应用双抗体夹心ELISA法测定病毒疫苗中的牛血清

本文介绍了一种更为敏感的双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测病毒疫苗中残存的牛血清含量,并与常规使用的免疫电渗泳法(IEOP)进行了比较。作者采用的包被抗体为羊抗牛IgG,指示抗体为兔抗胎牛IgG,以稀释的胎牛血清作为标准蛋白,被检样品包括麻疹-腮腺炎-风疹三联疫苗及其单价疫苗,脊髓灰质炎三价疫苗和狂犬病疫苗。试验结果:(1)在指示抗体中加入5%正常羊血清可减少非特异性交叉反应。(2)该法对牛血清蛋白具有高度特异性,将试验用牛、马和人血清作10~(-4)稀释后蛋白含量分别为     

人血浆皮质醇放射免疫测定(摘要)

近十多年来,用同位素作为示踪剂的方法测定肾上腺皮质功能已显示出灵敏度高、特异性强的优点。目前采用的有~(125)碘-皮质醇放射免疫测定法和~3氢-皮质醇竞争性蛋白结合分析法。最近用酶标法和液体层析法测定血浆皮质醇,其灵敏度与同位素法相似,前者只需分光光度计在一般实验室即可进行。本文采用~(125)碘-皮质醇试剂箱对74名健康献血员分别于上午8、9、10时取血检查皮质醇,经     

放射免疫分析法及其在药理学中的应用

放射免疫分析法(Radioimmlunoassay,简称 RIA)是一种将同位素的放射测量与免疫反应原理相结合的高灵敏度的微量分析法。由于标记抗原比度不断提高,目前 RIA的测定灵敏度已达微微克(10~(12)克,pg)水     

酶标记免疫分析法及其应用

一九五九年Berson及yalow迠立了放射免疫分析法,(RIA),目前放射免疫分析法的测定灵敏度已达微微克(10~(12)克,pg)水至,已普遍用于测定许多抗原性的蛋白质,酶和多肽激素,也广用于测定许多半抗原性化合物如:甾体激素、药物等。但RIA法也还存在一定缺点,如:试剂的半衰期短,费用高,需要有同位素实验室和计     

测定血清中抗双链DNA抗体诊断红斑狼疮的初步临床应用

引言系统性红斑狼疮(SLE)患者具有多种自身抗体。目前认为以抗核抗体(ANA)和抗双链DNA抗体(A-d_sDNA)具有诊断意义。ANA虽然敏感性较高(几达100％),但特异性较差,而检测A-d_sDNA抗体一旦呈现阳性则高度提示SLE。国外许多研究者的研究结果表明A-d_sDNA抗体为SLE所特有,其临床诊断及病情观测的意义较ANA和LE细胞可靠。国内近年来开展这项检测多采用放射免疫法,因其条件要求较高,难以推广。1981年国内徐     

抗-HCV的检测及其临床意义

1987年Chco等应用复杂的分子生物学方法,将丙型肝炎病毒(HCV)克隆出来,相继建立了各种检测方法,由于HCV在血中浓度仅为10~2～10~3CID/ml,所以对HCV的检测需要有较高的敏感性和特异性。由于抗-HCV的检测对HCV感染的诊断价值很高,在预后和筛选供血员方面也有一定的临床价值。鉴于此,本文就HCV特异性标志物一特异性抗体的检测及其临床意义作简要综述。1 测定抗-HCV的方法 目前,测定抗-HCV抗体的方法不少,应用较广的包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、重组免疫印迹法(RIBA)、放射免疫法(DIA)、酶免疫测定(EIA)等。     

化学发光和生物发光免疫测定法

发光免疫测定法(Luminescence Immu-noassay,LIA)是通过发光反应检测抗原抗体反应的一类分析方法。一般的发光反应是氧化-还原反应,在反应中能量以可见光的形式释放,可用发光计(Luminometer)或合适的仪器测定光发射率。这类发光测定法的灵敏度高,但特异性差。将灵敏度高的化学发光或生物发光反应与特异性高的抗原-抗体反应的免疫测定法相结合,就产生发光免疫测定法。发光免疫测定法是一种超微量的分析法,能分析10~(-12)～10~(-15)mol 浓度的生物样品,应用于医药、生物和生化的微量物质的测定中。在发光免疫测定中,在抗原或抗体上标记     

地方性甲状腺肿非病区人群碘代谢调查(摘要)

本调查以桐梓县元田乡7～14岁在校学生为对象作甲状腺检查,同时在当地儿童、成人中分别随机抽样测定尿碘(碱灰化法)、血清T4(蛋白竞争结合分析法)、T3(放射免疫树脂法)、TSH(放射免疫双抗体法)、甲状腺吸~(131)碘率(限制高碘饮食,用闪烁探头及FH—408定标器,口服~(131)碘2微居里后,于第3、6、24小时分别测定)。结果表明:一、元田乡7—14岁学生甲状腺肿大率14.2％,较为接近病区相应标准(20％)。二、成人及儿童尿碘均值都在正常低水平。其中40.3％的人群低70ug/克肌酐;26.     

