电针对慢性应激大鼠海马神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨电针（electroacupuncture,EA）对慢性应激海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响。方法30只雌性SD大鼠随机分成3组：模型组、电针组和对照组。每组10只。模型组大鼠连续接受21d各种不同的应激,平均每种应激使用2～3次。电针组模型建立后中止刺激,给予电针“三阴交”穴和“百会”穴．连续电针21d。对照组不给予刺激和电针。第42天将3组大鼠处死取脑。利用免疫组织化学方法检测海马区nNOS的表达情况。结果模型组大鼠海马nNOS阳性神经元的数量减少（P〈0．05）,染色变淡;电针后海马nNOS阳性神经元的数量有所增加（P〈0．05）。结论电针可上调nNOS在大鼠海马内的表达。     

苦参碱注射液对AD模型大鼠脑组织白介素1β、NO含量及nNOS免疫阳性神经元的影响

为探讨苦参碱注射液对老年性痴呆(AD)模型大鼠脑组织白介素1β(IL-1β)、NO含量及nNOS免疫阳性神经元的影响以及药物的作用效果及机制,本研究用SD大鼠将鹅膏蕈氨酸(IBO)双侧海马立体定位注射造模,实验分为对照组、高剂量苦参碱治疗组、低剂量苦参碱治疗组、模型组和哈伯因组。检测大鼠大脑皮质和海马内IL-1β、NO的含量变化以及nNOS免疫阳性神经元的形态改变。结果显示:模型组大鼠大脑皮质和海马内IL-1β及NO的含量均显著高于对照组(P<0.01);高剂量治疗组大脑皮质和海马内IL-1β及NO的含量均低于模型组(P<0.05);模型组nNOS免疫阳性神经元有明显变性、数目减少;高剂量治疗组大鼠nNOS免疫阳性神经元的数目与模型组比较明显增多(P<0.05),变性有所减轻;但低剂量组的nNOS免疫阳性神经元数与模型组没有显著差异(P>0.05)。本文结果提示,模型组大鼠大脑皮质和海马内IL-1β及NO的含量均显著增高,可能为导致AD神经元损伤的原因之一,苦参碱注射液对AD神经元损伤的保护作用可能是通过下调IL-1β和NO而实现的。     

对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠海马CA3区细胞凋亡及caspase-12表达的影响

目的:研究对药酸枣仁(SZS)-合欢花(AJF)对抑郁模型大鼠海马CA3区细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(caspase-12)表达的影响,从内质网应激(ERS)角度探讨其抗抑郁作用机制。方法:将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(Control)、模型组(CUMS)、对药酸枣仁-合欢花组(SZS+AJF)、盐酸文拉法辛组(Venlafaxine),采用孤养加慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立抑郁症大鼠模型,并用旷场实验评价各组大鼠行为学改变。应用DNA原位末端缺口标记(TUNEL)法检测海马CA3区神经元凋亡情况,应用免疫组化检测海马CA3区caspase-12表达。结果:与Control组比较,CUMS组大鼠旷场实验得分降低,海马CA3区细胞凋亡率及caspase-12表达显著增加。与CUMS组比较,SZS+AJF组、Venlafaxine组大鼠旷场实验得分显著增加,海马CA3区细胞凋亡率及caspase-12表达显著减少。结论:对药酸枣仁-合欢花能显著改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,降低海马CA3区caspase-12表达,抑制海马CA3区细胞凋亡。     

