人参皂甙Rg3诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3抑制人肝癌细胞生长及诱导凋亡作用机制。方法 体外培养人癌细胞（SMMC-721），观察人参皂甙Rg3高剂量组（80μg／m1）、中剂量组（40μg／m1）、低剂量组（20μg／m1）、阳性顺铂对照组（DDP，80μg／m1）和空白对照组（P13S）于12h、24h、48h、72h培养后，肝癌细胞的形态学和生长情况。采用MTT法，分析人参皂甙Rg3对细胞生长抑制率的影响。通过电镜观察细胞凋亡的形态学特征。结果 应用人参皂甙Rg3后，普通光镜下发现细胞数随Rg3浓度增加而减少，呈剂量依赖性，人参皂甙R西高、中、低剂量组细胞生长的抑制率分别为34．6％、19．1％和6．1％，与未处理空白对照组的细胞生长抑制率（5．7％）相比，以人参皂甙Rg3高剂量组于作用72h后对细胞生长的抑制作用最明显（P〈0．001），中剂量组次之（P〈0．05），低剂量组及Rg32h，24h，48h组未见明显差别。阳性对照顺铂组的细胞生长抑制为22．2％。人参皂甙Rg3作用72h后的电镜分析显示，细胞出现典型的凋亡形态学改变。结论 人参皂甙Rg3具有抑制人肝癌细胞生长作用，与促进细胞凋亡机制有关。     

人参皂甙的组合装正式上市

现代药理研究证实，人参皂甙是人参的精华。人参皂甙Rg3、Rh2通过调节中枢神经兴奋和抑制的平衡而消除疲劳，同时具有提高免疫、抑制肿瘤、缓解高原反应等作用。由于Rg3、Rh2在人参中含量极低，所以被誉为“植物钻石”。近年，我国利用现代科技生物技术，将提取率提高了近1000倍，实现了“植物钻石”的工业化生产。人参皂甙Rg3与Rh2的组合产品——立立胶囊日前正式上市，这是人参皂甙应用实现工业化后的第一个人参保健产品。     

人参皂甙Rg3作用PI3K/AKT通路诱导人子宫内膜癌Hec-1-B细胞凋亡的研究

目的:探讨人参皂甙Rg3(ginsenoside Rg3,GS-Rg3)作用PI3K/AKT通路对Hec-1-B细胞的诱导凋亡作用。方法:采用MTT法观察GS-Rg3对Hec-1-B细胞生长的抑制作用;流式细胞术观察GS-Rg3作用Hec-1-B细胞后对Hec-1-B细胞凋亡的影响;Transwell小室分析细胞体外的侵袭力;Western blotting检测PI3K、AKT的表达。结果:GS-Rg3对Hec-1-B细胞的体外增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并随着药物浓度和时间增加其抑制作用更加明显,在一定浓度范围内呈剂量、时间依赖性。GS-Rg3能够诱导Hec-1-B细胞凋亡,细胞端粒酶PI3K、AKT表达水平及活性显著降低。结论:GS-Rg3能够通过诱导人子宫内膜癌Hec-1-B细胞发生凋亡而发挥抑制细胞生长作用,抑制PI3K、AKT的活性是GS-Rg3体外诱导人子宫内膜癌Hec-1-B细胞发生凋亡的重要作用机制之一。     

UPLC法测定保健食品中人参皂甙Rg1和Re的研究

目的:采用WATERS超高效液相色谱法测定保健食品中人参皂甙Rg1和Re的含量。方法:样品用甲醇超声波提取法提取,采用ODS-C18(2.1 mm*100 mm,1.7μm)色谱柱,20%乙腈水溶液为流动相,0.3 ml/min流速对人参皂甙Rg1和Re洗脱,用DAD检测器在203 nm提取定量分析。结果:测定两种人参皂甙的相对标准偏差为0.9%~4.4%,最低检出浓度0.005 mg/kg,回收率91.0%~108.9%。结论:方法快速、节约,适用于保健食品中人参皂甙Rg1和Re含量的测定。     