乳腺癌MCF-7细胞p21~(WAF1/CIP1)启动子区HDAC1高功能结合位点的研究

目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21~(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L~(-1)0.88μL SAHA(S组)、0.625 nmol·L~(-1)10μL Leptin(L组)处理24 h,对照组(B组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液与HDAC1抗体孵育,收集纯化结合HDAC1抗体的DNA片段,应用Realtime PCR法检测p21~(WAF1/CIP1)启动子区从TSS到其上游(+2~-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCT法分析。结果 B组中,HDAC1抗体在p21~(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段有高亲和力,f8片段达最高。S组中,HDAC1抗体与p21~(WAF1/CIP1)启动子区f1~f10片段结合量明显低于对照组,f8片段达最低,而在L组此片段与HDAC1抗体结合量达最大值。结论乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中,HDAC1可被招募至p21~(WAF1/CIP1)启动子区,该启动子区上游-2 800 bp至-3 200 bp DNA片段是与HDAC1高度结合的靶功能区。     

临床检验中化学发光免疫分析的应用研究

目的探讨分析临床检验中化学发光免疫分析的应用。方法我院在2008年2月至2011年12月期间共接诊各类甲状腺疾病患者150例,将其划分为甲状腺肿瘤组50例、甲亢组50例、其他的甲状腺疾病50例,同时选取体检健康50例作为对照组,分别采取化学发光免疫分析及放射免疫分析检测血浆中甲状腺球蛋白,对比分析4个组的检测结果。结果化学发光免疫分析法测得甲状腺球蛋白的浓度明显高于放射免疫分析法,差异显著具有统计学意义(P<0.05);同时测得患病组假阴性例数显著低于放射免疫分析法,差异显著具有统计学意义(P<0.05);其中对照组两组检测方法的灵敏度和特异性均为100%,甲亢组化学发光免疫分析检测法灵敏度和特异性均为100%,放射免疫法为96%、95%,无统计学意义(P>0.05)。甲状腺肿瘤组及其余甲状腺疾病组化学发光免疫分析法的灵敏度及特异性均大于放射免疫法,并且患病组的符合率均大于放射免疫法差异显著具有统计学意义(P<0.05)。结论化学发光免疫可有效的对甲状腺疾病进行检测,可为临床诊断提供准确数据,应在临床检验中推广应用。     

神经生长因子对小鼠脾淋巴细胞DNA合成、cAMP和cGMP含量的影响

神经生长因子(NGF)是一种营养神经肽,在感觉和交感神经元的生长、维持和存活中起促进作用。NGF 还是一种神经免疫调节剂,可通过多种途径调节免疫反应。鉴于脾细胞表面存在特异性 NGF 受体,作者分别应用~3H-胸苷(~3H-TdR)掺入法及放射免疫法观察2.5s NGF 对小鼠脾淋巴细胞增殖及其细胞内 cAMP 和 cGMP 含量的影响。结果发现,NGF(4×10~(-7)～4×10~(-8)moL/L)在体外可剂量依赖性地抑制~3H-TdR 掺入到脾淋巴细胞 DNA 中,并能提高细胞内 cAMP 水平,但对 cGMP 无影     

竞争性放射分析与临床医学

竞争性放射分析近十几年来的应用日益广泛,是发展极为迅速的一种超微量测定的新技术。它可用来检测血液或其他体液中极为微量的物质,且特异性强,精确性好以及测示较简便。最初由Yalow等人利用免疫反应的原理和放射测量技术检测血浆中胰岛素的含量,故称放射免疫分析(Radioimmunoassay,简称RIA)。后发展到可不用抗原和抗体,而利用被测物质和能与之结合的物质相结合作为测定基础,并不涉及免疫反应,故广义地可称为饱和分析(Saturation analysis)。常用的几种分析法及其原理放射免疫分析:RIA的根据是用放射性标记的抗原和未标记的抗原与特异抗体竞争作用,可用下式表示:     

胰岛素酶联免疫测定法的研究快速制备高质量胰岛素抗血清(Ⅰ)

