皂荚提取物对人肝癌细胞相关癌基因表达的调控作用及端粒酶的影响

目的：研究皂荚提取物对人肝癌细胞的增殖、相关癌基因表达的调控作用及端粒酶的影响。方法：体外培养人肝癌细胞bel-7402，检测不同浓度皂荚提取物（0．05mg／ml、0．1mg/ml、0．2mg／m1）对人肝癌细胞bel-7402细胞增殖、细胞周期、肝癌相关基因（bax、bcl-2、p53）的表达及端粒酶活性的影响。结果：0．05mg／ml-0．2mg／ml浓度组皂荚提取液对人肝癌细胞bel-7402细胞增殖、调控癌基因与抑癌基因、促进癌细胞凋亡、抑制端粒酶活性差异均具有显著性意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论：皂荚提取物能够抑制人肝癌细胞增殖，促进细胞凋亡。     

塞来昔布对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响及作用机制

目的 探讨环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 用不同浓度(20～160μmol/L)塞来昔布,以不同时间段(24-72 h)处理宫颈癌Hela细胞,以四甲基耦氮唑蓝(MTT)法测定Hela细胞增殖抑制率.结果 不同浓度的塞来昔布对Hela细胞的增殖具有抑制作用,并呈现明显的时效和量效关系,与对照组相比有极显著性差异,(P＜0.01).塞来昔布诱导Hela细胞的凋亡率,与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01),并呈浓度依赖性.结论塞来昔布对宫颈癌Hela细胞具有抑制作用,并促进其凋亡,其作用可能与抑制COX-2活性表达及抑制细胞PGE2释放水平有关.     

叠氮胸苷增强顺铂对HeLa细胞敏感性的实验研究

目的观察叠氮胸苷(AZT)体外增强顺铂对宫颈癌HeLa细胞化疗敏感性的作用,并探讨可能的作用机制。方法将Hela细胞株分为空白对照组、AZT组(培养液中AZT终浓度为400μmol/L)、顺铂组(培养液中顺铂终浓度为20μmol/L)、联合组(培养液中AZT终浓度为400μmol/L,顺铂终浓度为20μmol/L),各组作用24 h,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,金氏公式评价AZT和顺铂的协同效果;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及周期分布;端粒重复序列扩增法联合酶联免疫吸附法检测各组端粒酶活性;RT-PCR法检测细胞hTERT mRNA水平。结果 AZT、顺铂均可抑制HeLa细胞增殖、诱导细胞凋亡、增加S期细胞数量、降低细胞端粒酶活性和hTERT mRNA水平,二者联合应用呈协同效应(P均<0.01)。结论 AZT能够增强顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化疗敏感性,这种作用与AZT能够抑制反转录酶活性和端粒酶活性有关。     

山茱萸水提取物对Hela细胞体外增殖的影响

目的探讨山茱萸水提取物对人宫颈癌细胞株Hela的体外增殖的抑制作用。方法采用MTT法及DNA琼脂糖凝胶电泳法检测山茱萸水提取物对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用并观察细胞形态变化。结果山茱萸水提取物对Hela细胞抑制作用较强，量效关系和时效大系良好；经不同浓度山茱萸水提取物作用的Hela细胞电泳均出现相差约200bp的DNA梯子状条带，形态学观察到细胞凋亡。结论山茱萸水提取物对人宫颈癌细胞株Hela的细胞增殖有较强的抑制作用，能诱导其细胞凋亡。     

槲皮素对胃癌细胞增殖的影响及机制探讨

目的观察槲皮素对胃癌细胞增殖的影响，并探讨可能的作用机制。方法采用不同浓度的槲皮素处理胃癌SGC7901细胞，以四氮唑盐（MTT）比色试验观察胃癌细胞增殖情况，以TRAP-ELISA方法检测胃癌细胞端粒酶活性，分别采用琼脂糖凝胶电泳法和TUNEL法检测胃癌细胞凋亡情况。结果槲皮素处理后胃癌SGC7901细胞增殖率及细胞端粒酶活性明显降低、细胞凋亡率增加，且呈浓度和时间依赖性（P〈0．05）。结论槲皮素可抑制胃癌细胞增殖，可能机制为抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡。     