人参皂甙Re Rg1标准对照品的高效液相色谱制备研究

目的 研究制备分离纯化高纯度人参皂甙Re,Rg1(Ginsenoside Re,Rg1)标准对照品的高效液相色谱（HPLC）方法,为人参类保健食品及中草药中人参皂甙Re,Rg1的标准化定量分析方法提供标准对照品。方法 人参总皂甙制成甲醇溶液;干法上柱,低压硅胶柱层析;步分离;真空浓缩;HPLC分离制备,真空浓缩结晶;纯度检测;产品。结果 该法所得产品纯度大于99％（HPLC）,制备收得率大于80％。结论 方法简便,生产周期短,产品质量高,产品完全可应用作为分析方法的标准对照品。     

HPLC法测定妇康片中人参皂甙Rg1，Re，Rb1

目的建立妇康片中人参皂甙Rg1,Re,Rb1的含量测定方法。方法采用HPLC法,以乙腈～水梯度洗脱,检测波长为203nm。测定人参皂Rg1,Re,Rb1的含量。结果通过方法学考察,人参皂甙Rg1,Re,Rb1分别在9．24—92．4μg／mL,0．384—3．84μg／mL,5．55～1．355μg／mL的范围内,分别与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率分别为100．71％,98．14％,100．94％,RSD分别为1.67％,0．44％,1．77％。结论该方法操作简单,重复性好．可用于评价妇康片中人参的质量。     

人参皂甙Rg3对小鼠肝癌H22腹水瘤抗血管生成作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3治疗小鼠恶性腹腔积液的抗血管生成作用.方法 50只雌、雄各半昆明种小鼠随机分为5组:Ⅰ组生理盐水组(0.9%NS);Ⅱ组顺铂组(DDP 0.5 mg/kg);Ⅲ组低剂量人参皂甙Rg3组(LPD 0.3 mg/kg);Ⅳ组中剂量人参皂甙RS3组(MPD 1.0 mg/ks);Ⅴ组高剂量人参皂甙Rg3组(HPD 3.0ms/ks).所有小鼠肝癌H22腹水瘤模型建立后24 h开始分别腹腔注射0.2 ml/只治疗,1次/d,共14 d.治疗结束后24 h,处死各组小鼠,应用酶联免疫吸附法检测腹水及血清中血管内皮生长因子(VEGF),免疫组织化学法计数腹膜瘤结节微血管密度(MVD),电镜观察人参皂甙Rg3中刺量组与生理盐水组腹腔内肿瘤细胞及腹膜瘤结节新生血管的形态学变化.结果 人参皂甙Rg3各剂量组随着用药剂量的加大,小鼠腹水及血清中VEGF值、腹膜瘤结节MVD下降(P＜0.05),且均较生理盐水组、DDP组下降(P＜0.05).电镜观察人参皂甙Rg3中剂量组较生理盐水组腹水中凋亡和坏死瘤细胞居多;腹膜瘤结节微血管基底膜平滑完整.结论 人参皂甙Rg3通过下调荷瘤小鼠体内VEGF,降低微血管的通透性和抑制腹膜微血管形成,从而抑制恶性腹腔积液的形成.这为临床应用提供了实验依据.     

人参皂苷Rg3对人肺腺癌细胞株A549/DDP抑制转移及逆转耐药作用的研究

目的:探讨人参皂苷Rg3抑制人肺腺癌细胞株A549/DDP的浸润及转移和逆转其耐药作用及机制。方法:应用MTT法检测Rg3对A549/DDP细胞逆转耐药的作用;用细胞膜流动性实验检测Rg3对A549/DDP细胞膜流动性的改变用穿膜实验检测Rg3对A549/DDP细胞侵袭和转移的影响;用Western blotting实验检测Rg3对转移和耐药相关蛋白表达的影响。结果:Rg3作用后,A549/DDP细胞对顺铂的耐药性下降I,C50明显降低(P<0.05),细胞膜的流动性明显降低(P<0.05),细胞的穿膜能力明显降低(P<0.05),Rg3作用后,nm23及caspase-3的表达明显上调,LRP的表达无明显改变。结论:Rg3可通过上调nm23的表达抑制A549/DDP细胞的侵袭和转移能力,还可通过上调caspas-3的表达,降低细胞膜的流动性达到逆转耐药的作用。     

大豆皂甙和人参皂甙抗石棉尘毒性的体外研究

大豆皂甙和人参皂甙抗石棉尘毒性的体外研究孙义敏，王为民，李章，孙慧娟我们通过观察巨噬细胞存活率、吞噬功能、酶学变化、丙二醛产生量等，研究大豆皂甙和人参皂甙对方棉尘所致肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）损伤的影响。一、材料与方法１．粉尘制备：用四川石棉矿的温石棉（...     

