HOXA11在人子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及与不育的关系

目的检测HOXA11蛋白在正常月经周期子宫内膜、早孕蜕膜和不明原因不育子宫内膜组织中的表达,探讨HOXA11与不明原因不育及雌孕激素受体(ER、PR)表达的相关性。方法采用免疫组织化学和Western-Blot方法对38例正常子宫内膜、15例早孕蜕膜和19例不明原因不育子宫内膜组织中HOXA11、ER及PR的表达。结果HOXA11蛋白在子宫内膜腺上皮和基质细胞均有表达,以分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜表达量较高;在不育内膜的表达量显著降低(P<0.05);ER、PR在各组表达量的变化与HOXA11相同,即分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜的表达量较高,而在不育内膜的表达量显著下降(P<0.05)。结论HOXA11基因在着床期子宫内膜的分化、发育以及着床后妊娠的维持起一定作用;HOXA11表达量下降与ER、PR表达量降低相关;HOXA11表达下降或缺失可能是女性不明原因不育的原因之一。     

孕酮对培养人子宫内膜腺上皮细胞HOXA11基因表达的影响

目的研究孕激素对人子宫内膜腺上皮HOXA11基因表达的影响,初步探讨其影响机制。方法6例增殖期子宫内膜腺上皮细胞进行原代培养,在细胞生长汇合时,分别加入孕酮或孕酮+17β-雌二醇;米非司酮(RU486)预处理后加入孕酮或孕酮+17β-雌二醇培养4、68、d,提取细胞总RNA。用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HOXA11基因表达量。结果在原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞中加入孕酮或孕酮+17β-雌二醇,第4天时HOXA11基因表达量增加,第6天达高峰,第8天时有所下降;孕酮+雌激素的作用无叠加效应;经RU 486预处理后,上述作用消失。结论孕酮对原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞HOXA11基因的表达具有正调控作用,这种作用由孕酮受体介导。     

每周一次口服米非司酮用于避孕的机理研究

目的探讨每周一次口服米非司酮避孕的机理。方法14例有正常月经周期的健康妇女随机分成两组,自月经周期第2～3日开始,每周一次口服米非司酮,共6个月。A组每周口服米非司酮25mg,共8例,B组每周口服米非司酮50mg,共6例。两组妇女于服药前1周期和随机选择服药后的1个周期进行阴道超声监测排卵,然后取子宫内膜组织,应用免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-26的表达。结果A组有6例妇女在取材周期有排卵,B组有3例妇女有排卵。14例妇女对照周期子宫内膜均表现典型的分泌中期特征,服药周期的内膜标本呈现不同程度的变化。与对照周期相比,服药后两组MMP-9和MMP-26在子宫内膜腺上皮和基质细胞的表达均显著降低(P<0.01)。结论每周一次口服25或50mg米非司酮用于常规避孕不能完全抑制排卵,但对子宫内膜的发育产生影响,其机理可能是通过MMP-9和MMP-26表达的改变影响子宫内膜的组织重建和胚胎着床,从而发挥避孕作用。     

层粘连蛋白、纤粘连蛋白、IV型胶原在人月经周期子宫内膜中的表达

目的　研究细胞外基质蛋白层粘连蛋白 (LN)、纤粘连蛋白 (FN)和IV型胶原 (IVCL)在正常人月经周期子宫内膜中的表达。　方法　采用免疫组织化学方法检测 4 9例正常月经周期子宫内膜中LN、FN、IVCL蛋白的表达。　结果　LN主要分布于腺上皮及腔上皮基底膜 ,分泌中期表达最强。FN主要分布于间质 ,腔上皮及腺上皮基底膜也均有表达 ,分泌中期含量丰富。IVCL在腺上皮基底膜的表达分泌中期最强 ,在间质的表达分泌早期最强 ,分泌中、晚期表达逐渐减弱。LN、FN、IVCL在血管基底膜上均有表达 ,无周期性变化。　结论　LN、FN、IVCL在月经周期子宫内膜中的表达随月经周期而变化。     

实时荧光定量聚合酶链反应技术检测人早孕蜕膜和黄体中期子宫内膜白血病抑制因子的表达

目的探讨白血病抑制因子(LIF)在人早孕期子宫蜕膜和黄体期子宫内膜的表达情况。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术,对36例正常早孕子宫蜕膜和34例输卵管阻塞妇女黄体中期子宫内膜进行LIF定量检测。结果黄体中期子宫内膜LIF表达量高于早孕期子宫蜕膜组织,表达中位数(M)分别为240.00和46.50 ng/L。两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论LIF基因在黄体中期(胚泡着床期)子宫内膜表达量较高,在早孕期子宫蜕膜表达量较低,提示黄体中期和早孕期LIF基因表达量的差异与胚泡着床和妊娠维持的不同生理阶段有关。     

