龙胆中龙胆苦苷的分离纯化

目的建立龙胆中高纯度龙胆苦苷的快速分离纯化方法。方法坚龙胆药材的乙醇提取液经AB-8大孔吸附树脂柱进行粗分,乙醇-水系统进行梯度洗脱,30%乙醇溶液洗脱下来的流份粗龙胆苦苷部分冷冻干燥后经MCI树脂柱进一步纯化,洗脱剂为乙醇-水,所得的龙胆苦苷的纯度经高效液相色谱进行检测。结果在此条件下,可以分离得到纯度大于97%的龙胆苦苷。结论该法简便、快速、低毒、所得产物纯度高,适用于分离较高纯度的龙胆苦苷及龙胆苦苷标准品的制备。     

响应面法优化龙胆苦苷的纯化工艺

目的:应用响应面法优选龙胆苦苷的大孔树脂纯化工艺。方法:通过预实验和单因素试验,根据星点设计-响应面法设计原理,采用三因素五水平响应面分析方法,以龙胆苦苷的转移率和龙胆苦苷的百分含量为考察指标,对上柱液浓度、洗脱剂浓度、洗脱剂用量进行优化,最终确定龙胆苦苷的大孔树脂纯化工艺。结果:采用HPD-100型大孔树脂,最佳纯化工艺为:上柱液质量浓度为0.2g/mL,乙醇浓度为30%,乙醇用量为5BV,龙胆苦苷的百分含量可达到73.4%。结论:星点设计-响应面法优化龙胆中龙胆苦苷的纯化工艺效率高、方法简便、预测性好,可用于实验室小量制备,为扩大再生产提供参考。     

HSCCC法分离制备龙胆有效成分龙胆苦苷

目的:采用高速逆流色谱技术(HSCCC)从龙胆中分离制备高纯度龙胆苦苷。方法:利用制备型高速逆流色谱仪,以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5∶4∶2∶4)为溶剂系统对龙胆甲醇粗提物进行分离,上相为固定相,下相为流动相,转速为820 r/min,流速为2.0 ml/min。结果:所得龙胆苦苷经HPLC分析,纯度达到96.68%(峰面积百分比)。结论:此研究为其他环烯醚萜苷的分离纯化提供了依据。     

龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定

目的:规范龙胆药材质量标准研究,建立较为准确的龙胆苦苷HPLC含量测定方法。方法:采用ProsphereC-18300A5μ(250×4.6mm)分析柱,以甲醇-0.4%磷酸(10∶90→60∶40,0→30min)为流动相,检测波长选择270nm。结果:采用本方法龙胆苦苷在0.4024~20.0800g范围内呈良好的线性关系,平均回收率达99.37%,RSD为2.20%,测定结果表明10批样品中龙胆苦苷含量在1.75%~5.66%。提示本方法重现性好、分离度高,准确、易行。     

黄芪甲苷纳米乳的处方筛选研究

目的:摸索制备黄芪甲苷纳米乳的最佳处方。方法:伪三元相图法分析不同处方比例对微乳区形成面积的影响。考察PC/Tween 80、Km、AS/O值、含水量对纳米乳载药量的影响。综合考虑伪三元相图及载药量分析结果,确定制备黄芪甲苷纳米乳的最佳处方比例。结果:当PC/Tween 80=3:7、2:8,Km=3:1、2:1时所形成的微乳区面积较大。当含水量为60%,PC/Tween 80=2:8,Km=2:1,AS/O=9:1时纳米乳载药量最大。综合考虑,最终确定黄芪甲苷纳米乳的最佳处方比例为PC:Tween 80:无水乙醇:IPM:H2O(w/w)=4.8%:19.2%:12%:4%:60%。结论:综合考虑伪三元相图及载药量分析结果,确定纳米乳最佳处方更具全面性。     

昆明龙胆不同部位龙胆苦苷的含量测定

目的：比较昆明龙胆不同部位的龙胆苦苷含量,确定昆明龙胆的最佳药用部位。方法：以龙胆苦苷为指标,采用HPLC法测定昆明龙胆地上部分、地下部分及全草的龙胆苦苷含量。结果：3个部位均含有龙胆苦苷,地上部分为3．72％,地下部分为2．45％,全草为2．57％。结论：昆明龙胆不同部位龙胆苦苷含量均大于2．4％。建议以全草入药。     

酒制前后龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量变化研究

目的:比较龙胆炮制前后龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量变化.方法:采用HPLC法测定10批生龙胆、酒制龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量,色谱柱为Agilent C18柱;流动相为甲醇-乙腈-0.025 mol/L磷酸水(30:10:300);检测波长为240 nm;流速为1.0 mL/min c,结果:酒制龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量均高于生品.结论:炮制可促进龙胆药材中环烯醚萜苷类成分的溶出.     

