马钱子碱对SGC-7901裸鼠移植瘤模型抑瘤作用的研究

目的:研究马钱子碱(brucine)对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤模型的抗肿瘤作用.方法:选取BALB/cnu裸小鼠,建立人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤模型.以不同剂量马钱子碱(1、2和4 mg/kg)作用于模型动物,通过观察肿瘤体积和质量的变化来研究马钱子的抗肿瘤作用.结果:在实验终点,马钱子碱各剂量组(1、2和4 mg/kg)的平均体质量均高于生理盐水组,差异有统计学意义,P值分别为0.024 6、0.041 8和0.036 2.马钱子碱2和4mg/kg剂量组肿瘤体积与生理盐水组相比差异均有统计学毒义(P=0.048 6;P=0.012 1),抑瘤率(肿瘤体积)分别为33.8％和49.8％.马钱子碱2和4 mg/kg剂量组肿瘤质量与生理盐水组相比差异均有统计学意义(P=0.013 2;P=0.011 3),抑瘤率(肿瘤质量)分别为37.9％和40.7％.结论:马钱于碱能够改善移植瘤裸鼠体质量剧减状况,抑制人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤的生长.     

蟾酥脂质微球注射液对四种荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用

目的:观察蟾酥脂质微球注射液对荷人肝癌Hep G2、人食管癌EC9706、人结肠癌HCT-8和人胃癌BGC 803瘤株裸鼠肿瘤生长的抑制作用.方法:在BALB/c-nu裸鼠右前肢腋下接种4种人癌细胞株建立荷瘤动物模型,移植10 d后采用均衡法随机分为5组,即蟾酥脂质微球注射液高剂量组(2.50 mg/kg)、中剂量组(1.25 mg/kg)、低剂量组(0.63 mg/kg)以及阳性药组(氟尿嘧啶注射液,1.25 mg/kg)和阴性对照组(等体积脂质微球空白注射液),每组7只裸鼠,给药体积0.2 ml.采用尾静脉注射方法给药,各组动物于分组后每周给药2次,连续给药6次.于给药后动态检测并计算各组肿瘤体积(Vt)、肿瘤相对体积(VRT)、肿瘤增殖率(T/C),末次给药后3 d检测并计算各组肿瘤质量和抑瘤率.结果:各组裸鼠给药前肿瘤体积均无显著性差异.荷人肝癌Hep G2细胞瘤裸鼠给药7 d后,各剂量组肿瘤体积和相对肿瘤体积均较阴性对照组明显降低(P<0.05),末次给药后中、高剂量组T/C值<40%,各剂量组的平均肿瘤质量均较阴性对照组明显降低(P<0.05),高剂量组的抑瘤率为74.07%.荷人食管癌EC9706瘤裸鼠末次给药后,各剂量组肿瘤体积和相对肿瘤体积均较阴性对照组明显降低(P<0.05),中、高剂量组T/C值<40%,各剂量组的平均肿瘤质量均较阴性对照组明显降低(P<0.05),高剂量组的抑瘤率为70.38%.荷人结肠癌HCT-8细胞瘤裸鼠末次给药后,各剂量组肿瘤体积和相对肿瘤体积均较阴性对照组明显降低(P<0.05),高剂量组T/C值<40%,各剂量组的平均肿瘤质量均较阴性对照组明显降低(P<0.05),高剂量组的抑瘤率为52.42%.荷人胃癌BGC 803细胞瘤裸鼠末次给药后,中、高剂量组的肿瘤体积和相对肿瘤体积均较阴性对照组明显降低(P<0.05),各剂量组T/C值>40%,各剂量组的平均肿瘤质量均较阴性对照组明显降低(P<0.05),高剂量组的抑瘤率为47.42%.结论:蟾酥脂质微球注射液具有确切的抑制人肝癌Hep G2、食管癌EC9706、结肠癌HCT-8和胃癌BGC 803瘤株增殖的作用,作用效果以抑制人肝癌Hep G2和人食管癌EC9706瘤株生长作用为最佳.     

