锌转运体8与小鼠睾丸间质细胞睾酮生成相关

目的锌转运体8(ZnT8)与胰岛素等激素的分泌有关,但其在睾丸的功能尚不清楚,本实验旨在探讨ZnT8在小鼠睾丸的分布与功能。方法通过免疫组织化学技术检测成年雄性小鼠睾丸ZnT8的分布;乳鼠腹腔注射hCG(human chorionic gonadotrophin,人绒毛膜促性腺激素),注射5d后,检测乳鼠睾丸ZnT8的分布;化学发光法检测乳鼠血清睾酮水平。结果 ZNT8主要分布在成年雄鼠睾丸间质细胞,hCG处理乳鼠在血清睾酮升高的同时伴有睾丸间质细胞ZnT8表达增加。结论 ZnT8的功能可能与小鼠睾丸间质细胞睾酮合成有关。     

hCG对成年小鼠睾丸Leydig细胞中睾酮生成酶的调节作用

目的　从分子水平探讨 h CG对成年小鼠睾丸 L eydig细胞中胆固醇侧链裂解酶 (P45 0 scc)、17α-羟化酶 (P45 0 c17)和 3β-羟甾脱氢酶 (3βHSD)的调节作用。　方法　体外培养成年小鼠睾丸 L eydig细胞 ,分别测定培养1、8h h CG刺激组及对照组细胞培养上清中睾酮含量 ,同时运用半定量 RT- PCR及核酸内切酶酶切方法测定两组细胞中 P45 0 scc、P45 0 c17及 I、VI两型总的 3βHSD的 m RNA水平 ,并测定了 I、VI两型 3βHSD m RNA的比值。　结果　 1.培养 1、8h刺激组睾酮含量均明显高于对照组 (1h P<0 .0 1,8h P<0 .0 0 5 ) ;2 .培养 8h,刺激组 P45 0 scc和P45 0 c17m RNA水平明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;而培养 1、8h刺激组 I、VI两型总的 3βHSD m RNA水平和对照组相比均无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,但 VI型 3βHSD m RNA和 I型 3βHSD m RNA的比值逐渐增高。　结论　 h CG能在转录水平刺激 P45 0 scc、P45 0 c17及 VI型 3βHSD的表达 ,促进睾酮生成。     

PKC-α反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及c-myc和c-fos表达的影响

为探讨PKC α反义核酸对CNE 2Z细胞增殖及c myc、c fos表达的影响 ,采用脂质体 (LP)介导法 ,用 0 0 1～1 0 0 μmol/L各浓度PKC α反义核酸 (asODN)转染CNE 2Z ;MTT法及软琼脂克隆形成法分别检测CNE 2Z生长指数(growthindex ,GI)及其体外增殖能力 ;免疫组化法检测PKC α、及c myc、c fos的表达。结果表明 :PKC αasODN 0 0 5～ 1 0 0 μmol/L各浓度组CNE 2ZGI显著降低 (P <0 0 5 ) ,且呈量效依耐关系 ;其中 1 0 0 μmol/L和 0 5 0 μmol/LPKC αasODN对CNE 2Z生长有非常显著抑制作用 (P <0 0 1) ;0 5 0 μmol/LPKC αasODN组CNE 2Z软琼脂克隆形成率均低于对照组 (P <0 0 5 ) ,并可下调其PKC α、c Myc、c Fos的表达 (P <0 0 5 )。结果提示 :LP介导PKC αasODN转染CNE 2Z细胞 ,可有效阻断CNE 2ZPKC α的表达 ,抑制其体外增殖能力 ,下调c myc、c fos蛋白表达 ;PKC αasODN可能通过下调c myc、c fos表达发挥作用     

