胃癌源性外泌体对HLA-DR~(neg)leukocytes中Dicer1、PTEN基因的调控

目的通过观察胃癌源性的外泌体对HLA-DR~(~(neg))leukocytes中Dicer1、PTEN基因表达的影响,探讨肿瘤源性外泌体调控机体免疫抑制功能的机制。方法提取胃癌患者血清外泌体并鉴定,免疫磁珠法分选HLA-DR~(neg)leukocytes,吖啶橙染色后的外泌体与CFSE染色后的HLA-DR~(neg)leukocytes在37℃,5%CO_2条件下共培养12 h;采用QRT-PCR和Western blot方法分别检测共培养后胃癌患者与健康对照组中Dicer1、PTEN基因和蛋白的表达。结果成功分离胃癌患者外周血外泌体;同时观察到外泌体被HLA-DR~(neg)leukocytes有效摄取。QRT-PCR检测结果显示Dicer1 m RNA、PTEN m RNA的相对表达量分别是健康对照组的0.46±0.19、0.48±0.27倍(P0.05);Western blot结果显示Dicer1、PTEN蛋白表达量是健康对照组的0.15±0.11、0.33±0.19倍(P0.05)。结论胃癌来源的外泌体可以抑制HLA-DR~(neg)leukocytes中Dicer1、PTEN基因的表达,为今后进一步研究肿瘤来源的外泌体的免疫调控作用提供线索。     

胃癌中hMSH2、PTEN和PCNA表达的相关性及意义

目的：探讨胃癌中错配修复基因 hMSH2与 PTEN、PCNA 表达的关系及意义。方法：采用免疫组织化学 SP 法检测胃癌、癌旁和胃炎粘膜中 hMSH2、PTEN 和 PCNA 的表达。结果：(1)hMSH2和 PCNA 在癌组织的表达阳性率均显著高于非癌组织;PTEN 在癌组织的表达阳性率显著低于非癌组织。(2)PTEN 在低分化癌和有淋巴结转移的病例表达阳性率显著低于高分化癌和无转移者。PCNA 在低分化癌和有淋巴结转移的病例表达阳性率显著高于高分化癌和无转移者。(3)hMSH2与 PCNA 蛋白表达呈显著性正相关;PTEN 与 PCNA 蛋白表达呈显著性负相关。结论：hMSH2的高表达及 hMSH2与 PCNA 表达的相互影响与胃癌的发生可能有关;检测3种蛋白有助于判断胃癌的恶性程度和生物学行为。     

PTEN、FOXO3a和氧化应激相关蛋白在胃癌组织中的表达

目的:探讨PTEN、FOXO3a和氧化应激相关蛋白在胃癌中的表达及它们之间的相互关系。方法:采用紫外分光光度法测定胃腺癌患者(n=45)和健康自愿者(n=30)血浆中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的表达水平;采用荧光定量RT-PCR法检测胃腺癌组织(n=84)和正常组织(n=48)中PTEN mRNA和FOXO3a mRNA的表达水平。PTEN和FOXO3a的表达与氧化应激的关系采用Spearman方法进行相关性分析。结果:胃癌组血浆中CAT、SOD表达低于对照组,MDA表达高于对照组;胃癌组织中PTEN mRNA和FOXO3a mRNA表达低于正常组织;PTENmRNA表达与SOD、CAT的含量呈正相关,与MDA的含量呈反相关。结论:胃腺癌患者体内存在过高的氧化应激水平及过低的抗氧化水平,机体抗氧化能力的降低有可能降低抑癌基因PTEN mRNA和FOXO3a mRNA的表达。     

与细胞骨架同源10号染色体有缺陷的磷酸酯酶和磷脂酰肌醇-3激酶在大鼠心肌肥厚中的表达

目的:研究异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚与细胞骨架同源10号染色体有缺陷的磷酸酯酶(PTEN)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)在心肌组织中的表达,为探讨心肌肥厚的信号转导机制和逆转心肌肥厚提供形态学资料.方法:健康成年SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素,造成心肌肥厚模型;取心肌组织,常规石蜡切片,H-E染色,观察心肌组织的病理变化;免疫组织化学显色和免疫荧光显色,检测PTEN和p-PI3K的表达及分布.利用图像分析软件对PTEN和p-PI3K的表达结果进行定量分析.结果:与对照组相比,实验组PTEN和p-PI3K的阳性表达增高.结论:PTEN和p-PI3K蛋白表达增高可能在心肌肥厚的发生和发展过程中发挥重要作用.     