原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达

目的 :探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-1 0基因的表达。方法 :采用原位杂交的方法。结果 :HOXA-1 0基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达 ;中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期 ,且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论 :( 1 ) HOXA-1 0基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。 ( 2 ) HOXA-1 0基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。     

胰岛素样生长因子结合蛋白1-3在人早孕期蜕膜和绒毛中的表达及其作用

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白1-3(IGFBP1-3)在早孕期蜕膜和绒毛中的表达及其作用。方法选取早孕5~7周行人工流产术的蜕膜和绒毛标本共48例,每一孕周分早、中、晚三个时期,每个时期5~6例,以分泌中期(周期第21天)子宫内膜标本为对照。采用免疫组织化学LsAB法和计算机图像分析法对IGFBP1-3在围着床期子宫内膜、蜕膜和绒毛滋养细胞的表达进行定位和定量分析。结果IGFBP1-3在子宫内膜腺、腔上皮、蜕膜细胞和绒毛滋养层中都有表达,其表达在孕5~6周达峰值,与对照的分泌中期内膜比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论IGFBP1-3在早孕期表达增强,推测可能参与了子宫内膜的蜕膜化、滋养层细胞侵袭性以及早期胚胎发育的调节过程。     

无排卵性功能失调性子宫出血患者子宫内膜雌、孕激素受体及基质金属蛋白酶表达变化的研究

目的研究无排卵性功能失调性子宫出血(功血)患者子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、IV型胶原、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)的表达,探讨无排卵性功血的发病机制。方法采用免疫组化法检测20例正常增殖期子宫内膜(对照组)和66例无排卵性功血患者(病例组)子宫内膜腺上皮和基质细胞ER、PR、IV型胶原、MMP-9及TIMP-1表达。结果病例组子宫内膜腺上皮和基质ER、PR表达高于对照组(P<0.05),MMP-9水平明显增加(P<0.05),MMP-9/TIMP-1比值升高(P<0.01),IV型胶原含量明显下降(P<0.01)。相关分析显示,无排卵性功血患者子宫内膜MMP-9水平与ER、PR均呈正相关(r=0.605,P<0.05;r=0.697,P<0.05)。结论无排卵性功血患者子宫内膜出血原因可能与雌激素作用下ER、PR表达失调有关,且MMP-9水平异常升高,导致细胞外基质过度降解,临床表现为子宫不规则出血。     

骨桥蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达

目的研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在人正常月经周期子宫内膜的表达。方法采用免疫组织化学法对51例人正常月经周期子宫内膜OPN蛋白质进行定位和定量检测,Western blotting法测定增殖期及分泌期OPN蛋白水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测18例人正常月经周期子宫内膜增殖期及分泌期OPN mRNA的表达。结果OPN蛋白质主要分布在正常子宫内膜腺上皮细胞,增殖早期、中期无表达,增殖晚期出现,分泌中期、晚期表达最强。月经期子宫内膜腺上皮细胞表达较强。OPN mRNA表达分泌期强于增殖期(P<0.05)。Western blotting检测结果显示正常子宫内膜组织中存在OPN蛋白,分泌期含量较高。结论OPN蛋白质及mRNA在正常子宫内膜中的表达呈现明显周期依赖性。分泌中、晚期表达增强提示其可能参与胚胎着床。     

白血病抑制因子在小鼠围着床期子宫内膜的表达

采用逆转录 -聚合酶链反应和免疫印迹法 ,研究了白血病抑制因子 (L IF)m RNA和蛋白在小鼠围着床期子宫内膜的表达规律。结果 :L IF m RNA在未孕期子宫内膜表达量极低 ,孕期升高 ,孕第四天达峰值 (P<0 .0 1 ) ,此后逐渐下降 ;LIF蛋白与 m RNA的表达规律一致 ,其水平在孕第四天达最高 ,显著高于未孕期 (P<0 .0 1 )。结果表明 L IFm RNA和蛋白孕早期子宫内膜的表达高峰与着床期一致 ,它可能参与了胚泡着床的启动     

原位杂交检测孕酮受体mRNA在周期子宫内膜的表达

应用地高辛标记的探针进行原位杂交，检测周期内膜各组分的孕酮受体（ＰＲ）ｍＲＮＡ的表达。内膜取自子宫肌瘤患者，子宫全切术后即取内膜及部分肌层，储于液氮。据月经史及形态表现将内膜分为三期：增殖、分泌早期及中晚分泌期。结果显示，ＰＲｍＲＮＡ在子宫内膜的表达有明显的组织／细胞差异。基质细胞普遍表达ＰＲｍＲＮＡ，增殖期与分泌期比较无明显差异。中晚分泌期内膜腺体细胞ＰＲｍＲＮＡ的表达极低甚至不表达，且无明显的表浅及深层的表达差异。提示子宫内膜孕酮受体至少在腺体上可能存在转录水平的调节。     