苯妥英钠对应激大鼠海马NO变化的影响

目的:探讨应激对大鼠海马CA3区锥体细胞神经型一氧化氮合酶(nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及海马匀浆液中亚硝酸盐(NO₂^-)/硝酸盐(NO₃^-)含量的影响及苯妥英钠对它们的效应。方法:采用强迫游泳作为应激模型。利用免疫组织化学方法及计算机图像分析技术,定量测定各组大鼠海马CA3区神经元nNOS和iNOS的表达水平;采用硝酸还原酶法测定海马匀浆液中NO₂^-/NO₃^-的含量。结果:应激组大鼠海马CA3区锥体细胞nNOS表达的平均灰度值(155.42±3.77)显著低于对照组(164.54±4.62)和应激给药组(164.27±2.55)(P<0.01);应激组iNOS表达的相对切面面积比(5.87%±2.90%)显著高于对照组(0.90%±0.89%)和应激给药组(0.90%±0.88%)(P<0.01);应激组海马匀浆液中NO₂^-/NO₃^-含量(42.75μmol/L±14.49μmol/L)显著高于对照组(21.23μmol/L±6.99μmol/L)和应激给药组(18.40μmol/L±8.11μmol/L)(P<0.01),后两组间差异无显著性。结论:应激可诱导海马CA3区锥体细胞nNOS和iNOS表达水平增加及海马中NO含量升高,苯妥英钠能阻止慢性应激所致的海马CA3区锥体细胞nNOS和iNOS异常表达,从而抑制NO的过度生成。     

复方刺蒺藜苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及海马CNTF表达的影响

目的：观察刺蒺藜苷对慢性应激抑郁大鼠行为学及海马CNTF表达的影响.方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、复方刺蒺藜苷组、氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型.通过敞箱实验观察抑郁模型大鼠行为学改变并运用免疫组化和原位杂交方法探讨复方刺蒺藜苷对抑郁模型大鼠海马神经元细胞CNTF、CNTFmRNA表达的影响.结果：慢性应激抑郁大鼠敞箱实验中水平穿越格数、竖立次数、理毛时间有减少,中央格停留时间、粪便粒数均有增加.刺蒺藜苷和氟西汀可改善大鼠行为学变化.与模型组相比,复方刺蒺藜苷组大鼠海马神经元CNTF免疫反应阳性颗粒数目增多,神经元平均灰度值降低.结论：刺蒺藜苷能明显改善抑郁动物的各项行为学指标,增加海马CNTF、CNTF mRNA的表达具有抗抑郁作用.     

慢性应激对心肌梗死后大鼠模型行为学及海马BDNF的影响

目的:探讨慢性应激对心肌梗死后大鼠模型行为学及海马BDNF的影响.方法:建立急性心肌梗死模型.结合慢性不可预见的轻度应激和孤养制作心梗并抑郁复合大鼠模型.观察动物的体重变化和行为学指标,用Westernblot方法检测海马BDNF蛋白表达.结果:经过21天慢性不可预见轻度应激.模型组大鼠体重、糖水消耗和糖水偏爱百分比、敞箱试验得分均明显降低,纯水消耗显著增加;海马BDNF蛋白表达减少(P<0.05).结论:对急性心肌梗死大鼠采用21天慢性应激后,模型鼠体重下降、行为学明显异常,符合抑郁动物的行为学改变,且存在海马神经元可塑性降低的表现,这可能是心肌梗死并抑郁发病的机制之一.     

对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠学习记忆能力及BDNF-MEK-ERK-CREB细胞信号转导通路的影响

目的:观察对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠学习记忆能力及脑源性神经营养因子(BDNF)-丝裂原细胞外激酶(MEK)-细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)-环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号转导通路的影响,探讨对药酸枣仁(SZS)-合欢花(AJF)抗抑郁作用的机制。方法:将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组(control)、模型组(CUMS)、对药酸枣仁-合欢花组(SZS+AJF)、盐酸文拉法辛组(Venlafaxine)、PD184161组(PD),采用孤养加慢性不可预知性温和应激(CUMS)复制抑郁症大鼠模型,并用Morris水迷宫实验评价各组大鼠不同时间学习记忆能力的改变。应用ELISA法测定血清BDNF水平,应用real time RT-PCR法测海马CREB、BDNF mRNA表达,应用Western Blot法测定海马ERK、p-ERK、p-RSK及p-CREB蛋白表达。结果:与Control组比较,CUMS组大鼠学习记忆能力下降(从第14 d开始有统计学意义,P 0. 05或P 0. 01),血清BDNF含量减少(P 0. 01),海马CREB、BDNF mRNA和ERK、p-ERK、p-RSK、p-CREB蛋白表达量减少(P 0. 05或P 0. 01)。与CUMS组比较,SZS+AJF组、Venlafaxine组、PD组大鼠学习记忆能力提高(从第14 d开始有统计学意义,P 0. 05或0. 01),血清BDNF含量增加(P 0. 05),海马CREB、BDNF mRNA和ERK、p-ERK、p-RSK、p-CREB蛋白表达量增加(P 0. 05或P 0. 01)。与SZS+AJF组比较,PD组大鼠学习记忆能力减少(第21 d有统计学意义,P 0. 05),血清BDNF含量减少(P 0. 05),海马CREB、BDNF mRNA和ERK、p-ERK、p-RSK、p-CREB蛋白表达降低(P 0. 05)。结论:对药酸枣仁-合欢花能够提高抑郁模型大鼠的学习记忆能力,具有抗抑郁效应,其作用机制可能与提高抑郁模型大鼠BDNF-MEK-ERK-CREB信号转导通路的关键因子表达有关。     