本文报告制备胰岛素抗血清的新方法。每只免疫动物的胰岛素用量为200～300μg.免疫时间60天。经放射免疫分析,10株抗血清的50%B/T稀释度均大于1:10万,最高者达1:26万。用计算机进行Scatchard分析,10株抗血清的Ka_1均大于1.5×10~(12)L/M,Ka_2均小于4×10~(?)L/M。[Ab~·]_1,在0.5～1.6×10~(-12)M/L之间,[Ab~°]_2均大于1×10~(-11)M/L。10株抗血清与前胰岛素、胰多肽和胰高血糖素进行放免分析,均无交叉反应。     

HBsAg前S(2)区的11个连续性氨基酸残基具有两个不同但相互重叠的抚体结合位点

作者用3株抗前S(2)合成肽(p133-151/ayw)单克隆抗体(McAb)和2株抗HBsAg/p33(ayw)完整多肽的McAb,研究了鼠对HBsAg前S(2)区体液免疫应答的特异性。方法:(1)间接固相放射免疫法:合成一系列与HBsAg前S(2)区相应的具有组特异性或亚型特异性的肽,用这些肽和HBsAg/p33(自然蛋白)作为固相;羊抗鼠IgG作第二抗体;猪抗羊     

荧光偏振免疫法监测血药浓度

荧光偏振免疫法(Fluorescence polarigation immunoassay,FPIA)是近年来发展起来的免疫测定方法。免疫分析法自1959年Berson及Yalow创立放射免疫法(RIA)以来,由于其灵敏度高、特异性强、     

酶标记免疫分析法及其在体液中药物测定的应用

1959年Berson及Yalow建立了放射免疫分析法(RIA),其灵敏度可达到微微克(10~(-12)g,pg)水平,目前已应用于测定许多抗原性蛋白质、酶和多肽激素,也用于测定半抗原性化合物如甾体激素类药物。RIA法存在一定缺点,如试剂的半衰期短、费用高,需要有同位     

放射免疫分析法与化学发光法检测血清HCG效果对比分析

目的 探讨分析放射免疫分析法与电化学发光法检测血清HCG的效果.方法 将我院检验科收治的100例患者分为异位妊娠50例、葡萄胎30例、绒癌20例三组,另取正常35例为对照组,使用放射免疫分析法与电化学发光法分别检测四组患者的血清HCG.结果 放射免疫分析法的异位妊娠检测值最低,为80.1 mIU/ml,电化学发光法的绒癌检测值最高,为978.9 mIU/ml.患病三组检测值均高于对照组.电化学发光法检测的特异性为100％,高于放射免疫分析法(P＜0.05).结论 电化学发光法特异性高于放射免疫分析法,效果更显著.     

放射免疫法测定胰岛素制剂中猪前胰岛素、胰高糖素和胰多肽的含量

<正> 放射免疫是一种测定技术,应用日益广泛。由于此技术具有许多特点,已成为当今常用的超微量分析方法之一。为进行《胰岛索抗原性的研究》及《高纯度低抗原性胰岛素制剂的研究)等科研项目,自1982年开始,我室陆续建立了猪胰岛素、前胰岛素、胰高糖素和胰多肽的放射免疫分析法,并应用于检测胰岛素制剂中各种激素的含量。兹简介于下供参考。一、放射免疫分析的原理和条件放射免疫分析的基本原理是竞争性结合(Competitive binding)或竞争性抑制(Competitive inhibition),也称为置换(Displaccment)。本法是在试管内免疫反应系统中,引入放射性核素标记抗原,它与原型抗原(未     

山扁豆属植物中具有抗微生物、抗痉挛作用的四氢化蒽

山扁豆属Cassia singueana是东非的一种药用植物。从它的根中得到四个四氢化蒽类化合物。它们具有抑制革兰氏阳性菌生长的作用。最小抑菌浓度如下:torosachry-sone 70×10~(-6)克/毫升,germichrysone 30×10~(-6)克/毫升,singueanol-I 25×10~(-6)克/毫升,singueanol Ⅱ 50×10~(-6)克/毫升。si-ngueanol-I还表现了类似于罂粟硷的抗痉挛活性。将C.singueana根粉碎,用氯仿在3000     

抗AFPMcAb在诊断肝癌中的应用——附三种检测方法的比较

AFP测定是目前肝癌诊断中特异性较强、敏感性较高、简便易行的一项血清学指标。为适应肝癌高发现场研究的需要,我们应用杂交瘤技术获得了一株能分泌 AFPMcAb 的杂交瘤细胞株6D_2。将此 McAb 以 ELISA 法用于肝癌的临床诊断,并与多克隆抗体放射免疫(放免法)和放射免疫火箭电泳自显影(火箭法)作比较,结果分析如下。