激发型CD40单克隆抗体联合特异性细胞毒T淋巴细胞对B细胞淋巴瘤的免疫治疗作用

目的研究激发型CD40单克隆抗体5C11联合特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对B细胞淋巴瘤的免疫治疗作用,方法人B细胞淋巴瘤Daudi细胞株经5C11刺激24或48 h,Annexin V/PI结合实验测定凋亡率,流式细胞术检测Fas表达率外周血单个核细胞来源的树突状细胞(DC),经凋亡Daudi细胞负载、5C11诱导成熟后,与自体T细胞混合培养,激发特异性CTL,JAM法检测5C11、CTL或5C11联合CTL对Daudi细胞的杀伤效应。皮下注射Daudi细胞,建立人源化SCID小鼠B细胞淋巴瘤模型;接种肿瘤细胞1周、3周后,分别经腹腔注射5C11、CTL、5C11 CTL进行治疗,通过肿瘤生长曲线、荷瘤小鼠生存期评价疗效。结果5C11作用后,Daudi细胞表面Fas的表达率显著上调,但细胞凋亡率没有明显改变。特异性CTL能有效杀伤靶细胞,且与5C11联合应用后,Daudi细胞DNA片段形成率显著增高,8 h为71.9%±4.0%,12 h达82.6%±4.4%经5C11、CTL、5C11联合CTL治疗后,荷瘤小鼠体内肿瘤生长速度均显著减缓,而且在低肿瘤负荷小鼠中,CTL、5C11联合CTL治疗分别取得了30.0%和70.0%的完全缓解率,与对照组相比,各治疗组小鼠生存期显著延长。结论激发型CD40单抗5C11可显著上调细胞表面Fas的表达,增强Daudi细胞对诱导凋亡的敏感性,从而促进肿瘤特异性CTL的体外杀伤和体内治疗效应。     

精子蛋白17单克隆抗体-多柔比星免疫偶联物体内外靶向抗卵巢癌活性研究

目的:将抗精子蛋白17(anti-Sp17)单克隆抗体(3C12)与多柔比星(DOX)偶联,并考察偶联物的体内外抗卵巢癌作用.方法:以二琥珀酰亚胺基酒石酸盐(DST)为交联剂制备3C12-DOX偶联物;免疫荧光法检测3C12-DOX的内化作用;MTT法测定3C12-DOX对Sp17+卵巢癌细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测细胞的凋亡率.建立高表达Sp17荷瘤裸鼠模型,分为5组给药,分别经尾静脉注入生理盐水、3C12、S2D11-DOX、3C12-DOX和DOX,定期测量肿瘤体积和裸鼠体质量;实验结束时检测血液AST、LDH和CK-MB,检测心肌组织MDA和SOD,比较3C12-DOX和DOX对心脏的毒性.各组肿瘤称取质量,并检测肿瘤组织中细胞的凋亡率.结果:Sp17单克隆抗体(3C12)与DOX成功偶联,形成的3C12-DOX偶联物能够与Sp17+的细胞结合,并内化至细胞内;MTT结果显示,3C12-DOX偶联物能明显杀伤SK-OV3和HO8910细胞,加速细胞凋亡.在体实验中,注射3C12-DOX偶联物组的肿瘤体积明显小于其他对照组(DOX组除外).而与DOX组对比,3C12-DOX毒副作用明显降低.结论:3C12-DOX是潜在的靶向治疗卵巢癌的药物.     