类固醇生成因子-1对青春期小鼠睾丸中睾酮生成及精子发生的调节

目的 探讨类固醇生成因子-1(SF-1)对青春期小鼠睾丸内分泌功能及精子发生过程的调节作用，并推测其可能机制。方法 用免疫组织化学方法定位SF-1在不同年龄小鼠睾丸中的细胞分布，进一步分离有SF-1阳性表达信号的青春期小鼠Leydig细胞在体外进行培养，用反义转染方法抑制细胞内SF-1蛋白质的表达，检测细胞的睾酮分泌量及睾酮生成酶P450scc的mRNA水平变化。结果 1．SF-1在青春期Leydig细胞核有表达；反义抑制细胞内SF-1蛋白质的表达，则细胞的睾酮分泌量及P450scc mRNA水平均显著下降；2．SF-1在青春期小鼠睾丸B型精原细胞及细线期、偶线期、粗线期的初级精母细胞核中也有表达。结论 1．SF-1参与调节青春期睾丸Leydig细胞中P450scc基因的转录，影响睾酮分泌；2．SF-1作为一种核受体，可能也是生精过程中重要的转录调控因子，调节B型精原细胞向初级精母细胞分化及初级精母细胞第1次减数分裂过程中特异表达的基因转录过程，从而影响青春期小鼠精子发生过程。     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中睾丸间质细胞3β-羟基类固醇脱氢酶组织化学及睾酮免疫细胞化学研究

我们以实验性慢性胃溃疡大鼠为动物模型,用酶组织化学和免疫组织化学方法,观察了胃溃疡自愈过程中睾丸间质细胞内合成睾酮的关键酶3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)及睾酮的改变。实验用雄性Wistar大鼠100只,分为正常对照组、盐水对照组和胃溃疡组。各组分别于术后4、6、10、14、21和28d测溃疡面积。取右侧睾丸恒冷箱切片,用四唑盐法显示间质细胞3βHSD,用半定量积分法评价其活性。左侧睾丸经4%多聚甲醛     

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织P450胆固醇侧链裂解酶和类固醇激素急性调节蛋白的影响

目的 探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组);何首乌饮预防组(F组),每组10只.C、D、E和F组大鼠复制运动疲劳动物模型,其中F组每天训练前给何首乌饮20g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃60 d.模型成功后E组给何首乌饮20 g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃治疗60 d.采用美国Beckmancoulter Unicel Dxl 800仪器测定睾酮水平; 采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达变化.结果 P450scc免疫组织化学阳性颗粒主要表达于间质细胞及精母细胞,B组和F组表达最强,C组最弱,与其余各组相比差异有统计学意义.P450scc蛋白和mRNA表达变化为B、F组明显高于E、D和A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A组和D组以及B组和F组两两之间差异无显著性;StAR免疫组织化学阳性颗粒主要表达于睾丸间质细胞胞质,阳性强度表现为E组和F组最强,C组最弱.StAR蛋白和mRNA表达变化为E和F组明显高于A、D组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A、D组之间无差异.结论 何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达.     

genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3及其裸鼠移植瘤中表皮生长因子受体介导的信号转导通路的影响

目的　通过 genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 及其裸鼠移植瘤中表皮生长因子受体(EGFR)介导的肿瘤信号转导系统的影响 ,探讨其抑制增殖作用的机制。方法　应用免疫细胞化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法检测c erbB 2蛋白的表达 ;Western印迹检测细胞c jun和c fos蛋白的表达 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测c erbB 2 ,c raf 1,c jun和c fosmRNA的表达。结果　 2 0 μmol/Lgenistein处理组c erbB 2、c raf 1及其下游基因c jun、c fosmRNA表达减弱。2 0 μmol/Lgenistein处理SKOV3 细胞 4 8h后 ,c erbB 2蛋白表达减弱 ,平均吸光度 (A)值减低 ,为0 4 2± 0 0 2 (P <0 0 5 )。Western印迹检测结果表明 :2 0 μmol/Lgenistein处理SKOV3 细胞 12～ 72h后 ,c jun、c fos蛋白表达水平逐渐减弱。结论　genistein下调SKOV3 中EGFR介导的肿瘤信号转导通路中两个关键基因c erbB 2和c raf 1之mRNA及蛋白及其下游核转录因子c jun和c fos的mRNA及蛋白的表达水平 ,提示genistein干预EGFR介导的肿瘤信号转导系统中主要信号分子的表达可能是其抑制卵巢癌增殖的分子基础。     