人参皂苷Rg1对2型糖尿病大鼠肝损伤保护作用

目的探讨人参皂苷Rg1对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用及其机制。方法采用高脂饮食和链脲佐菌素结合的方法建立大鼠2型糖尿病模型, 实验设对照组、模型组、人参皂苷Rg1(2、4、8 mg/kg)组;血糖仪测定大鼠血糖水平, 分光光度法测定大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST), 超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛含量;苏木素伊红染色观察肝组织形态学变化;酶联免疫吸附法测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果与对照组比较, 模型组大鼠血清中ALT、AST[分别为(123±10.7)、(138±13.8)U/L]、TNF-α、IL-6[分别为(54±2.8)、(168±12.5)pg/mL]和丙二醛[(24.8±2.5)nmol/mgprot]含量均增加, SOD[(65±7.9)U/mgprot]活力降低;与模型组比较, 8 mg/kg人参皂苷Rg1组大鼠血清中ALT、AST[分别为(58±8.0)、(65±8.9)U/L]、TNF-α、IL-6[分别为(34±4.1)、(83±10.4)pg/mL]和丙二醛[(13.8±1.9)nmol/mgprot]含量均降低, SOD[(105±9.7)U/mgprot]活力增加。结论人参皂苷Rg1对2型糖尿病大鼠肝损伤具有一定保护作用, 其机制可能与其抗炎抗氧化作用有关。     

肌酸六磷酸对裸鼠皮下移植HT-29细胞瘤的生长抑制作用研究

目的研究肌醇六磷酸(IP6)对HT-29细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法建立HT-29细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,对照组,5-氟尿嘧啶组(5-FU)组,IP6低剂量组,IP6高剂量组。每组8只。每组每日腹腔注射1次0.5ml;分别含生理盐水,5-FU20mg/kgbw,IP640mg/kgbw,100mg/kgbw。用药20d后经颈椎脱位处死。比较各组抑瘤作用和裸鼠一般状态的变化,对标本分别行光镜和电镜观察、Hoechst染色、原位末端标记(TUNEL)和免疫组化检测。结果生理盐水,低、高IP6及5-FU组瘤重分别为0.68±0.31、0.57±0.28、0.58±0.18、0.24±0.23g;瘤体积分别为0.71±0.35、0.58±0.21、0.59±0.20和0.34±0.27cm3;与对照组比,5-FU组瘤量、瘤体积显著降低(P0.05),IP6组瘤重和体积呈一定降低趋势,但无显著差异(P0.05)。免疫组化检测显示,与对照组比,低、高IP6组P53蛋白表达显著降低(P0.05),PCNA表达无显著差异(P0.05)。TUNEL检测结果,与对照组比,低、高IP6组细胞凋亡率显著升高(P0.05)。结论IP6可能通过抑制P53表达、诱导肿瘤细胞凋亡,而起到抑制和延缓肿瘤生长的作用。     

HPLC测定复方血栓通滴丸中人参皂苷Rg1的含量

目的建立复方血栓通滴丸中人参皂苷Rg1的含量测定方法。方法采用C18(10μm,250mm×4.6mm)柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(21:79),流速:1.5ml/min,检测波长:203nm。结果人参皂苷Rg1在3.2～32μg线性关系良好,平均回收率人参皂苷Rg1为96.58%,RSD为2.11%。结论本法操作简便,结果稳定,重现性好,可作为质量控制方法。     