青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞株血管内皮生长因子及其受体表达的影响

 目的　研究青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞株血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR）的影响。方法　酶联免疫吸附法检测非细胞毒性浓度（5、10、20 ng／ml）青蒿琥酯作用SHI-1细胞后培养上清液VEGF浓度,流式细胞术检测有或无青蒿琥酯作用时,SHI-1细胞表面VEGFR-1及VEGFR-2阳性表达率。结果　培养24、48 h后,无青蒿琥酯作用的 SHI-1细胞培养上清液VEGF质量浓度分别为（980.3±2.2）、（982.4±2.3）pg／ml,VEGFR-1表达率分别为（5.40±3.11）%和（4.45±2.85）%,VEGFR-2表达率分别为（13.90±2.26）%和（13.95±1.96）%。 5、10 、20 ng／ml青蒿琥酯作用24 h后,SHI-1细胞培养上清液VEGF质量浓度分别为（234.6±1.8）、（114.9±1.6）、（108.8±1.5）pg／ml,作用48 h后分别为（62.3±1.7）、（60.9±1.6）、（32.7±1.7）pg／ml,与培养相同时间无青蒿琥酯组相比,VEGF浓度明显下降（均P＜0.05）,且相同浓度青蒿琥酯作用24 h与48 h间差异亦有统计学意义（均P＜0.05）。5、10 、20 ng／ml青蒿琥酯作用24 h,VEGFR-1阳性率分别为（4.30±2.21）%、（4.20±1.37）%和（3.90±1.86）%,作用48 h后分别为（3.80±2.87）%、（3.60±1.73）%和（3.00±1.82）%,相同作用时间不同浓度青蒿琥酯组间及相同浓度作用不同时间组间VEGFR-1阳性率差异均无统计学意义（均P＞0.05）;作用24 h后,SHI-1细胞VEGFR-2阳性率分别为（4.40±1.15）%、（3.10±0.68）%和（1.10±0.72）%,作用48 h后分别为（3.00±1.68）%、（2.20±0.93）%和（0.60±0.92）%,3个不同浓度青蒿琥酯作用相同时间后VEGFR-2表达率降低（均P＜0.05）,相同浓度作用24与48 h间差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论　SHI-1细胞株高分泌VEGF,青蒿琥酯可下调VEGF分泌及VEGFR-2的表达,而对VEGFR-1表达的调节作用不显著。     

MT方案治疗急性单核细胞白血病的疗效及其与染色体核型的关系

 目的　研究米托蒽醌联合替尼泊苷（MT）方案在急性单核细胞白血病（M5）诱导缓解中的疗效及患者不良反应,并观察疗效与白血病染色体核型的关系。方法　将33例M5患者按治疗史分两组：初治组23例（A组）、DA（柔红霉素联合阿糖胞苷）或HDA（三尖杉酯碱、柔红霉素和阿糖胞苷） 1个疗程无效组10例（B组）。按核型预后分两组：预后中等组29例（C组）,预后不良组4例（D组）,均采用MT方案2个疗程诱导缓解,分别统计4组的临床疗效及患者不良反应。结果　MT方案对A、B组的M5诱导完全缓解（CR）率分别为83 %（19／23）及60 %（6／10）,有效率达91 %（21／23）及70 %（7／10）。C、D组CR率分别为83 %（24／29）及25 %（1／4）,有效率为88 %（26／29）及50 %（2／4）,其中复杂核型CR率为0（0／3）,非复杂核型的11q23染色体异常患者一次化疗达CR率100 %（4／4）。MT方案对M5化疗后白细胞最低点在第（7±3）天出现,为（0.4±0.2）×109／L,白细胞＜1×109／L时间达（8±5）d,未见化疗相关死亡病例。结论　MT方案简单有效、较安全,是治疗M5的较佳化疗方案,对1个疗程DA、HDA方案无效者亦可试用。MT方案化疗疗效与核型预后分组有关,对11q23染色体异常的M5患者疗效较好,对复杂核型患者疗效欠佳。     

