Smac对胰腺癌细胞凋亡的作用及研究进展

胰腺癌是消化系统恶性程度最高、预后最差的肿瘤之一,目前的治疗手段并未取得令人满意的疗效。Smac是一种新型的线粒体源性促凋亡蛋白,参与细胞凋亡的线粒体通路和死亡受体通路反应,主要通过拮抗X-相关凋亡抑制蛋白(XIAP)对caspase的抑制作用促进细胞凋亡。研究表明Smac与肿瘤的发生发展、放化疗疗效具有相关性,但关于Smac在胰腺癌中的作用的研究甚少,本文就Smac在胰腺癌中表达、发生发展及治疗等方面研究进展作一论述。     

D2/D3受体激动药罗匹尼罗对抗鱼藤酮介导多巴胺能细胞凋亡的研究

目的:探讨D2/D3多巴胺受体激动药罗匹尼罗对多巴胺能细胞是否具有抗凋亡作用并研究其机制。方法:使用多巴胺能细胞株SH-SY5Y,以高剂量呼吸链抑制药鱼藤酮诱导细胞凋亡建立细胞凋亡模型。通过Hoechst染色观察并计数凋亡的细胞,应用免疫印迹(Westernblot)方法检测促凋亡基因caspase 9, cleaved caspase 9,cleaved caspase 3,PARP,cleaved PARP的表达。结果:高剂量鱼藤酮处理细胞24h后其凋亡比例明显升高,罗匹尼罗(10~(-5),10~(-4)mol·L~(-1))预处理2h能显著减少细胞凋亡的比例。免疫印迹方法显示10~(-4)mol·L~(-1)罗匹尼罗预处理2h能减少caspase 9,caspase 3,PARP的剪切。结论:罗匹尼罗能有效抑制鱼藤酮诱导细胞凋亡,其机制可能是通过抑制内源性通路中caspase 9剪切而实现的。     

药物治疗的新靶点——细胞凋亡

细胞凋亡是一种由基因调控的细胞程序性死亡过程。多种蛋白质和信号分子参与细胞凋亡过程并进行精确地调控。细胞凋亡可分为caspase依赖性和非caspase依赖性两大途径。其中caspase依赖性途径又分为内源性(线粒体介导)和外源性(死亡受体介导)的凋亡途径。本文对其中一些关键性调控蛋白功能形成初步认识,并尝试把这些蛋白质作为药物治疗的新靶点,借此实现对细胞凋亡过程的干预,为肿瘤、神经退行性疾病、自身免疫性疾病治疗提供新的思路和策略。     

TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡与临床

TRAIL是最近发现的属肿瘤坏死因子家族新成员 ,它能选择性地杀伤多种肿瘤细胞而对正常细胞没有细胞毒性。它的作用机制主要通过细胞膜的表面死亡受体DR4和DR5介导细胞的凋亡信号 ,激活细胞内的多种诱导细胞凋亡蛋白的表达。主要的途径是通过TRAIL与死亡受体结合后促进DISC的形成和caspase8的激活 ,然后启动非依赖线粒体的凋亡途径和线粒体的凋亡途径。非线粒体凋亡途径通过激活的csapase8直接激活caspase3,从而启动细胞的凋亡。线粒体依赖途径通过激活的tBID导致细胞色素C的释放 ,与Apaf1和caspase9形成凋亡小体导致细胞的凋亡。通过以往的研究表明 ,非融合表达的TRAIL能明显诱导多种肿瘤细胞的凋亡 ,对正常人和猴的肝细胞没有细胞毒性 ,提示非融合表达的人TRAIL蛋白可能是未来最有发展前途的抗肿瘤药物     

PJA1诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的初步研究

目的:探讨PJA1在宫颈癌Hela细胞中的促凋亡作用。方法:采用流式细胞仪检测转染PJA1后的宫颈癌细胞12,24,36,48 h的凋亡变化。采用Western免疫印迹(Western Blot)检测凋亡通路。结果:宫颈癌Hela细胞在转染PJA1后12 h凋亡率最低,48 h最高,并且在凋亡中与caspase通路相关。结论:PJA1可以通过caspase通路促进宫颈癌Hela细胞凋亡。     

