芪归解毒汤防治硫酸镍致晶状体上皮细胞损伤的实验研究贾丹张兴儒刘龙民张隆周欢明

目的观察芪归解毒汤药物血清对硫酸镍损伤正常人晶状体上皮细胞（Lens epithium cells，LEC，细胞编号：SRA01／04）的保护作用。方法采用血清药理学方法提取芪归解毒汤药物血清，体外培养晶状体上皮细胞，用硫酸镍产生细胞损伤，再加入体积分数分别为5％、10％、15％、20％的药物血清，倒置显微镜下观察晶状体上皮细胞的形态学改变，MTT法检测细胞活性的变化，试剂盒测量乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化。结果倒置显微镜下观察到硫酸镍损伤的晶状体上皮细胞出现肿胀、体积缩小、折光性下降、贴壁率降低等形态学改变。加入10％和15％芪归解毒汤药物血清时细胞生长明显好转，折光性优于硫酸镍组，药物血清浓度为20％时细胞生长接近正常；MTT法检测药物血清组细胞活力较硫酸镍组明显增强；药物血清组LDH活性较硫酸镍组明显降低。结论芪归解毒汤药物血清能明显减轻晶状体上皮细胞的镍性损伤，并呈现剂量依赖关系。     

芪归解毒汤对硫酸镍诱导晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用

目的观察芪归解毒汤对硫酸镍诱导正常人晶状体上皮细胞(Lens epithelium cell,LEC)凋亡的影响。方法体外培养正常人晶状体上皮细胞,用血清药理学方法制备含芪归解毒汤药物血清,用药物血清和硫酸镍处理培养的LEC,采用流式细胞术检测LEC凋亡率;透射电子显微镜观察LEC超微结构改变和凋亡小体形成。结果硫酸镍组LEC凋亡率(26.99±2.58)高于中药组LEC(12.21±2.42),硫酸镍组和中药组LEC凋亡率均高于对照组(0.8±0.16),三组间差异有统计学意义(x2=-20.489,P0.01),两两比较均有统计学意义(P0.01)。透射电镜观察到硫酸镍组LEC各阶段均有细胞凋亡,可见到LEC凋亡后的继发性坏死。中药组LEC呈凋亡早期改变,只有少数LEC呈凋亡改变,未见有凋亡后继发性坏死的LEC。结论芪归解毒汤药物血清可有效地抑制硫酸镍诱导的LEC凋亡。     

芪归解毒汤保护硫酸镍致Wistar大鼠晶状体损伤的实验研究

目的探讨硫酸镍致Wistar大鼠晶状体的损伤情况及芪归解毒汤的保护作用。方法Wistar大鼠随机分为硫酸镍注射组、芪归解毒汤预防组、障眼明预防组及空白对照组。每隔2周在裂隙灯下观察拍照并详细记录晶状体变化情况。给药45天后双盲法在裂隙灯下参照LOCSⅡ、Ⅲ评价Wistar大鼠晶状体的混浊程度,用SPSS16.0统计学软件进行方差分析处理。结果在晶状体P区域中,硫酸镍组晶状体混浊指数得分要高于另外3组,差异有统计学意义(F=35.28,P0.05)。在晶状体N区域中,硫酸镍组晶状体混浊指数得分也高于另外3组,差异有统计学意义(F=78.64,P0.05)。在晶状体A、C两区域,晶状体混浊指数得分各组之间比较,差异无统计学意义。在晶状体A+P区域上,硫酸镍组晶状体混浊指数得分要高于另外3组,差异有统计学意义(F=30.24,P0.05)。晶状体A+C+N+P四个区域混浊指数得分总和分析,硫酸镍组晶状体混浊指数得分要高于另外3组,差异均有统计学意义(F=38.14,P0.05)。结论硫酸镍皮下注射能对Wistar大鼠晶状体造成一定的损伤,芪归解毒汤能有效减轻硫酸镍致Wistar大鼠晶状体的损伤。     

