大豆异黄酮对AD大鼠模型海马caspase-3表达的抑制作用

目的 观察大豆异黄酮对Aβ25-35诱导的Alzheimer病（AD）大鼠模型海马组织caspase-3蛋白表达的影响。方法 Aβ25-35双侧海马注射制备AD大鼠模型，分组后给予不同剂量大豆异黄酮，免疫组化法观察大豆异黄酮对大鼠海马组织caspase-3蛋白表达的影响。结果 与对照组相比，模型组caspase-3蛋白表达阳性率明显升高，大豆异黄酮治疗组caspase-3蛋白表达明显降低。结论 大豆异黄酮抑制caspase-3蛋白的表达和减少海马神经元凋亡可能是其改善大鼠的学习记忆功能的作用机制之一。     

阿托伐他汀对Aβ_1-42诱导AD模型抗凋亡作用的研究

目的 探讨阿托伐他汀对Aβ1-42诱导阿尔茨海默病(AD)大鼠模型学习记忆功能及神经细胞凋亡的影响.方法 采用侧脑室注射Aβ1-42的方法制备大鼠痴呆模型,阿托伐他汀5 mg·kg-1·d-1灌胃为治疗组,并设假手术组作为对照组.水迷宫实验观测大鼠的行为学变化,免疫组织化学方法测定海马区caspase-3的表达,尼氏染色观察海马区神经元凋亡情况,透射电镜观察海马区神经元超微结构的变化.结果 模型组大鼠的学习记忆成绩下降,半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)生成增多(P＜0.01),凋亡神经元增多;阿托伐他汀治疗组与模型组大鼠相比较,学习和记忆成绩有所改善,海马区caspase-3生成减少(P＜0.01),凋亡神经元减少.细胞形态学观察显示,与模型组相比,阿托伐他汀治疗组模型海马区神经细胞损伤减轻.结论 阿托伐他汀可以减少AD大鼠模型海马区caspase-3的生成,减少神经元的凋亡,减轻神经细胞损伤,改善其学习和记忆能力.     

辛伐他汀调控klotho蛋白改善高糖诱导的大鼠海马神经元细胞损伤的研究

目的 探讨高糖环境下辛伐他汀对大鼠海马神经元细胞的影响，klotho蛋白表达变化及相关机制。方法 大鼠海马神经元细胞持续培养6 d后，分为正常对照组（Con）、辛伐他汀组（Sim）、高糖组（HG）、HG+Sim组。Con组采用25 mmol/L葡萄糖培养，Sim组采用25 mmol/L葡萄糖及10 nmol/L辛伐他汀培养，HG组采用50 mmol/L葡萄糖培养，HG+Sim组采用50 mmol/L葡萄糖及10 nmol/L辛伐他汀培养，培养48 h后检测活性氧簇（ROS）、超氧化酶歧化物（SOD）、丙二醛（MDA）、klotho及半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白。结果 与Con、Sim组比较，HG、HG+Sim组ROS、MDA、caspase-3蛋白表达升高，SOD、klotho蛋白表达降低（P<0.05）。与HG组比较，HG+Sim组ROS、MDA、caspase-3蛋白表达降低，SOD、klotho蛋白表达升高（P<0.05）。结论 10 nmol/L辛伐他汀延缓高糖诱导的大鼠海马神经元细胞氧化应激及细胞凋亡，可能与klotho蛋白表达升高相关。     

慢性弓形虫感染对大鼠海马神经细胞凋亡周期及caspase-3与细胞色素C蛋白表达的影响

目的观察弓形虫慢性感染对大鼠海马神经细胞周期、细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和细胞色素C(Cytc)表达的影响。方法将20只成年雄性SD大鼠随机分成2组:弓形虫感染组和正常对照组。弓形虫感染组每只大鼠腹腔注射纯化弓形虫速殖子2×107/ml悬液2ml;正常对照组大鼠每只腹腔注射2ml灭菌生理盐水。感染10周后应用流式细胞术检测大鼠海马神经细胞周期和细胞凋亡,罗丹明123染色检测其线粒体膜电位;应用免疫组化法检测海马caspase-3和Cytc蛋白表达。结果弓形虫感染10周后,大鼠海马神经细胞凋亡率为(49.3±13.6)%,与正常对照组(40.1±11.2)%相比较,差异有统计学意义(P0.05),G0/G1期细胞百分率增高(P0.05),出现G0/G1期阻滞,S期细胞减少(P0.05);感染组线粒体膜电位为(22.1±6.8)%,比对照组的(25.4±9.4)%低(P0.05);caspase-3和Cytc蛋白表达则均显著增高(P0.05)。结论弓形虫慢性感染可能导致大鼠海马神经细胞凋亡,进而引起一定的认知功能障碍。     

