小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌脂磷壁酸释放的作用研究

目的:探讨小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistance Staphylococcus aureus,MRSA)脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)的释放作用。方法:采用微量肉汤稀释法测定小檗碱对临床分离的MRSA的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)。酶联免疫法测定MRSA经小檗碱处理后的LTA含量,设置TritonX-100为阳性对照组,阴性对照组不加药。结果:小檗碱对MRSA分离株的MIC值为32μg·ml-1。随着培养时间的增长,各组细菌释放的LTA含量均有上升。与0.02%的Triton X-100相比,8μg·ml-1的小檗碱在各时间点对金黄色葡萄球菌LTA的促释放作用更强。结论:小檗碱可明显促进MRSA的LTA释放,该作用可能与其改变MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药性有关。     

小檗碱对豚鼠回肠电解质转运影响的研究

目的: 探讨小檗碱(Ber) 对正常豚鼠离体回肠和分泌性腹泻豚鼠离体回肠电解质转运的影响及其作用机制。方法: 利用霍乱毒素(ChT) 制成分泌性腹泻模型。通过Ussing Chamber 技术测定豚鼠离体回肠膜电位差(PD) 、膜短路电流(SCC) 和膜电阻(R) 。结果: (1) 在含糖台氏液中,粘膜(M) 侧和浆膜(S) 侧Ber 均可降低正常豚鼠和分泌性腹泻豚鼠离体回肠的PD和SCC(P<0.01, P<0.01), S侧1.0 mmol·L^-1的Ber 还可降低R(P<0.01); (2) 在无糖台氏液中, 仅S侧1.0 mmol·L^-1的Ber 可降低PD、SCC 和R(P< 0.01, P<0.01, P<0.05) 。结论: Ber 不仅可抑制正常豚鼠回肠电解质转运, 且可抑制由ChT所致的电解质分泌亢进。     

干姜吴茱萸水煎液对大鼠结肠平滑肌细胞L型Ca2+通道的影响

目的：探讨干姜吴茱萸水煎液对大鼠结肠平滑肌收缩及平滑肌细胞L型Ca²⁺通道的影响机制。方法：采用0、0.01、0.1、1、10 g/L干姜吴茱萸(1∶1)水煎液依次作用于正常结肠平滑肌，10 g/L水煎液及L型Ca²⁺通道激动剂BAY-K-8644依次作用于氯化乙酰胆碱(Ach)诱导后的正常平滑肌，检测平滑肌收缩张力、频率和振幅；全细胞膜片钳记录L型钙电流；Western blot检测各组细胞中L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(α1c)和钙调蛋白(CaM)蛋白表达情况。结果：1、10 g/L水煎液组能显著降低离体结肠平滑肌的收缩张力(P<0.05)，对频率及振幅并无显著影响(P>0.05)；与0 g/L水煎液组相比，Ach促进平滑肌收缩张力、频率和振幅显著增加(P<0.05)；与Ach组相比，10 g/L水煎液显著降低平滑肌的收缩张力、频率和振幅(P<0.05)；与10 g/L水煎液组相比，BAY-K-8644显著增加平滑肌的收缩张力、频率和振幅(P<0.05)；与0 g/L水煎液组相比，Ach可显著增加ICa...     

豚鼠哮喘模型气道重建对气道反应性的影响

目的:通过小剂量致敏原反复致敏建立豚鼠慢性哮喘模型,设定不同时点(4、6、8周)观察气道结构及气道反应性的变化,探讨气道重建对气道反应性的影响。方法:采用低剂量卵白蛋白反复致敏、激发豚鼠,制作哮喘动物模型,应用氯化乙酰胆碱静脉注射进行支气管激发实验,进行支气管肺泡灌洗并计数灌洗液的白细胞总数及分类。应用图像分析系统对豚鼠气道进行形态学测量。结果:哮喘8周组以纤维组织增生及平滑肌厚度增加最为显著。气道高反应性以哮喘4周组增高最明显,而随着与致敏原接触时间的延长,气道高反应性逐渐降低,到哮喘8周组与正常对照组相比已无显著差异。结论:长时间卵白蛋白吸入致敏可以引起哮喘豚鼠气道反应性的变化,这种变化与气道重建的发生相关联。     

