miR-125b-5p对喉鳞状细胞癌细胞能量代谢及增殖的影响

目的  探讨miR-125b-5p对喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）细胞能量代谢和增殖的影响及其可能的作用机制。方法 实验分为miR-125b-5p转染组（miR-125b-5p模拟物转染LSCC）和对照组（空质粒转染LSCC细胞）。采用RT-qPCR 检测miR-125b-5p在正常支气管上皮细胞和LSCC细胞中的表达,CCK-8和流式细胞术检测LSCC细胞增殖、凋亡情况,Western blot检测miR-125b-5p过表达后LSCC中HK2的表达,3H-2DG法和乳酸盐比色测定实验分别检测LSCC细胞葡萄糖消耗和乳酸产生的情况。结果 RT-qPCR实验结果显示,与正常支气管上皮细胞相比,LSCC细胞中miR-125b-5p的表达降低（0.68±0.03 vs 0.22±0.05,t=7.025,P=0.001）。CCK-8实验结果显示,转染72 h和96 h后,miR-125b-5p转染组LSCC细胞的增殖能力均较对照组明显降低（P<0.05）。流式细胞术检测结果显示,miR-125b-5p转染组LSCC细胞凋亡率较对照组升高 ［（37.52±2.34）% vs （12.46±3.52）%,t=7.025,P<0.001）］,但细胞集落形成能力降低（0.29±0.02 vs 1.02±0.03,t=5.689,P=0.005）;荧光素酶报告基因测定实验结果显示,miR-125b-5p转染组的荧光素酶活性低于对照组（0.32±0.03 vs 1.01±0.02,t=7.543,P=0.001）;Western blot法实验结果显示,miR-125b-5p转染组HK2蛋白表达水平较对照组降低（0.12±0.02 vs 0.75±0.03,t=5.875,P=0.023）;miR-125b-5p转染组葡萄糖消耗量［（3.85±0.86） dpm/mg vs （10.52±1.34） dpm/mg,t=6.118,P=0.005］以及乳酸产生量［（4.23±1.36） dpm/mg vs （10.96±2.45） dpm/mg,t=5.907,P=0.002］亦较对照组降低。结论 miR-125b-5p可能通过下调HK2表达降低喉鳞状细胞癌细胞的能量代谢和增殖能力,诱导细胞凋亡。     

食管鳞状细胞癌HPV 16/18型感染与p53表达的相关性研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16/18型在食管鳞状细胞癌中的感染情况及其与p53的关系。方法 采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测56例食管鳞状细胞癌手术切除组织（鳞癌组）和24名健康者正常食管组织（对照组）中HPV l6/18 E6、E7基因的表达,并根据其判断HPV感染情况;采用免疫组化SP法检测p53蛋白的表达水平。 结果 鳞癌组HPV感染率和p53蛋白阳性表达率均高于对照组（44.6% vs 12.5%,χ²=7.630,P=0.006;41.1% vs 4.2%,χ²=10.896,P<0.001）。在食管鳞癌组织中,HPV 16/18感染与病理分级、TNM分期和淋巴结转移有关（P<0.05）;且HPV16/18感染与p53蛋白表达呈正相关（r=0.565,P<0.001）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,HPV感染阳性、p53表达阳性患者中位OS均小于HPV感染阴性、p53表达阴性者（21个月 vs 39个月,χ²=4.306,P=0.038;17个月 vs 41个月,^χ2=5.868, P=0.015）。控制相关的潜在混杂因素后,Cox回归模型显示HPV感染（HR=1.834,95%CI：1.010~3.330,P=0.046）和p53阳性表达（HR=2.189,95%CI：1.182~4.054, P=0.013）均可增加食管鳞状细胞癌患者的死亡风险。结论 食管鳞状细胞癌中HPV感染和p53阳性表达均较高,可能共同促进食管鳞状细胞癌的发生、发展并影响其预后。     