局部脑缺血再灌注后丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2参与XIAP的降解和神经元的死亡

Omi/HtrA2是一种促进细胞凋亡的位于线粒体内的丝氨酸蛋白酶,参与依赖和不依赖于半胱氨酸蛋白酶(caspase)的细胞凋亡过程。脑缺血损伤激活细胞凋亡和抗凋亡两条信号     

雷公藤甲素诱导自噬促进人肾小管上皮HK-2细胞凋亡

目的 研究自噬在雷公藤甲素(triptolide, TP)诱导人肾近端小管上皮HK-2细胞凋亡中的作用。方法 以HK-2细胞为研究对象,CCK-8法检测细胞存活率;倒置荧光显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位MMP变化;激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内LC3荧光强度变化;Western blot检测细胞凋亡及自噬相关蛋白cleaved caspase 9、caspase 9、Bax、Bcl-2、LC3、p62和Beclin 1的表达;采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)和自噬激动剂雷帕霉素(rapamycin, Rap)研究自噬对TP诱导HK-2细胞凋亡的影响。结果 TP降低HK-2细胞存活率,诱导细胞凋亡和自噬,降低MMP水平,增加胞内LC3Ⅱ荧光强度,上调Beclin 1表达,下调p62表达,升高cleaved caspase 9/caspase 9、Bax/Bcl-2和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。此外,与TP组相比,3-MA+TP组细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和cleaved caspase 9/caspase 9比值降低,p...     

细胞色素C、线粒体与凋亡

线粒体细胞色素C释放在细胞凋亡过程中起重要作用。细胞色素C释放到胞质后可引发caspase活化级联 ,导致细胞死亡。细胞色素C的释放是线粒体外膜通透性增高的结果。Bcl 2蛋白家族具有调控细胞色素C释放的功能。除细胞色素C外 ,线粒体膜间隙的凋亡诱导因子 (AIF)在凋亡过程中也释放至胞质 ,这两种途径充分保证了细胞死亡程序的有效执行。轻中度暂时性脑缺血后细胞色素C释放至胞质 ,早于DNA片段化     

二氢青蒿素诱导HL-60细胞凋亡

目的探讨二氢青蒿素对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的治疗作用。方法采用台盼蓝染色法和MTT法测定二氢青蒿素对HL-60细胞存活的影响,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染色、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹分析凋亡相关蛋白的表达。结果二氢青蒿素可抑制HL-60细胞存活,诱导HL-60细胞凋亡,同时降低HL-60细胞Bcl-2蛋白的表达,增加Bax蛋白和凋亡执行蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达,并呈浓度依赖性。结论二氢青蒿素可诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能是通过对线粒体凋亡通路中Bcl-2,Bax和caspase-3蛋白表达的调控而发挥作用。     

一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及人参皂苷Rg1的保护作用

目的　探讨一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及人参皂苷Rg1保护作用的可能机制。 方法　DNA凝胶电泳观察DNA的断裂情况 ,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位 ,West ernblotting检测胞浆细胞色素C和活化型半胱氨酸蛋白水解酶caspase 3P2 0 水平。结果　一氧化氮供体SNAP(5 0 0μmol·L-1)可诱导PC12细胞凋亡 ,细胞线粒体跨膜电位明显下降、胞浆细胞色素C水平增加及caspase 3得到激活 ;预先经过 5 0、10和 2 0 μmol·L-1等浓度人参皂苷Rg1处理后 ,SNAP诱导的PC12细胞凋亡明显减少 ,同时明显减弱SNAP对细胞线粒体跨膜电位、胞浆细胞色素C水平及cas pase 3激活的影响。 结论　人参皂苷Rg1可抑制一氧化氮诱导PC12细胞凋亡 ,其作用机制可能与其稳定细胞线粒体跨膜电位、减少线粒体细胞色素C向胞浆释放及抑制cas pase 3的激活有关