K-受体激动剂对体外循环大鼠JAK2-STAT3信号通路及认知功能影响

目的探讨K-受体激动剂U50488H对体外循环(CPB)术后大鼠JAK2-STAT3信号通路及认知功能的影响。方法选取60只SD大鼠为研究对象,随机分为假手术组(S组)、CPB组(C组)、U50488H组(K组),U50488H拮抗剂组(NK组),U50488H+AG490组(AG组),每组各12只。各组大鼠于CPB后1 d行水迷宫检测;酶联免疫吸附试验检测血清中炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及S-100β蛋白的变化。蛋白印记法检测海马JAK2、STAT3及磷酸化JAK2、STAT3表达水平变化。结果 C组、K组、NK组及AG组S100-β、IL-6、TNF-α水平均显著高于S组(P <0. 05)。K组、AG组S100-β、IL-6、TNF-α水平均显著低于C组(P <0. 05)。C组、K组、NK组及AG组海马组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3水平均显著高于S组(P <0. 05)。K组、AG组JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3水平均显著低于C组(P <0. 05)。与C组比较,K组和AG组大鼠平均逃避潜伏期时间明显缩短,空间探索试验中进入目标象限的次数明显增多(P <0. 05)。结论 K-受体激动剂可在一定程度上减少CPB术后认知功能障碍发生,其机制可能与抑制JAK2-STAT3通路,减少炎症反应有关。     

K受体激动剂通过MAPK-ERK 1/2通路对术后认知功能保护作用研究

目的探讨K受体激动剂对体外循环(CPB)后大鼠认知功能的保护作用。方法选取健康成年清洁级雄性SD大鼠48只,按完全随机数字表法将其分为CPB手术组(C组)、CPB+K阿片受体激动剂(U50488H)组(K组)、CPB+U50488H+K阿片受体拮抗剂(Nor-BN)组(NK组)及CPB+U50488H+MAPK-ERK1/2通路特异阻断剂(U0126)组(UK组),每组各12只。应用Western-blot法观察各组大鼠海马组织NF-κB-p65、α7烟碱型胆碱能受体(α7nAChR)、p-erk蛋白水平的表达情况。结果 C组NF-KB-p65蛋白表达水平显著高于K组、NK组及UK组,且K组最低,组间比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。K组、NK组及UK组海马组织中α7nAChR蛋白表达水平均高于C组; NK组及UK组α7nAChR表达水平均低于K组; NK组大鼠α7nAChR表达水平低于UK组;组间比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。K组p-erk蛋白表达水平高于C组、NK组及UK组,组间比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 K阿片受体激动剂对认知功能的保护与MAPK-erk1/2通路上调α7n AChR激活胆碱能抗炎通路有关,可激活α7n AChR,抑制核转录因子-κB蛋白表达,减少炎症反应,从而降低CPB所致术后认知功能障碍的发生率。     

κ阿片受体激动剂U45088 H对大鼠体外循环后认知功能及PKA-CREB信号通路影响

目的探讨κ阿片受体(KORs)激动剂U45088H对大鼠体外循环(CPB)后认知功能及PKA-CREB信号通路的影响。方法选取成年雄性SD大鼠40只为研究对象。采用随机数字表法分为假手术(S)组、CPB(C)组、CPB+U50488H(K)组、CPB+KORs拮抗剂Nor-BNI+U50488H(N)组与CPB+PKA拮抗剂H89+U50488H(H)组,每组各8只。S组不建模型,其余4组各CPB 60 min。K组CPB前30 min静脉注射U50488H 1.5 mg/kg;N组CPB前1 h静脉注射Nor-BNI 2 mg/kg,CPB前30 min静脉注射U50488 1.5 mg/kg;H组CPB前1 h侧脑室注射H89 5μl,CPB前30 min静脉注射U50488H 1.5 mg/kg。1 d后水迷宫法检测大鼠认知功能,TUNEL法观察海马组织细胞凋亡,Western-blot法检测海马组织p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达情况。结果与S组比较,C、K、N及H组大鼠水迷宫逃避潜伏期均延长,穿越平台次数、游泳距离及停留时间均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与S组比较,C、K、N及H组大鼠海马细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与S组比较,C、K、N及H组大鼠海马p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KORs可减少大鼠CPB后认知功能障碍的发生,其机制可能与激活PKA-CREB信号通路有关。     

