肝癌组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3、mTOR的表达及意义

目的探讨自噬相关基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链(LC)3、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测49例肝癌组织、38例正常肝组织的Beclin1、LC3和mTOR表达,并分析相关性及与临床病理因素的关系。结果 Beclin1、LC3和mTOR在肝癌组织中的阳性率明显高于正常肝组织(P0.05),且Beclin1与LC3的表达呈正相关(r=0.578,P0.01),LC3与mTOR的表达呈负相关(r=-0.403,P0.05),而Beclin1与mTOR的表达无关(r=-0.113,P0.05)。Beclin1、LC3和mTOR的表达均仅与病理分级和有无胆管癌栓有关(P0.05),与患者性别、年龄、肿瘤直径、HBSAg、AFP、分化程度、TNM分期、转移情况等均无关(P0.05)。结论肝癌组织中Beclin1、LC3和mT OR表达阳性率均高于正常肝组织。细胞自噬机制的变化可能是导致肝癌发生发展的重要原因。检测肝癌组织上述蛋白表达变化有助于诊断肝癌及判断患者病情。     

Beclin1和LC3在食管癌组织中的表达水平和临床意义

目的探讨Beclin1和LC3在食管鳞癌和腺癌组织中的表达水平和临床意义。方法通过免疫组织化学SP法检测89例食管癌组织标本中Beclin1和LC3的表达情况。结果 Beclin1和LC3在食管癌中的阳性表达率(47.2%,40.4%)均显著低于正常食管癌组织标本组(88.9%,80.6%)(P0.05)。Beclin1和LC3在食管癌中的表达与TNM分期、组织浸润程度、淋巴结转移和组织分化程度有关(P0.05),与年龄、性别和组织类型(P0.05)等无明显差异。Beclin1与LC3在食管鳞癌和腺癌中的表达呈正相关(r=7.935,P=0.005)。结论在食管鳞癌和腺癌中,肿瘤分化程度越低、浸润程度越高、有淋巴结转移、临床分期越高,Beclin1和LC3的表达越低,可能与肿瘤的发生发展与侵袭转移相关。     

Beclin 1、LC3在非小细胞肺癌中的表达水平及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Beclin 1、LC3的表达情况及临床意义。方法通过免疫组织化学SP法检测72例NSCLC标本中Beclin 1、LC3的表达情况。结果 Beclin1、LC3在NSCLC中的阳性表达率(46.3%,43.9%)、癌旁组的阳性表达率(83.3%,91.7%)均低于肺正常组织(100%,100%),差异具有统计学意义(均P<0.05)。Beclin 1在NSCLC的表达与患者的年龄及临床分期有关(P=0.037;0.009)。LC3在NSCLC的表达与患者的临床分期和肿瘤分化程度有关(P=0.002;0.000);Beclin 1、LC3在NSCLC中的表达呈正相关(r=0.425,P=0.000)。结论Beclin 1、LC3在NSCLC中低表达,自噬活性的降低可能对肺癌的发生发展及侵袭转移起一定的作用。     

NSCLCCT影像学表现与癌组织Beclin1、LC3表达的关系

目的研究自体吞噬相关基因Beclin 1与微管相关蛋白1轻链3(LC3)在NSCLC(NSCLC)组织中的表达,并分析其与NSCLC CT影像学表现的关系。方法选择2016年4月-2017年12月我院收治的并确诊的NSCLC 90例为病例组,另以距NSCLC肿物边缘大于3 cm的肺组织,且经病理HE染色确诊为非肿瘤组织55例作为正常对照组,运用免疫组化(SP)法测定两组标本组织中的Beclin1、LC3表达情况,分析NSCLC患者CT征象,采用Spearman相关分析Beclin1与LC3表达的相关性。结果病例组癌组织中的Beclin1、LC3阳性表达率均明显低于对照组癌旁正常组织(P 0. 05)。Beclin1、LC3表达与肿瘤大小、TNM分期、分化程度均相关(P 0. 05),而与患者性别、年龄、病理类型、淋巴结转移均无关(P 0. 05)。病例组NSCLC患者癌组织中Beclin1、LC3表达均与有无深分叶征、棘突征、血管集束征、纵隔淋巴结肿大及胸膜外脂肪线是否消失相关(P 0. 05),而与有无毛刺征、空洞征无关(P 0. 05)。Spearman相关分析显示,病例组NSCLC患者癌组织中Beclin1与LC3表达呈正相关(r=0. 478,P=0. 037)。结论 Beclin1、LC3在NSCLC组织中呈低表达,且Beclin1、LC3表达水平与NSCLCCT影像学表现密切相关。运用CT影像学表现可以在一定程度上评估Beclin1、LC3在NSCLC组织中的表达水平,将NSCLC的CT影像学表现与自噬分子Beclin1、LC3结合研究,有益于此类患者临床诊断及预后前瞻性的评估。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子通过Toll样受体－4信号通路调节巨噬细胞自噬水平