普鲁托品对豚鼠离体心房生理特性的影响

目的:观察普鲁托品(protopine,Pro)对豚鼠离体心房生理特性的影响,并探讨其作用机制。方法:利用豚鼠离体心房测定其自动节律、收缩力和功能性不应期,并观察普鲁托品对正阶梯现象和静息后增强的影响。结果:测定右心房自动节律和收缩力作为药前对照,给予普鲁托品(0.1～300μmol·L~(-1))可浓度依赖性地明显抑制心房的自律性,但较低浓度时Pro对心房收缩力无明显影响,在较高浓度时(大于10μmol·L~(-1))才明显抑制右心房的收缩力。Pro 300μmol·L~(-1)时对上述两项指标原抑制率为65％±15％和79.56％±961％。Pro 50μmol·L~(-1)可使左心房的功能性不应期A     

卡马西平对离体蛙心心功能的影响

目的:观察卡马西平对离体蛙心心肌收缩力和心率的影响及其初步机制。方法:根据斯氏蛙心插管方法,蛙心插管内液体恒定体积为1ml,以卡马西平溶液100μl对离体蛙心进行一次加药灌流,使其终浓度为10.58μmol·L~(-1)、21.16μmol·L~(-1)、42.32μmol·L~(-1),采用BL-420生物机能实验系统记录第2分钟内离体蛙心心率、心力峰峰值、心肌平均收缩力的变化;以乙酰胆碱100μl对离体蛙心进行一次加药灌流,使其终浓度为1mg·L~(-1)、以艾司洛尔100μl对离体蛙心进行一次加药灌流,使其终浓度为10 mg·L~(-1)、以乙酰胆碱与卡马西平溶液各50μl同时灌流离体蛙心,使乙酰胆碱和卡马西平终浓度分别为1mg·L~(-1)和21.16μmol·L~(-1)1、以艾司洛尔与卡马西平溶液各50μl同时灌流离体蛙心,使艾司洛尔和卡马西平终浓度分别为10 mg·L~(-1)和21.16μmol·L~(-1),记录第2分钟内离体蛙心心力峰峰值的变化。结果:10.58μmol·L~(-1)、21.16μmol·L~(-1)、42.32μmol·L~(-1)浓度的卡马西平溶液对蛙心心率无影响,但是可以增强离体蛙心心肌自发性收缩的心力峰峰值和平均收缩力(P0.01),且具有一定浓度依赖性;21.16μmol·L~(-1)卡马西平可明显拮抗乙酰胆碱抑制蛙心心肌收缩峰峰值的作用(P0.01),同时也可明显拮抗艾司洛尔抑制蛙心心肌收缩峰峰值的作用(P0.01)。结论:卡马西平可以明显增强心肌收缩力,其机制可能与其兴奋β1受体、阻断M2受体有关。     

少年红矾杏平喘糖浆镇咳、祛痰和平喘作用的实验研究

目的:观察少年红矾杏平喘糖浆(简称平喘糖浆)的止咳、祛痰和平喘作用。方法:采用氨水引起小鼠咳嗽实验观察平喘糖浆止咳作用;通过小鼠酚红祛痰实验观察平喘糖浆排痰作用,通过磷酸组胺所致豚鼠哮喘及离体豚鼠气管平滑肌实验观察平喘糖浆平喘作用。结果:平喘糖浆能明显延长引起半数小鼠咳嗽的氨水喷雾时间(EDT50),增加小鼠气管酚红的排出,显著延长豚鼠由磷酸组胺引起哮喘的潜伏期,明显抑制离体气管平滑肌的收缩。结论:平喘糖浆有祛痰、止咳和平喘作用。     

