着丝粒蛋白A在原发性肝癌中的表达

目的研究乙肝病毒X蛋白（HBx）上调的基因着丝粒蛋白A（centromere protein A,CENP-A）在原发性肝细胞癌（HCC）及癌旁组织的表达差异,并初步探讨其意义。方法应用RT-PCR和即时定量PCR（real-time quantitative PCR）方法,检测20例HCC及配对癌旁肝组织中CENP-A基因mRNA的表达水平,应用免疫组织化学方法检测80例HCC和癌旁肝组织中CENP-A蛋白、p53蛋白的表达情况。结果CENP-A mRNA在癌及癌旁组织中的相对表达水平分别为（0．64±0．18）和（0．09±0．09）,二者差异有统计学意义（t=12．78,P〈0．01）。免疫组织化学结果显示：CENP-A在HCC组织中的总阳性率为71．25％（57／80）,高于配对癌旁组织的总阳性率43．75％（35／80）（x^2=12．38,P〈0．01）。p53在癌组织中的总阳性率为75％（60／80）,高于配对癌旁组织中的总阳性率16．25％（13／80）（x^2=55．65,P〈0．01）,p53与CENP-A在癌组织中的表达一致性达88．75％（71／80）,呈正相关（r=0．57,P〈0．01）。结论CENP-A在肝癌组织中的过表达与细胞恶性增殖相关,且这种过表达是由转录水平引起的,其机制可能与p53基因的转录调节有关。     

Nucleophosmin/B23在肝细胞癌组织中的高表达

目的探讨Nucleophosmin／B23（B23）在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其临床病理意义。方法采用重组蛋白表达和杂交瘤细胞技术制备B23重组蛋白和鼠抗B23单克隆抗体。收集103例HCC组织、12例肝局灶性结节性增生和17例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,10例HCC及癌旁肝新鲜组织,采用免疫组织化学（ABC）方法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫印迹等技术检测B23在这些组织中的表达,并与增殖细胞核抗原（PCNA）的表达相比较。应用统计学方法对结果进行分析。结果RT-PCR及免疫印迹结果显示：在mRNA和蛋白质水平,B23在HCC组织中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。免疫组织化学结果显示：B23在4组（HCC组、癌旁肝组织组、肝局灶性结节性增生组、血管瘤旁肝组织组）中的表达差异有统计学意义（P〈0．001）,其中B23在HCC组织中的表达显著高于其他3组（P〈0．01）,PCNA在HCC组织中的表达也显著高于其他3组（P〈0．01）,相关性分析表明B23与PCNA在4组中表达强度及其差异具有相关性（r=0．4767,P〈0．01）。B23在HCC组织中的表达强度与患者血清AFP水平、肿瘤病理分级及是否伴有肝硬化之间的关系有统计学意义（P〈0．05）。结论B23在HCC中呈高表达,且显著高于非癌肝组织;B23可作为HCC细胞增生程度的潜在标记,并在临床病理上具有潜在的应用意义。     