抑癌基因TCF21启动子甲基化在肾癌诊断及预后中的意义

目的 探讨TCF21启动子甲基化在肾癌诊断与预后中的意义。方法 使用焦磷酸测序仪对样本的TCF21基因启动子甲基化水平进行定量检测,并进行统计学分析。结果 肾癌组织及尿液中TCF21基因甲基化水平明显升高（P=0.000,P=0.000）。肾癌组织TCF21基因甲基化水平与年龄（P=0.003）、吸烟史（P=0.018）、Fuhrman分级（P=0.046）及临床分期（P=0.048）有关, TCF 2 1 甲基化水平与年龄（ r=0 . 4 0 3 、P=0 . 0 0 2 ） 、吸烟史（r=0.321、P=0.017）和Fuhrman分级（r=0271、P=0.045）呈正相关。肾癌尿液中TCF21甲基化水平与肿瘤大小（P=0.000）、Fuhrman分级（P=0.013）及临床分期（P=0.020）有关,TCF21甲基化水平与肿瘤大小（r=0.662、P=0.000）、Fuhrman分级（r=0.662、P=0.010）和临床分期（r=0.662、P=0.017）呈正相关。TCF21高甲基化组（>35.42%）与TCF21低甲基化组（≤35.42%）患者术后生存率和总生存率差异有统计学意义（P=0.000,P=0.000）。肾癌组织中TCF21甲基化水平诊断肾癌的ROC曲线下面积高于尿液样本,差异具有统计学意义（P=0.004）。结论 TCF21与肾细胞癌的发生、发展及预后有关。联合检测肾细胞癌组织标本和尿液标本可作为诊断肾癌及判断预后等生物学行为的重要指标。     

CK-20和LGALS4在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的 探讨角蛋白-20（cytokeratin-20，CK-20）和半乳糖凝集素4（galectin-4，LGALS4）在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义。方法 选取2010年1月—2014年6月在张家口市第一医院手术且经病理证实的甲状腺乳头状癌患者128例为研究对象，免疫组化检测癌组织及相应癌旁正常甲状腺组织CK-20、LGALS4的表达；ROC曲线分析CK-20、LGASL4对甲状腺乳头状癌的诊断价值；多因素Cox回归分析影响患者无病生存期（disease-free survival，DFS）的因素。结果 甲状腺乳头状癌组织中CK-20阳性表达率高于癌旁正常组织，而LGALS4阳性表达率低于癌旁正常组织（均P＜0.05）；CK-20高表达、LGALS4低表达均与肿瘤远处转移、TNM分期、淋巴结转移有关（均P＜0.05）；CK-20与LGALS4表达水平呈负相关（r=-0.531，P＜0.001）；CK-20、LGALS4联合诊断甲状腺乳头状癌的曲线下面积、敏感度均优于其单独诊断（均P＜0.05）；CK-20阳性表达患者5年DFS低于阴性表达患者，而LGALS4阳性表达患者5年DFS高于阴性表达患者（均P＜0.05）；CK-20高表达、远处转移、淋巴结转移是DFS的独立危险因素，而LGALS4高表达是DFS的保护因素（均P＜0.05）。结论 甲状腺乳头状癌组织中CK-20与LGALS4表达呈负相关，CK-20高表达预示预后不良，而LGALS4高表达预示预后良好，两者有望成为监测甲状腺乳头状癌预后的生物标志分子。     

术前白蛋白与球蛋白比值对喉鳞状细胞癌患者预后的评估价值

目的 探讨术前白蛋白与球蛋白比值（albumin/globulin ratio,AGR）对喉鳞状细胞癌患者预后的评估价值。 方法 回顾性分析2008年1月至2017年12月于广西医科大学附属肿瘤医院头颈外科行喉癌手术治疗的147例患者的临床资料。通过X-Tile软件计算AGR的最佳截断值,并根据最佳截断值分为高AGR组（AGR＞1.31,n=98）和低AGR组（AGR≤1.31,n=49）,比较两组患者的临床病理特征及总生存期。结果 两组患者肿瘤部位分型、T分期、N分期、临床分期差异均有统计学意义（P＜0.05）;高AGR组3年、5年总生存率分别为88.5%、82.4%,低AGR组分别为70.1%、56.4%,生存曲线比较差异有统计学意义（χ²=16.639,P＜0.001）。单因素Cox回归显示,吸烟、肿瘤部位分型、组织学分级、T分期、N分期、临床分期、AGR与患者总生存期有关（P<0.05）;校正潜在的混杂因素后,多因素Cox回归显示AGR≤1.31是影响患者总生存期的独立危险因素（HR=2.098,95%CI：1.142~3.856,P=0.017）。结论 低AGR的喉鳞状细胞癌患者预后较差,AGR可作为预后评估的指标。     