去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液对荷人肺癌A549移植瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用

目的: 观察去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液对荷人肺癌A549细胞移植瘤裸鼠模型肿瘤生长的抑制作用。方法:在BALB/c-nu裸鼠右前肢腋下接种A549细胞株建立人肺癌动物模型,移植11 d后采用均衡法随机分为5组,即去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液高剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(2.5 mg/kg)、低剂量组(1.25 mg/kg)以及阳性对照组(2.5 mg/kg去甲斑蝥酸钠注射液)和阴性对照组(等体积空白脂质微球注射液),每组7只裸鼠,给药体积为0.2 mL。采用尾静脉注射给药,各组动物于分组后第1、4、8、11、15、18、22天给药,共7次。于给药第7、14、24天检测并计算各组肿瘤体积(V_t)、相对体积(V_RT)、增殖率(T/C)等,给药后第24天检测并计算各组肿瘤质量和抑瘤率。结果:去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液给药第7天后,各给药组肿瘤体积、相对体积均明显小于阴性对照组(P<0.05),并具有剂量-效应关系(r_{7 d}=0.994,r_{14 d}=0.993,r_{24 d}=0.996,P均<0.05);24 d后各剂量组动物肿瘤T/C均小于35%,其中2.5、5 mg/kg剂量组和阳性对照组T/C均小于20%;各给药组平均肿瘤质量明显低于阴性对照组(P<0.01),肿瘤生长抑制率均大于50%。结论:去甲斑蝥酸钠脂质微球注射液具有抑制人肺癌A549细胞生长,降低人肺癌A549细胞移植瘤增殖率的作用。     

沉默乙酰肝素酶基因对胃癌生物学行为的影响

目的 探讨乙酰肝素酶(HPA)沉默对人胃癌裸鼠移植瘤生长、转移和血管形成的影响.方法 利用人胃癌SGC-7901细胞和HPA被沉默的SGC-7901-HPA-细胞,分别建立6只裸鼠皮下移植瘤模型,观察成瘤的时间、肿瘤生长速度和体积.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法分别检测皮下移植瘤组织中HPA mRNA和蛋白的表达,应用免疫组织化学SP法检测皮下移植瘤组织的微血管密度(MVD).将皮下移植瘤细胞分别注射入6只裸鼠腹腔,建立腹腔转移瘤,并观察成瘤情况.结果 SGC-7901细胞和SGC-7901-HPA-细胞在裸鼠皮下均能生长出移植瘤,分别在接种后第4天后和第7天后出现肉眼可见的肿瘤,接种SGC-7901-HPA-细胞的裸鼠移植瘤生长较慢,MVD为(11.35±1.94)个/高倍视野,明显低于接种SGC-7901细胞组[(20.69±1.20)个/高倍视野,P＜0.05].接种SGC-7901-HPA-细胞与接种SGC-7901细胞的裸鼠皮下移植瘤组织相比,HPA mRNA和蛋白的表达均降低.由SGC-7901细胞皮下移植瘤组织建立腹腔转移瘤的裸鼠,有3只成瘤,在肝脏、大网膜、肠系膜、右肾形成了4处转移灶,且体积较大.而接种SGC-7901-HPA-细胞皮下移植瘤组织的裸鼠,仅有1只在肝脏和右肾形成了转移灶,而且瘤体较小.结论 HPA沉默后抑制了人胃癌在裸鼠体内的生长、转移和血管形成,HPA有可能成为预防和治疗胃癌的一个新靶H点.     

