噬菌体法与比例法在结核分枝杆菌药敏检测的比较研究

目的 探讨噬菌体检测技术(PhaB)同时快速检测4种一线抗结核药物耐药性的可能性,分析其临床应用价值.方法 应用PhaB同时测定53株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性,并与比例法的药敏结果比较,对2种方法检测结果不符的菌株进行Bactec-960药敏测定.结果 PhaB检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法药敏结果符合率分别为94.3%、90.6%、96.2%和88.7%.共有7株菌株16个药敏结果PhaB与比例法检测结果不符.Bactec-960检测结果有5株12个药敏结果支持PhaB结果,2株4个药敏结果支持比例法结果.结论 PhaB同时检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法检测结果有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速筛选方法.     

噬菌体生物扩增法快速检测临床标本中结核分枝杆菌及其耐药性

噬菌体生物扩增（PhaB）法是近年来发展起来的结核分枝杆菌（MTB）快速检测方法,操作简便、快速,价廉,无需特殊仪器,有较高的敏感性和特异性。为探讨其临床应用价值,我们于2007年10月至2008年7月间用PhaB法对临床标本进行MTB检测,并对其进行异烟肼、链霉素、利福平和乙胺丁醇4种抗结核药物的耐药性检测,同时实施改良罗氏培养法及比例法药敏试验作比对。     

噬菌体生物扩增法直接检测痰标本中结核分枝杆菌异烟肼耐药性的研究

目的利用噬菌体生物扩增法(PhaB法)直接检测痰结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼的耐药性,以建立一种特异性强,敏感性高的MTB药敏试验方法。方法选取临床上初步诊断为耐药肺结核的40例患者痰标本,使用PhaB法直接检测痰MTB对异烟肼的耐药性,同时用绝对浓度法检测异烟肼的耐药性,将两者结果进行比较。结果 40例患者痰标本PhaB法与绝对浓度法异烟肼耐药性检测结果均阳性22例,均阴性11例,两法不相符7例。以绝对浓度法检测结果为判断标准,则PhaB法异烟肼耐药性检测的敏感性、特异性、准确性分别是78.57%(22/28)、91.67%(11/12)、82.50%(33/40);Kappa检验,k=0.63 P=0.00<0.05。结论 PhaB法直接检测痰MTB对异烟肼的耐药性简便快速,具有较高的敏感性、特异性和准确性,且与绝对浓度法有较好的一致性。     

噬菌体法直接检测痰标本中结核分枝杆菌利福平耐药性的研究

目的 应用噬菌体生物扩增(PhaB)法直接检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)利福平(RFP)耐药性,探讨其在临床MTB耐药性测定中的应用价值.方法 应用PhaB法检测临床40例痰标本中MTB对利福平(RFP)的耐药性,并与绝对浓度法检测结果 进行比较.结果 加例痰标本PhaB法与绝对浓度法RFP耐药性检测均阳性25例,均阴性7例,两法不相符8例.以绝对浓度法检测结果 为判断标准,则PhaB法RFP耐药性检测的敏感性、特异性、准确性分别是78.13%、87.50%、80.00%.结论 PhaB法检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)对RFP的耐药性具有较高的敏感性和特异性,只需要3天时间,简便快速,不需要特殊仪器设备,费用低廉,可作为MTB耐药性检测的快速筛选方法 .     

噬菌体法直接检测痰标本中结核分枝杆菌利福平耐药性的研究

目的 应用噬菌体生物扩增（PhaB）法直接检测痰标本中结核分枝杆菌（MTB）利福平（RFP）耐药性,探讨其在临床MTB耐药性测定中的应用价值。方法应用PhaB法检测临床40例痰标本中MTB对利福平（RFP）的耐药性．并与绝对浓度法检测结果进行比较。结果40例痰标本PhaB法与绝对浓度法RFP耐药性检测均阳性25例,均阴性7例,两法不相符8例。以绝对浓度法检测结果为判断标准,则PhaB法RFP耐药性检测的敏感性、特异性、准确性分别是78．13％、87．50％、80．00％。结论PhaB法检测痰标本中结核分枝杆菌fMTB）对RFP的耐药性具有较高的敏感性和特异性,只需要3天时间．简便快速。不需要特殊仪器设备,费用低廉．可作为MTB耐药性检测的快速筛选方法。     