乳腺癌中Livin基因及蛋白表达与细胞凋亡、增殖的关系

目的探讨Livin在乳腺癌表达及其与caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系。方法采用SP法免疫组化和原位杂交技术检测Livin在正常乳腺组织（14例）、乳腺增生性病变（14例）、乳腺非浸润性癌（20例）和乳腺浸润性癌组织（52例）中Livin mRNA和其蛋白的表达以及caspase-3、Ki-67在乳腺癌组织中的表达。结果Livin蛋白和mRNA在正常乳腺组织、乳腺增生性病变、乳腺非浸润性癌和乳腺浸润性癌组织中阳性率分别为（7．1％、7．1％）、（28．6％、28．6％）、（65．0％、70．0％）、（73．1％、75．0％），差异有统计学意义（P〈0．01）。Livin蛋白与mRNA表达之间差异无统计学意义（P〉0．05）。Livin表达与临床分期、淋巴结转移和年龄有关（P〈0．05），与肿瘤大小和组织学分级无关。Livin蛋白与caspase-3的在乳腺癌表达呈负相关（P〈0．01）。Livin蛋白表达阳性的乳腺癌Ki-67增殖指数（47．32％±22．34％）明显高于Livin蛋白表达阴性的乳腺癌Ki．67增殖指数（18．01％±23．34％）（P〈0．01）。结论Livin基因及蛋白在乳腺癌中表达上调，提示在乳腺癌发生、发展中起重要作用，可作为乳腺癌新的分子标记物，可能成为乳腺癌诱导凋亡治疗的新靶点。Livin蛋白通过与执行型caspase-3结合，抑制其活性，从而阻止细胞凋亡。Livin不仅参与细胞凋亡的调控，还促进了细胞增殖及肿瘤的发生、发展。     

凋亡抑制蛋白Livin和Ki67在胃癌的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin和Ki67在胃癌的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测60例胃癌（其中男性44例,女性16例,年龄41～77岁,中位年龄58_3岁）和30例癌旁正常组织中Livin蛋白和Ki67蛋白的表达情况。结果Livin蛋白在胃癌组织中的表达（58．3％）明显高于癌旁正常组织（3.3％）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;Livin蛋白的表达与临床分期、病理组织分级和淋巴结转移呈正相关（P〈0．05）;Ki67蛋白在胃癌组织中表达（66．7％）明显高于癌旁正常组织（0％）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;Livin蛋白表达与Ki67蛋白表达呈正相关（r=0．482,P〈0．05）。结论Livin蛋白在胃癌组织中表达上调,提示其可能在胃癌发生、发展中起重要作用,有望成为胃癌诊断和基因治疗的新靶点。Livin蛋白和Ki67蛋白可能在胃癌癌变中起协同作用。     

脐血瘦素质量浓度与新生儿免疫功能的相关性研究

目的探讨脐血瘦素（leptin）质量浓度与新生儿免疫功能的关系及其可能的免疫调控机制。方法2004年4—10月我室对在本校附属医院儿科正常分娩的早产儿34例、足月儿56例，分别采用放射免疫分析（RIA）、免疫透射比浊法及流式细胞术（FCM）检测脐血leptin、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、IgG、IgA、IgM、补体（C3、C4）、白细胞介素-4（IL-4）、r-干扰素（IFN—r）质量浓度及bcl-2蛋白表达量、T淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡率。结果脐血leptin质量浓度与IgG（r=0.618，P〈0．01）、C3（r=0．346，P〈0．01）、C4（r=0．272，P〈0.05）、CD^4＋T淋巴细胞百分率（r=0.284，P〈0．05）、CD^8＋T淋巴细胞百分率（r=0.365，P〈0．01）及IFN-r质量浓度（r=0.319，P〈0.05）、GM-CSF质量浓度（r=0.253，P〈0．05）、bcl-2蛋白表达量（r=0．297，P〈0.05）均呈正相关，与IL-4质量浓度（r=-0．288，P〈0．05）、淋巴细胞凋亡率（r=-0．544，P〈0.01）呈负相关，而与IgA、IgM无显著相关（均P〉0．05）。结论脐血leptin质量浓度与新生儿免疫功能密切相关，leptin具有增强新生儿细胞免疫功能的作用，而对体液免疫功能影响较小。Leptin可上调bcl-2蛋白表达和GM—CSF质量浓度，抑制淋巴细胞的凋亡，此作用可能是leptin免疫调节作用的重要机制。     