蛇床子提取液对离体蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

目的:研究蛇床子提取液对蟾蜍离体坐骨神经动作电位传导阻滞作用。方法:观察3种浓度蛇床子提取液(1g·ml-1、0.5g·ml-1、0.2g·ml-1)对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的振幅和传导速度的影响。结果:3种浓度的蛇床子提取液均可使坐骨神经复合动作电位的振幅变小(P0.01),传导速度变慢(P0.01)并最终使坐骨神经动作电位消失。结论:蛇床子提取液能阻滞神经动作电位的传导。     

罂粟花粉不同组份对平滑肌的作用

罂粟花粉不同组份的制作,平滑肌制备、平滑肌活动记录方法、小鼠整体小肠活动实验法同前文。其实验结果如下: 1.罂粟花粉各组份对豚鼠离体气管平滑肌均有松弛作用,并能拮抗Ach和对气管平滑肌的致痉效应,其拮抗强度与花粉各组份浴浓相关。对Ach的拮抗、罂粟全花粉混     

法半夏对离体蟾蜍心功能的研究

目的:观察法半夏悬浊液对离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力的影响。方法:根据斯氏蛙心插管的方法,用0.033g·ml~(-1)、0.067g·ml~(-1)、0.133g·ml~(-1)和0.267g·ml~(-1)的法半夏悬浊液对离体蟾蜍心脏灌流,采用BL-420生物实验系统记录心率和心肌收缩力的变化。结果:灌注0.033g·ml~(-1)的法半夏悬浊液对离体蟾蜍心的收缩力和心率影响不大;分别灌注0.067g·ml~(-1)、0.133g·ml~(-1)和0.267g·ml~(-1)的法半夏悬浊液,离体蟾蜍心收缩力明显增强,心率减慢(P0.05)。结论:法半夏可以增强离体蟾蜍心的收缩力,对其心率影响不大。     

突触前组胺受体在豚鼠输精管的分布和功能

组胺H_3受体激动剂(R)-α-methylhistamine在离体豚鼠输精管平滑肌上的效应表现为两个时相。在10~(-10)～10~(-7)mol/L范围内,aMeHA浓度依赖性地抑制电场刺激诱发输精管平滑肌的收缩。当浓度增加至10~(-6)和10~(-5)mol/L时,αMeHA上述抑制效应减弱,并转为增强平滑肌收缩的效应。当存在扑尔敏(10~(-6)mol/L)时,αMeHA     

低温下剌猬皮肌紧张性收缩机制的研究

我们在研究电刺激引起刺猬和豚鼠的离体皮肌(HCM和GPCM)的收缩与温度的关系时,曾发现温度降到15℃以下,HCM静息肌张力开始明显升高。本文考察了乙酰胆碱(Ach)对两种皮肌的收缩和季节性冬眠对静息肌张力时影响。同时,应用阻断剂和改变胞外离子浓度,进一步探讨了HCM在低温下静息肌张力升高的机制。 实验用成年健康刺猬(活跃和冬眠状态)和豚鼠,体重分别为550～900g和300～650g,     

小檗碱对糖尿病大鼠离体膀胱逼尿肌收缩功能的影响及其机制

<正>目的:观察糖尿病大鼠离体膀胱逼尿肌收缩功能以及小檗碱对其的作用及其机制。方法:雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50mg/kg)诱导大鼠糖尿病模型。观察糖尿病早期大鼠离体膀胱逼尿肌神经源性收缩反应中胆碱能     