miRNA-143在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的:分析miRNA-143在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及与临床病理特征的关系。方法:采用Real time-PCR法检测60例食管鳞状细胞癌组织及正常食管组织中miRNA-143的表达量,并分析表达量与临床病理特征的关系。结果:miRNA-143在食管鳞癌组织中的表达低于对应正常组织,其表达与肿瘤分期、淋巴结转移情况显著相关（P<0.05）,而与患者年龄、性别、肿瘤位置及肿瘤分化程度均无相关性（P>0.05）。miRNA-143的ROC曲线下面积AUC=0.875,其诊断食管鳞癌的灵敏度为86.5%,特异度为82.8%。结论:ESCC患者肿瘤组织中miRNA-143表达水平明显下降。miRNA-143可能成为食管鳞状细胞癌的潜在肿瘤标志物之一。     

中性粒细胞与淋巴细胞比值评估老年中晚期宫颈鳞状细胞癌患者同放化疗的疗效及预后的价值

目的 探讨老年中晚期宫颈鳞状细胞癌患者治疗前中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）与同步放化疗疗效及预后的关系。方法 回顾性分析2014年1月至2018年12月青岛市中心医院行同步放化疗的103例老年中晚期（ⅡB~ⅢB期）宫颈鳞状细胞癌患者的临床资料,分为高NLR组（NLR≥3.48）和低NLR组（NLR＜3.48）,比较两组疗效,并分析影响预后的因素。 结果 高NLR组有效率明显低于低NLR组（57.69% vs 84.31%,χ²=8.840,P=0.004）。NLR与患者年龄、病灶大小、组织分化程度无关（P>0.05）,与FIGO分期和淋巴结转移有关（P<0.05）。高NLR组中位OS低于低NLR组（24.0个月 vs 46.0个月,χ²=7.187,P=0.007）。多因素Cox回归分析显示,NLR≥3.48是影响老年中晚期宫颈癌鳞状细胞患者OS的独立危险因素（HR=1.937,95%CI：1.086~3.456,P=0.025）。结论 老年中晚期宫颈鳞状细胞癌患者治疗前NLR高同步放化疗疗效较差,预后不良。     

miRNA-145、Ki-67、survivin、Aurora-b在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨miRNA-145、Ki-67、生存素(survivin)、Aurora-b在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测85例LSCC组织及85例癌旁正常组织中miRNA-145的表达量,采用免疫组化法检测LSCC组织中Ki-67、survivin、Aurora-b的表达水平,分析miRNA-145、Ki-67、survivin、Au-rora-b表达情况与LSCC患者临床特征的关系及四者的相关性.结果 LSCC组织中miRNA-145的表达量明显低于癌旁正常组织(P﹤0.01).LSCC组织中Ki-67、survivin、Aurora-b的阳性表达率明显高于癌旁正常组织,miRNA-145的阳性表达率明显低于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01).miRNA-145、Ki-67、survivin、Aurora-b的阳性表达率与LSCC患者的TNM分期和淋巴结转移情况有关(P﹤0.01),而与患者的年龄、性别、肿瘤直径及分化程度无关(P﹥0.05).LSCC组织中miRNA-145与Ki-67、survivin、Aurora-b的表达均呈负相关(P﹤0.01),Ki-67、survivin及Aurora-b的表达两两之间呈正相关(P﹤0.01).结论 miRNA-145在LSCC组织中低表达,Ki-67、survivin、Aurora-b在LSCC组织中高表达,miRNA-145、Ki-67、survivin、Aurora-b的阳性表达率与LSCC患者的TNM分期和淋巴结转移情况密切相关,四者联合检测可能成为LSCC诊断的有效指标.     