胰腺癌淋巴管生成及其与生物学行为关系

目的研究胰腺癌淋巴管生成的机制、分布特征及其与胰腺癌临床病理学的关系。方法应用免疫组化双标记方法检测42例胰腺癌和12例癌旁胰腺组织中血管内皮生长因子-C（VEGF—C）及肾小球足突细胞黏蛋白（Podoplanin）的表达。结果42例胰腺癌组织VEGF—C阳性率为61．9％，12例癌旁胰腺组织中VEGF—C阳性表达率为58．3％，两者差异无显著性（x^2=0．050，P〉0．05）。VEGF-C阳性率与胰腺癌的淋巴结转移有密切关系（x^2=4．822，P〈0．05），而与胰腺癌大小、组织学分级、神经浸润及临床病理分期无关（P〉0．05）。胰腺癌组织中可见明确的Podoplanin阳性淋巴管，其数目和分布具有明确的异质性。肿瘤边缘组织中淋巴管数最多，其次为肿瘤表浅部，而肿瘤中心区最少；在形态上，肿瘤边缘可以见到较多管腔扩张的淋巴管，而肿瘤中心及表浅淋巴管多为闭锁的条索状或点状。癌旁胰腺中Podoplanin阳性淋巴管分布在呈慢性炎症的胰腺组织周围，多数呈扩张状态。42例胰腺癌组织中LVD为7．67±1．25，12例癌旁胰腺组织中LVD为7．85±0．93，二者差别无显著性（t=0．639，P〉0．05）。胰腺癌组织中LVD与淋巴结转移及临床病理分期有关（t=7．076，6．803，P〈0．01），而与胰腺癌大小、组织学分级和神经浸润无关（P〉0．05）。胰腺癌组织中VEGF-C的表达与LVD间呈正相关性（r=0．509，P〈0．05）。结论胰腺癌及癌旁胰腺组织中VEGF—C高表达，促进淋巴管增生，可能是临床上胰腺癌早期发生淋巴结转移的重要机制之一。     

SEL1L基因在食管癌中的表达及意义

目的探讨SEL1L（human Sel-1-like）mRNA及其蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测90例手术切除的食管鳞状细胞癌、35例距癌灶边缘5am以上切缘的正常黏膜、60例癌旁黏膜及20例内窥镜活检的食管鳞状上皮不典型增生组织中SEL1L蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测上述癌组织、正常黏膜、癌旁黏膜中SEL1L mRNA的表达。结果（1）SEL1L mRNA在食管鳞状细胞癌的表达率为80．0％（72／90）,较正常黏膜的14．3％（5／35）和癌旁黏膜的16．7％（10／60）高（P〈0．01）;SEL1L mRNA在有淋巴结转移组的表达阳性率为92．7％（38／41）比无淋巴结转移组69．4％（34／49）高（P〈0．01）。（2）SEL1L蛋白在鳞状细胞癌的表达阳性率为87．8％（79／90）,在鳞状上皮不典型增生中的表达阳性率为90．0％（18／20）。分别较正常黏膜的14．3％（5／35）和癌旁黏膜的13．3％（8／60）高（P〈0．01）。SEL1L蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均无明显相关性（P〉0．05）。（3）食管鳞状细胞癌组织中SEL1L mRNA和SEL1L蛋白的表达呈明显正相关（r=0．492,P〈0．01）。结论（1）SEL1L蛋白表达的调控主要在转录水平,SEL1L蛋白表达水平的升高主要是相应转录水平上调的结果。（2）SEL1L蛋白过表达可能是食管鳞状细胞癌发生的早期表现,SEL1L蛋白的检测可作为识别食管癌高风险患者的生物标记物。     

SDF-1和VEGF-C在结肠癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的探讨结肠癌组织中基质细胞衍生因子SDF-1、血管内皮生长因子-C（VEGF-C）表达的相互关系及其在淋巴结转移过程中的作用和可能机制。方法应用免疫组化法检测70例结肠癌组织和12例癌旁组织中SDF-1及VEGF-C的表达水平。结果结肠癌组织中SDF-1、VEGF-C阳性表达率分别为71．4％、64．3％，显著高于癌旁非癌组织的16．7％和8．3％（P〈0．01）。SDF-1、VEGF-C的表达与结肠癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0、01或P〈0．05），与结肠癌的分化程度、远处转移无关（P〉0．05）。SDF-1、VEGF-C之间表达呈正相关（r=0．608，P〈0．05）。结论结肠癌组织中SDF-1、VEGF-C表达均显著增高，两者在结肠癌淋巴结转移中可能具有协同效应，共同促进结肠癌的淋巴结转移。     