氟比洛芬酯联合颈丛神经阻滞用于甲状腺癌联合根治术的超前镇痛

背景与目的：超前镇痛是伤害性刺激作用于机体之前采取的一种措施,可防止神经中枢敏感化,减少和消除伤害引起的疼痛。本研究采用氟比洛芬酯联合颈丛神经阻滞用于甲状腺癌联合根治术的超前镇痛,采用多药物多途径的多模式联合超前镇痛,以尽可能消除外周和中枢敏化的形成,从而取得完善、长效的镇痛效果。方法：2009年6-8月间,选择60例择期行单侧甲状腺癌联合根治术的患者,随机分成A、B和C3组,A组：氟比洛芬酯＋颈丛神经阻滞作为的联合超前镇痛;B组：颈丛神经阻滞作为超前镇痛;C组：单纯全麻组。A组术前30min及皮肤缝合毕即刻分别给氟比洛芬酯50mg稀释至20mL静脉缓慢（1min以上）推注,B、C组分别在相同时点给予生理盐水对照,A、B组均行双侧浅颈丛神经阻滞,给予0.375%罗派卡因20mL。记录A、B两组颈丛阻滞起效时间、手术时间、拔管时间以及芬太尼用量。分别于术后1、4、8、24h疼痛视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）（静息和活动）,以及恶心呕吐、嗜睡、呼吸抑制等不良反应的发生情况。结果：在神经阻滞的起效时间上A、B组分别是（7.47±1.04）和（8.75±136）min,两组相比差异有统计学意义（P〈0.05）;术中A、B和C组芬太尼用量分别是（0.36±0.04）、（0.40±0.06）和（0.45±0.07）mg,A组与B组、A组与C组相比,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;术后疼痛视觉模拟评分方面,术后4h和8h（活动）A、B组与C组分别是（26±8）和（32±6）、（25±6）和（37±5）、（36±6）和（40±6）mm,A组与C组、B组与C组、A组与B组相比,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;而术后24h（静息和活动）A、B和C组分别是（25±4）和（34±5）、（27±5）和（36±5）、（31±5）和（40±6）mm,A组与C组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。不良反应方面,恶心呕吐发生情况A、B与C组分别是1、0和5例。结论：氟比洛芬酯联合颈丛神经阻滞用于甲状腺癌联合根治术的超前镇痛可以提供更加快速、完善、长效的镇痛效果,起到阿片类药物节约效应,可有效地减少其不良反应的发生。     

5-FU核-壳型共聚物纳米胶束的制备及其体内释药的研究

背景与目的:5-氟尿嘧啶(5-FU)属抗代谢类的抗癌药,其在体内半衰期仅为5min,临床上为了维持长时间的稳态浓度,往往采取持续静脉滴注(48h、72h、28d)的给药方式,因此,有必要开发新型5-FU缓释制剂。本研究的目的是探讨两亲嵌段共聚物聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯(PEG-PBLG)为载体的5-FU核-壳型缓释型纳米胶束的制备、形态特征及体内释药特性。方法:用阴离子聚合法制备PEG-PBLG纳米聚合物;透析法制备5-FU纳米胶束;透射电镜、扫描电镜观察5-FU胶束形态;紫外分光光度法测定载药量;高效液相色谱法检测5-FU纳米胶束在体内的释药特性。结果:PEG-PBLG包裹的5-FU纳米胶束呈圆形或椭圆形,直径约为180～250nm,中间药库区大小约为200nm,周围亲水区厚度约为30nm,载药量为(29.500±0.015)%。5-FU对照组在体内呈一室模型,半衰期(t1/2)仅为5.3min,最高浓度(Cmax)17047.3μg/L,峰浓度时间(Tmax)为给药后即刻,浓度-时间曲线下面积(AUC)为6263.7μg/(L·min);而5-FU/PEG-PBLG纳米胶束注射入体内后呈典型的纳米胶束释药模型即突释-缓释模型,t1/2为63.2min,Cmax为4563.5μg/L,Tmax为1.25h,AUC为5794.5μg/(L·min)。5-FU/PEG-PBLG纳米胶束比普通的5-FU制剂Tmax长(P<0.01),Cmax较低(P<0.01),t1/2较长(P<0.01),而同样剂量5-FU和5-FU/PEG     