基于数据挖掘分析GOLM1基因在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨GOLM1基因在前列腺癌中的表达及临床意义。方法 利用Oncomine数据库分析GOLM1基因在前列腺癌与其癌旁正常组织组织中的表达情况，从TCGA数据库中下载相关的RNA-Seq数据和临床资料，分析GOLM1基因表达与患者临床病理学特征及预后的关系。结果 Oncomine及TCGA数据库分析结果显示，GOLM1基因在前列腺癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织（P<0.001）。相关分析结果显示，TCGA数据库中547例前列腺癌患者GOLM1 mRNA表达水平与其年龄、临床T分期、病理学T分期及Gleason评分的相关性不大；低表达GOLM1基因的患者总生存期显著较高表达者长（HR=4.50，95%CI：3.77~5.37，P=0.038）；ROC曲线分析显示最佳截断点为8.889，灵敏度为80.5%，特异度为80.8%，ROC曲线下面积为0.862（95%CI：0.813~0.912）。结论 GOLM1基因在前列腺癌组织中高表达，且与患者不良预后相关，可作为前列腺癌较好的诊断标志物。     

口腔鳞状细胞癌患者唾液中癌胚抗原、过氧化氢酶及细胞角质蛋白19片段抗原21-1的表达水平及临床意义

目的 探讨口腔鳞状细胞癌患者唾液中癌胚抗原(CEA)、过氧化氢酶(CAT)及细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)的表达水平及临床意义.方法 选取84例口腔鳞状细胞癌患者、50例口腔良性肿瘤患者及50例体检健康者,分别作为口腔鳞状细胞癌组、良性肿瘤组和健康对照组,检测3组研究对象唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1水平,比较不同临床特征口腔鳞状细胞癌患者唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1的水平.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1水平对口腔鳞状细胞癌的诊断价值.结果 口腔鳞状细胞癌组、良性肿瘤组患者唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1水平均高于健康对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);口腔鳞状细胞癌组患者唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1水平均高于良性肿瘤组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).临床分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移的口腔鳞状细胞癌患者唾液中CEA、CYFRA21-1水平均明显高于临床分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01).唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1水平诊断口腔鳞状细胞癌的ROC曲线下面积分别为0.790、0.750和0.896,P﹤0.05,截断值分别为38.50 ng/ml、46.50 U/ml和50.20μg/L,灵敏度分别为72.20％、64.50％和80.00％,特异度分别为65.50％、61.00％和78.50％.结论 口腔鳞状细胞癌患者唾液中CEA、CAT及CYFRA21-1水平均升高,CEA和CYFRA21-1水平与患者的临床分期及淋巴结转移情况有关.     

Upregulation of miR-129-5p affects laryngeal cancer cell proliferation,invasiveness, and migration by affecting STAT3 expression

Tumor Biology - microRNA-129-5p may have a relationship with laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC), but the expression and function of miRNA-129-5p are not fully understood. This study was...     

钙通道蛋白α2δ1及miR-107在喉癌组织中的表达和临床意义

目的:检测钙通道蛋白α2δ1及microRNA-107(miR-107)在喉癌组织中的表达情况及相互作用关系,探讨它们在喉癌发病中可能发挥的作用。方法:收集40例喉癌患者的癌组织和临近正常组织,分别检测两种组织中α2δ1及其编码基因CACNA2D1和miR-107的表达情况,并且分析它们的表达情况是否与患者的临床特征及预后具有相关性,使用生物信息学方法寻找CACNA2D1和miR-107潜在结合位点,双荧光素酶报告基因去验证,并使用喉癌细胞TU212人为过表达和敲减miR-107后行细胞迁移和增殖实验。结果:免疫荧光和蛋白质印迹分析结果表明,喉癌组织中α2δ1的表达较高（P＜0.05）。RT-qPCR结果显示喉癌组织中miR-107的表达水平显著降低（P＜0.05）。miR-107的低表达与喉癌患者的淋巴结转移、肿瘤分化和原发部位有关（P＜0.05）,但与年龄和肿瘤TNM分期无关（P＞0.05）。CACNA2D1的高表达与喉癌患者的淋巴结转移、肿瘤分化和TNM分期密切相关（P＜0.05）,但与LSCC患者的年龄和肿瘤原发部位无关（P＞0.05）;CACNA2D1的表达水平与患者的复发和3年生存率有相关性（P＜0.05）,而miR-107与之无相关性（P＞0.05）;双荧光素酶报告基因实验证实miR-107与CACNA2D1的3'-UTR两个位点结合,在TU212细胞中过表达miR-107会抑制细胞的迁移和增殖,敲减后则增强喉癌细胞的迁移和增殖能力（P＜0.05）。结论:在喉癌患者体内,钙通道蛋白α2δ1扮演着促癌的作用,miR-107可以通过直接靶向调节CACNA2D1从而抑制喉癌细胞的迁移和增殖。     