慢性应激抑郁状态对大鼠海马神经元再生的影响

目的:探讨慢性应激性刺激引起的抑郁状态对大鼠海马神经元再生的影响。方法:建立大鼠慢性应激性抑郁症模型,通过开场实验和蔗糖饮水实验观察大鼠行为学变化;取大鼠脑冰冻切片行Doublecortin(DCX)免疫荧光检测海马新生神经元。结果:慢性应激抑郁模型大鼠开场实验水平运动得分和垂直运动得分降低,蔗糖偏嗜度降低,且体重明显减轻;免疫荧光结果显示慢性应激抑郁模型大鼠海马齿状回颗粒下层(subgranularzone SGZ)DCX阳性细胞减少。结论:慢性应激性刺激引起的抑郁状态下大鼠海马神经元再生能力减弱,提示海马神经元再生的损害可能参与了抑郁症的病理过程。     

运动预干预对睡眠剥夺大鼠学习记忆及海马nNOS表达的影响

目的:探讨跑台运动预干预对完全睡眠剥夺(TSD)大鼠空间学习记忆能力、海马单胺类神经递质水平和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组(CON)、运动组(EX)、完全睡眠剥夺组(TSD)及睡眠剥夺运动组(EX+TSD)。除CON组及TSD组大鼠,EX组和EX+TSD组大鼠进行跑台运动预干预4周,运动结束后建立大鼠72 h睡眠剥夺模型(小平台水环境法),然后运用八臂迷宫实验(ERM)评估大鼠空间学习记忆能力,用高效液相-电化学法检测大鼠海马单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)的表达水平,用免疫组化法检测海马一氧化氮合酶(nNOS)神经元的表达。结果:(1)与CON组比较,ERM实验中TSD组大鼠工作记忆错误次数(WME)、参考记忆错误次数(RME)均显著增多,正确反应的次数(CN)减少,完成八臂迷宫时间显著延长(P 0. 01);海马内DA及NE的水平均显著下降(P 0. 01),而5-HT的水平增加(P 0. 01),海马nNOS阳性细胞平均光密度显著增加(P 0. 01);(2)与TSD组比较,ERM实验中EX+TSD组大鼠WME及RME均显著减少,CN增多,完成八臂迷宫时间均显著缩短(P均0. 05); EX+TSD组海马DA的表达水平显著增加(P 0. 05),5-HT的表达水平下降(P 0. 05),NE的表达水平则无显著变化(P 0. 05),海马nNOS阳性细胞平均光密度显著下降(P 0. 05)。结论:规律的跑台运动预干预可以增强TSD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与此运动下调大鼠海马内nNOS活性、减弱高浓度NO的神经毒性纠正TSD大鼠单胺类神经系统紊乱,对睡眠剥夺引起的海马神经元损害具有保护作用有关。     

缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠大脑海马p-CREB阳性神经元数量的影响

目的探讨最佳剂量缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠行为及其大脑海马磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMP responsive element-binding protein,p-CREB))阳性神经元的影响。方法将35只大鼠随机均分为正常对照组、未用药模型组、阴性对照模型组、阳性对照模型组、低剂量缬草模型组、中剂量缬草模型组和高剂量缬草模型组。在用药期间,每周测试大鼠体质量、自来水及1%糖水摄取量1次。用药后,计数大脑海马神经元数量,确定缬草最佳剂量。然后根据前述方法,在灌药结束后灌注和固定所有大鼠。采用中性红染色、免疫组化等方法对大鼠海马p-CREB和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)阳性神经元进行检测。结果高剂量(100mg·kg-1·d-1)缬草能促使抑郁大鼠1%糖水摄取量恢复至正常水平,还可使抑郁大鼠大脑海马神经元以及p-CREB阳性神经元数量恢复到正常水平。正常对照组大鼠大脑海马神经元的BDNF染色较浅淡,其余各组大鼠大脑海马神经元的BDNF阳性染色没有明显差异。结论本研究高剂量(100mg·kg-1·d-1)缬草可能是治疗慢性应激导致大鼠抑郁症的最佳剂量。缬草可以改善抑郁大鼠的行为活动,恢复大脑海马神经元以及p-CREB阳性神经元数量到正常水平。     

Mice lacking rhes show altered morphine analgesia, tolerance, and dependence

Nitric oxide (NO) is an important messenger in the central nervous system to mediate male copulatory behavior. EGb 761, a standardized extract of Gingko biloba, has been reported to facilitate male copulation in rats. The present study is to determine the effects of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) in the medial preoptic area (MPOA) on copulation in male rats following EGb 761 treatment. Adult male rats were treated with 50mg/kg of EGb 761 or distilled water by oral gavage for 14 consecutive days. The animals were sacrificed approximately 14h after the last behavioral test and MPOA brain tissues were collected for nNOS immunohistochemistry. EGb 761 treatment for 14 days significantly increased the intromission frequency compared to the vehicle-treated controls on day 14. An increase in ejaculation frequency was also seen in the EGb 761-treated group compared to the vehicle-treated controls on day 14 and to the same group on day 0. However, EGb 761 treatment did not influence the number of nNOS-immunoreactive cells in the MPOA. These results suggest that enhanced male copulatory performance in sexually experienced rats administered EGb 761 may not be related to central nNOS activity in the MPOA.     

切割穹窿海马伞海马提取液和银杏叶提取物联合诱导海马NSCs向胆碱能神经元的分化

为探讨切割穹窿海马伞海马提取液和银杏叶提取物(extract of ginkgo bilobo,EGb)在海马NSCs向胆碱能神经元定向分化中的作用,分别制备大鼠穹窿海马伞切割侧和正常侧海马提取液;将从鼠胚海马中分离扩增的NSCs球分成4组,应用不同的培养液促其分化:(1)联合组:含切割侧海马提取液和银杏内酯的DMEM/F12培养基;(2)提取液组:含切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基;(3)EGb组:含银杏内酯的DMEM/F12培养基;(4)对照组:含正常侧海马提取液的DMEM/F12培养基。培养14d后行ChAT免疫荧光检测,计算ChAT阳性神经元的分化率,图像处理细胞面积和周长。结果显示联合组各项指标均明显优于其它各组(P<0.01);提取液组、EGb组各项指标也均优于对照组(P<0.05);细胞面积提取液组优于EGb组(P<0.05),细胞周长EGb组优于提取液组(P<0.05),两组ChAT阳性神经元分化率无明显差异(P>0.05)。上述提示切割穹窿海马伞的海马提取液和EGb联合应用可诱导海马NSCs分化为更多、更为成熟的胆碱能神经元。     