高效液相色谱法测定人造靶点导向的吡柔比星在肿瘤组织中的浓度

[目的]制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸吡柔比星免疫靶向偶联物，在肿瘤组织中接种人IgG非特异性靶点，探讨人造靶点免疫导向治疗肿瘤的可行性。[方法]制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸吡柔比星（THP）偶联物，建立荷瘤小鼠模型。采用EUSA法测定小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸毗柔比星偶联物抗体活性；体外细胞毒性实验（四甲基偶氮唑蓝法）比较分析小鼠抗人IgG、游离盐酸吡柔比星、小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸吡柔比星对S180细胞的毒性作用；采用高效液相法（HPLC）测定肿瘤组织中盐酸吡柔比星药物浓度。[结果]制备的偶联物中，小鼠抗人IgG、葡聚糖与盐酸毗柔比星物质的量比为1：2．5：54；偶联物保留了小鼠抗人IgG抗体活性；体外细胞毒性实验证明偶联物对S180细胞有体外杀伤作用。对荷S180肉瘤小鼠进行体内导向治疗试验，高效液相色谱法测定小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸吡柔比星＋人IgG组中肿瘤组织含盐酸吡柔比星含量较盐酸吡柔比星组增加（P〈0．01）。[结论]通过在肿瘤组织中接种IgG非特异性靶点，用抗人IgG单克隆免疫导向吡柔比星治疗小鼠S180肉瘤具有一定的可行性。     

全反式维甲酸联合小剂量三尖杉酯碱治疗急性早幼粒细胞白血病18例

 目的　观察全反式维甲酸（ATRA）和ATRA联合小剂量三尖杉酯碱治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的疗效。方法　41例APL分为两组：A组23例采用ATRA。B组18例采用ATRA联合小剂量三尖杉酯碱。结果　A组完全缓解（CR）率为78.3 %,B组CR率为94.4 %,达到CR时间A组为（41.50±8.74）d,B组为（31.82±7.20）d（P＜0.01）,A组高白细胞症发生率为43.5 %,B组高白细胞症发生率为11.1 %（P＜0.05）。结论　ATRA联合小剂量三尖杉酯碱治疗APL的CR率高,能缩短CR时间,减少高白细胞症,有临床推广应用价值。     

EB病毒microRNA Bart6-5p表达对鼻咽癌上皮间质转化的影响

 目的 探讨EB病毒microRNA Bart6-5p表达对鼻咽癌细胞上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）的影响。方法 采用实时荧光定量PCR检测EB病毒阳性的鼻咽癌细胞株C666-1和淋巴瘤细胞株Akata、Daudi、Raji及Namalwa中microRNA Bart6-5p和Dicer mRNA的表达,在恒定携带EB病毒且microRNA Bart6-5p表达最高的鼻咽癌细胞株C666-1中抑制microRNA Bart6-5p表达后检测Dicer和与鼻咽癌EMT相关分子标志物E-cadherin、Vimentin、ZEB1和ZEB2 mRNA的表达。结果 EB病毒阳性细胞株中microRNA Bart6-5p mRNA表达水平按C666-1、Akata、Daudi、Raji及Namalwa顺序依次递减（P＜0.05）,而Dicer mRNA表达水平则依次递增（P＜0.05）。在恒定携带EB病毒且microRNA Bart6-5p表达最高鼻咽癌细胞株C666-1中抑制microRNA Bart6-5p表达后,Dicer mRNA表达呈升高趋势（P＜0.05）,与鼻咽癌EMT相关分子标志物E-cadherin mRNA表达呈升高趋势（P＜0.05）, Vimentin、ZEB1及ZEB2 mRNA表达则呈下降趋势（P＜0.05）。结论 EB病毒microRNA Bart6-5p可能通过调控Dicer基因表达而进一步影响鼻咽癌的上皮间质转化过程。     