异莲心碱对小鼠离体气管平滑肌的舒张作用

目的:研究异莲心碱对高K~+预收缩小鼠离体气管平滑肌(ASM)的舒张作用及其机制。方法:利用张力换能器检测异莲心碱对高K~+诱导的ASM预收缩和Ca~(2+)内流的影响;利用膜片钳技术和钙成像系统分别检测异莲心碱对ASM细胞膜L型电压依赖性Ca~(2+)通道(LVDCC)电流以及细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)的影响。结果:异莲心碱可显著舒张高K~+预收缩的ASM,且其舒张作用呈现浓度依赖性,当浓度为100μmol/L时最大舒张比达到(95.3±3.9)%。此外,利用膜片钳全细胞记录技术测量LVDCC电流,电流可被异莲心碱完全阻断;在高K~+诱导下气管平滑肌细胞中Fura-2的340/380 nm荧光比值稳定在0.63±0.10,而异莲心碱加入后比值显著下降至0.36±0.05(P0.01);在[Ca~(2+)]_i峰点加入异莲心碱,340/380 nm荧光比值从0.74±0.02迅速降至0.42±0.05(P0.01);异莲心碱抑制高K~+诱导的Ca~(2+)内流引起的ASM收缩。结论:异莲心碱可阻断小鼠离体气管平滑肌细胞LVDCC电流,LVDCC介导的Ca~(2+)内流停止,[Ca~(2+)]_i降低,导致ASM舒张,提示异莲心碱可能是潜在的气管舒张剂。     

豚鼠前列腺Cajal间质细胞与交感神经及平滑肌的形态与功能学联系

目的:探索前列腺Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)与交感神经及平滑肌细胞之间的形态及功能学联系。方法:(1)制作豚鼠前列腺组织冰冻切片并进行双重免疫荧光染色。使用酪氨酸激酶受体(c-Kit)作为ICCs的标记物,酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和多巴胺β羟化酶(dopamineβ-hydroxylase,DβH)作为交感神经纤维的标记物,α肌动蛋白(α-actin)作为平滑肌细胞的标记物。另外,分别对α1-肾上腺素受体与c-Kit以及缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)与c-Kit进行免疫荧光双重标记。(2)将前列腺肌条固定于灌流槽中,记录去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱发的肌条收缩幅度和频率,以及加入Glivec后肌条收缩幅度和频率的变化。结果:(1)免疫荧光组织化学标记结果显示:ICCs与交感神经纤维、平滑肌细胞平行分布,ICCs边缘与交感神经、平滑肌细胞边缘密切接触,c-Kit标记的ICCs上存在α1-肾上腺素受体和缝隙连接蛋白Cx43的共表达。(2)在去甲肾上腺素的刺激下前列腺平滑肌肌条收缩幅度为(0.98±0.16)g,收缩频率为(2.54±0.28)次/min。使用Glivec后肌条收缩幅度显著下降,50μmol/L组为(0.56±0.07)g(P0.01),200μmol/L组为(0.25±0.05)g(P0.01),收缩频率未见明显改变,50μmol/L组为(2.67±0.32)次/min(P0.05),200μmol/L组为(2.75±0.31)次/min(P0.05)。结论:豚鼠前列腺ICCs具有介导前列腺交感神经信号,支配平滑肌活动的形态和功能学基础。     

红霉素对豚鼠离体回肠的收缩作用

红霉素对豚鼠离体回肠的收缩作用余贤恩，罗绮凝右江民族医学院生理学教研室微生物学教研室红霉素（ＥＭ）在低于抗感染剂量时即可增强人、狗的胃肠运动及胃排空，也可加强胆囊排空，并刺激兔离体小肠及大肠收缩。国外研究发现红毒素对豚鼠离体肌肉无影响或抑制小肠运动。...     

羟基红花黄色素A通过激活Kv通道舒张大鼠冠状动脉

目的:研究羟基红花黄色素A (hydroxysafflor yellow A,HSYA)对离体大鼠冠状动脉(rat coronary artery,RCA)的舒张作用,并探讨该作用与电压门控性钾通道(Kv通道)的关系。方法:采用DMT离体血管环技术明确HSYA对RCA的肌源性作用及血管内皮对该作用的影响;采用全细胞膜片钳技术观察HSYA对RCA平滑肌细胞Kv电流的影响;采用Western blot技术探讨HSYA对RCA平滑肌细胞Kv1.2和Kv1.5通道蛋白表达的影响。结果:10μmol/L和30μmol/L HSYA能够舒张60 mmol/L KCl或0.1 mmol/L U46619预收缩的RCA(P<0.05),但其对预收缩的内皮完整组和去内皮组RCA舒张作用的差异无统计学显著性(P>0.05);HSYA(3μmol/L、10μmol/L和30μmol/L)可使RCA平滑肌细胞Kv电流显著增加(P<0.05);10μmol/L和30μmol/L HSYA能够增加RCA平滑肌细胞Kv1.2和Kv1.5通道蛋白的表达。结论:HSYA可舒张预收缩的RCA,该作用与血管内皮无关,其可能的机制与增强Kv通道功能和蛋白表达有关。     