良恶性胃溃疡组织中PTEN、survivin的表达及意义

目的 探讨良、恶性胃溃疡组织中PTEN和survivin的表达变化及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测63例无癌前病变的胃溃疡、68例有癌前病变胃溃疡及83例溃疡型胃癌组织中PTEN和survivin蛋白的表达,分析二者的相关性及其与溃疡型胃癌病理特征的关系和临床价值.结果 无癌前病变、有癌前病变的胃溃疡及溃疡型胃癌组织中PTEN表达逐渐下降(P<0.01),survivin表达逐渐升高(P<0.01),二者的表达呈负相关(r=-0.489,P<0.01).PTEN表达与溃疡型胃癌分化类型有关(P<0.01),survivin表达与有癌前病变胃溃疡病理进展有关(P<0.05).PTEN、survivin在溃疡型胃癌检测中特异度分别为79.39%、57.25%,灵敏度分别为52.38%、71.08%.结论 良、恶性胃溃疡组织中PTEN和survivin蛋白表达不同,检测其组织中PTEN和survivin对良、恶性胃溃疡的鉴别及观察溃疡的组织演变可能具有重要意义.     

膀胱移行细胞癌中PTEN的表达分析

目的研究PTEN在膀胱移行细胞癌（TCC）中的表达。方法应用免疫组织化学染色方法观察52例TCC标本PTEN的表达情况。结果TCC组中PTEN的阳性表达率为71.2%,而10例正常膀胱粘膜组织PTEN表达均为阳性。PTEN表达与膀胱肿瘤病理分级、临床分期密切相关。结论PTEN的异常表达在TCC的发生、发展过程中起重要作用。该指标的检测有助于预后判断。     

CD、PTEN在胶质瘤中的表达与侵袭性的关系

目的探讨组织蛋白酶D(Cathepsin D,CD)和第10号染色体磷酸酶和张力蛋白同源丢失性基因(phosphatase and tension homolog deleted on chromosome10,PTEN)表达与人胶质瘤恶性程度和侵袭性之间的关系。方法采用免疫组织化学法和Western blot法检测46例胶质瘤标本和10例正常脑组织标本中CD及PTEN的表达情况。结果 CD阳性染色主要定位于细胞质内,呈棕黄色细颗粒状,在高分化组(Ⅰ-Ⅱ级)中呈散在的弱阳性表达,表达率为50%(14/28);而在低分化组(Ⅲ-Ⅳ级),表达明显增强,表达率为83.3%(15/18),与高分化组有显著差异(P<0.05)。PTEN阳性染色主要定位于细胞质内,46例胶质瘤中PTEN阳性表达18例(39.1%),高分化组(Ⅰ-Ⅱ级)中15/28例(53.6%)明显高于低分化组(Ⅲ-Ⅳ级)3/18例(16.7%,P<0.05)。结论 CD和PTEN的表达对分析、判断胶质瘤分级及恶性转化具有一定意义。     

胃癌中survivin、PTEN、cyclinD1和p53基因的表达及其相关性

目的　探讨survivin基因表达与胃癌生物学行为及PTEN、cyclinD1、p5 3和凋亡指数 (AI)的相关性。 方法　用免疫组化EnVision法检测 15 6例胃癌组织、4 6例正常胃黏膜和 4 6例癌旁不典型增生组织中survivin、PTEN、cyclinD1和 p5 3的表达以及AI。结果　survivin、PTEN、cyclinD1和p5 3的阳性检测率分别为 6 5 %、4 1%、6 1%和 5 8%。survivin未见核内表达。survivin、cyclinD1和 p5 3表达与胃癌的组织学类型相关 (P <0 0 1,P <0 0 5和P <0 0 1) ;survivin和cyclinD1表达与胃癌的浸润深度相关 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ;4种基因蛋白表达均与淋巴结转移相关 ,survivin的表达与p5 3和cyclin阳性表达呈正相关 ,与PTEN的阳性表达呈负相关 ;survivin、p5 3和cyclinD1高表达均有患者术后 <3年生存期相关 (P <0 0 5 ,P <0 0 1和P<0 0 1) ;survivin阳性组的平均AI为 0 6 1,明显低于survivin阴性组 (P <0 0 1) ;PTEN阳性组明显高于阴性组 (P <0 0 1)。结论　survivin、PTEN、p5 3和cyclinD1基因在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用 ,它们的检测对胃癌恶性度的判定、预后和进一步治疗提供有效的依据。survivin、p5 3和cyclinD1的过表达可作为判断肿瘤术后差的指标     