体外循环对大鼠术后认知功能障碍影响

目的探讨体外循环(CPB)对大鼠术后认知功能障碍(POCD)的影响。方法将24只成年雄性SD大鼠随机分为S组(n=12)和C组(n=12)。观察两组海马组织细胞凋亡形态;检测血清中炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),脑损伤标志物S-100β以及caspase-3蛋白表达的变化情况。结果 C组在CPB转流前(T_0)、CPB术后1 d(T_1)、CPB术后3 d(T_3)、CPB术后7 d(T_7)的IA值均高于S组,组间比较,差异均有统计学意义(P <0. 05);与T_0时比较,C组大鼠海马阳性细胞IA值在T_1、T_3时间点均显著升高(P <0. 05)。C组T_1、T_3时间点caspase-3表达明显高于S组,组间比较,差异有统计学意义(P <0. 05); C组T_1、T_3时caspase-3表达明显高于T_0、T_7时(P <0. 05)。C组T1、T3时S100-β、IL-6、TNF-α浓度均明显高于T_0、T_7时,差异有统计学意义(P <0. 05)。T_1、T_3时,C组血清S100-β、IL-6和TNF-α浓度均高于S组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论结论 CPB可引起炎症相关的大鼠海马损伤并导致POCD的发生,且术后第1天最严重。     

丹参酮ⅡA对癫痫大鼠认知功能的作用机制研究

目的 探讨丹参酮ⅡA对于癫痫大鼠认知功能的作用及可能分子机制。方法 选取清洁级SD大鼠,随机分为对照组、模型组及丹参酮ⅡA低、中、高剂量干预组,每组10只,使用氯化锂、毛果芸香碱构建癫痫大鼠模型,对照组为生理盐水灌胃的常规饲养大鼠,模型组为生理盐水灌胃的癫痫大鼠模型,低、中、高剂量干预组分别为5、10、20 mg/(kg·d)丹参酮ⅡA灌胃的癫痫大鼠模型。Morris水迷宫实验检测丹参酮ⅡA对于癫痫大鼠认知行为的影响,ELISA法检测各组脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平,Western blot法检测各组脑组织白细胞介素-1β前体(pro-IL-1β)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达水平。结果 丹参酮ⅡA干预6 d后,与对照组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期显著延长,脑组织TNF-α、IL-1β表达水平以及pro-IL-1β、NLRP3蛋白表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,中、高剂量干预组大鼠穿越原有平台次数及在原有平台所在象限停留时间均明显增多或延长,脑组织TNF-α、IL-1β表达水平明显降低(P<0.05)。...     

组蛋白乙酰转移酶GCN5对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的作用

目的 探讨组蛋白乙酰转移酶GCN5介导的组蛋白H3乙酰化对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞(A549细胞)增殖、凋亡及炎性因子表达的作用。方法 将A549细胞随机分为6组：对照组、LPS组、NC+LPS组、GCN5+LPS组、MB-3(GCN5抑制剂)+LPS组和GCN5+MB-3+LPS组。分别比较对照组、LPS组和GCN5+LPS组，以及LPS组、MB-3+LPS组和GCN5+MB-3+LPS组的组蛋白H3乙酰化水平、GCN5表达水平、细胞活性与增殖情况、细胞凋亡情况、炎性因子水平的差异。采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测GCN5 mRNA表达水平；CCK-8试剂盒检测细胞活性；EdU实验检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞凋亡情况；Western blotting检测GCN5、H3K9ac、H3K14ac、H3K23ac、Caspase-3和Bcl-2蛋白表达水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 与对照组A549细胞比较，LPS组的H3K9ac、H3K14ac、H3K23ac...     

大鼠脊髓缺血再灌注损伤中Ire1α、caspase-12的表达与细胞凋亡

目的 观察在大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中Ire1α与caspase-12的表达变化规律及其与神经细胞凋亡的关系. 方法 健康成年SD大鼠55只,用随机数字表法分为2组:(1)脊髓压迫缺血再灌注组(手术组,50只大鼠),每个时相点10只,采用自制压迫装置制备脊髓压迫缺血再灌注模型;(2)假手术对照组(手术组,5只大鼠),只做全椎板切除不做脊髓压迫.用TUNEL、免疫组化、Western blot和免疫荧光标记等方法 ,分别于缺血再灌注后1,4,8,16和24 h检测压迫段脊髓组织中细胞凋亡以及lre1α,caspase-12的表达变化情况. 结果 细胞凋亡数量随着缺血再灌注时间的延长而增加.手术组Ire1α、caspase-12的阳性细胞数及蛋白量于再灌注1 h开始增加,16 h达峰值,24 h开始减少,但仍然高于假手术对照组(P＜0.05). 结论 Ire1α与caspase-12共同参与了内质网应激介导的神经细胞凋亡.     