CD138和乙酰化肝素酶在肝细胞癌中表达的组织芯片研究

目的探讨人肝细胞癌中CD138和乙酰化肝素酶的表达水平及其与肝细胞癌发生、发展、转移和复发的关系。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学EnVision法研究197例肝细胞癌、癌旁肝组织及其中66例转移病灶中CD138和乙酰化肝素酶的表达水平。48例获得4～72个月随访。结果（1）CD138的表达率在肝细胞癌和癌旁肝组织中分别为48．7％（96／197）和65．0％（128／197。P〈0．05）,在早期和中晚期肝细胞癌中分别为61．7％（29／47）和44．7％（67／150,P〈0．05）,在有和无转移的中晚期肝细胞癌组中分别为33．3％（22／66）和53．6％（45／84,P〈0．05）,在1年之内和1年之上复发组中分别为23．3％（7／30）和61．1％（11／18,P〈0．05）;（2）乙酰化肝素酶的阳性表达率在肝细胞癌和癌旁肝组织中分别为35．5％（70／197）和12．7％（25／197,P〈0．05）,在早期和中晚期肝细胞癌中分别为29．8％（14／47）和37．3％（56／150,P〉0．05）,在伴随和不伴转移的肝细胞癌组织中48．5％（32／66）和28．6％（24／84,P〈0．05）,在1年之内和1年之上复发组中分别为50．0％（15／30）和44．4％（8／18,P〉0．05）;（3）66例伴随转移的肝细胞癌组织中,CD138在乙酰化肝素酶阴性组中的高表达率高于阳性组（P〈0．05）。结论（1）CD138在肝细胞癌组织中的低表达与其发生、发展、转移和复发密切相关,与分级、HBV感染及血清甲胎球蛋白值无关;（2）CD138蛋白低表达与乙酰化肝素酶高表达参与肝细胞癌的转移过程。     

CoX-2、Survivin蛋白在原发性肝细胞癌(HCC)中表达及其相关性研究

目的：探讨环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、凋亡抑制蛋白Survivin在HCC组织中的表达情况及两者的相关性，为HCC的基因诊断和治疗提供实验依据。方法：采用流式细胞术（FCM）及免疫组化（SP）法，定量检测肝癌、癌旁及正常肝组织中的COX-2、Survivin蛋白。结果：在HCC组织中，COX-2及Survivin蛋白阳性表达显著高于癌旁及正常对照组，两者的表达显著正相关（P〈0．01）。结论：COX-2、Survivin蛋白在HCC组织中过表达是反映HCC生物学行为的有效指标，两者在HCC发生、发展中可能起协同作用。     

EZH2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨EZH2在肝细胞癌中的表达及临床意义方法采用RT-PCR、免疫组织化学和Western blotting方法分析肝癌及癌旁组织EZH2mRNA转录和蛋白表达水平及其与临床病理因素的关系.结果 在42例肝癌组织中检出26例EZH2mRNA,而在相应的42例癌旁组织中只检出12例,癌组织EZH2mRNA阳性率高于...     