显微镜观察药物敏感性技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌的研究

目的探讨显微镜观察药物敏感性技术(MODS)在痰液标本中结核分枝杆菌(MTB)的检测效果,以评价其临床应用价值。方法收集150份患者临床痰标本,应用MODS技术、罗氏培养法进行MTB的检测,将两法的结果进行对比分析。结果 MODS技术与罗氏培养法结果符合率为77.8%,MODS技术检测痰标本中MTB的敏感性为93.3%,特异性为70.0%,阳性预测值(PPV)为60.8%,阴性预测值(NPV)为95.4%,正确性为77.8%。结论 MODS技术检测痰标本中MTB具有快速、灵敏、简便等优点,可作为结核病细菌学快速检测的新方法之一。     

显微镜观察药物敏感性试验在结核性淋巴结炎中的应用评价

摘要：目的：探讨显微镜观察药物敏感性试验（MODS）用于结核性淋巴结炎的诊断价值及直接进行结核分枝杆菌（MTB）耐药性检测的可能性。 方法：对94例细针针吸细胞学（FNAC）诊断为结核性淋巴结炎患者,用MODS法、抗酸染色和改良罗氏培养基培养（以下简称罗氏法）对穿刺吸出物进行MTB检测;抗酸染色阳性标本同时用MODS法和绝对浓度法检测药敏,对两法检测结果不符的菌株进行最低抑菌浓度（MIC）测定。 结果：MODS法、罗氏法和抗酸染色法检测结核性淋巴结炎的阳性率分别为51.1%、39.4%和22.3%,MODS法阳性率均显著高于罗氏法和抗酸染色法（χ² =7.69与25.04,P均＜0.01）。MODS法和罗氏法检测结果的符合率为86.2%。MODS检测时间中位数为13 d,明显短于罗氏培养法的29 d。MODS检测21株MTB对利福平、异烟肼、乙胺丁醇和链霉素药敏结果与罗氏药敏结果符合率分别为95.0%、85.7%、85.7%、100%。7个MODS药敏结果与罗氏药敏检测结果不符,经MIC检测5个药敏结果支持MODS法结果。 结论：MODS技术对结核性淋巴结炎诊断和MTB药敏试验检测有较高的敏感性和准确性,在结核病防控中有较好的应用价值。     

基因芯片法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性分析

目的分析基因芯片法检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的灵敏度、特异度及符合率,为临床提供方便、准确、快速的MTB耐药性的检测方法。方法以DNA测序法为金标准,采用基因芯片法与比例法药敏试验同时对2014年8~12月收治的250例结核病患者的痰液标本分离MTB菌株进行耐药性检测,比较两种方法检测MTB对利福平和异烟肼耐药性的效能。结果基因芯片法与比例法药敏试验检测MTB对利福平的耐药率分别为3.0%、3.5%,对异烟肼的耐药率分别为6.7%、8.2%。以DNA测序法为金标准,基因芯片法检测MTB对利福平与异烟肼耐药性的灵敏度、特异度及符合率均高于比例法药敏试验,且检测时间短于比例法药敏试验,差异均有统计学意义(P0.05)。结论运用基因芯片法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的灵敏度、特异度与符合率,可以代替比例法药敏试验成为检测MTB耐药性的有效方法。     

Xpert MTB/RIF检测痰标本结核分枝杆菌与利福平耐受性的临床应用研究

目的分析Xpert MTB/RIF方法用于临床快速检测结核分枝杆菌(MTB)与利福平耐受性的临床意义。方法收集2015年1-12月在惠州市结核病防治研究所及5个县区医院结核科就诊的肺结核患者痰标本552例,进行涂片镜检、Xpert MTB/RIF核酸检测和改良罗氏培养,并对培养阳性者进行药敏实验。评价各种方法 MTB检测灵敏度与特异度,对比传统药敏方法和Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性的结果并分析。结果 Xpert MTB/RIF与改良罗氏培养法对MTB检测结果相比,敏感度95.3%、特异度93.1%;耐药性对比结果中,所有阳性标本中利福平耐药的敏感度82.1%,特异度97.8%;Xpert MTB/RIF检测MTB分级与改良罗氏培养分级一致性分析中,kappa=0.688,提示两者结果具有良好的一致性。结论 Xpert MTB/RIF可用于临床早期快速检测结核分枝杆菌与利福平耐药检测的筛查,有利于临床快速决策。     

基因芯片检测结核分枝杆菌耐药基因效能分析

目的评价基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的效能。方法选取140例MTB阳性的痰标本进行基因芯片检测和传统药敏试验检测,分析基因芯片法对异烟肼(INH)、利福平(RFP)耐药性检测的灵敏度、特异度、准确度。对两种结果不符合的标本进行耐药基因测序检验。结果 INH耐药基因检测的灵敏度89.5%,特异度96.1%;RFP耐药基因检测的灵敏度86.4%,特异度97.9%。痰和菌株进行基因芯片检测的结果一致率为97.1%,用痰标本进行基因芯片耐药基因检测报告时间为(3.6±1.5)d,传统药敏报告时间为(65.1±4.9)d。结论利用痰标本进行的基因芯片检测可作为一种高效的MTB耐药筛查方法。     