复方轮叶党参对小鼠酒精性肝损伤的预防作用

[目的]探讨复方轮叶党参对酒精性肝损伤的预防作用。[方法]选择昆明种小鼠50只，雄性，清洁级，许可证号：（吉）2003—0001，按体质量随机分为5组，即正常对照组、乙醇损伤组，轮叶党参组，决明子组，复方轮叶党参组（轮叶党参＋决明子提取物），每组10只，连续灌胃8周，检测肝组织中的三酰甘油（TG）、丙二醛（MDA）、微量元素硒（Se）含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，并进行肝脏病理组织学检查。[结果]乙醇损伤组的肝组织TG、MDA含量明显高于正常对照组，GSH-Px活性和Se含量明显低于正常对照组，而药物组小鼠肝组织TG、MDA含量明显低于酒精损伤组，而GSH-Px活性和Se含量则明显高于乙醇损伤组，各给药组较乙醇损伤组肝脏病理学变化明显改善。[结论]复方轮叶党参具有较好的预防酒精性肝损伤的作用。     

二乙基亚硝胺对人胎肝干细胞的毒性效应

目的探讨二乙基亚硝胺(Diethylnirtosamine,DENA)对人胎肝干细胞的毒性效应,为评价其遗传毒性提供理论依据。方法用不同质量浓度DENA(0、450、900、1350、1800、2250μg/ml)处理人胎肝干细胞后,应用MTT法检测DENA对体外培养的人胎肝干细胞增殖的抑制作用及量效关系;通过单细胞凝胶电泳实验检测不同剂量DENA处理后人胎肝干细胞DNA的损伤情况;利用Hoechst 33258染色方法检测DENA诱导后人胎肝干细胞凋亡的情况。结果人胎肝干细胞经900、1350、1800μg/ml的DENA处理48 h后,细胞存活率低于阴性对照组,差异有显著性(P0.01);人胎肝干细胞经DENA处理24 h后,出现染色体固缩、浓染等细胞凋亡表现;单细胞凝胶电泳实验发现,当DENA为900和1350μg/ml时,具有致DNA断裂的作用,尾部DNA含量分别达到(18.44±4.99)%和(17.33±3.29)%,明显高于对照组的(0.015±0.004)%,差异有显著性(P0.01),但在1800和2250μg/ml时,彗星拖尾程度明显降低,差异有显著性(P0.01)。结论 DENA对人胎肝干细胞具有直接毒性效应,引起DNA损伤,具有潜在遗传毒性。     

飞燕草素葡萄糖苷抑制人血管内皮细胞凋亡的作用及机制研究

目的观察飞燕草素葡萄糖苷(Dp)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人血管内皮细胞株EA.hy926凋亡的影响,并探索相关分子机制。方法 CCK-8等试剂盒分别检测不同浓度的Dp(25、50、100、200μmol/L)对oxLDL诱导的细胞活力、MDA和LDH生成的影响;激光共聚焦显微镜检测Dp对oxLDL诱导的细胞内ROS生成、线粒体膜电位和线粒体膜通道孔开放状态的影响;流式细胞仪检测不同浓度的Dp对oxLDL诱导的细胞凋亡的影响;Western blot法检测Dp对oxLDL诱导的bcl-2及bax蛋白表达水平的影响。结果 Dp能明显抑制oxLDL诱导的EA.hy926细胞活力降低,及MDA和LDH生成增加,并呈浓度依赖关系;与oxLDL处理组比较,不同浓度的Dp预处理细胞2 h后,总凋亡细胞百分比显著降低(P<0.05);Dp能明显抑制oxLDL诱导的细胞内ROS生成、线粒体膜电位下降和线粒体膜通道孔开放,并能明显抑制oxLDL诱导的细胞内bcl-2蛋白表达水平降低及bax蛋白表达水平增高。结论 Dp可能通过线粒体途径抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡发生。     

雌马酚对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用及其机制研究

目的观察雌马酚(equol)对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用,并探讨其作用的分子机制。方法用不同浓度(10-8、10-7、10-6、10-5、5×10-5、10-4mol/L)雌马酚处理SKOV-3细胞24、48、72h后,及同时用10μmol/LERK通路抑制剂U0126或雌激素受体抑制剂ICI182,780处理1h后再用50μmol/L雌马酚处理2h,测定各组SKOV-3细胞存活率,用Westernblotting检测总ERK和磷酸化ERK1/2(p-ERK)的蛋白表达水平。结果各实验组SKOV-3细胞存活率随着雌马酚作用浓度和时间的增加而降低,总ERK蛋白表达量不变,p-ERK的表达量随雌马酚处理浓度的增加而逐渐降低。U0126、ICI182,780单独使用或与雌马酚联合使用均能够降低p-ERK的蛋白表达。结论雌马酚显著抑制人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,其机制是通过下调磷酸化ERK蛋白的表达发挥作用。     