文拉法辛对抑郁模型大鼠认知功能及海马神经元凋亡的作用研究

目的：观察文拉法辛对抑郁模型大鼠认知功能、海马形态结构及其凋亡的作用,并研究其可能的作用机制。方法：100只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、抑郁模型组以及文拉法辛1、2、3组。抑郁模型组和文拉法辛组采取慢性无法预见性应激刺激（CUMS）及孤养21 d建立抑郁模型。建模成功后,文拉法辛1、2、3组分别腹腔注射文拉法辛5、15、45 mg/(kg•d),模型组注射盐水,连续14 d。对各组大鼠进行行为学测定,采用水迷宫方法对认知功能进行检测。尼氏染色法观察海马结构及形态,TUNEL检测海马神经元细胞凋亡率,Western blot方法测定海马PI3K、pAKt、mTOR、BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白的表达。结果：与模型组相比,文拉法辛1、2、3组自主活动总距离、糖水偏好率和消耗增加,强迫游泳不动时间、水迷宫逃避潜伏期和空间探索时间缩短,大鼠海马CA3区细胞形态改善显著,Tunel法测得海马神经元细胞凋亡率下降,且PI3K、pAKt、mTOR、BCL-2蛋白表达明显增加,BAX和Caspase-3的表达明显下降,上述各项指标均有显著性意义,且均具有浓度依赖性（P<0.05）。结论：文拉法辛能够改善抑郁模型大鼠的抑郁样行为和认知功能,并且能够抑制抑郁模型大鼠的海马神经元凋亡,可能与PI3K/Akt信号通路有关。     

Species,strain and developmental variations in hippocampal neuronal and endothelial nitric oxide synthase clarify discrepancies in nitric oxide-dependent synaptic plasticity

Nitric oxide (NO) has been implicated in long-term potentiation (LTP) in pyramidal neurons in cellular area 1 (CA1) of the hippocampus. However, considerable confusion exists about the exact role of NO, and the contribution of the endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and neuronal nitric oxide synthase (nNOS) isoforms of NO synthase to NO-dependent LTP (NO-LTP), with results often varying, depending on the organism and experimental paradigm used. Using immunohistochemistry and in situ hybridization, we contrast NO synthase expression and activity in rat, mouse, and human hippocampus. nNOS is prominently expressed in all CA1 pyramidal cells of C57B6 mice and humans, while in rats and SV129 mice, its levels are much lower and restricted to the caudal hippocampus. By contrast, eNOS is restricted to endothelial cells. We observe N-methyl-D-aspartate-dependent citrulline production in pyramidal cells of mouse hippocampus, which is absent in nNOS(Delta/Delta) animals. Finally, we observe robust nNOS expression in human CA1 pyramidal cells.The considerable axial, developmental, strain and species-dependent variations in nNOS expression in CA1 pyramidal neurons can explain much of the variation observed in reports of NO-dependent LTP. Moreover, our data suggest that NO produced by eNOS in endothelial cells may play a paracrine role in modulating LTP.     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠脂代谢及巨噬细胞功能的影响

目的： 研究银杏叶提取物（EGb）对2型糖尿病大鼠脂代谢及巨噬细胞功能的影响。 方法： SD大鼠分4组：正常对照组、高脂组、糖尿病组、EGb治疗组，治疗结束取血测血糖、血脂、血胰岛素并分别灌取4组大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞，测定巨噬细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）及丙二醛（MDA）的水平，并用RT-PCR方法测定大鼠肺泡巨噬细胞内CD36、PPARγ的基因表达水平。 结果： 糖尿病大鼠血糖、血胰岛素、总胆固醇（TC）、总甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）升高，经EGb治疗后，血糖、血胰岛素、TC、TG、LDL-C明显降低；糖尿病大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞内SOD活性下降、NO及MDA含量增高，经EGb治疗后，SOD活性升高、NO2-/NO3-及MDA含量下降；糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞CD36基因表达升高，PPARγ基因表达升高，经EGb治疗后，CD36基因表达继续升高但无显著差异、PPARγ基因表达继续升高。 结论： EGb对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化有较好的拮抗作用，并能降低一氧化氮含量，从而改善糖尿病时巨噬细胞功能；EGb可提高2型糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞CD36、PPARγ基因的表达水平，这可能是其降血脂和改善胰岛素抵抗的机制之一。     