回顾性分析噬菌体生物扩增技术在肺结核诊断中的应用

目的评价噬菌体生物扩增技术（PhaB）在肺结核诊断中的应用。方法回顾性分析采用PhaB法、3D培养法、直接涂片法检测373份痰标本的抗酸杆菌结果。结果 PhaB法、3D培养法、直接涂片法检测抗酸杆菌的阳性率分别为53.6%、56.6%及20.1%。以3D培养法结果为标准,直接涂片法的敏感性、特异度、准确性分别为33.2%、95.7%及60.3%;PhaB法的敏感性、特异度、准确性分别为89.1%、93.6%及90.6%。直接涂片法与PhaB法检测结果比较,差异有统计学意义（χ2=94.7,P〈0.01）;PhaB法与3D培养法检测结果比较,差异无统计学意义（χ2=3.46,P〉0.05）。结论 PhaB法检测结核分枝杆菌具有较高的敏感性、特异度、准确性,值得在临床推广。     

噬菌体生物扩增法快速检测脊柱结核脓液中结核分枝杆菌

[目的]探讨噬菌体生物扩增(PhaB)法快速检测脊柱结核脓液中结核分枝杆菌的临床应用价值.[方法]应用直接涂片法,BACTEC MGIT-960法及PhaB法分别检测56例脊柱结核患者的56份脓液标本以及10株结核分枝杆菌标准株,15株非结核分枝杆菌及5株非分枝杆菌.[结果]PhaB法检测10株结核分支杆菌标准株均为阳性,15株非结核分支杆菌和5株非分支杆菌均为阴性.46份BACTEC MGIT-960培养阳性和10份BACTEC MGIT-960培养阴性的标本中,PhaB法分别有42份(91.3%)、3份(30.0%)阳性,检出率分别为82.1%和80.4%(P＞0.05).涂片检查阳性仅13份(23.2%),阴性43份(76.8%),而应用PhaB法可以检测出45份(80.4%)阳性,其中有33份为涂片阴性的标本(P＜0.05).用PhaB法能在18～24 h内得出结果,较BACTEC MGIT-960法提前5～17 d.[结论]PhaB法与直接涂片法、BACTEC MGIT-960法相比,可以简便、快速地检测结核分支杆菌,全程只需1 d,并且具有较高的敏感性和特异性.     

噬菌体生物扩增法检测涂阴肺结核患者痰标本的临床应用价值

目的探讨噬菌体生物扩增法对涂阴肺结核临床诊断的应用价值。方法对110例涂阴肺结核和20例非结核性其他肺部疾病患者的痰标本进行噬菌体生物扩增法检测,并同时进行分枝杆菌罗氏培养。结果110例涂阴痰标本中46例噬菌体生物扩增法阳性（41．82％）;27例罗氏培养阳性（24．55％）。结论噬菌体生物扩增法检测涂阴痰标本中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,可作为诊断涂阴肺结核的一种检测方法。     

结核分枝杆菌噬菌体快速检测方法的临床应用评价

目的评价噬菌体生物扩增法直接检测痰样本中结核分枝杆菌的临床效果。方法应用噬菌体生物扩增法、金胺O染色涂片镜检和快速培养法对530例临床痰样本进行检测。结果以快速培养法培养结果为参考标准进行评价。结果 530例痰样本中有270例快速培养法阳性,其中噬菌体生物扩增法有220例阳性,而260例快速培养法阴性的样本中有20例噬菌体生物扩增法阳性;噬菌体生物扩增法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为81.6%、92.3%、91.6%、82.8%。涂片联合噬菌体生物扩增法的检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88.9%、80.8%、82.8%和87.5%。结论噬菌体生物扩增法具有较高的敏感性和特异性,以及快速、安全等优点,特别是对于痰涂片阴性的结核病患者具有较高的临床应用价值。     

3种检测痰抗酸杆菌方法的比较研究

目的探讨噬菌体生物扩增法、夹层杯法和直接涂片法(简称直涂法)在检测痰抗酸杆菌中的应用价值。方法收集临床确诊的114例活动性肺结核患者的晨痰,同时进行噬菌体生物扩增法、夹层杯法和直涂法检测痰抗酸杆菌,统计分析3种方法的检出率。结果噬菌体生物扩增法、夹层杯法和直涂法对114例晨痰标本的阳性检出率分别为50.9%、28.9%、16.7%,3种方法检出率两两比较,经卡方检验差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论噬菌体生物扩增法检测抗酸杆菌阳性率明显高于夹层杯法和直涂法,且所需设备简单,是一种具有推广价值的检测方法。     