携带hIFN-γ的内皮祖细胞增强肿瘤化疗后维持治疗的效果

目的：观察携带hIFN-γ基因的内皮祖细胞（endothelial progenetor cells carrying hIFN-γ, EPC-hIFN-γ）在肿瘤化疗后维持治疗的效果。方法：LoVo大肠癌细胞加入喜树碱-11（camptothecin-11, CPT-11）,再分别加入 hIFN-γ或（和）西妥苷单抗（cetuximab, C225),MTT法观察其对LoVo细胞的抑制作用。荷Lovo大肠癌细胞移植瘤裸鼠在给药CPT-11后,再给予EPCs-hIFN-γ或（和）C225,观察对肿瘤的抑制作用和对裸鼠生存期的影响。结果：在体外,肿瘤细胞中加入CPT-11后再加入hIFN-γ或（和）C225可进一步抑制肿瘤细胞的生长。荷瘤裸鼠在给予CPT-11 50 mg/kg后,分别给予EPCs-hIFN-γ、C225或者EPCs-hIFN-γ + C225,均可以进一步抑制肿瘤的生长\[肿瘤平均体积(2 024.28±1 048.40) mm3 vs (764.94±720.14) mm3、(233.85±186.97) mm3、(186.95±133.43) mm3、(163.9±173.39) mm3,P＜005),均可进一步延长荷瘤裸鼠的生存期（中位生存期34.2 d vs 39.4 d、44.5 d、48.5 d、51.3 d,P<0.05或P＜001）;其中以CPT-11+EPCs-hIFN-γ+C225的治疗效果最好。结论：EPCs-hIFN-γ用于化疗后维持治疗可以抑制肿瘤细胞生长,延长荷瘤小鼠的生存。     

肠系膜伯基特淋巴瘤一例

患者男,6岁,因腹部包块伴呕吐1周入院.体格检查:于脐部偏左可触及一类圆形肿块,大小约15 cm×10 cm,无发热或畏寒.CT检查示腹腔内肠系膜源性肿物,超声示左侧腹腔不均质实性占位.     

Évaluation du protocole CMA renforcé dans le traitement du lymphome de Burkitt endémique au CHU de Yopougon à Abidjan

We report the results of the protocol CMA (cyclophosphamide, methotrexate, Aracytine^®) reinforced of 26 patients affected by Burkitt lymphoma in facial-maxillary localisation, in a retrospective study from January 2000 till December 2007 and prospective from January till September 2008. Their average age was 7.89 years, with a sex ratio of 2.71. The global response to the treatment was 92.3% with 57.7% of complete remission and 34.6% of incomplete remission. The morbidity related to treatment was essentially a haematological complication (84.6%) and hydroelectrolytic complication (84.6%). Evolution was made towards death in 30.8 and 15.4% were lost of view. The median monitoring was 18.2 months. Treatment response was linked to the therapeutic compliance (P < 0.001), and the delay of consultation (P = 0.01).     

椎管内Burkitt淋巴瘤一例并文献复习

患儿男,10岁,因后背疼痛伴双下肢麻木2天入院。患者入院前2天无明显诱因下出现背部间断性疼痛,每次持续几秒钟至几分钟后能自行缓解。疼痛一天后出现双下肢麻木,随后出现双下肢行走不能,平卧及休息均不能缓解。查体：神清,精神可,心肺听诊无明显异常,脊柱生理性弯曲存在,双上肢肌张力正常,肌力Ⅴ级,双下肢肌张力正常,肌力Ⅳ级,病理征未引出。     

Burkitt Lymphoma — Subtypes,Pathogenesis, and Treatment Strategies

Burkitt's lymphoma (BL) is a rare and highly aggressive Non-Hodgkin lymphoma (NHL) with a germinal center phenotype, a nearly universal myc oncogene translocation to an enhancer element and a proliferation index greater than 95%.¹ Bcl-2 is not expressed as opposed to double-hit or triple-hit lymphoma. Genetic mutations and aberrancy involving the phosphatidylcholine 3-kinase and cyclin-dependent kinase pathways are also involved.2, 3, 4, 5 Rarely patients present with stage I disease and others are considered as high risk if greater than stage I or with elevated LDH or masses greater than 10 cm.     