人肝细胞癌中整合素α5,β1亚基和纤维连接蛋白mRNAs的表达

目的研究肝细胞癌（ＨＣＣ）中整合素α５、β１亚基和纤维连接蛋白（ＦＮ）ｍＲＮＡｓ表达的生物学意义。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交和核酸原位杂交技术，对１５例ＨＣＣ癌组织、５例癌旁肝硬化和３例正常肝组织中整合素α５、β１亚基和ＦＮｍＲＮＡｓ表达作杂交分析。结果高分化ＨＣＣ癌组织中三种ｍＲＮＡｓ表达水平与癌旁及正常肝组织相近，而低、中分化ＨＣＣ癌组织内明显减少，甚至消失（分别Ｐ＜００１）；整合素α５亚基和ＦＮｍＲＮＡｓ主要见于癌细胞胞浆内；ＨＣＣ伴肝内浸润和／或转移组癌组织内三种ｍＲＮＡｓ水平较无浸润转移组显著下降（Ｐ＜００５）；５例伴肝内转移的ＨＣＣ癌组织中ＦＮｍＲＮＡ呈异质性表达。结论ＨＣＣ中整合素α５、β１和ＦＮ蛋白的表达变化系癌细胞基因转录水平下调的结果，可能与ＨＣＣ细胞分化、浸润和转移相关；异质性ＦＮｍＲＮＡ及其编码的ＦＮ蛋白可能在ＨＣＣ转移中有意义。     

Clinical implications of telomerase activity in resected hepatocellular carcinoma.

This study investigated the relationship of telomerase activity to its clinical implications in hepatocellular carcinoma (HCC). Telomerase activity was quantatively examined by a non-radioisotope quantitative system based on a TRAP-eze (ONCOR) in 42 HCC nodules and 40 non-cancerous liver tissue adjacent to the HCC nodules, obtained by surgical resection. Telomerase activity was confirmed in 37 HCC nodules (88.1%), being more statistically intense in de-differentiated tumors (p<0.01). Telomerase activity was positive in 9 cases (22.5%) of non-cancerous liver tissue and its activation was closely associated with the biologically malignant potential of the tumor itself such as the histological grade, portal vascular invasion, and intrahepatic metastasis (p<0. 05). The disease-free survival rate with its activity was also statistically lower than that without its activity of the non-cancerous tissue (p<0.01). These results indicate that telomerase may be a useful marker of biological characteristics in HCC and may lead to more effective surgical procedures.     

Evaluation of PRL-3 expression, and its correlation with angiogenesis and invasion in hepatocellular carcinoma

Protein phosphatase of regenerating liver 3 (PRL-3) is a metastasis-associated phosphatase. Studies have shown that its overexpression increases cell motility and invasiveness. In this study, we aimed to investigate the expression of PRL-3 in hepatocellular carcinoma (HCC) tumor tissues and determine its correlations with matrix metalloproteinases (MMP-2, MMP-9) and E-cadherin in HCC. Paired cancerous and non-cancerous tissues were freshly collected from 42 primary HCC patients. PRL-3 expression at both mRNA and protein level was evaluated by real-time PCR, Western blot analysis and immunohistochemistry. The microvessel density (MVD) in HCC was detected with immunohistochemistry. The mRNA expression of MMP-2, MMP-9 and E-cadherin was analyzed by real-time PCR in search of correlations with PRL-3. We found that PRL-3 was significantly up-regulated in the HCC tumor tissues compared with corresponding noncancerous liver tissues (0.664+/-0.053 vs. 0.024+/-0.003, P<0.001). The mRNA level of PRL-3 in tissues was correlated with serum alpha-fetoprotein level, vascular invasion and metastasis (P<0.001). PRL-3 expression was closely related to MVD. Furthermore, we found a significant correlation between PRL-3 mRNA expression and MMP-2, MMP-9 and E-cadherin. Our results demonstrated that PRL-3 is up-regulated in HCC. It is strongly suggested that PRL-3 plays a key role in the angiogenesis and invasion of HCC. MMP-2, MMP-9 and E-cadherin might be involved in PRL-3 functions in HCC.     

