上两脑区中乙酰胆碱（ＡＣｈ）含量可能增加。我们以往的实验说明，中枢ＡＣｈ可调节体液免疫应答。综合两者结果，可以推测在中枢ＡＣｈ与免疫之间存在着相互作用。     

胎儿食管肌间神经丛胆碱能神经元的定位定量研究

用引产后死亡的正常胎儿（３２￣４０周，１５个）食管，将其分颈部，胸部上、中、下，腹部食管５部分。对各部位食管肌间神经丛内胆碱能神经元，进行光镜（ｃｈＡＴ、ＡＣｈＥ）和电镜（ＡｃｈＥ）酶组织化学定位、定量观察。结果表明，胆碱能神经元的分布及细胞内酶含量，在食管各部位不同，ＡＣｈＥ在电镜下定位于粗面内质网。这一研究结果，不仅将使食管胆碱能神经支配及其生理功能等基础理论知识，得到进一步阐明、丰富和发展；     

脑缺血／再灌注后大鼠海马GABA、AchE水平和迟发性神经元损害关系的研究

为探讨海马ＧＡＢＡ、ＡｃｈＥ和迟发性神经元损害（ｄｅｌａｙｅｄｎｅｕｒｏｎａｌｄａｍａｇｅ，ＤＮＤ）的关系，观察了脑缺血／再灌注后大鼠海马亚区ＧＡＢＡ含量、ＡｃｈＥ活性和海马组织病理改变。发现再灌注５ｍｉｎ，海马亚区ＧＡＢＡ含量显著升高，再灌注１ｈ和６～１２ｈ，ＧＡＢＡ含量明显降低，ＣＡ＿１区更明显。再灌注５ｍｉｎ至１ｈ，海马亚区ＡｃｈＥ活性明显升高。再灌注４８ｈ后，光镜下见海马ＣＡ＿１区神经元出现缺血性改变，提示：（１）再灌注后，ＧＡＢＡ含量减少、海马内源性抑制降低可能是ＣＡ＿１区ＤＮＤ的因素之一。（２）再灌注早期ＡｃｈＥ活性升高，提示Ａｃｈ代谢变化可能和ＤＮＤ有关。（３）再灌注后ＧＡＢＡ和ＡｃｈＥ在海马各亚区的明显改变，提示ＣＡ＿１区选择性易损和递质代谢变化密切相关，而ＣＡ＿１区神经元本身的生理生化特性也起着重要的作用。     

老龄大鼠下丘脑及垂体促肾上腺皮质激素样和β－内啡肽样免疫阳性细胞的相关变化

正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌雄不拘，老龄鼠（２０个月）８只，壮龄鼠（８个月）１３只。石蜡切片，ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色．光镜下观察下丘脑及垂体促肾上腺皮质激素样免疫反应（ＡＣＴＨ－ｉｒ）和β－内啡肽样免疫反应（β－ＥＮｒｙ－ｉｒ）阳性细胞的形态、分布和计数。图像分析仪测其灰度值、结果：下丘脑弓状核β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞可分为胞核不明显、着色较深、数量较多的强阳性细胞和胞核明显、着色较淡、数量较少的弱阳性细胞；ＡＣＴＨ－ｉｒ阳性细胞，胞核明显，胞体较大，类似于β－ＥＮＤ－ｉｒ弱阳性细胞。老龄大鼠这两种阳性细胞出现率均明显低于壮龄大鼠。弓状核和垂体前叶ＡＣＴＨ－ｉｒ阳性细胞灰度值老龄鼠显著低于壮龄鼠，而β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞灰度值老龄鼠则显著高于壮龄鼠。     

成年大鼠基底前脑隔-斜角带复合体的巢蛋白免疫阳性神经元至海马的纤维投射

目的 观察大鼠基底前脑巢蛋白(nestin)免疫阳性神经元的纤维投射。方法 先用荧光素逆行追踪法显示基底前脑内投射至海马的荧光素标记神经元，观察摄片后再进行nestin免疫组织化学染色。对比荧光照片和免疫组织化学染色照片，辨认荧光素和nestin双标神经元。结果 在基底前脑注射侧的内侧隔核(MS)和斜角带核的垂直支(vDB)和水平支(hDB)均存在荧光素标记细胞，其中一部分为nestin免疫阳性。在MS、vDB和hDB，双标细胞占逆行标记细胞的比例分别为21．3％、25％和20．6％；占nestin阳性细胞的比例分别为26．6％、15．7％和16．3％。结论 大鼠基底前脑的nestin免疫阳性神经元发出神经纤维向海马投射。提示在基底前脑有一个平行于隔-海马胆碱能投射和GABA能投射的第3条通路。