通窍活血汤含药血清对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用

目的:从细胞水平研究通窍活血汤含药血清(TQHXD)对谷氨酸(Glu)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予通窍活血汤提取液,每日2次,每次4 g.kg-1,连续5 d,制备通窍活血汤含药血清。采用PC12细胞和终浓度为12.5 mmol.L-1的谷氨酸共培养,造成神经细胞损伤模型。光镜观察5%,10%,20%的TQHXD对损伤PC12细胞形态改变的影响;台盼兰染色法、AO/EB染色法及LDH法观察TQHXD对损伤的细胞膜通透性的变化影响;MTT法检测TQHXD对PC12细胞增殖及活性的影响及对培养上清液中NO浓度的影响。结果:倒置显微镜下可见,正常组细胞胞体较损伤组略大,呈强折光性,细胞数量多,突起长。模型组细胞数量显著减少,折光性明显减弱,细胞突起减少、缩短。TQHXD和PC12细胞共培养24 h后,活细胞数明显增加,细胞折光性增加,损伤细胞形态接近于正常细胞;台盼兰染色后,TQHXD组活细胞比率明显上升,AO/EB染色后被EB染色的数量较少。MTT法检测结果显示,与模型组比较,各浓度TQHXD组的吸光度A均升高且有显著性差异。各浓度的TQHXD组细胞培养上清中LDH,NO含量相对模型组明显减少,两者有显著性差异。结论:TQHXD对Glu损伤的PC12细胞有明显的保护作用。     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞NO损伤的保护作用

目的：探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞一氧化氮(NO)损伤的影响。方法：采用血清药理学方法，体外培养PC12细胞，用SNP产生NO损伤，观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、LDH活性的变化。结果：醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用，可增强细胞活力，降低LDH活性。结论：醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的NO损伤，并呈现一定的剂量依赖关系。     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞Caf损伤的保护作用

为了进一步探讨XNQZ对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制,采用形态学观察、MTT法细胞活力和LDH活性测定,观察XNQZ药物血清对PC12细胞咖啡因(Caf)损伤的保护作用。目的:探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞咖啡因(Caf)损伤的影响。方法:采用血清药理学方法,体外培养PC12细胞,用Caf形成损伤,观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、LDH活性的变化。结果:醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用,可增强细胞活力,降低LDH活性。结论:醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的Caf损伤。     

黄芪多糖对高血压病血瘀证患者血清损伤的人脐静脉内皮细胞形态学、活性的影响

目的:观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对高血压病血瘀证患者血清损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC-C)形态学、活性的影响。方法:将培养的高血压病血瘀证患者血清损伤的HUVEC-C分别用不同浓度的APS含药血清干预后,倒置显微镜下观察其形态学变化,MTT法检测其活性。结果:APS呈剂量依赖性升高损伤的细胞OD值,且随着药物组浓度的增加,细胞的形态趋向正常细胞。结论:APS能够抵抗高血压病血瘀证患者血清中有害因子对HUVEC-C的损伤作用,能增强细胞的活性和维持细胞的形态结构,并呈剂量依赖性。     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞Caf损伤的保护作用

为了进一步探讨XNQZ对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制，采用形态学观察、MTT法细胞活力和LDH活性测定，观察XNQZ药物血清对PC12细胞咖啡因(Caf)损伤的保护作用。目的：探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞咖啡因(Caf)损伤的影响。方法：采用血清药理学方法，体外培养PC12细胞，用Caf形成损伤，观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、LDH活性的变化。结果：醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用，可增强细胞活力，降低LDH活性。结论：醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PCI2细胞的Caf损伤。     

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·mL-1),每天2次,按10 mL·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清.MTT法考察桃红四物汤含药血清(终浓度为5％,10％,15％)预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用;显微镜观察细胞形态学变化;以丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响;Western blot法检测细胞Caspase-3的表达.结果:与空白血清对照组比较,经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低,含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量,并抑制Caspase-3表达.AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡.结论:桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用.     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞谷氨酸损伤的保护作用

目的:探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞谷氨酸(GLU)损伤的影响.方法:采用血清药理学方法,体外培养PC12细胞,用GLU形成损伤,观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化.结果:醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用,可增强细胞活力,降低LDH活性.结论:醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的GLU损伤,并呈现一定的剂量依赖关系.