Ⅰ-单克隆抗体对人卵巢癌细胞株OC-3-VGH裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的： 探索131I-单克隆抗体对人OC-3-VGH卵巢癌裸鼠肿瘤的抑制作用。方法：建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,将28只移植瘤模型裸鼠随机分成7组,即阴性对照组 (等体积生理盐水)、60 mg/kg环磷酰胺 (cyclophosphamide,CP)阳性组、单抗高 (10 mg/kg)、低 (2 mg/kg)剂量组、131I-单抗高剂量组 (10 mg/kg＋125 μCi)、131I-单抗中剂量组 (6 mg/kg＋75 μCi)、131I-单抗低剂量组 (2 mg/kg＋25 μCi),各组连续腹腔给药14 d,分别在第0天 (d0)、d4、d8、d12、d15称量裸鼠体质量,测量肿瘤体积,于末次给药后24 h,剖瘤称取质量,计算相对肿瘤增殖率和抑瘤率。结果：与阴性对照组相比,单抗高剂量组、131I-单抗中、高剂量组均显著抑制肿瘤生长,相对肿瘤增殖率分别是54%、48%、30%,抑瘤率分别为33.59%、45.80%、64.89%,差异均具有统计学意义 (P＜0.01),单抗高剂量组与131I-单抗高剂量组间的差异也具有统计学意义 (P＜0.05)。结论：单克隆抗体和131I-单克隆抗体对人OC-3-VGH卵巢癌均有明显的抑制作用,131I-单克隆抗体高剂量组有明显的增效作用。     

中药左金丸逆转胃癌顺铂耐药的作用机制

目的:探讨左金丸逆转胃癌顺铂耐药的作用机制。方法:体外实验采用人胃癌细胞株SGC-7901及人胃癌顺铂耐药细胞株SGC-7901/DDP,CCK-8法检测细胞增殖率;免疫蛋白印迹法和实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测左金丸干预后各组基因蛋白表达量;同时构建RTKN基因慢病毒载体转染的胃癌细胞系并验证,结合CCK-8法、qRT-PCR和Western blot法检测RTKN基因干扰对胃癌细胞顺铂耐药性的影响。裸鼠体内实验将RTKN干扰的SGC-7901/DDP细胞移植到裸鼠皮下,分别给予左金丸干预4周后,记录移植瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,Western blot检测RTKN、p53、Ace-p53、HDAC1蛋白的表达量。结果:SGC-7901/DDP细胞中的RTKN表达量显著高于SGC-7901细胞,沉默RTKN显著降低SGC-7901/DDP细胞的耐药性;左金丸可显著降低SGC-7901/DDP细胞的耐药性,但沉默RTKN后其对SGC-7901/DDP细胞的耐药性及对裸鼠皮下移植瘤体积无明显影响,提示降低RTKN表达后,左金丸的抗肿瘤作用被抑制。结论:RTKN通过p53脱乙酰...     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤抑制作用的观察

目的 观察熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤生长的抑制作用及其强度,为本药的进一步临床应用研究提供基础数据.方法 采用荷瘤裸小鼠作为移植性肿瘤实验动物模型.将裸鼠随机分为3组,每组8只,分别为阴性对照组、环磷酰胺阳性对照组和熊果酸组.阳性对照组给予环磷酰胺20mg/kg,熊果酸组给药剂量为4.5mg/kg,阴性对照组给予等量无菌注射用水,每日一次腹腔注射,连续14天.给药期间定期测定动物体重和瘤体积.实验结束后处死裸鼠,取出瘤体称重,计算肿瘤抑制率.结果 给药期间动物一般状况未见明显改变,饮食未见异常,体重较实验前有所增加.熊果酸组瘤体积缩小,瘤株抑瘤率达53.7%,阳性对照组的抑瘤率为39.2%,两组与阴性对照组比较,均有显著差异(P<0.05).熊果酸组和阳性对照组的相对肿瘤体积(RTV)分别为33.16±22.36,21.61±12.88,明显低于阴性对照组(62.09±32.80)(P<0.05),两组的相对肿瘤增殖率均小于60%.结论 熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤有明显的抑制作用.     