黄芪多糖对鼻咽癌CNE-2细胞增殖抑制作用的研究

[目的]研究黄芪多糖(APS)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响。[方法]设不同浓度APS(12.5,25.0,50.0,100.0μg/ml)、二甲基亚砜2‰为空白对照组,顺铂2μg/ml为顺铂组。应用MTT法检测APS对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖抑制作用。[结果]与空白对照组比较,不同浓度的APS组在12、24、48、72h作用时吸光度均表现为上升的趋势,在48h时达到最大值,随后下降。不同浓度的APS组经不同的作用时间后,其吸光度与空白对照组比较差异均有统计学意义(P﹤0.05)。与顺铂组比较,12.5、25.0μg/mlAPS作用鼻咽癌CNE-2细胞12h时细胞的增殖没有明显的抑制作用(P﹥0.05),但作用24、48、72h时对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖有明显的抑制作用(P﹤0.05);50.0、100.0μg/mlAPS在不同的作用时间对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖均有明显的抑制作用(P﹤0.05)。[结论]APS可以明显地抑制鼻咽癌CEN-2细胞的生长,且存在剂量-时间的关系。     

JNK通路介导帕金森病小鼠黑质神经元丢失及人参皂甙Rg1的保护作用

[目的]研究c-Jun氨基端激酶(e-Jun N-terminal protein kinase, JNK)在1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(Parkinson's disease, PD)模型中对PD黑质多巴胺(Dopamine, DA)能神经元丢失的可能机制以及人参皂甙Rg1的神经保护作用.[方法]采用神经毒素MPTP制备PD小鼠模型.免疫组织化学法与蛋白印迹法观察各组小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)和磷酸化c-Jun (p-c-jun)表达变化;原位末端标记法(TUNEL)观察黑质细胞凋亡数量变化.[结果]与对照组相比,模型组小鼠黑质致密带TH阳性神经元显著减少约55%(P<0.01),p-c-jun表达水平亦明显升高,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量增高;人参皂甙Rg1干预组黑质TH阳性神经元细胞丢失明显减轻31%(P<0.01),p-e-jun表达水平明显下降,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量显著减少.[结论]JNK通路可能通过凋亡途径参与模型小鼠黑质多巴胺能神经元丢失过程;人参皂甙Rg1可在一定程度上阻抑黑质区JNK信号通路,减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质DA能神经元凋亡;人参皂甙Rg1对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用.     

多肽-Fe对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的:研究多肽-Fe对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠肝脏氧化损伤的保护作用。方法:用CCl4(50mg/kg.d)灌胃造成小鼠急性肝脏损伤模型,将多肽-Fe分为低、中、高剂量预防组,分别为67.5mg/kg·d、675mg/kg·d、2025mg/kg·d喂饲小鼠30d,观察其对血清ALT、AST和ALP及肝脏TG、TC、GSH、MDA和SOD的影响。结果:与模型组相比,多肽-Fe可显著降低血清中ALT、AST、ALP活性和肝脏中TG、TC、MDA含量(P<0.01),提高肝脏中GSH含量(P<0.05),以中剂量组最为有效。结论:多肽-Fe对CCl4引起的小鼠肝脏氧化损伤具有保护作用。     

大肠癌肝转移48例诊治分析

的总结出大肠癌肝转移的诊断特点和治疗方法。方法收集1989年10月至1997年10月48例大肠癌肝转移的临床资料并进行回顾性分析。结果48例合并转移者B超和CT诊断阳性率分别为18.2%和53.3%。对转移灶的治疗行肝转移灶切除10例,无水酒精瘤内注射10例,门静脉插管化疗8例,放射介入治疗8例,放弃治疗12例。结论大肠癌肝转移术前诊断困难,术中B超结合术中仔细探查是诊断大肠癌肝转移的最可靠方法。手术切除是治疗的首选,其次是无水酒精瘤内注射、门静脉插管化疗、放射介入治疗等方法。