性表达对发情雄性小鼠血清睾酮、雌二醇和间质细胞表达芳香化酶的影响

目的:研究性表达对发情雄性小鼠血清睾酮、雌二醇水平及睾丸组织芳香化酶表达的影响。方法:采用放射免疫法检测发情雄性小鼠性表达组与禁欲组血清睾酮、雌二醇水平以及睾丸组织雌二醇含量;采用原位杂交、免疫组织化学技术检测睾丸组织芳香化酶表达水平。结果:发情雄性小鼠性表达组血清雌激素水平显著性增高,性表达显著上调睾丸间质细胞芳香化酶表达;发情雄性小鼠性表达组睾丸组织匀浆上清液雌二醇浓度较禁欲组显著性升高。结论:性表达可能通过上调发情雄性小鼠睾丸间质细胞芳香化酶表达而提高外周血雌二醇水平。     

子宫颈癌中癌基因产物c—Fos、c—Jun的表达及意义

目的 :探讨癌基因c fos、c jun表达产物与子宫颈癌的发生 ,发展及预后的关系。方法 :用免疫组化SABC法 ,以兔抗c fos、c jun抗体标记 6 0例子宫颈癌和 30例子宫颈上皮不典型增生 ,观察其分化程度和组织学类型 ,子宫颈癌的表达及阳性率比较。结果 :c fos、c jun阳性反应见于不典型增生上皮和子宫颈癌组织 ,不典型增生上皮c fos、c jun阳性率分别为 70 0 %和 5 0 0 %癌组织为 5 6 6 %和 4 8 3% ;在子宫颈癌表达的阳性率与癌组织分化程度和组织学类型有关 (P <0 .0 5 )。结论 :提示c fos、c jun过量表达可发生在不典型增生的子宫颈上皮和子宫颈癌组织     

姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠睾酮合成的影响

 目的: 研究姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠睾酮合成的影响。方法: 雄性SD大鼠35只,随机均分为正常对照组(C组)、高脂组(H组)、高脂治疗组(HT组)、糖尿病组(D组)和糖尿病治疗组(DT组),后4组高脂喂养4周后,D组及DT组用低剂量链脲佐菌素诱导糖尿病,HT组和DT组用0.2 mg·kg^-1·d^-1的B06灌胃8周。微量血糖仪测定大鼠血糖浓度;ELISA法测定血胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数;光镜和电镜观察睾丸形态;放射免疫法测定血睾酮、雌二醇水平;免疫组化检测Leydig细胞的类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)表达;RT-PCR检测睾丸Leydig细胞StAR、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P450 17A1(P450c17)、细胞色素P450芳香化酶(P450arom)、3β-羟基类固醇脱氢酶(HSD)及17β-HSD的mRNA表达水平。结果: H组及D组血糖、胰岛素抵抗指数升高,血清睾酮水平降低,经B06治疗后好转;H组及D组睾丸曲细精管变形,生精细胞脱落,Leydig细胞内线粒体肿胀,内质网减少且扩张,胞核皱缩,染色质稀疏,经B06治疗后病变减轻;D组的StAR蛋白表达减弱,经B06治疗后表达增强;H组及D组Leydig细胞StAR、P450scc mRNA表达降低,经B06治疗后升高,P450c17、P450arom、3β-HSD及17β-HSD mRNA表达未见明显差异。结论: B06可缓解2型糖尿病大鼠睾丸病变,提高血清睾酮水平,这可能与B06改善机体代谢紊乱并上调Leydig细胞StAR及P450scc mRNA表达水平相关。