喉鳞癌组织中SPARC基因的差异表达

 目的 探讨富含半胱氨酸的酸性蛋白（SPARC）在喉鳞癌的增殖、侵润和转移中的作用及指导意义。方法 用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析SPARC在不同的喉鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的差异表达量。利用免疫组化技术研究SPARC在喉鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的表达差异,同时对蛋白表达进行定位。结果 RT-PCR分析SPARC在20对配对标本中的表达,在其中16对喉鳞癌组织中的表达明显高于其相应的正常粘膜组织,在4对中差异表达不明显,R=80.0%（有差异的例数/总例数）。免疫组化技术分析了30对配对喉鳞癌手术标本的石蜡切片（肿瘤组织和正常粘膜组织）,其中25对SPARC蛋白在癌巢细胞中的表达高于相邻的正常粘膜组织,5例在癌巢细胞中和相邻的正常粘膜组织内表达不明显,R=83.3%。同时对SPARC蛋白在不同分化程度的喉癌组织中的表达进行分析,发现SPARC在中低分化喉癌中的表达与高分化喉癌无显著差异（P〉0.05）。而在有淋巴结转移的喉癌的表达比无淋巴结转移的高（P=0.036）。细胞核和细胞浆均有表达。结论 通过mRNA和蛋白水平分析得出,SPARC和喉鳞癌的发生密切相关,喉鳞癌淋巴结转移时SPARC表达升高。     

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2在喉鳞癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的 检测促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)蛋白在喉鳞癌组织及细胞系中的表达,探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系.方法 采用Western blot技术,检测EphA2蛋白在喉鳞癌细胞株Hep-2及头颈部永生化上皮细胞株NP-69中的表达;采用免疫组织化学技术,检测EphA2蛋白在88例喉鳞癌及16例癌旁黏膜组织中的表达,并分析EphA2与临床病理特征和预后的关系.结果 EphA2蛋白在Hep-2细胞株中的表达高于NP-69细胞株.EphA2蛋白在喉鳞癌组织及癌旁黏膜组织中的刚性表达率分别为80.7%和43.8%,差异有统计学意义(P＜0.001).EphA2高表达与喉鳞癌的临床分期(P=0.005)、淋巴结转移(P=0.025)和复发(P=0.021)密切相关.Kaplan-Meier生存分析结果显示,EphA2高表达组与低表达组的5年无瘤生存率分别为33.3%和63.2%,5年生存率分别为46.7%和81.6%,差异有统计学意义(P=0.003,P=0.002).EphA2表达水平结合临床分期对喉鳞癌预后具有更好的预测价值.单因素及多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,EphA2表达水平为喉鳞癌预后的独立影响因素(P=0.019).结论 EphA2蛋白在喉鳞癌组织和细胞中的表达显著升高,且其高表达与喉鳞癌患者的复发、转移及预后密切相关.EphA2可能在喉鳞癌的发生、发展中有重要作用,有望成为评估喉鳞癌复发、转移及预后的重要分子标志物.