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)是否通过Toll样受体-4(TLR4)通路调节巨噬细胞自噬水平。方法用终浓度为5ng/ml的佛波酯(PMA)诱导人单核细胞白血病细胞系(THP-1)THP-1单核细胞48h,采用分化成功的巨噬细胞进行实验。实验分为空白对照组、EMMPRIN组和TAK-242组。蛋白印迹法检测各组TLR4、核因子-κB(NF-κB)、LC3-Ⅱ、Beclin1及P62蛋白表达水平;免疫荧光检测各组LC3-Ⅱ、Beclin1及P62蛋白荧光表达情况。采用SPSS 22.0软件对数据进行处理。结果Western blot检测发现,EMMPRIN组与对照组及TAK-242组相比,TLR4、NF-κB蛋白表达水平均升高(均P<0.05),LC3-Ⅱ蛋白表达水平均升高(P<0.05),Beclin1蛋白表达水平也升高[EMMPRIN组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但仍较对照组升高;EMMPRIN组与TAK-242组比较,差异有统计学意义(P<0.05)],P62蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。免疫荧光检测发现,EMMPRIN组与对照组及TAK-242组相比,LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白荧光表达水平明显升高(均P<0.05),P62蛋白表达水平无差异统计学意义(P>0.05)。结论EMMPRI可能通过TLR4信号通路调节人THP-1巨噬细胞过度自噬。     

非小细胞肺癌组织中CCR7、mTOR表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中CC类趋化因子受体7(CCR7)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达变化,并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学染色(MaxVisionTM二步法)检测42例NSCLC患者癌组织中的CCR7、mTOR,分析其与NSCLC临床病理参数的关系。结果 NSCLC组织中,CCR7阳性表达率59.5%,mTOR阳性表达率为50.0%。CCR7表达与NSCLC患者的年龄、性别、TNM分期、病变部位及有无淋巴结转移无关(P均>0.05),但在腺癌中阳性表达率为82.6%(19/23),鳞状细胞癌为31.6%(6/19),P<0.01;在肿瘤直径≤3.0 cm者阳性表达率为82.4%(14/17),而>3.0 cm者仅为44.0%(11/25),P<0.05。mTOR表达与NSCLC患者的年龄、性别、病理类型、TNM分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移及病变部位均无关(P均>0.05)。NSCLC组织中,CCR7与mTOR的表达呈正相关(r=0.340,P<0.05)。结论 NSCLC组织中均有CCR7、mTOR表达,且CCR7表达与病理类型和肿块大小有关,有助于鳞癌和腺癌的鉴别。     

自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测64例胰腺癌组织及相应癌旁正常组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62的表达情况;分析自噬蛋白表达水平与胰腺癌临床病理特征的关系.结果:免疫组织化学法检测提示Beclin1蛋白在胰腺癌组织及癌旁正常组织中阳性表达率分别为28.1%(18/64)、90.6%(58/64),LC3蛋白阳性表达率分别为34.4%(22/64)、75%(48/64)P 6 2蛋白表达阳性率分别为7 5%(4 8/6 4)、4 6.9%(3 0/6 4),均P0.0 5;胰腺癌组织中Beclin1与LC3的表达水平呈正相关(r=0.572P0.05),Beclin1、LC3的表达与肿瘤分化、TNM分期相关(P0.05),Beclin1、LC3和P62的表达均与性别、年龄、有无门脉浸润、淋巴结转移无明显相关(P0.05).结论:自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在胰腺癌组织中的异常表达及Beclin 1与LC3两者表达呈正相关提示自噬活动下降可能参与了进展期胰腺癌的发展.     