Glypican-3在原发性肝细胞癌中的表达及其对预后的影响

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测了59例HCC组织及其癌旁组织、10例肝内胆管细胞癌组织、11例肝硬化肝组织、14例正常肝组织(肝血管瘤旁)中GPC3的表达。应用Kap lan-M e ier法进行生存分析;Cox比例风险回归模型进行患者术后无瘤生存的独立危险因素分析。结果:GPC3 mRNA在HCC组织中的阳性率为83.1%(49/59),明显高于癌旁组织的35.6%(21/59)(2=27.53,P0.01)。GPC3蛋白在HCC中的阳性率为78.0%(46/59),也明显高于在癌旁组织的阳性率32.2%(19/59)(2=24.97,P0.01)。而GPC3在肝内胆管细胞癌(ICC)、肝硬化和正常肝组织中不表达。Kap lan-M e ier生存分析显示在HCC组织中GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率明显低于GPC3(-)组(33.6%vs72.7%,P0.05);癌旁组织GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率也低于GPC3(-)组(23.5%vs40.1%,P0.05);随着GPC3在HCC组织中表达强度的增加,患者的无瘤生存率也明显降低。Cox风险回归模型分析结果显示,肿瘤AFP阳性[优势比(OR)]=0.372,95%置信区间(CI):0.140-0.900,P0.05]、肿瘤大小(OR=5.215,95%C:I 1.737-15.656,P0.01)、癌旁组织GPC3表达(OR=0.226,95%CI:0.085-0.599,P0.01)、肿瘤GPC3表达的强度(OR=1.946,95%C:I 1.080-3.507,P0.05)是影响患者术后无瘤生存率的独立危险因素。结论:GPC3在肝细胞癌组织中高表达,而在肝内胆管细胞癌组织、肝硬化组织和正常肝组织不表达。癌旁组织GPC3表达、肿瘤GPC3表达的强度是影响HCC患者术后无瘤生存率的独立危险因素;但对患者1年总体生存率无明显影响。     

肝细胞肝癌中端粒酶、p53和CK19的表达及意义

目的探讨端粒酶、p53和CK19在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床病理意义。方法应用组织芯片技术和免疫组化SP法检测272例HCC及81例癌旁组织中端粒酶、p53和CK19的表达情况,并分析其与临床病理特征及预后的关系。结果 (1)272例HCC中端粒酶、p53和CK19的阳性率分别为56.62%(154/272)、12.90%(35/272)和14.30%(39/272),均高于癌旁组织的9.88%(8/81)、0(0/81)和0(0/81),差异均有显著性(P<0.01)。(2)端粒酶在HCC中的表达与术后无瘤生存时间、组织学分级、肿瘤直径、卫星灶、脉管癌栓及临床分期有关(P<0.05),与其他指标无关(P均>0.05);p53在HCC中的表达与术后无瘤生存时间、组织学分级、肝被膜浸润、血中AFP含量及淋巴结转移有关(P<0.05),与其他指标无关(P均>0.05);CK19在HCC中的表达与术后无瘤生存时间、组织学分级、肿瘤直径、肝硬化、卫星灶、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),与其他指标无关(P>0.05)。(3)三者在HCC中的表达互呈正相关(端粒酶与p53:r=0.137,P=0.024;端粒酶与CK19:r=0.497,P=0.001;p53与CK19:r=0.274,P=0.005)。(4)Kaplan-Meier生存分析结果显示:HCC组织中端粒酶、p53和CK19阳性的患者生存时间缩短。结论 HCC中端粒酶、p53和CK19的阳性表达与多种临床病理指标相关,三者均可作为HCC患者预后不良的判断因子。     