血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂抑制胃癌淋巴管生成的实验研究

目的 建立人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤模型,观察血管紧张素转换酶抑制剂(CEI)及血管紧张素Ⅱ受体拈抗剂(ARB)对胃癌移植瘤模型肿瘤生长以及肿瘤淋巴管生成的影响,并探讨这两类药物可能的抗肿瘤作用的机制.方法 建立胃癌移植瘤模型1周后60只裸小鼠随机分为5组(对照组、培哚普利组、卡托普利组、氯沙坦组、缬沙坦组)每组12只分别以生理盐水、培哚普利2 mg/kg、卡托普利5 mg/kg、氯沙坦50 mg/kg、缬沙坦40 mg/kg予以灌胃每日1次.定期观察肿瘤生长情况,测量肿瘤体积.第口周末时处死各组裸鼠,立即解剖标本称重并计算抑瘤率.切片则行免疫组织化学染色技术测定各组裸鼠肿瘤组织中基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、血管内皮生成因子-C(VEGF-C)的表达使用VEGFR-3单克隆抗体分别测定各组标本微淋巴管密度(LMVD).结果 ACEI组和ARB组移植瘤体积与对照组相比明显受到抑制,差异有显著性(P<0.01),ACEI组和ARB组肿瘤组织中的VEGF-C(P<005)和LMVD与对照组比较均显著降低(P<0.01),而ARB对MMP-7并没有抑制作用.结论 ACEI和ARB能明显抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长以及新生淋巴管的形成.     

吉西他滨联合奥沙利铂对人胆管癌裸鼠移植瘤模型的药效实验研究

目的观察吉西他滨联合奥沙利铂对荷人胆管癌裸鼠移植瘤的治疗效果。方法培养人胆管癌裸鼠移植瘤模型,将49只荷人胆管癌裸鼠分成7组,每组7只,分别为空白对照组,奥沙利铂(A)组,吉西他滨(B)组,A+B组,2A+B组,A+2B组和2A+2B组,于分组当天腹腔注射奥沙利铂,第2天注射吉西他滨。给药剂量:奥沙利铂1.125mg/kg,吉西他滨50mg/kg,生理盐水0.3mL/只。第24天处死裸鼠后测量肿瘤标志物,进行移植瘤病理及流式细胞仪分析。治疗期间每周2次测量肿瘤直径,计算相对肿瘤增殖率。结果荷人胆管癌裸鼠移植瘤成瘤率100%。A、B组第24天相对肿瘤增殖率分别为39.78%和45.73%;2A+2B组相对肿瘤增殖率最低,为32.05%。治疗组与空白对照组相比,肿瘤标志物、病理分析及MTT分析均有显著差异。结论吉西他滨、奥沙利铂对荷人胆管癌裸鼠移植瘤有抑制作用,两药联合有助于提高疗效。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤抑制作用的观察

目的：观察熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤生长的抑制作用及其强度,为本药的进一步临床应用研究提供基础数据。方法：采用荷瘤裸小鼠作为移植性肿瘤实验动物模型。将裸鼠随机分为3组,每组8只,分别为阴性对照组、环磷酰胺阳性对照组和熊果酸组。阳性对照组给予环磷酰胺20mg/kg,熊果酸组给药剂量为4.5mg/kg,阴性对照组给予等量无菌注射用水,每日一次腹腔注射,连续14天。给药期间定期测定动物体重和瘤体积。实验结束后处死裸鼠,取出瘤体称重,计算肿瘤抑制率。结果：给药期间动物一般状况未见明显改变,饮食未见异常,体重较实验前有所增加。熊果酸组瘤体积缩小,瘤株抑瘤率达53.7%,阳性对照组的抑瘤率为39.2%,两组与阴性对照组比较,均有显著差异（P〈0.05）。熊果酸组和阳性对照组的相对肿瘤体积（RTV）分别为33.16±22.36,21.61±12.88,明显低于阴性对照组（62.09±32.80）（P〈0.05）,两组的相对肿瘤增殖率均小于60%。结论：熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤有明显的抑制作用。     