老年直肠癌患者EGFR、MMP-2、BRCA1、mTOR表达及临床意义

目的 探讨老年直肠癌患者表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、乳腺癌1号基因(BRCA1)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达变化及临床意义。方法 选取老年直肠癌患者92例为直肠癌组;另收集同期健康志愿者40例为健康对照组。酶联免疫吸附试验测定两组血清EGFR、MMP-2浓度。收集老年直肠癌患者直肠癌组织和癌旁正常组织,免疫组化检测BRCA1、mTOR蛋白表达。收集两组性别、年龄及老年直肠癌患者临床病理特征。随访3年,记录患者生存情况,分为生存组和死亡组。结果 直肠癌组血清EGFR、MMP-2水平明显高于健康对照组(P<0.01)。直肠癌组织中BRCA1阳性率明显低于癌旁正常组织,mTOR阳性率明显高于癌旁正常组织(P<0.001)。血清EGFR、MMP-2浓度及组织中BRCA1、mTOR阳性率在不同TNM分期、淋巴结转移、远处转移、分化程度的老年直肠癌患者间差异有统计学意义(P<0.01);血清EGFR、MMP-2浓度及组织中BRCA1、mTOR阳性率在不同肿瘤直径的老年直肠癌患者间差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组血清EGFR、MMP...     

生存素和P53在胃癌组织芯片中的表达及意义

目的探讨胃癌组织中生存素、P53表达与胃癌临床病理特征和生物学预后的相关性及意义。方法将100例术前无放、化疗史的胃癌患者手术标本和30例对照组胃黏膜制成组织芯片,取样针直径2.0 mm。免疫组化法检测生存素、P53在胃癌中的表达,原位末端标记法(TUNEL 法)检测细胞凋亡指数(AI),分析其相互关系及与胃癌临床病理特征的相关性,对随访14个月～13年的47例患者作生存分析。结果 100例胃癌和30例对照组胃黏膜共获得2个组织芯片蜡块,分别含114和116个位点。在胃癌组织芯片中,生存素和 P53阳性表达为78%和52%,而对照组胃黏膜几乎无表达(P<0.01),生存素的阳性率与胃癌组织分化、淋巴结转移、血管神经(BV/N)侵犯及临床分期有关(P<0.05);生存素阳性组胃癌细胞 AI(3.2±1.0)明显低于阴性组(4.0±1.1,P<0.01)。P53表达在胃癌不同组织分化、临床分期和 BV/N 侵犯、淋巴结转移中差异均无统计学意义(P>0.05),胃癌 P53表达与AI 无关(阳性组:3.5±1.2,阴性组:3.2±1.0;P>0.05)。在有随访结果的47例胃癌中,单因素 Cox 分析显示,BV/N 侵犯、临床分期及生存素表达均与预后有关(P<0.05),胃癌组织分化、P53表达与预后无关(P>0.05)。但经多因素 Cox 分析显示,只有临床分期、生存素表达具有独立的预后意义。结论生存素表达与胃癌病理形态特征、临床分期及预后密切相关,似可作为预测胃癌预后不良的指标。     

P-GSK3β和β-catenin蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的检测乳腺癌组织中P-GSK3β蛋白和β-catenin蛋白表达情况并探讨其意义。方法采用微波EliVisionTM免疫组织化学法检测56例乳腺癌组织、30例癌旁正常乳腺组织中P-GSK3β蛋白和β-catenin蛋白的阳性表达率。结果 (1)56例乳腺癌组织中P-GSK3β蛋白和β-catenin蛋白的阳性表达率分别为57.14%(32/56)、64.29%(36/56),在癌旁正常乳腺组织中无表达,二者比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)P-GSK3β的表达与乳腺癌的组织学分级、临床TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、原发肿瘤大小无关(P>0.05)。β-catenin表达与乳腺癌的淋巴结转移、组织学分级有关(P<0.05),与乳腺癌的原发肿瘤大小、临床TNM分期及患者年龄无关(P>0.05)。(3)P-GSK3β蛋白和β-catenin蛋白的表达呈正相关(P<0.05)。结论 P-GSK3β蛋白和β-catenin蛋白在乳腺癌呈高表达,且与乳腺癌的发生、发展和转移密切相关。     