膜芯片技术对结核分枝杆菌耐药性检测的研究

目的 验证膜芯片技术在结核分枝杆菌对利福平（RFP）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）和乙胺丁醇（EMB）耐药性检测中的应用价值.方法 收集393例临床标本（包括痰液、尿液、胸腔积液、腹水标本）,根据结核分枝杆菌耐药位点的DNA序列,设计用于检测rpoB、katG、inhA、rpsL和embB基因常见突变类型的膜芯片,对上述临床标本进行检测,并将其与传统微生物敏感性试验结果进行比较,对不相符结果用聚合酶链反应产物直接测序（PCR-DS）进行验证.结果 以常规培养法为金标准,膜芯片法扩增结核分枝杆菌的敏感性、特异性、准确性分别为90.4%、98.8%和95.7%,其对结核分枝杆菌RFP、INH、SM和EMB耐药性检测的敏感性分别为92.3%、83.3%、68.8%和83.3%;准确性分别为98.6%、97.3%、96.6%、和98.5%;特异性均达到100.0%.结论 膜芯片法检测结核分枝杆菌耐药性具有较高的敏感性、特异性和准确性,可作为常规微生物敏感性试验的补充.     

Usefulness of induced sputum and fibreoptic bronchoscopy specimens in the diagnosis of pulmonary tuberculosis

We investigated the diagnostic value of induced sputum (IS) and bronchial lavage (BL) specimens in patients with suspected pulmonary tuberculosis who had negative spontaneous sputum specimens or who were unable to produce sputum spontaneously. IS specimens and BL specimens obtained using flexible fibreoptic bronchoscopy from 55 patients were evaluated for the presence of acid-fast bacilli (AFB) and cultured for Mycobacterium tuberculosis. Positive results were found with IS smear in 23 patients, BL smear in 26 patients, and IS or BL culture in 42 patients. Culture of BL specimens had a higher sensitivity than IS or BL smears or culture of IS specimens. The highest sensitivity rate was obtained with a positive BL or IS culture (86%). For early diagnosis (a positive IS or BL smear), the sensitivity was 57%. IS has a higher sensitivity rate than spontaneous sputum for the detection of tuberculosis, and fibreoptic bronchoscopy is useful for the early diagnosis of tuberculosis when AFB are not detected in spontaneous or induced sputum specimens.     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用。方法采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析。结果DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和抗酸杆菌涂片法(P<0.05)。以比例法药敏试验为金标准,DNA微阵列芯片法与比例法药敏试验检测耐利福平、耐异烟肼结核分枝杆菌及耐多药结核分杆菌的效果比较,差异有统计学意义(P<0.05),但均有较好的一致性(Kappa≥0.75)。耐利福平基因突变类型主要为rpoB531(C→T),占56.3%;耐异烟肼基因突变类型主要为KatG315(G→C),占84.6%;耐多药结核分杆菌基因突变类型主要为rpoB531+KatG315占54.6%。结论DNA微阵列芯片法可快速、准确地对海南地区疑似结核病患者的痰标本进行结核分枝杆菌及其耐药性检测,从而指导临床用药。     

噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用

目的 探讨噬菌体生物扩增法（Phab）快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法 应用Phab、BACTEC-460检测仪及厚涂片法共同检测206例痰标本。结果 58例涂片阳性、BACTEC-460培养阳性的标本中．Phab检测阳性55例（94．8％）;47例涂片阴性、BACTEC-460、培养阳性的标本中,Phab检测阳性35例（74．4％）;101例涂片阴性、BACTEC-460培养阴性的标本中,Phab检测阳性25例（24．8％）。结论 Phab快速、简便、灵敏,有助于结核分枝杆茵的快速检测,可用于结核病的初步诊断,但测定条件的选择非常重要。     

200例分支杆菌药敏试验的临床意义

目的对结核分支杆菌及非结核分支杆菌培养阳性药物的敏感性及耐药性研究及意义。方法用法国生物梅里埃BacT/ALERT药敏试剂,内含链霉素(SM)、异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)4种药对200例分支杆菌培养阳性的标本做药敏试验。结果通过药敏试验得出痰、胸水、椎体脓液、尿、大便等临床标本对SM、INH、RFP、EMB的敏感性及耐药性比例,以及结核分支杆菌及非结核分支杆菌的耐药程度。结论通过分支杆菌药敏试验对指导帮助临床用药具有重要的意义。