ＣＩＫ细胞及上清液抗胃癌细胞株ＳＧＣ-７９０１活性的研究*

目的：探讨由多种细胞因子诱导的杀伤细胞（ＣＩＫ）在体外的增殖情况,分析体外ＣＩＫ细胞对胃癌细胞株ＳＧＣ-７９０１的杀伤作用。方法：健康人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）在体外诱导成ＣＩＫ细胞,计数培养不同时间的ＣＩＫ细胞,并用流式细胞术动态分析其表型特征。倒置显微镜下观察ＣＩＫ细胞作用于ＳＧＣ-７９０１胃癌细胞的形态学变化;流式细胞仪检测ＣＩＫ细胞培养上清液对胃癌细胞的诱导凋亡作用;采用ＭＴＴ法检测ＣＩＫ细胞对ＳＧＣ-７９０１胃癌细胞株的杀伤活性。结果：ＣＩＫ细胞随体外培养时间的延长,数量及杀伤活性均增加。体外培养２１ｄ,细胞总数增殖倍数１１１.６３±１０.９７,ＣＤ３＋ＣＤ５６＋双阳性细胞数量亦增加,比例达（３５.８±９.７）％,其后两者数量逐渐降低。ＣＩＫ细胞上清液能够诱导胃癌细胞株凋亡;ＣＩＫ细胞对胃癌ＳＧＣ-７９０１细胞株有明显的杀伤作用,最高杀伤率为（７４.９１±２.７１）％。结论：ＣＩＫ细胞具有较强的抗胃癌细胞活性,体外培养１４～２１ｄ时具有较强的抗瘤活性,其主要通过直接杀伤及释放细胞因子诱导凋亡的作用杀伤肿瘤细胞。     

细胞微缺氧模型的建立及其对胃癌细胞生物学行为的影响

背景与目的:缺氧是实体瘤微环境的基本特征之一,体外制造微缺氧的细胞培养环境,对研究缺氧对肿瘤细胞的影响有重要意义。目前建立体外缺氧细胞培养模型的方法较为烦琐,尚缺少微缺氧对胃癌细胞影响较为完整的研究。本实验运用GasPaK产气袋法体外创建胃癌细胞微缺氧培养模型,并观察该状态下细胞生物学行为的变化。方法:运用产气袋法(GasPaK)制造微缺氧条件,血气分析监测RPMI-1640培养液中PO2、PCO2和pH值变化。流式细胞仪分析微缺氧对SGC-7901细胞周期分布的影响,光镜及透射电镜观察微缺氧条件下SGC-7901细胞形态的改变,台盼蓝染色计数微缺氧对活细胞数的影响,MTT法检测微缺氧对SGC-7901细胞粘附能力的影响,游走实验检测微缺氧对SGC-7901细胞游走运动能力的影响。结果:GasPaK产气袋法在0.5～48h内PO2、PCO2和pH稳定,并能达到微缺氧细胞培养的条件。微缺氧处理SGC-7901细胞16h后未见细胞周期的变化。微缺氧导致部分SGC-7901细胞形态发生改变。微缺氧处理16h后活细胞计数无明显下降,微缺氧组SGC-7901细胞粘附能力增强,游走穿膜细胞数(196±9)是对照组(114±7)的1.71倍(P<0.05)。结论:通过GasPaK产气袋法制造的微缺氧肿瘤细胞培养环境,达到了条件稳定、重复性好的特点。微缺氧对SGC-7901细胞有影响,但这种影响相对较小,SGC-7901细胞对微缺氧有一定的耐受性。     

miR-17-92基因簇反义寡核苷酸对胃癌细胞增殖与侵袭的抑制作用

目的:探讨miR-17-92基因簇反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖及侵袭的影响。方法:合成miR-17-92基因簇中miR-17、miR-18a、miR-20a的反义寡核苷酸,通过实时荧光定量PCR验证miR-17、miR-18a、miR-20a反义寡核苷酸对SGC-7901细胞的miR-17、miR-18a、miR-20a的抑制效果,然后利用MTT、Transwell检测抑制表达后对细胞增殖及侵袭的影响。结果:miR-17、miR-18a、miR-20a的反义寡核苷酸能够抑制对应miRNA的表达,同时抑制了胃癌细胞的增殖与侵袭。结论:miR-17-92基因簇可能在胃癌发生发展中起到了癌基因的作用。     