非小细胞肺癌FGFR3及CyclinD1表达与临床病理特征及预后分析

目的分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3, FGFR3)、G1/S特异性周期蛋白D1(CyclinD1)表达与临床病理特征及预后关系。 方法选取2018年1月1日至2020年12月31日我院收治的NSCLC患者80例为对象。免疫组织化学检测NSCLC肿瘤组织中的FGFR3及CyclinD1；采用构建突变引物并PCR扩增检测组织中FGFR3突变；分析FGFR3表达、突变及CyclinD1表达与NSCLC关系。 结果FGFR3高表达易出临床分期、淋巴结转移及EGFR突变阴性(P<0.05)，FGFR3突变易出现中低分化、临床分期、淋巴结转移及EGFR突变阴性(P<0.05)，CyclinD1高表达易出现中低分化、淋巴结转移及EGFR突变阳性(P<0.05)；CyclinD1高表达易出现FGFR3^+/MUT的活化形式(P<0.05)；NSCLC临床分期、淋巴结转移、EGFR状态、FGFR3高表达、FGFR3突变及CyclinD1高表达为患者出现预后(P<0.05)；FGFR^3+/MUT患者的PFS及OS差于FGFR^3－/MUT患者(P<0.05)。 结论FGFR3在NSCLC中存在异常活化，包括突变及过表达，两种方式同时激活通过CyclinD1促进肿瘤发展具有意义。     

S100A11和自噬基因Beclin1在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨S100A11和自噬基因Beclin1在胃癌组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学超敏两步法(S-P法)分别检测50例胃癌组织、30例胃癌前病变(中、重度非典型增生)和20例慢性非萎缩性胃炎组织中S100A11和Beclin1蛋白的表达.使用病理图像分析仪分析S100A11和Beclin1蛋白表达在3种组织中的阳性信号灰度值.结果:S100A11蛋白在胃癌组织及胃癌前病变组织中表达的灰度值分别为132.9209±5.6490和133.6706±5.8348,两者均明显低于慢性非萎缩性胃炎中的灰度值138.048±3.5902,差异均有统计学意义(P<0.01),胃癌与胃癌前病变组织中S100A11蛋白表达比较差异无统计学意义;S100A11蛋白的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),与肿瘤的部位、大小无关.Beclin1蛋白在胃癌组织中表达的灰度值为140.9705±6.2019,明显高于胃癌前病变(136.711±5.5759)和慢性非萎缩性胃炎(130.8024±2.5363),三者两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);Beclin1的表达与胃癌的分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05),与肿瘤的部位、大小、浸润深度及TNM分期无关.S100A11和Beclin1在胃癌组织中的表达呈负相关(r=-0.156,P<0.05).结论:S100A11在胃癌组织中高表达,Beclin1在胃癌组织中低表达,S100A11和Beclin1与胃癌的部分生物学行为关系密切,胃癌组织中S100A11和Beclin1的表达呈负相关,提示S100A11和Beclin1在胃组织中的表达失衡,可能是胃癌发生的分子生物学机制之一.     

miRNA-17-5p在慢加急性肝衰竭合并乙型病毒性肝炎患者中的表达及与自噬相关蛋白表达的关系

目的:探讨微小RNA-17-5p(miRNA-17-5p)在慢加急性肝衰竭合并乙型肝炎(HBV-ACLF)患者中的表达水平及其与自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)表达的相关性。方法:选取2019年2月至2020年5月HBV-ACLF住院患者82例为HBV-ACLF组,选取同期住院治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者79例作为CHB组,选取同期健康体检者86例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miRNA-17-5p水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清Beclin1、LC3-Ⅱ、总胆红素、白蛋白水平;PCR结合荧光探针的体外扩增技术测定血清HBV DNA载量;Pearson法分析HBV-ACLF患者血清miRNA-17-5p与Beclin1、LC3-Ⅱ、总胆红素、白蛋白、HBV DNA载量的相关性;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miRNA-17-5p、Beclin1、LC3-Ⅱ水平对HBV-ACLF的诊断价值;多因素Logistic回归分析影响HBV-ACLF发生的因素。结果:HBV-ACLF组患者血清Beclin1、LC3-Ⅱ、总胆红素水平高于CHB组和对照组,miRNA-17-5p、白蛋白低于CHB组和对照组(P<0.05);CHB组患者血清Beclin1、LC3-Ⅱ、总胆红素水平高于对照组,miRNA-17-5p、白蛋白低于对照组(P<0.05);HBV-ACLF组患者血清HBV DNA载量高于CHB组(P<0.05)。HBV-ACLF组患者血清miRNA-17-5p水平与Beclin1、LC3-Ⅱ呈负相关(r=-0.580、-0.511;均P<0.05);Beclin1、LC3-Ⅱ与总胆红素、HBV DNA载量均呈正相关,与白蛋白呈负相关(P<0.05);miRNA-17-5p与总胆红素、HBV DNA载量均呈负相关,与白蛋白呈正相关(P<0.05)。血清miRNA-17-5p、Beclin1、LC3-Ⅱ水平诊断HBV-ACLF的曲线下面积(AUC)分别为0.862、0.784、0.886,特异性分别为88.4%、80.2%、81.4%,敏感度分别为74.4%、63.4%、81.7%;三者联合诊断的AUC为0.915,特异性为88.4%,敏感度为82.9%。Beclin1、HBV DNA载量是影响HBV-ACLF发生的独立危险因素(P<0.05),miRNA-17-5p是影响HBV-ACLF发生的保护因素(P<0.05)。结论:HBV ACLF患者血清miRNA-17-5p表达水平降低,与Beclin1、LC3-Ⅱ呈明显负相关,且三者均对HBV-ACLF有一定的诊断价值。     