血管内皮生长因子C及其受体表达与肝细胞癌侵袭转移的关系

目的 研究人肝细胞癌(HCC)组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)及VEGFR-3表达与HCC临床病理特征之间的关系.方法 取HCC石蜡切片标本50例及正常肝组织标本15例,免疫组化法检测止常肝组织及HCC组织中VEGF-C、VEGFR-2及VEGFR-3表达,分析其与HCC临床病理特征之间的关系.结果 (1)HCC组织中VEGF-C、VEGFR-2及VEGFR-3表达阳性率高于正常肝组织(62%比26.7%,34%比6.7%,40%比0%,P均<0.05).(2)HCC组织中,VEGF-C表达与肝内转移、门静脉癌柃形成及肝门淋巴结转移有关(P<0.05);VEGFR-2表达与肝内转移及门静脉癌栓形成有关(P<0.05);VEGFR-3表达与肝门淋巴结转移有关(P<0.05).结论 HCC组织中VEGF-C、VEGFR-2及VEGFR-3表达与HCC的侵袭及转移有密切关系.     

原发性肝细胞癌中5种细胞周期蛋白的表达及其临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌中5种细胞周期蛋白(cyclin)的表达及其与肝癌细胞的增殖状态、侵袭转移和乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。方法应用Instrumedics公司生产的组织芯片制作仪,将273例原发性肝癌组织、144例癌旁肝组织和10例尸检非肝病死亡肝组织制成组织芯片,取样针直径2．0am,采用免疫组织化学方法分别检测了cyclin A、cyclin B、cyclin D1、cyclin D3及cyclin E在肝癌、癌旁肝及尸检肝组织的表达率,并分析了肝癌、癌旁肝组织中HBV感染与这5种cyclin表达间的相关性。结果共获得3个肝癌组织芯片蜡块,分别含136、143和148个位点。在273例肝癌组织标本中5种cyclin的阳性表达率分别为cyclin A 52．7％、cyclin B 45．4％、cyclin D1 35．9％、cyclin D3 44．3％和cyclin E 23．1％;在144例癌旁肝组织中分别为8．3％、5．6％、4．9％、6．3％和1．4％;10例尸检肝组织除1例cyclin D1阳性外,其余均为阴性。5种cyclin在肝癌组织中的阳性表达率均显著高于癌旁肝组织(P＜0．01);组织学分级为Ⅱ、Ⅲ级的肝癌组织5种cyclin的表达高于Ⅰ级(P＜0．05);除cyclinA外,伴有门静脉癌栓组的阳性率高于无癌栓组(P＜0．01);HBV感染与cyclin的表达无明显相关性(P＞0．05)。结论各个cyclin在肝癌细胞中呈不同程度的高表达,使癌细胞周期缩短,处于细胞增殖活跃状态,并有利于肝癌细胞的侵袭转移;未发现与HBV感染有关。     

Nuclear Accumulation of Mutated β-Catenin in Hepatocellular Carcinoma Is Associated with Increased Cell Proliferation

Inappropriate activation of the Wnt pathway resulting from beta-catenin gene alterations has recently been implicated in the development of hepatocellular carcinoma (HCC). To explore the in vivo effects of mutated beta-catenin, HCC specimens from 32 patients carrying one or several tumors were screened for somatic mutations in exon 3 of the beta-catenin gene, and the expression and subcellular localization of beta-catenin was studied by immunohistochemistry. Missense mutations or interstitial deletions in beta-catenin exon 3 were detected in 12 of 35 (34%) HCC samples. After immunostaining, most tumors exhibited increased membranous and/or cytoplasmic expression of beta-catenin compared with adjacent nontumoral liver. Strong nuclear accumulation of beta-catenin was observed either focally or uniformly in 15 of 35 (43%) tumor specimens, but not in cirrhotic nodules or dysplastic liver cells in adjacent liver. Aberrant nuclear expression of beta-catenin was significantly associated with the presence of mutations in the beta-catenin gene (P < 0.005). Moreover, nuclear beta-catenin staining correlated significantly with increased Ki-67 proliferative index in tumor (P < 0.001) and seemed to be associated with poor outcome in patients with HCC. In conclusion, our data indicate that activation of the Wnt/beta-catenin pathway in HCC results mainly from somatic mutations in the beta-catenin gene and may promote tumor progression by stimulating tumor cell proliferation.