HMGA2在胃癌细胞SGC-7901上皮间质转化中的作用

目的 探讨TGF-β1调控人胃癌细胞SGC-7901由上皮向间质细胞转化过程中,HMGA2的表达及其作用。方法 用TGF-β1处理人胃癌细胞SGC-7901(0,3,6,24,48,72h),在显微镜下观察SGC-7901细胞形态的变化,蛋白质印记法检测HMGA2、E-cadherin和Vimentin蛋白的表达,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果 (1)随着TGF-β1作用时间的延长,SGC-7901细胞逐渐变长,变大,细胞融合;(2)在TGF-β1作用下,SGC-7901均不同程度地表达HMGA2、E-cadherin和Vimentin。HMGA2蛋白从0h开始表达,到6h表达最强,24h以后表达稍有下降。E-cad蛋白从0h开始表达,到3h表达最高,随后开始降低。Vimentin蛋白48h表达最高,72h有降低的趋势;(3)Transwell小室实验显示SGC-7901在TGF-β1处理后,3h时细胞穿膜最多,从6h起穿过的细胞开始降低,到72h最低。结论 在TGF-β1诱导人胃癌细胞SGC-7901细胞上皮间质转化的过程中,HMGA2蛋白起到重要作用,HMGA2可作为Snail的启动子,结合Smads,促进上皮间质转化HMGA2还可能通过调控Wnt/β-Catenin信号通路对肿瘤细胞的生长和凋亡发挥作用。     

内皮抑素30肽对SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响

目的研究经RGD修饰的人内皮抑素（endostatin）N-端的30肽对胃癌SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响。方法人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。用WST-1试剂检测30肽对SGC-7901细胞增殖的影响;细胞划痕实验和迁移实验观察30肽对细胞运动迁移的影响;明胶酶谱实验观察其对肿瘤转移相关基因MMP-2、MMP-9表达和分泌的影响。结果30肽能够有效抑制SGC-7901细胞的增殖、侵袭和迁移,同时还抑制了MMP-2和MMP-9的活性。结论30肽可能是通过下调MMP-2和MMP-9的活性而抑制SGC-7901细胞的转移,其在胃癌的临床治疗上具有潜在的应用前景。     

转染FRZB基因对人胃癌SGC-7901细胞生长和转移的影响

背景与目的:FRZB(frizzled motif associated with bone development)是sFRP(secreted frizzled related protein)家族的成员,在胚胎发育过程中起重要作用。有文献报道FRZB的表达能抑制基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和MMP-9表达而与前列腺癌的侵袭能力相关。本研究拟探讨FRZB基因对人胃癌SGC-7901细胞成瘤性和侵袭能力的影响,及其可能的机制。方法:构建FRZB真核表达载体并转染SGC-7901细胞,经G418筛选获得稳定表达克隆。用MTT法检测并绘制细胞增殖曲线,软琼脂培养和裸鼠皮下注射的体外和体内实验检测细胞成瘤性变化。用细胞免疫化学检测转染FRZB后细胞中MMP-2、MMP-7、MMP-9的表达变化,体外侵袭和粘附实验检测细胞侵袭能力变化。结果:筛选稳定表达细胞株经定量PCR检测,FRZB表达显著提高。体内外实验证实,转染FRZB的细胞(SGC-7901/FRZB)生长抑制率约为60%,克隆形成能力和成瘤性减弱。免疫细胞化学显示MMP-2、MMP-7、MMP-9在细胞浆内的阳性表达降低或接近阴性,对细胞外基质成分(CollagenI、IV、Vitronectin、Fibronectin、Laminin)粘附能力均增高,比空载体转染对照组(SGC-7901/vector)增加12.8%、19.8%、59.8%、26.7%、15.2%,差异具有显著性(P<0.05),而空载体转染对照组与亲本细胞间差异无统计学意义(P>0.05)。SGC-7901、SGC-7901/vector和SGC-7901/FRZB细胞侵袭能力分别是每高倍视野55.90±5.68、54.80±6.97、6.60±2.63,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:FRZB高表达在体内体外均可抑制SGC-7901细胞的增殖、成瘤性和侵袭能力,具有肿瘤抑制基因的功能。FRZB抑制肿瘤细胞的生长和抑制MMP-2、MMP-7、MMP-9的表达为抑癌功能相关机制之一。     