miR-195、核糖体蛋白L34和Beclin1在人骨肉瘤中表达及临床价值

目的考察miR-195、核糖体蛋白L34和Beclin1在人骨肉瘤(OS)中表达及临床价值。方法观察OS患者56例和骨软骨瘤患者35例miR-195、核糖体蛋白34和Beclin1表达水平。结果与骨软骨瘤组比,OS组miR-195和Beclin1阳性或半定量表达明显降低(P0.05),核糖体蛋白L34阳性或半定量明显增高(P0.05),miR-195与核糖体蛋白L34和Beclin1分别呈负和正相关(r=-0.64,r=0.68,均P0.05),核糖体蛋白L34和Beclin1呈正相关(r=0.72,P0.05)。OS组化疗效果良好为48例(85.71%),不佳8例(14.29%)。miR-195、核糖体蛋L34和Beclin1表达呈阴性、阳性及阴性者化疗效果不佳,差异无统计学意义(P0.05)。OS组均获得5年随访,存活26例(46.43%),死亡30例(53.57%);miR-195、核糖体蛋白L34和Beclin1表达分别为阳性、阴性和阳性的患者5年生存时间均较长(χ~2=4.207,P=0.040;χ~2=4.033,P=0.045;χ~2=4.858,P=0.028)。结论人OS中mi-195、核糖体蛋白L34和Beclin1表达水平与预后密切相关,miR-195和Beclin1表达水平越高,核糖体蛋白L34表达越低,预后较好。     

XIAP、c-Jun在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨X-连锁调亡抑制蛋白(XIAP)和氨基端激酶(c-Jun)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌的关系。方法应用免疫组织化学法检测50例乳腺癌组织及50例乳腺纤维腺瘤组织中XIAP和c-Jun的表达,并分析其临床意义。结果 XIAP和c-Jun在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为76%(38/50)和82%(41/50),在乳腺纤维腺瘤中的阳性表达率分别为30%(15/50)和22%(11/50),在乳腺癌中的阳性表达明显高于乳腺纤维腺瘤(P<0.01)。XIAP和c-Jun的阳性表达均与有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、组织学分级及临床分期均无明显相关(P>0.05);XIAP的阳性表达和c-Jun的阳性表达呈正相关。结论 XIAP和c-Jun在乳腺癌的发病中具有协同作用,其高表达可能促进淋巴结转移。     

BCRP基因在乳腺癌组织中的表达及意义

目的　研究乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)基因在乳腺癌组织中的表达水平 ,探讨其与肿瘤病理分期、淋巴结转移的关系。方法　采用实时荧光定量 RT- PCR检测 5 1例乳腺癌患者癌组织和癌旁组织中 BCRP基因表达。结果　 BCRP基因在乳腺癌组织中的阳性表达率、表达水平均显著高于癌旁组织 (P<0 .0 1、<0 .0 5 ) ;BCRP基因在 、 、 期乳腺癌组织中的表达水平无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;有淋巴结转移者的 BCRP基因表达水平显著高于无淋巴结转移者 (P<0 .0 5 )。结论　 BCRP基因表达水平与肿瘤病理分期无关 ,与淋巴结转移有关 ,BCRP基因过表达可能在乳腺癌的多药耐药中起较重要的作用。     

胃癌组织中Survivin和Ki-67的表达及其临床意义

目的 探讨Survivin和Ki-67在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学技术(S-P)法检测各期胃癌共50例及12例浅表性胃炎组织中Survivin和Ki-67的表达水平,并结合病理特征进行分析。结果 胃癌组织中Survivin阳性表达率为74％,显著高于浅表性胃炎组(P<0.001)。Survivin过表达与肿瘤浸润深度、淋巴结及远处转移、临床分期相关(P<0.05),而与胃癌组织分化程度无关(P>0.05)。Ki-67抗原阳性表达率在胃癌组织中为52％,显著高于浅表性胃炎组(P<0.01),并与胃癌组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结及远处转移、临床分期相关(P<0.05)。两种蛋白表达有关联(P<0.01)。结论 Survivin和Ki-67在胃癌组织中过表达,二者过表达与胃癌的发生、发展密切相关,可作为预后不良的指标。     