运动对尼古丁戒断大鼠学习与记忆能力的影响及机制

目的:研究运动干预对尼古丁戒断大鼠学习与记忆能力的影响及其机制。方法:40只4周龄雄性SD大鼠适应性饲养1周后,建立大鼠尼古丁条件位置偏好(CPP)模型,随机分为4组:安静组、小强度运动组、中等强度运动组和大强度运动组。运动组大鼠进行连续10天、每天30 min的不同强度跑台运动干预。采用CPP偏好得分反映大鼠对尼古丁的奖赏记忆,水迷宫评价学习与记忆能力,Western blotting检测前额叶皮层和海马组织α7烟碱乙酰胆碱受体(n ACh Rs)蛋白表达水平。结果:与安静组相比,小强度运动组大鼠CPP得分没有显著变化,中等强度和大强度运动组大鼠CPP得分显著下降(分别P<0.01和P<0.05),但两组之间不存在差异性;在水迷宫测试中,仅中等强度运动组大鼠在连续4天学习任务中的逃避潜伏期显著缩短(P<0.01)。中等强度和大强度运动组大鼠在目标象限的游泳时间、在目标象限的游泳距离均显著增加(P<0.05),但两组之间不存在差异性,且仅中等强度运动组大鼠穿梭目标象限的次数显著增加(P<0.05);与安静组相比,仅中等强度运动组大鼠前额叶皮层α7 n ACh Rs蛋白相对表达显著上调(P<0.01),海马α7 n ACh Rs蛋白表达无变化。结论:连续10天的中等强度跑台运动可能通过特异性上调前额叶皮层α7 n ACh Rs蛋白表达,改善尼古丁戒断大鼠的学习与记忆能力,促进大鼠尼古丁奖赏记忆的消退。     

氢气预处理及后处理对大鼠肠缺血/再灌注认知功能的影响

目的 观察氢气(H2)预处理及后处理对肠缺血/再灌注(I/R)大鼠认知功能的影响,并探讨相关机制.方法 将SD大鼠64只随机分为4组(n=16):假手术(Sham)组、肠缺血/再灌注(I/R)组、H2预处理(Pre)组和H2后处理(Post)组.夹闭肠系膜上动脉(SMA) 90 min再灌注方法制备大鼠肠I/R模型.Pre组及Post组分别于造模前或再灌注后吸入2％氢气3h.用Morris水迷宫评定大鼠认知功能;检测海马白细胞介素(IL)-1β IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与Sham组比较,I/R组、Pre组和Post组大鼠潜伏期延长,穿越平台次数及平台象限停留时间减少;IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA含量增加,SOD活性降低(P＜ 0.05或P＜0.01).与I/R组比较,Pre组和Post组潜伏期缩短,穿越平台次数及平台象限停留时间增加;IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA含量降低,SOD活性增加(P＜0.01),但Pre组和Post组之间差异未见统计学意义.结论 氢气预处理及后处理能同等地改善肠缺血/再灌注(I/R)大鼠认知功能的变化,机制可能与抑制神经炎症反应,减轻氧化应激损伤有关.     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠认知能力的影响

目的检测α-硫辛酸对糖尿病大鼠认知能力的影响情况,探讨α-硫辛酸对糖尿病大鼠学习与记忆影响的机制。方法Wistar大鼠共30只,随机分成3组,对照组10只,治疗组10只,糖尿病组10只。糖尿病大鼠模型用链佐菌素（STZ）制模。12周后,Morris水迷宫测试其学习记忆能力,western blotting检测各组NF—kB蛋白水平表达,TUNEL法检测大鼠海马神经元凋亡情况。结果糖尿病组大鼠学习成绩降低（P〈0．05）,TUNEL阳性细胞增多（P〈0．05）,NF-kB蛋白水平表达增加（P〈0．05）,甜硫辛酸治疗组大鼠较糖尿病组学习成绩升高（P〈0．05）,TUNEL阳性细胞减少（P〈0．05）,NF-kB蛋白水平表达减少（P〈0．05）。结论NF-kB蛋白的表达增高可能与糖尿病大鼠海马神经元凋亡及认知功能障碍有关。α-硫辛酸可能通过降低NF-kB的表达,从而对糖尿病大鼠学习与记忆障碍有一定程度的改善。