Abstract：

Objective To evaluate the expression of EphA2 protein in tissue specimens and cell lines of laryngeal squamous cell carcinoma ( LSCC), and to further study the correlation of EphA2 protein expression with clinicopathological characteristics and prognosis in LSCC. Methods Western blot was applied to assess the EphA2 protein expression in LSCC cell line Hep-2 cells and the head and neck immortalized epithelial cell line NP-69 cells. Immunohistochemical staining was performed on paraffin sections of 88 cases of LSCC specimens and 16 cases of adjcent normal tissue samples to investigate the EphA2 protein expression, and to futher elucidate its correlation with clinicopathological characteristics.Results Compared with the NP-69 cells, EphA2 expression in LSCC cell line Hep-2 cells was upregulated.The positive rates of EphA2 expression in LSCC and adjcent normal tissues samples were 80. 7% and 43.8%,respectively, with a significant difference between the two groups ( P ＜ 0. 001 ). EphA2 overexpresion was closely correlated with clinical stage ( Ⅰ + Ⅱ / Ⅲ + Ⅳ, P = 0. 005 ), metastasis ( P = 0. 025 ) and recurrence(P = 0. 021 ) in LSCC. Furthermore, patients with EphA2 overexpression had poorer tumor-free survival and 5-year overall survival compared with that in patients with low EphA2 expression (33.3% vs.63.2%, P =0.003; 46.7% vs. 81.6%, P = 0. 002 ). EphA2 expression combined with clinical stage provided a better predictive value in prognosis. Univariate and multivariate Cox regression analysis revealed that EphA2 expression is an independent prognostic factor for patients with LSCC( P =0.019). Conclusions The results of this study demonstrate that EphA2 protein expression is significantly increased in LSCC tissues and cell lines, and EphA2 protein overexpression is associated with tumor recurrence, metastasis and poorer prognosis in LSCC patients. These results suggest that EphA2 may play a critical role in the initiation and progression of LSCC, implicating EphA2 as a valuable marker for the prediction of recurrence, metastasis and prognosis in LSCC.     

Low expression of lncRNA SBF2-AS1 regulates the miR-302b-3p/TGFBR2 axis,promoting metastasis in laryngeal cancer

The 5-year survival rate of laryngeal cancer continues to decline, and the laryngeal particularity of the anatomy adversely affects the patient's quality of life. Emerging evidence suggests that long noncoding RNAs (lncRNAs) are closely correlated to key steps in the malignant progression of cancer cells. In this study, we report the role of lncRNA SBF2-AS1/miR-302b-3p/TGFBR2 interactions in the metastasis of laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). We verified that SBF2-AS1 was significantly downregulated in LSCC tissues and cell lines using qRT-PCR analysis. Its low expression was correlated to lymph node metastasis and an advanced clinical stage. More importantly, LSCC patients with low expression of SBF2-AS1 tended to have a poor prognosis. Based on this, we performed gain-of-function and loss-of-function experiments in LSCC cell lines. The results confirmed that knocking down SBF2-AS1 can promote the metastasis of LSCC cells and enhance epithelial–mesenchymal transition phenotype, while the upregulation of SBF2-AS1 expression resulted in the opposite. Our in vivo model verified that SBF2-AS1 overexpression could inhibit LSCC cell metastasis. Subsequent mechanistic studies revealed that SBF2-AS1 acted as a competing endogenous RNA that upregulated the expression of TGFBR2 by endogenous sponging for miR-302b-3p in LSCC cell lines. Moreover, miR-302b-3p overexpression reversed the inhibitory effects on LSCC metastasis induced by upregulation of SBF2-AS1 expression, and inhibition of TGFBR2 expression reversed the effect of SBF2-AS1 on metastasis. Our study proposes SBF2-AS1 as a biomarker to predict the prognosis of LSCC patients and a novel potential therapeutic target.     

喉癌及癌旁组织端粒酶活性检测在喉癌手术切缘定界中的意义

目的探讨喉鳞状细胞癌、相应癌旁切缘组织的端粒酶活性表达及其在喉癌手术定界研究中的意义.方法采用多聚酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)对47例喉鳞状细胞癌、21例不同距离的相应癌旁组织、20例喉炎性息肉组织的端粒酶活性进行定量检测.结果47例喉癌组织中39例端粒酶呈阳性(83%),而20例喉炎性息肉组织端粒酶均为阴性,两组具有显著性差异(P＜0.001).21例癌旁5 mm处的切缘组织中有6例端粒酶呈阳性(28.6%),但其活性水平均低于相应原发肿瘤组织.而10 mm处的切缘组织端粒酶均呈阴性,两组差异有显著性(P＜0.001).结论端粒酶在喉癌组织中有较高的表达,在不同距离的癌旁切缘组织中有不同程度的表达.喉癌及癌旁组织端粒酶活性可能作为预测喉癌浸润性的指标.可望从分子水平评估喉癌手术的切缘状态,以期为指导喉癌手术分子定界提供客观而有价值的资料.     