蜂胶黄酮 pinobanksin-3-acetate对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响及机制

[目的]探讨蜂胶黄酮pinobanksin-3-acetate对体外培养的胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及部分基因表达的影响.[方法]采用四甲基偶氮唑盐(MTr)显色法检测不同浓度PB3A作用不同时间对SGC-7901细胞生长所产生的影响,计算生长抑制率和IC50值;倒置显微镜观察PB3A干预后细胞的形态变化;Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测PB3A(40、80μg/ml)干预24h后SGC-7901细胞FOS、GEM、RGS2、GADD45G及HSPA6的蛋白表达水平,利用Spearman进行候选基因相关性分析.[结果]PB3A可明显抑制SGC-7901细胞的增殖(P＜0.05),且抑制作用呈时间和剂量依赖性.随PB3A剂量的增多,SGC-7901细胞的凋亡率渐增,细胞的早期凋亡率从25.6％提高到50.2％.通过40μg/ml和80μg/ml PB3A干预胃癌SGC-7901细胞24h后与对照组相比,高浓度组GADD45G、HSPA6、GEM、RGSR及FOS蛋白表达有极显著性差异(P＜0.01),而低浓度组GADD45G、GEM和HSPA6蛋白表达有显著性差异(P＜0.05).[结论]PB3A在体外可明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导凋亡的作用,并呈剂量依赖性变化趋势.机制可能与其诱导GEM、RGSR、FOS及HSPA6蛋白的上调表达有关,以上基因可能相互协同导致肿瘤细胞增殖信号通路的抑制并促进胃癌细胞的凋亡.     

The Effect of Nimesulide on the Expression of NF-κB, Bcl-2 and Bax in the Human Gastric Cancer SGC-7901 Cell Line

OBJECTIVE To investigate whether nimesulide can suppress tumor growth and induce apoptosis in SGC-7901 gastric cancer cells and to explore the molecular mechanism involved.METHODS SGC-7901 cells were cultured in RPMI 1640 medium containing different concentrations of nimesulide (0,12.5, 50, 100, 200, 400 μmol/L). The MTT assay, morphological observation, electron microscopy (EM), immunohistochemical analysis and Western blot analysis were employed to investigate the effects of nimesulide on the SGC-7901 cells and to explore possible related molecular mechanisms.RESULTS Nimesulide inhibited the growth of SGC-7901 cells and elicited typical apoptotic morphologic changes. Nimesulide also decreased NF-κB and Bcl-2 expression, but increased the level of the Bax protein.The positive rate of Bcl-2 protein expression at 0, 50, 100 and 200 μmol/L of nimesulide was 58.3±14.0%, 50.2±9.9%, 32.8±5.0% and 22.7± 5.5% respectively based on immunohistochemical staining. The positive rate of Bax protein expression was 22.0±5.7%, 29.2±6.5%, 42.7±5.9% and 74.5±9.1% and the NF-κB expression was 74.2±10.9%, 61.8±7.6%,36.7±10.9% and 17.5±12.3%, Significant differences were found between 0 μmol/L and 100 μmol/L and 200 μmol/L. Western blot analysis also showed that the expression of NF-κB was decreased.CONCLUSION Nimesulide suppresses tumor growth and induces apoptosis by inhibiting NF-κB expression, which may be related to the overexpression of Bax relative to Bcl-2 expression.