米非司酮对子宫内膜整合素亚单位α4和β3表达的影响

为探讨米非司酮对与子宫内膜接受性建立相关的整合素的影响。对 1 9例正常生育妇女进行两个连续月经周期的前瞻性、自身对照研究。应用免疫组织化学方法检测口服米非司酮前后种植窗期子宫内膜整合素亚单位α 4(1 9例 )和β 3 (9例 )、以及孕激素受体 (PR,1 9例 )表达的情况 ,应用 HSCORE评分作半定量分析 ,用非参数 Wilcoxon检验作统计学处理。结果 :种植窗期正常子宫内膜腺体及血管内皮表达整合素亚单位 α4和β3 ;黄体中期服用米非司酮 5 0 mg,明显降低整合素亚单位 α4和 β3、以及 PR在子宫内膜腺体的表达。提示损害子宫内膜接受性是米非司酮用于紧急避孕的机制之一 ;整合素亚单位 α4和 β3在子宫内膜腺体的表达受孕激素的调节。米非司酮降低整合素亚单位 α4和 β3在子宫内膜腺体的表达可能与其降低腺体 PR的表达有关     

Expression of osteopontin in human endometrium throughout menstrual cycle

<正> Objective:To analyze mRNA and protein expression of osteopontin(OPN)in human endome-trium throughout menstrual cycle.Methods:Immunohistochemieal method was used to determine the level and the location ofOPN in normal cycling endometrium of 50 women.Western Blot analysis was also used to detectthe existence of OPN at proliferative and secretory phases in six samples.The levels of OPNmRNA in 18 samples were measured by RT-PCR.Results:The OPN mainly expressed in human endometrial glandular epithelium but not instromal cells.The expression was highest at mid and late secretory phases and menstruous phaseas well.No expression was found in early and mid proliferative endometria.Two subtypes ofOPN proteins(40 kDa-75 kDa)were detected by Western blot analysis in homogenized endome-tria at secretory phase.The level of OPN mRNA in secretory phase endometrium was significantlyhigher than that in proliferative phase.Conclusions:OPN was only found in endometrial glandular epithelial cells,and the OPN andits mRNA showed a pronounced cycle-dependent expression in human endometrium,higher ex-pression at mid and late secretory phases and menstruous phase.It's probably involved in embry-onic implantation and endometrial shedding.     

Expression Level of Hoxa-10 is decreased at time of implantation in glandular epithelium of human endometrium

Aim: To explore the connection between Hoxa-10 and humanimplantation by observing the expression pattern of Hoxa-10 in hu-man endometrium during normal menstrual cycle. Methods:Human Hoxa-10 Riboprobe was prepared and the expression ofhomeobox gene Hoxa-10 in the human endometrium during men-strual cycle was determined through in situ hybridization. Re-sults: Hoxa-10 expressed in both glandular cells and stromalcells at proliferative phase and early secretory phase. But the ex-pression of Hoxa-10 was markedly decreased or disappeared inglandular epithelium at the mid secretory phase, which correspondsto the time of implantation, and at late secretory phase. Conclu-sion; The results suggest that Hoxa-10 may play an essential rolein establishing necessary conditions for implantation. (Reprod Con-tracep 2001; 21: 149-52)     

Yikang decoction facilitates embryo implantation in mice with implantation dysfunction via upregulation of LIF expression

ObjectiveThe present study investigates the effects and mechanisms of Yikang decoction on embryo implantation in mice.MethodsTotally, mature female mice were randomly divided into four groups: normal, implantation failure (mifepristone treatment), Yikang decoction treatment (mifepristone and Yikang decoction treatment), and control (mifepristone and physiological saline treatment) groups. The efficacy of Yikang decoction was evaluated by the adhesion of uterine endometrial cells. The expression of leukemia inhibitory factor (LIF) and integrin αvβ3 in the endometrium were detected by real-time quantitative PCR and western blot. In addition, mouse endometrial cells were transfected with LIF specific siRNA-1, and the expression of LIF and αvβ3 were detected.ResultsThe number of embryos markedly decreased after mifepristone treatment. The adhesion of endometrial cells in the Yikang decoction treatment group significantly increased, when compared to the control group. The expression of LIF and integrin αvβ3 was significantly reduced by mifepristone, but the attenuated expression of LIF and αvβ3 was markedly reversed by treatment with Yikang decoction. In addition, after LIF siRNA-1 transfection, the expression of integrin αvβ3 significantly decreased (P < 0.01). The correlation analysis revealed a significant positive correlation between LIF and αvβ3 protein expression.ConclusionYikang decoction can regulate the expression of αvβ3 and increase cell adhesion by upregulating the expression of LIF, thereby improving embryo implantation in mice. These data suggest that Yikang decoction may have therapeutic effect in treating infertility.