MiR-21/miR-375 ratio is an independent prognostic factor in patients with laryngeal squamous cell carcinoma

We sought to identify microRNAs that exhibit altered expression in laryngeal squamous cell carcinoma (SCC) and to determine whether microRNA expression is predictive of disease. This study was divided into three steps: (1) The expression of six miRNAs, such as up-regulated miR-223, miR-142-3p, miR-21, miR-16, miR-23a and down-regulated miR-375, was evaluated using total RNA isolated from freshly-frozen primary tumors and non-cancerous laryngeal squamous epithelial tissues and analyzed using quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). (2) We also investigated the mRNA expression levels of processing elements (RNASEN, DGCR8, and DICER1) that participate in miRNA-biogenesis pathway. (3) We analyzed the relationships between the expression levels of these miRNAs and the clinicopathologic parameters of laryngeal SCC patients. In this study, we found that: (1) A marked difference in the microRNA expression pattern was observed between tumors and non-cancerous tissue. With regard to miRNA-processing elements, the expression level of RNASEN was higher in laryngeal SCC than in normal epithelium (P<0.01). (2) The miR-21/miR-375 expression ratio was highly sensitive and specific for disease prediction. Kaplan-Meier analysis revealed a significant association between high expression of miR-21/miR-375 in cancerous tissue and a worse prognosis (p=0.032). (3) Furthermore, the expression ratio of miR-21/mir-375 in patients with stage (III-IV) tumors was significantly higher than that in those with stage (I-II) tumors (p=0.006). These data suggest that the pattern of microRNA expression in primary laryngeal SCC tissues is exhibiting strong predictive potential.     

喉鳞状细胞癌中SIAH2表达的预后价值

  目的  观察E3泛素连接酶SIAH2在喉鳞状细胞癌组织中的表达, 探讨其在喉鳞状细胞癌中表达的预后价值。  方法  应用免疫组织化学染色法检测119例喉组织标本SIAH2的定性表达, Western blot方法检测喉新鲜组织中SIAH2的定量表达, 结合患者5年随访资料, 利用Kaplan-Meier法绘制生存曲线, Log-rank法分析SIAH2的表达水平与喉鳞状细胞癌患者预后的关系, Cox比例风险回归模型分析喉鳞状细胞癌患者预后的独立预测因素。  结果  SIAH2在喉鳞状细胞癌中阳性表达率为77.19%, 显著高于不典型增生(53.13%)和癌旁正常喉组织(26.67%), 差异具有统计学意义(χ2=21.02, P＜0.001)。SIAH2的表达与组织学分级、临床分期及淋巴结转移相关(均P＜0.05);在正常喉组织(1.25±0.04)、不典型增生(1.38±0.05)及喉鳞状细胞癌组织(1.44±0.07)中SIAH2的相对表达量逐渐升高(F=61.811, P＜0.001);SIAH2阳性与阴性患者的5年生存率分别为18.18%和58.33%(χ2=5.720, P= 0.017), SIAH2阳性与阴性患者的中位生存时间分别为25个月和60个月(P＜0.05);多因素回归分析表明高表达SIAH2是喉鳞状细胞癌患者总生存期的独立预测因子。  结论  SIAH2可能作为一个癌基因参与喉鳞状细胞癌的发生发展, 过表达SIAH2与喉鳞状细胞癌患者的不良预后有关, 提示SIAH2作为一个潜在的靶基因可能对喉鳞状细胞癌的治疗有帮助。      

miR-24 functions as a tumor suppressor in Hep2 laryngeal carcinoma cells partly through down-regulation of the S100A8 protein

microRNAs, a family of small non-coding RNAs, regulating approximately 30% of all human genes are deeply involved in the pathogenesis of several types of cancers, including laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). Here, we demonstrate that miR-24 is down-regulated in human LSCC tissues. Ectopic expression of miR-24 in Hep2 cells significantly induced cell morphology changes and inhibited cell proliferation and invasion ability in vitro by targeting S100A8 at the translational level. Meanwhile, miR-24 could significantly inhibit Hep2 cell invasion after S100A8 protein blockade. In conclusion, our results suggest that miR-24 may function as a tumor suppressor in LSCC through down-regulation of S100A8, which suggests that miR-24 could serve as a novel potential maker for LSCC therapy.