龙胆苦苷的血脑屏障通透性研究

目的为龙胆苦苷(Gent)的血脑屏障通透性提供直接证据,并阐明其在脑组织中的药物动力学特征。方法建立小鼠脑脊液、脑组织和血浆中龙胆苦苷含量测定的LC-MS/MS方法;直接测定小鼠腹腔注射龙胆苦苷后脑脊液中的药物浓度;建立脑组织和血浆中龙胆苦苷的药-时曲线,并比较药物动力学参数。结果 Gent在血浆样本检测限均为10 ng·ml-1,脑组织样本中的检测限为10 ng·g-1,脑脊液样本中检测限为2.5 ng·ml-1。小鼠腹腔注射50 mg·kg-1龙胆苦苷后0.5 h和2 h,在脑脊液中均能检测到原型药物;龙胆苦苷在血浆中的Cmax为57.43μg·ml-1,在脑组织中的Cmax为0.45μg·g-1;在脑组织中的平均滞留时间MRT0-∞为294.68 min,在血浆中的MRT0-∞为45.62 min。结论龙胆苦苷能够通过血脑屏障,在脑组织中代谢消除相对较慢。     

龙胆苦苷抗炎药理作用研究

目的 研究秦艽所含龙胆苦苷的抗炎作用。方法 分别用二甲苯致小鼠耳肿胀，冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加及小鼠扭体反应，酵母多糖A、角叉菜胶、制霉菌素致大鼠或小鼠足跖肿胀模型，ig给药，观察龙胆苦苷的抗炎作用。结果 龙胆苦苷能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀、冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶、酵母多糖A所致大鼠足跖肿胀，但对制霉菌素所致的炎症模型无明显作用。结论 秦艽所含龙胆苦苷具有一定的抗炎作用，其机制涉及对多种炎症介质的抑制。抗炎作用能部分代表秦艽生药的传统功效。     

HPLC法测定复方龙胆片中龙胆苦苷的含量

目的:建立复方龙胆片中龙胆苦苷含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Waters Symmetry C18柱(250 mm×Φ4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(23:77);柱温:40 ℃;检测波长:270 nm;流速:0.8 mL/min.结果:龙胆苦苷在0.010 76～0.107 6 μg/μL之间,质量浓度与峰面积值呈良好的线性关系,r＝0.999 8,平均回收率为100.6%,RSD值为1.54%(n=6).结论:此方法操作简单、快捷、稳定性及重现性好,可用于复方龙胆片中龙胆苦苷的含量测定.     

龙胆苦苷的保肝作用研究

目的：研究ig龙胆苦苷的肝保护作用及与龙胆草药理作用的一致性。方法：给动物ig给药，用CCl4、D－GlaN造急性肝损伤模型，测定小鼠血清ALT、AST及肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶含量，采用麻醉大鼠，测定胆汁分泌量及胆汁成分。结果：ig龙胆苦苷后能明显降低CCl4急性肝损伤小鼠血清ALT、AST水平及增加肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶活力，大鼠胆流量明显增加，胆汁中胆红素浓度提高。结论：龙胆苦苷具有明显肝保护作用。     

甲基龙胆苦苷元的制备

将龙胆苦苷置甲醇中用盐酸水解，成功得到甲基龙胆苦苷元。     

龙胆泻肝片中龙胆苦苷的含量测定

龙胆泻肝片由龙胆、柴胡、黄芩、栀子 (炒 )、泽泻、关木通、车前子 (盐炒 )、当归 (酒炒 )、地黄、甘草(蜜 )十味药组成 ,具清肝热、利湿热之功。用于肝胆湿热 ,头晕目赤 ,耳鸣耳聋 ,耳肿疼痛 ,胁痛 ,口苦 ,尿赤涩痛 ,湿热带下 ;临床疗效较好。为了更好地控制龙胆泻肝片的质量 ,本文对龙胆泻肝片中龙胆苦苷的含量测定方法进行了研究。1　仪器与试药HP110 0高效液相色谱仪 ,龙胆泻肝片 (广东环球制药有限公司研究发展部 ) ;阴性样品 (广东环球制药有限公司研究发展部 ) ;龙胆苦苷 (中国药品生物制品检定所 ) ;甲醇为色谱纯 ;其余试剂均为分…     

HPLC法测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷含量

目的：测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷的含量。方法：供试品用甲醇超声提取30min,滤过,取续滤液作为供试品溶液,经高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱：Inertsil ODS-sp（5um,4.6mm×150mm）;流动相：甲醇：水（36：73）;检测波长：270nm;流速：1.0ml/min;柱温：25℃。结果：蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷与其他组分分离良好。保留时间为17.1min。龙胆苦苷对照品线性范围1.68-8.40μg,r=0.9993。结论：本法灵敏度高、操作简便、结果准确,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定。     

Box-Behnken响应面法优化组织破碎提取龙胆苦苷

目的采用Box-Behnken响应面法优化组织破碎提取龙胆苦苷。方法以龙胆苦苷提取率为指标,在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken响应面法对提取工艺进行优化。结果最佳条件为药材粒径80目,料液比1∶30,电压150 V,乙醇体积分数70%,提取时间35 s,龙胆苦苷提取率达到5.37%。结论该方法快速高效,可显著缩短提取时间,增加龙胆苦苷的提取率。     