姜黄素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及HMGB1和JNK表达的影响

 目的：探讨姜黄素对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆能力、海马高迁移率族框蛋白1 （HMGB1）及c-Jun氨基末端激酶（JNK）表达的影响。方法: 36只雄性SD大鼠随机分为4组：空白对照组（A组）、AD模型组（B组, 鹅膏覃氨酸Meynert基底核注射）、AD模型+姜黄素治疗组（C组,腹腔注射100 mg·kg-1·d-1持续6 d）和AD模型+溶剂对照组（D组, 腹腔注射4 mL/kg玉米油持续6 d）。Morris水迷宫测试大鼠平均逃避潜伏期（AEL）,免疫组化和Western blotting法检测海马HMGB1和JNK的表达。结果: 与A组相比,B和D组大鼠造模后各时点AEL明显延长（P＜0.05）,C组大鼠第5天和第6天 AEL较B组相应时点明显缩短（P＜0.05）;B组和D组海马存在HMGB1大量胞浆、胞外释放情况（P＜0.05）,而C组海马区HMGB1胞浆、胞外释放无明显差异（P＞005）。4组大鼠海马总HMGB1表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但B组和D组海马JNK表达水平增高（P＜0.05）。结论: 姜黄素能够改善AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制HMGB1的胞浆、胞外释放及JNK的表达下调有关。     

天然抗氧化剂减少神经根撕脱诱导的一氧化氮合酶表达和运动神经元死亡

为了研究抗老年性痴呆 990 1号和 TA990 1+银杏叶标准提取物合剂对臂丛神经根撕脱后前角运动神经元的神经元型一氧化氮合酶 ( n NOS)表达和存活的影响 ,用成年 SD雌性大鼠进行右侧臂丛 C5～ T1 神经根撕脱术后 ,随机分为撕脱组、撕脱 +TA990 1组以及撕脱 +TA990 1和 EGb761合剂组。对此三组每天分别进行腹腔注射 1ml生理盐水、0 .5 % TA990 1、0 .5 %TA990 1和 EGb761合剂。治疗 5 d、1、2、4和 6周后处死动物并进行 NADPH-d染色及中性红复染。定量比较各组 n NOS阳性和存活的运动神经元数量。结果证明 ,神经根撕脱后 5 d受损运动神经元开始表达 n NOS,2周时达高峰 ,随后下降至 6周。受损运动神经元的死亡从 2周开始 ,4～ 6周最明显。抗氧化剂治疗组 n NOS表达规律与对照组相似 ,但是阳性程度和阳性细胞数量均少于对照组 ,存活的运动神经元数量则明显多于对照组。撕脱后 4～ 6周 ,TA990 1治疗组抑制 n NOS表达和提高运动神经元存活的效果均明显优于 TA990 1和 EGb761合剂组。结论 :天然抗氧化剂可有效地减少臂丛神经根撕脱后 n NOS表达 ,提高受损运动神经元的存活。 TA990 1抑制 n NOS表达的作用强于 EGb761。     

急性乙醇中毒大鼠学习记忆行为的改变与脑组织NO和nNOS含量变化

目的：通过观察急性乙醇中毒对大鼠学习记忆的影响并测定脑组织中一氧化氮（NO）与神经型一氧化氮合酶（nNOS）含量的变化，探讨乙醇中毒影响学习记忆的分子机制。方法:成年SD大鼠随机分为2组，模型组腹腔1次性注射乙醇2.5 g/kg［用生理盐水配成含20%乙醇(W/V)溶液］制备急性乙醇中毒大鼠模型；对照组注射等容量的生理盐水。Y-型迷宫检测大鼠学习记忆成绩、硝酸还原酶法检测鼠脑海马CA1、新纹状体中NO的含量、免疫组化方法检测鼠脑海马CA1、纹状体、小脑中nNOS的含量。结果:（1）模型组大鼠达到学会标准所需要的训练次数（34.33±13.04）明显大于对照组（27.50±8.79），P<0.05；（2）海马CA1区NO的含量在模型组为23.09±9.60，明显高于对照组（8.46±5.67）（P<0.01）；新纹状体（尾壳核）NO的含量在模型组（19.46±8.25）也明显高于对照组（8.22±4.46），P<0.01；（3）海马CA1区nNOS阳性神经元的数量在模型组为18.22±7.47，明显高于对照组（10.15±4.24）（P<0.05）；新纹状体（尾壳核）nNOS阳性神经元的数量在模型组（11.38±5.00）也明显高于对照组（6.15±3.69），P<0.05。结论:乙醇的神经毒性作用可能与脑组织中nNOS和 NO信号通路有关。     