乳腺癌的MRI影像特征与PTEN和PCNA表达的相关性研究

目的探讨乳腺癌动态增强磁共振成像的影像特征及其与癌组织10号染色体上与张力蛋白同源的磷酸酶(PTEN)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的关系。方法纳入2015年5～2017年12月我院乳腺手术患者52例,全部患者均行MRI-弥散加权成像(DWI),将图像进行后处理,并进行ADC值测量。术后病理证实其中43例乳腺癌,9例乳腺纤维腺瘤。所有患者组织采用HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学方法与Western blot方法检测肿瘤组织PTEN和PCNA的表达情况,并将PTEN和PCNA的表达与MRI-DWI成像表观扩散系数(ADC值)进行相关性分析。结果与乳腺纤维腺瘤组织相比,乳腺癌组织中PTEN蛋白阳性表达的平均光密度值显著降低,PCNA蛋白阳性表达的平均光密度值显著升高(P0.01)。乳腺癌ADC值明显低于乳腺纤维腺瘤组织,乳腺癌ADC值与PTEN呈正相关(r=0.619,P0.01);乳腺癌ADC值与PCNA表达结果呈负相关(r=-0.527,P0.01)。结论 PTEN与PCNA的表达与乳腺癌的MRI影像学表现密切相关,可作为患者临床治疗和预后判断的重要参考指标。     

胃癌不同分化程度与PTEN表达缺失的相关性

目的：探讨磷酸酶基因（PTEN）表达缺失情况与胃癌分化程度的关系。方法：通过检测52例经病理证实为胃癌的手术标本或胃镜检查活检标本中PTEN的表达情况,并与浅表性胃炎和正常无病变的胃黏膜活检标本（各20例）比较。结果：浅表性胃炎组、正常胃黏膜组所有标本中PTEN均有高度阳性（＋＋＋）表达,两组无明显差异（P〉0.05）;低分化胃癌组、中分化胃癌组、高分化胃癌组与浅表性胃炎组或正常胃黏膜组比较,随着胃癌分化程度的降低,PTEN的表达逐渐减弱,组间差异经统计学分析有显著性意义（P〈0.05）。结论：PTEN的表达情况与胃癌的分化程度密切相关,胃癌组织学分化越差,PTEN的表达缺失越明显。     

胃癌中SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达及意义

目的研究趋化因子SDF-1及其受体CXCR4以及MMP-2和MMP-9在胃癌中的表达,探讨SDF-1对MMP-2和MMP-9表达的影响。方法应用免疫组化EnVision两步法检测109例胃癌组织中SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达。结果 (1)SDF-1、CXCR4、MMP-2、MMP-9在胃癌组的表达阳性率分别为88.1%、56.9%、80.7%和83.4%,高于切缘对照组的47.8%、30.4%、43.4%和47.8%,差异有显著性(P<0.05);(2)SDF-1和CXCR4的表达在淋巴结转移组高于无转移组(P<0.05),SDF-1、MMP-9表达程度与淋巴结转移、组织学分级、浆膜侵犯、临床分期指标呈正相关(P<0.05);MMP-2、CXCR4表达程度与淋巴结转移、浆膜侵犯、临床分期呈正相关(P<0.05);(3)SDF-1与其受体CXCR4的表达及与MMP-2、MMP-9均呈正相关(P<0.05)。结论 (1)SDF-1、CXCR4、MMP-2和MMP-9的表达水平与胃癌的发生、侵袭及淋巴结转移密切相关,可作为预测胃癌淋巴结转移及预后的指标;(2)SDF-1/CXCR4轴可通过加强肿瘤细胞MMP-2和MMP-9分泌的途径促进肿瘤的浸润和转移,提示SDF-1可能是药物靶向治疗的重要靶点。     

转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在胃癌中的表达及意义

目的探讨转录因子Snail及黏附分子E—cadherin在胃癌中的表达及意义。方法采用免疫组化sP法检测96例胃癌组织和80例癌旁组织中Snail、E—cadherin的表达，分析两者在不同组织类型与分化程度胃癌中的表达，以及与临床病理因素之间的关系。结果胃癌组织E—cadherin的阳性率（37．5％）显著低于癌旁组织（100％）（P〈0．05），E—cadherin的表达与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关（P〈0．05）。胃癌组织Snail阳性率（83．3％）显著高于癌旁组织（41．25％）（P〈0．05），Snail的表达与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关（P〈0．05）。胃癌组织中E—cadherin与Snail的表达呈负相关（P〈0．05）。结论E—cadherin蛋白低表达与Snail蛋白高表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志。联合检测E—cadherin及Snail对预测胃癌浸润转移有重要意义。     