龙胆及朝鲜龙胆中龙胆多糖与龙胆苦苷的含量测定

目的测定不同药用部位、不同采收时期及产地的龙胆、朝鲜龙胆中龙胆多糖和龙胆苦苷的含量,为龙胆药材的综合利用及资源开发提供理论依据。方法采用紫外分光光度法测定多糖含量,HPLC法测定龙胆苦苷含量。结果龙胆根中龙胆多糖的含量在0.29%~1.13%、茎叶中含量在0.65%~1.85%、花中含量在0.61%~2.15%;龙胆苦苷主要存在于根部,8批龙胆药材根中龙胆苦苷的含量在4.31%~5.35%;两个不同产区的朝鲜龙胆根中龙胆苦苷的含量分别为4.28%及5.51%。结论龙胆茎叶中含有一定量的龙胆多糖,具有一定的开发价值;朝鲜龙胆根中含有一定量龙胆苦苷、龙胆多糖,可作为龙胆新资源开发利用。     

HPLC法同时测定三味龙胆花片中龙胆苦苷及獐牙菜苦苷

目的建立HPLC法同时测定三味龙胆花片(白花龙胆、甘草、蜂蜜)中龙胆苦苷及獐牙菜苦苷的含有量。方法药物甲醇提取液的分析采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温30℃;流动相为甲醇-水(25∶75);体积流量1.0 m L/min;进样量10μL;检测波长240 nm。结果龙胆苦苷和獐牙菜苦苷分别在20.1~201.0 ng(r=0.999 9)和19.76~197.6 ng(r=0.999 9)范围内有良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.93%和100.8%,RSD值分别为1.65%和2.06%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于三味龙胆花片的质量控制。     

紫苏精油纳米乳的处方工艺研究与初步质量评价

目的 采用紫苏Perilla frutescens为模型药,制备紫苏精油纳米乳,进行处方工艺研究与初步质量评价。方法 根据紫苏精油在各辅料中的溶解量确定助表面活性剂,采用亲水亲油平衡值（HLB）值法初步筛选适宜水包油型（O/W）纳米乳的表面活性剂,进一步筛选具备用量安全性的表面活性剂,确定纳米乳处方组成。通过绘制伪三元相图,综合比较纳米乳区域大小、载药量、含水量,以及电导率、黏度、粒径及分布、稳定性等优化处方;研究对优化处方工艺的紫苏精油纳米乳的外观质量与形态、相关理化性质（黏度、pH值、电导率、Zeta电位、粒径及分布）、稳定性、体外渗透性以及鼻黏膜刺激性进行考察。结果 优化的紫苏精油纳米乳处方为14.3%紫苏精油-9.5% Transcutol P-19.1% Labrasol-57.1%水;根据优化的处方制备的紫苏精油纳米乳均一、透明、澄清,流动性良好,黏度（3.68±0.17）mPa·s;pH值为6.18±0.03,电导率为（109.61±0.89）μS/cm,Zeta电位为（-7.08±1.82）mV;平均粒径为（49.98±1.55）nm;透射电镜实验结果表明,紫苏精油纳米乳乳滴为球形,粒径大小均在100 nm以内;紫苏精油纳米乳具备离心稳定性、稀释稳定性、长期稳定性以及温度稳定性;于常温未密封的条件下储存1个月与6个月后紫苏精油纳米乳与紫苏精油的平均紫苏醛含量变化百分比分别为1.8%和17.48%;鼻黏膜刺激性实验结果表明,紫苏精油纳米乳给药组与空白生理盐水组无显著差异。结论 研究制备优化处方工艺的紫苏精油纳米乳,其外观形态、相关理化性质符合纳米乳质量要求,具备药物稳定性、药物渗透性以及安全性。     

HPLC法测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、黄芩苷和栀子苷

龙胆泻肝丸由龙胆泻肝汤进行剂型改进而来,主要由龙胆草、黄芩、栀子等药味组成,具有泻肝胆实火,清下焦湿热的功效。《中国药典》2005年版只对龙胆泻肝丸君药龙胆草的主要成分龙胆苦苷进行了定量测定,臣药黄芩、栀子主要成分的测定方法已有文献报道[1~4]。复方中药多指标的同时测定不但可以节约分析成本,减少分析误差,而且更重要的是它可以直接反映药品的质量。本实验建立了RP-HPLC法同时测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、黄芩苷、栀子苷3种指标成分,该方法专属性好、灵敏度高、结果准确,可更好地表征该丸内在质量。1仪器与试药液相色谱仪系统…     

HPLC法测定不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量

目的:建立龙胆苦苷含量测定的方法,测定不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量,为控制药材质量提供参考。方法:采用Hypersil ODS2 C18色谱柱;以甲醇-水(25∶75)为流动相;流速为1 m L·min-1;检测波长为270 nm,柱温:30℃,测定不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量。结果:龙胆苦苷在0.002 15~0.107 5 g·L~(-1)的浓度范围内呈现良好的线性关系;平均回收率为100.07%,RSD为2.32%。结论:该方法快捷、简便、重复性好,通过测定不同产地龙胆药材中龙胆苦苷的含量,为不同产地龙胆质量的控制提供参考。