Acute and delayed restraint stress-induced changes in nitric oxide producing neurons in limbic regions

RATIONALE: Microinjection into the dentate gyrus of the hippocampus of N(omega)-nitro-l-arginine methyl ester hydrochloride (l-NAME), a nitric oxide synthase (NOS) inhibitor, induces antinociceptive effect 5 days after a single restraint episode. The mechanisms of this stress-antinociceptive modulatory effect have not been investigated but may involve plastic changes in the hippocampal formation (HF). OBJECTIVE: The objective of the present study was to investigate possible mechanisms of the stress-modulating effect on antinociception induced by NOS inhibition in the hippocampus. We analyzed the effects of restraint stress on neuronal NOS (nNOS) expression and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase histochemical activity (NADPH-d) in the HF and related brain regions. METHODS: Male Wistar rats (n=6-11/group) were submitted to a single (acute stress) or repeated (5 days) episodes of 2-h restraint. Control animals remained in their home cages being all animals daily handled during this period. In the fifth day, animals received unilateral microinjection of l-NAME (150 nmol/0.2 microl) or saline (control) into the dentate gyrus of the dorsal hippocampus (DG). Immediately before and after drug microinjection tail-flick reflex latency or hotplate licking reaction was measured. Animals were killed i. immediately; ii. 5 days after acute stress; or iii. after repeated stress. NADPH-d and nNOS expression were quantified in the HF, caudate-putamen, secondary somatosensorial, entorhinal and piriform cortices and amygdaloid complex. RESULTS: Five days after one or five restraint episodes l-NAME microinjection into the DG elicited antinociceptive effect (analysis of variance [ANOVA], P<0.05). Acute restraint stress induced a significant increase in the density of neurons expressing NADPH-d and nNOS in the amygdaloid nuclei. nNOS expression increased also in the DG and piriform cortex. Five days after a single or repeated restraint stress there was an additional increase in NADPH-d- and nNOS-positive neurons in CA1, CA3, and entorhinal cortex. No changes were seen in non-limbic regions such as the caudate-putamen and secondary somatosensorial cortex. CONCLUSION: The results confirm that the dorsal hippocampus participates in the modulation of stress consequences. They also show that a single stress episode causes acute changes in nitric oxide system in the amygdala complex and delayed modifications in the HF. The delayed (5 days) antinociceptive effect of NOS inhibition in the HF after a single restraint episode suggests that those latter modifications may have functional consequences. It remains to be tested if the acute amygdala and delayed hippocampal changes are causally related.     

母源性BDE-209暴露对仔鼠海马一氧化氮神经递质的影响

目的从一氧化氮神经递质角度探讨母源性BDE-209损伤仔鼠神经系统的可能机制。方法 3月龄wistar雌鼠自确定交配成功后随机分为实验组A、B、C、D和对照组E,通过胃灌方法建立自妊娠期至哺乳期的不同剂量BDE-209(100、300、600、1200mg/kg/d)的暴露模型,21天仔鼠断乳后各组随机选取10只仔鼠作为研究对象,应用光电比色法和放射免疫法分别测定各组仔鼠海马组织中一氧化氮(NO)含量、神经元型一氧化氮合成酶(nNOS)活性、环鸟苷酸(cGMP)含量。结果与对照组E相比,C、D组NO含量和nNOS活性明显增加(P<0.05);B、C、D组cGMP含量明显升高(P<0.05)。结论一定剂量的母源性BDE-209可能通过影响仔鼠NO神经信号递质系统影响其神经认知功能。