细胞自噬在激素性股骨头缺血坏死大鼠发病中的作用

目的 探索细胞自噬在激素性股骨头缺血坏死(SANFH)大鼠发病机制中的作用。方法 24只无特定病原体(SPF级)SD大鼠(雄鼠各半),随机抽样分为：正常(C)组、模型(T1)组、自噬阻断(T2)组、自噬激动(T3)组,每组雌、雄各3只。C组给予生理盐水,T1、T2、T3组分别给予甲泼尼龙、甲泼尼龙+3-甲基腺嘌呤(MA)、甲泼尼龙+雷帕霉素。8 w后处死,取后肢股骨头并测量坏死面积,采用免疫组化、Western印迹检测坏死股骨头组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ、自噬效应蛋白(Beclin)1及p62蛋白的表达情况。结果 T1、T2、T3组经甲泼尼龙干预8 w后,至少一侧股骨头坏死率分别为83.33%、16.67%、100.00%,T1、T2、T3组与C组比较均具有统计学差异(均P<0.05),且T1组、T3组股骨头坏死面积均显著大于C组和T2组(均P<0.05)。免疫组化染色和Western印迹检测LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1、p62蛋白结果显示,T1、T3组股骨头组织中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的表达量显著高于C组、T2组(均P<0.05),但p62...     

Beclin1、p62和Ki-67在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及意义

目的探讨自噬相关蛋白(Beclin)1、自噬底物蛋白(p62)和增殖指数(Ki-67)在乳腺浸润性导管癌(IDC)患者中的表达及意义。方法选取沈阳医学院附属中心医院病理科IDC标本79例作为实验组,随机选取20例相应距肿瘤组织5 cm以上的正常乳腺组织为对照组,采用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶链接法(SP)检测两组中Beclin1、p62和Ki-67的表达水平,分析3种因子与IDC临床病理学参数的关系。结果实验组Beclin1阳性表达率[44.3%(35/79)]明显低于对照组[100%(20/20),P0.05];p62和Ki-67阳性表达率分别[58.2%(46/79)、51.8%(41/79)]明显高于对照组[10%(2/20)、5%(1/20),P0.01]。实验组中Beclin1和p62阳性表达与组织学分级及淋巴结转移相关(P0.05),而与患者发病年龄、肿瘤大小无关(P0.05)。实验组Ki-67阳性表达与组织学分级相关(P0.01),而与患者发病年龄、肿瘤大小及淋巴结是否转移无关(P0.05)。实验组中Beclin1与p62和Ki-67呈负相关(P0.01),p62和Ki-67呈正相关(P0.01)。结论 Beclin1、p62和Ki-67蛋白异常表达可能与乳腺癌恶性程度分级及侵袭力有关。     

辛伐他汀对哮喘小鼠细胞自噬和炎症的影响及其机制的实验研究

目的观察不同剂量辛伐他汀对哮喘小鼠自噬和炎症的影响及机制。方法32只小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、低剂量辛伐他汀组(C组40 mg/Kg)、高剂量辛伐他汀组(D组60 mg/Kg),每组8只。B、C、D三组采用卵清蛋白+氢氧化铝造模,C、D组同时给予辛伐他汀40 mg/kg、60 mg/kg灌胃。采用H.E染色观察肺组织,Western blot法检测LC3Ⅱ/Ⅰ、mTOR、p-mTOR,RT-PCR法检测Atg5和Beclin1 mRNA。结果A组支气管未见炎症细胞浸润,管腔规则、黏膜上皮正常;B组可见大量炎症细胞浸润,管壁增厚,气道黏膜增生;C、D组上述表现较B组减轻,且D组改善更明显。与A组比较,B组LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5 mRNA、Beclin1mRNA增加,p-mTOR/mTOR降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D两组LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA增加,p-mTOR/mTOR降低,D组上述指标变化更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠自噬水平增加,p-mTOR/mTOR信号通路蛋白降低;辛伐他汀可能通过阻断mTOR信号通路进一步提高LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5 mRNA、Beclin1mRNA水平,从而缓解气道炎症。