链霉素过敏休克机制的研究

链霉素用于临床已经40余年,至今仍然常用于阴性菌和结核病的治疗。但过敏反应甚至休克屡见报道,并且国内外对其研究较少,为此本室进行研究,以便更好的防治。用商品链霉素和牛血清白蛋白合成链霉素——牛蛋白结合物(ST—BSA)作为抗原致敏豚鼠。过敏反应发生率为88％,其中休克率占76％,死亡占44％,而对照组为0％;ST—BSA致敏豚鼠离体回肠释放过敏介质生物效应实验证明,用抗原攻击后,肠管紧张度升高,     

小檗碱抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白的表达:c-JUN末端激酶信号转导途径

背景:当细胞受到各种细胞因子及环境刺激时,c-JUN末端激酶信号转导通路可以通过激活不同的受体,对细胞的发育、分化、凋亡、癌变、炎症和免疫反应起调节作用。目的:观察中药小檗碱是否通过c-JUN末端激酶信号转导途径抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白表达。方法:取人外周静脉血分离培养单核细胞,分为5组培养:空白对照组、脂多糖组、脂多糖+小檗碱25μmol/L组、脂多糖+小檗碱50μmol/L组、脂多糖+小檗碱100μmol/L组。分别在培养后30min,6h,12h,24h提取细胞,采用RT-PCR测定COX-2 mRNA水平,采用Western blot测定c-JUN末端激酶及COX-2蛋白水平。同时加入选择性c-JUN末端激酶抑制剂,测定COX-2 mRNA及蛋白水平。结果与结论:与空白对照组相比,脂多糖组COX-2 mRNA及蛋白表达明显增强(P0.01)。加入不同浓度小檗碱后COX-2 mRNA及蛋白表达明显被抑制(P0.05),且随着浓度增加,抑制作用更明显,给药后12h,抑制作用最强。但c-JUN末端激酶活性水平无明显变化(P0.05),脂多糖+小檗碱100μmol/L组c-JUN末端激酶活性水平变化明显(P0.05)。加入c-JUN末端激酶抑制剂后,COX-2 mRNA及蛋白水平降低明显(P0.05)。证实小檗碱能抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白水平,并呈浓度依赖性,高浓度小檗碱对c-JUN末端激酶活性蛋白表达有明显抑制作用,其可能通过c-JUN末端激酶信号转导途径抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白表达。     

小檗碱对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化及TGF-β/Smad通路的影响

目的研究小檗碱(BBr)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK-52E)转分化(EMT)及TGF-β/Smad通路的影响。方法常规培养肾小管上皮细胞、传代、分组:1正常对照组;2TGF-β1组(10ng/ml TGF-β1作用48h);3小檗碱作用组(30μM小檗碱作用24h后加10ng/ml TGF-β1作用48h)。采用相差显微镜观察各组细胞表型改变,免疫荧光及Western Blot方法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮钙黏素(E-cadherin)、Smad2、Smad3、磷酸化的Smad2、3(P-Smad2、3)蛋白表达;应用流式细胞术,采用活性氧自由基(ROS)检测试剂盒检测各组别的ROS蛋白表达情况。结果 TGF-β1处理可导致NRK-52E细胞的α-SMA蛋白表达明显升高,E-cadherin蛋白表达降低。而小檗碱处理能够减少肾小管上皮细胞α-SMA的高表达,提高E-cadherin蛋白的表达;同时,小檗碱可有效降低由TGF-β1引起的NRK-52E细胞中ROS的过多产生。此外,小檗碱可有效抑制Smad2/3的活化。结论小檗碱可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞的EMT,其作用机制可能是通过抑制氧化应激及TGF-β/Smad信号通路而发挥作用。