TWIST、HIF-1α、VEGF在胃癌中的表达及意义

目的:探讨TWIST,HIF-1α和VEGF在人胃癌组织中的表达及与临床病理参数、预后的关系。方法:选择120例胃癌标本,应用SP法免疫组化检测TWIST、HIF-1α和VEGF在人胃癌组织中的表达,分析TWIST、HIF-1α和VEGF的表达与患者临床病理参数之间的关系。结果:胃癌组织及正常胃黏膜组织中均可检测到TWIST、HIF-1α和VEGF的表达,但胃癌组织中的表达水平均明显高于正常胃黏膜组织,表达差异有显著性(P<0.05)。TWIST的表达与浸润深度、肿瘤远处转移及淋巴结转移明显相关(P<0.05)。HIF-1α的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移呈明显相关性(P<0.05)。VEGF的阳性表达与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。TWIST和(或)HIF-1α阳性表达的患者其5年生存率明显低于其阴性表达的患者。结论:胃癌中TWIST、HIF-1α和VEGF的高表达与胃癌的生物学行为及预后密切相关,检测其表达对预测胃癌的转移及判断预后有一定价值。     

Low expression of FHIT and PTEN correlates with malignancy of gastric carcinomas: tissue-array findings.

To clarify the roles of FHIT (fragile histidine triad) and PTEN (phosphatase and tensin homology deleted from human chromosome 10) expression in the genesis and progression of gastric cancers, we examined expression of FHIT and PTEN on tissue microarray containing gastric normal mucosa (n=49), adenoma (n=49), noncancerous mucosa adjacent to carcinoma (n=84) and carcinoma (n=249) by immunohistochemistry. Their expression was compared with clinicopathologic parameters of tumors, including expression of p53 and cysteine protease protein 32 as well as survival time of patients with carcinoma. The results showed expression of FHIT and PTEN were lower in gastric carcinoma than those in normal mucosa, noncancerous mucosa adjacent to carcinoma and adenoma of the stomach (P<0.05). FHIT and PTEN expression showed a significantly negative association with depth of invasion, lymphatic invasion, and lymph node metastasis, liver metastasis, and Union Internationale Contre le Cancer staging of gastric carcinoma (P<0.05). Intestinal-type gastric carcinomas highly expressed FHIT and PTEN protein, compared with diffuse-type ones (P<0.05). Expression of FHIT and PTEN were positively related with expression of p53 and cysteine protease protein 32 in gastric carcinoma (P<0.05), as well as favorable prognosis of the patients with the tumors (P<0.05). There was positive relationship between FHIT and PTEN expression in gastric carcinoma (P<0.05). It was suggested that down-regulated expression of FHIT and PTEN contributed to gastric carcinogenesis possibly by involving in the imbalance between apoptosis and proliferation of cells. Their altered expression underlay the molecular basis of invasion, metastasis, differentiation of gastric carcinoma.     

Clinicopathologic Characteristics and Prognosis of Advanced Gastric Cancer Simulating Early Gastric Cancer

Background

Although the clinicopathologic features and prognosis of Borrmann type advanced gastric cancer has been well characterized, those of advanced gastric cancer simulating early gastric cancer (AGC simulating EGC) still remains unclear.

Methods

We reviewed 1985 gastric cancer patients who had undergone gastrectomy at our hospital to determine the clinicopathologic characteristics, susceptible sites for lymph node metastasis, and prognosis of AGC simulating EGC in comparison with Borrmann type advanced gastric cancer.

Results

Among 102 patients with AGC simulating EGC, 100 patients (98%) had tumors with depressed type appearance. The frequencies of serosal invasion, lymph node metastasis, lymphatic vessel invasion, blood vessel invasion, and liver metastasis were significantly lower in AGC simulating EGC than in Borrmann type tumors. The prognosis of AGC simulating EGC was significantly better than that of the Borrmann type tumors. Multivariate analysis indicated that the gross appearance was an independent prognostic factor. In patients with AGC simulating EGC which invaded to the the muscularis propria (MP), most lymph node metastasis was restricted with the perigastric lymph nodes (1st-titer lymph nodes) and lymph node metastasis to 2nd-titer lymph nodes was only observed at station 8a.

Conclusion

AGC simulating EGC is less advanced in comparison with Borrmann type advanced gastric cancer. Based on the results of susceptible sites for lymph node metastasis in the current study, limited lymph node dissection could be indicated for AGC simulating EGC whose depth of invasion is MP.     