Prolonged low intensity EPOCH–rituximab has improved toxicity in Burkitt lymphoma compared with standard short,high intensity therapy

Burkitt lymphoma is an aggressive form of non-Hodgkin lymphoma that has a short doubling time, thus intense short-cycle chemotherapy has been thought to be essential. A recent NCI-sponsored clinical trial investigated DA-EPOCH-R given to 19 HIV-negative patients and a short course regimen (SC-EPOCH-RR) given to 11 HIV-positive patients in hopes of maintaining the efficacy of the regimen while decreasing the typical side effects from the intensive short-cycle chemotherapy. Low intensity EPOCH-R based therapy achieved excellent rates of efficacy despite a significant difference in the median cumulative dose between the DA-EPOCH-R and SC-EPOCH-RR cohorts. Furthermore, both cohorts experienced mainly grade 1 and grade 2 toxicities, with SC-EPOCH-RR cohort patients experiencing less adverse events than DA-EPOCH-R cohort patients. This recent clinical investigation suggests the most important therapeutic principle is not the intensity but rather the length of exposure time above an effective threshold concentration. Since short, intense bolus doses are the standard therapy for Burkitt lymphoma, these findings are clinically relevant and significant.     

Burkitt淋巴瘤临床分析

目的:分析我中心2007年至2013年确诊的34例Burkitt淋巴瘤（BL）的病理、临床特征及12例临床特点和预后关系。方法:回顾分析2007年-2013年我中心确诊的34例BL（占淋巴瘤总数1.43%,B细胞淋巴瘤2.03%）的病理资料及12例接受治疗的患者临床资料,治疗方法为［hyperCVAD（A+B）±R（利妥昔单抗）］±自体造血干细胞移植（allo-HSCT）,观察短期疗效［完全缓解（CR）和部分缓解（PR）］和长期疗效［包括1年和2年总生存率（OS）及无进展生存率（PFS）］,分析预后影响因素。结果:34例患者中男∶女=10∶7,中位年龄23.5岁（3~74岁）,0~14岁29.4%（10/34）,15~22岁23.5%（8/34）,大于22岁47.1%（16/34）。全身各脏器均可发病,主要以浅表淋巴结、脑部及鼻咽部为主。Ki-67指数均大于95%以上;c-myc阳性77%（10/13）。其中12例在我中心接受治疗,Ⅱ期1例（8.4%）,Ⅲ-Ⅳ期11例（91.7%）。诱导治疗:11例（91.7%）采用hyperCVAD（A+B）方案化疗,3疗程后2例达PR,9例（82%）达CR。9例达CR的患者中有1例采用CHOPE方案巩固化疗,1年内复发;5例采用hyperCVAD（A+B）巩固化疗6疗程,1例1年后复发,2年OS及PFS分别为100%、80%。3例采用hyperCVAD（A+B）+利妥昔单抗（R）方案巩固化疗6疗程,2年OS及PFS均为100%,PFS较未用R组高。3例在巩固、维持治疗后序贯allo-HSCT,随访至2年无复发,病情稳定,OS及PFS均为100%。随访2年无复发8例,年龄小于15岁占50%（4/8）,15~22岁占37.5%（3/8）,大于22岁占12.5%（1/8）。结论:BL主要发生在儿童和青少年,男性高于女性,可累及全身各个器官,诊断时临床分期常较高,需要高强度、高频率、足疗程、规律化疗,尤其是儿童及青少年患者。利妥昔单抗和大剂量化疗药物协同使用,序贯自体造血干细胞移植巩固治疗能提高OS率与PFS,但仍需要临床大样本研究。     

Two Translocations: a Follicular Variant 2; 18 and a Burkitt 8;14 in a Small Non Cleaved Non Hodgkin's Lymphoma

The t(2;18)(p11;q21) has recently been described in two lymphoma cases as a variant of the t(14;18)(q32;q21) typical chromosome translocation in follicular lymphomas. Molecular investigations of t(2;18) confirmed juxtaposition of the bcl-2 gene to the immunoglobulin kappa (Igk) locus and described a new break point region on 18q21 found also in the recently reported, second follicular variant translocation (18;22)(q21;q11). Thus, cytogenetic and molecular studies established the same mechanism of (onco)gene activation by the heavy or light Ig gene in follicular lymphomas and Burkitt lymphomas.

We describe a case of small non cleaved non Hodgkin's lymphoma in which translocation (2;18) coexisted with a typical (8;14) Burkitt translocation. Absent HLA-DR expression by the tumour cells was noted in this case. The possible implications of the cytogenetic and immunologic findings are discussed.