Humanin对谷氨酸诱导大鼠脊髓神经元凋亡和caspase-3表达的影响

目的探讨Humanin(HN)对谷氨酸诱导体外培养大鼠脊髓神经元凋亡和caspase-3表达的影响。方法利用谷氨酸诱导原代培养胚胎大鼠脊髓神经元损伤,MTT法、NSE免疫组化染色评价HN对脊髓神经元的保护作用,Hoechst33258荧光染色研究HN对脊髓神经元凋亡的影响,免疫组化、western blotting检测脊髓神经元cleaved caspase-3蛋白的表达,RT-PCR检测caspase-3 mRNA的表达。结果 HN促进脊髓神经元存活,显著减少凋亡细胞数,降低caspase-3mRNA的表达,从而降低caspase-3蛋白的表达。结论 HN能抑制caspase-3蛋白的活化,从而抑制神经元的调亡,对谷氨酸造成的大鼠脊髓神经元的兴奋性损伤起到一定的保护作用。     

硝普钠对体外培养的海马神经元NF-κB和caspase-3基因表达的影响

目的探讨NO供体硝普钠（SNP）诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB（NF）-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3 mRNA表达变化;Western印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化。结果SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度。随着SNP剂量的增加,NF-κB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/LSNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值。结论SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关。     

实验性糖尿病大鼠认知功能障碍与额叶皮质、海马细胞凋亡关系的研究

目的 探讨糖尿病(DM)大鼠认知功能与额叶皮质和海马神经元凋亡的关系.方法 电迷宫法测试28只DM大鼠(DM组)和30只正常大鼠(NC组)学习能力,并检测额叶皮质和海马发生凋亡的神经元数目和bcl-2、Bax基因表达.结果 DM组大鼠学习能力明显下降,额叶皮质和海马细胞凋亡数高于NC组,bcl-2表达减少,而Bax表达增加.DM组大鼠达到学会标准所需训练次数与额叶皮质和海马细胞凋亡数呈正相关,而NC组大鼠两者无相关性.结论 高血糖状态下额叶皮质与海马凋亡调节基因表达改变引起的细胞凋亡增加可能与糖尿病认知功能障碍有关.     

慢性脑缺血大鼠海马中APE、PCNA的表达与神经细胞凋亡

目的研究慢性脑缺血大鼠海马中DNA损伤修复相关蛋白脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶（APE）、增生细胞核抗原（PCNA）的活性变化及神经元的凋亡情况,并探讨三者之间的相关性。方法成年雄性W istar大鼠随机均分为假手术组、持久性双侧颈总动脉结扎（2-VO）1周组、3周组、8周组,用W estern b lotting检测各组海马组织中APE、PCNA蛋白表达水平,用流式细胞仪检测海马神经元的凋亡程度。结果2-VO 1周组APE、PCNA蛋白的表达量明显低于对照组（P〈0.01）,随着2-VO时间的延长其蛋白表达水平逐渐上升,但仍低于对照组（P〈0.05）;慢性脑缺氧大鼠术后1周时海马神经细胞凋亡百分率最高为22.66%,以后随时间的延长细胞凋亡数逐渐下降（P〈0.01）。结论慢性脑缺血大鼠早期APE、PCNA活性下降,同时其神经元凋亡率较高,后期蛋白表达水平逐渐上升,神经元的凋亡程度也逐渐下降,表明DNA损伤与修复失衡所致的神经细胞凋亡是慢性缺血性脑损伤发病的重要机制之一。     

血糖波动对糖尿病大鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察糖尿病(DM)大鼠在血糖波动状态下海马神经元凋亡及Caspase-3的异常表达,探讨血糖波动对大鼠海马神经元凋亡的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)诱导,间断短效胰岛素应用制备DM血糖波动模型。12 w后,用TUNEL法检测海马神经元的凋亡,用免疫组化法检测海马神经元凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果 DM组大鼠海马可见少数阳性凋亡细胞表达,与对照组(NC组)相比明显增多(P<0.01);血糖波动组(RDM组)凋亡阳性细胞较DM组增多更加明显(P<0.01)。DM组大鼠海马神经元Caspase-3表达较NC组明显增强(P<0.05),RDM组Caspase-3的表达较DM组进一步增强(P<0.05)。结论 DM大鼠血糖波动可明显加速海马神经元的凋亡,Caspase-3介导的细胞凋亡机制可能参与DM大鼠海马神经元的损伤。     

APP17肽对DM大鼠海马神经元胰岛素和凋亡信号传导通路相关蛋白的影响

目的 观察糖尿病大鼠海马脑区胰岛素和凋亡信号传导通路中某些相关蛋白的表达及APP17肽对其表达的影响。方法 链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病模型，并用APP17肽治疗。用免疫沉淀和Western-blot法分析海马中信号传导及部分凋亡相关蛋白；电镜观察大鼠脑组织超微结构。结果 DM大鼠IGF－IRα、Akt/PKB、CREB表明明显降低，APP17肽治疗后明显上调（P＜0．05），GSK－3β、PP－1及凋亡相关蛋白Bax、AIF表达增加，治疗后则明显降低（P＜0．05）；超微结构表明APP17肽治疗后兴奋性突触小泡明显减少。结论 糖尿病大鼠海马脑区胰岛素和凋亡信号传导通路中某些重要蛋白表达异常，APP17肽部分纠正这些蛋白的异常表达，这可能是其保护DM大鼠海马神经元的机制。