胃癌组织中SIRT-1、VEGF的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中沉默信息调节因子1(SIRT-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及临床意义。方法选取2016年6月至2018年6月本院胃癌患者120例,均接受胃癌手术切除术。采用免疫组化检测胃癌组织及其癌旁正常组织中SIRT-1、VEGF的表达。结果胃癌组织SIRT-1、VEGF表达阳性率明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织SIRT-1、VEGF的表达与TNM分期、浸润深度、浆膜受侵、淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、肿瘤直径无关(P>0.05);胃癌组织SIRT-1与VEGF表达呈正相关(P<0.05)。结论胃癌组织中SIRT-1、VEGF呈高表达状态,且与胃癌的发生发展有关,可能共同促进了胃癌的生长、侵袭、转移等生物学行为。     

c-erbB-2、VEGF和组织蛋白酶D在胃癌中的表达及其相关性

目的：探讨癌基因c-erbB-2、血管内皮生长因子（VEGF）和组织蛋白酶D（Cath-D)在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学（S－P）法，检测了102例胃癌手术标本中c-erbB-2、VEGF及Cath-D的表达，同时观察了网状纤维分布与c-erbB-2、Cath-D之间的关系，并将检测结果与跟踪随访资料进行了综合分析。结果：102例胃癌组织中c-erbB-2表达阳性率为38.24%（39／102），与胃癌浸润深度（P＜0.05）、淋巴结转移（P＜0.05）密切相关；VEGF表达阳性率为50％（51／102），与胃癌浸润深度（P＜0.01）、生长方式（P＜0.01）、淋巴结转移（P＜0.01）密切相关；Cath-D表达阳性率为81.37%(83/102)，与胃癌浸润深度（P＜0.05）、生长方式（P＜0.05）、淋巴结转移（P＜0.05）及脉管内有无癌栓（P＜0.05）有关。对生存期分析显示：Cath-D、VEGF、c-erbB-2阳性患者预后差，5年生存率低于阴性表达患者。结论：c-erbB-2、VEGF及Cath-D与胃癌的生长、浸润、转移、预后有密切关系，可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标。     

High <Emphasis Type="BoldItalic">PRL-3</Emphasis> expression in human gastric cancer is a marker of metastasis and grades of malignancies: an in situ hybridization study

Phosphatase of regenerating liver (PRL)-3, encoding a 22-kD low molecular weight tyrosine phosphatase, has been reported to be associated with metastasis of colorectal carcinoma. We assessed the levels of PRL-3 mRNA expression to know whether its up-regulation was involved in progression and metastasis of gastric carcinoma. Levels of PRL-3 expression in 94 human gastric adenocarcinomas and 54 matched lymph node metastases were detected by in situ hybridization and compared with clinicopathological characteristics including prognosis. High PRL-3 expression was detected in 36.2% of primary gastric carcinoma (with nodal metastasis, 55.6%; without nodal metastasis, 10%; P < 0.001) and in 74.1% of lymph node metastases. The incidence of high PRL-3 expression in lymph node metastasis was significantly higher than in primary tumors (P < 0.044). Moreover, high expression of PRL-3 was closely associated with tumor size, lymphatic invasion, venous invasion, extent of lymph node metastasis, and tumor stage. These results suggest that high PRL-3 expression may participate in the progression and metastasis of gastric carcinoma. PRL-3 might be a novel molecular marker for aggressive gastric cancer.     

Inducible nitric oxide synthase expression correlates with angiogenesis, lymphangiogenesis, and poor prognosis in gastric cancer patients

Increased nitric oxide synthase expression plays a key role in tumor progression. To examine inducible nitric oxide synthase expression and its correlation with clinical variables, such as tumor progression, angiogenesis, lymphangiogenesis, and prognosis in gastric cancer, we studied inducible nitric oxide synthase expression in gastric cancer samples from 211 patients with 5-year follow-up. CD105 and D2-40 were adopted as biomarkers for tumor angiogenesis and lymphangiogenesis, respectively. Inducible nitric oxide synthase staining was mainly found in the cytoplasm of gastric cancer tumor cells. Positive inducible nitric oxide synthase immunoreactivity was seen in 54.03% of gastric cancer specimens, which was correlated with lymph node metastasis, vascular invasion, distant metastasis, and TNM stage. Compared with inducible nitric oxide synthase negative patients, inducible nitric oxide synthase-positive patients had significantly shorter survival times and higher microvessel density and lymphatic vessel density. Intratumor and peritumor blood microvessel density and lymphatic vessel density correlated with inducible nitric oxide synthase expression (Spearman ρ test, P < .05). We conclude that inducible nitric oxide synthase expression correlates with lymph node metastasis, vascular invasion, distant metastasis, TNM stage, and poor survival rate in gastric cancer. We propose that synthesized inducible nitric oxide synthase increases angiogenesis, and lymphangiogenesis thus promotes tumor progression. Inducible nitric oxide synthase expression may be a good biomarker for poor prognosis in gastric cancer.