人端粒酶反义寡核苷酸抑制三种不同分化程度胃癌细胞生长及作用机制研究

目的 研究特定序列人端粒酶反义寡核苷酸(AS-0DN)抑制三种分化程度不同的胃癌细胞(MKN-45、SGC-7901、MKN-28)生长的可能性，并阐述其抑制胃癌细胞生长的作用与胃癌细胞分化程度的相关性。方法 在指定的作用时问和浓度等条件下，以AS-0DN作用于不同分化程度的三种胃癌细胞，用改良端粒酶活性定量检测法测定AS-0DN片段作用前后胃癌细胞的端粒酶活性；用锥虫蓝染色法观察细胞活力；用倒置显微镜、电镜、流式细胞仪和原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡情况。结果以指定浓度的AS-ODN作用后，MKN-45和SGC-7901细胞出现明显的端粒酶活性和细胞生长抑制(P＜0．05)，但在同样浓度条件下，MKN-28胃癌细胞只出现端粒酶活性抑制。错义序列对照组则无明显变化。以10 μmol／L的AS-ODN连续作用三种胃癌细胞96h后，光镜、电镜和TUNEL法检测均发现MKN-45和SGC-7901细胞表现出特有的凋亡征象，流式细胞仪检测证实MKN-45和SGG-7901细胞的平均凋亡率在44．75％和33．56％，错义序列对照组则无明显变化(P＜0．05)。结论 AS-0DN能有效抑制胃癌细胞生长，其作用机制主要是抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡。AS-0DN对中分化胃癌细胞的生长抑制最显著，对低分化胃癌细胞的抑制作用略强于高分化胃癌细胞，提示端粒酶反义核酸的抑制作用不依赖于胃癌细胞的分化程度。     

没食子酸诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的机制

目的体外观察没食子酸对人宫颈癌Hela生长及凋亡的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法体外培养Hela细胞,用不同浓度的没食子酸作用为实验组,同时设对照组,以CCK8法测细胞增殖抑制作用、流式细胞仪检测p53和Bcl-2蛋白表达情况,扫描电镜下观察细胞形态的改变。结果不同浓度没食子酸作用Hela细胞24 h增殖抑制显著(P0.05),其抑制效应具有剂量依赖性,同时诱导Hela细胞凋亡、上调p53基因表达、下调Bcl-2基因表达(P0.05)。结论没食子酸可抑制Hela细胞的生长且随药物剂量的增加而升高,并可诱导肿瘤细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与细胞的基因调控有关。     

阿司匹林对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的 探讨阿司匹林对宫颈癌Hela细胞增殖的影响.方法 体外培养Hela细胞,分别以不同浓度阿司匹林干预.应用Giemsa染色观察细胞形态学的改变;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;采用MTT法测定细胞增殖抑制率.结果 Giemsa染色后可见阿司匹林组细胞体积缩小,凋亡小体形成,且随着浓度增加,凋亡率也增加;不同浓度阿司匹林作用Hela细胞48 h后,提取DNA电泳,可见明显的DNA裂解带;MTT结果显示,在1.0～10.0 mmol/L浓度区间内,随浓度增加和时间的延长,阿司匹林对细胞的抑制率逐渐增加.结论 阿司匹林在体外可抑制人宫颈癌Hela细胞增殖,其机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成有关.     

基于P53、Bax、Caspase-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的 基于P53、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响。方法 以宫颈癌HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度竹节参水提取物(0、50、100、150μg/ml)进行培养(分别为A、B、C、D组),MTT法检测HeLa细胞增殖抑制情况;TUNEL法对比HeLa细胞凋亡率;流式术观察HeLa细胞周期;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态;RT-PCR法测定P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果 与A组相比,B组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞增殖活力减弱。与A组相比,B组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。HeLa细胞周期在竹节参水提取物的作用下G0/G1期上升,S期下降。A组未添加竹节参水提取物,HeLa细胞细胞核形态为卵圆状...     

阿司匹林对宫颈癌Hela细胞凋亡及增殖的影响

目的研究阿司匹林对宫颈癌Hela细胞的增殖和凋亡的影响。方法不同浓度的阿司匹林(1.0、5.0、10.0 mmol/L)处理细胞48 h后,显微镜下观察细胞生长状况,采用水溶性四氯唑(WST)-1法检测细胞增殖情况;Hochest 33258染色、TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白。结果阿司匹林能够抑制Hela细胞增殖,诱导细胞凋亡,处理浓度在1 mmol/L时,细胞生长变慢;处理浓度达到5 mmol/L时,大量细胞凋亡;阿司匹林浓度高于5 mmol/L时,Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显增加。结论阿司匹林在体外实验条件下可抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并诱导其发生凋亡。     

外源性趋化因子CXC配体12对Hela宫颈癌细胞增殖作用及机制

目的探讨外源性趋化因子CXC配体(L)12对宫颈癌Hela细胞增殖的作用及机制。方法 CCK8实验考察不同浓度和不同时间的外源性CXCL12对宫颈癌Hela细胞增殖的影响;蛋白免疫印迹法检测不同浓度的外源性CXCL12对细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达量的影响。结果 48 h后,浓度40 ng/ml的外源性CXCL12对Hela细胞增殖作用明显高于0 ng/ml(P<0.05);72 h后,浓度20 ng/ml的外源性CXCL12对Hela细胞增殖作用明显高于0 ng/ml(P<0.05),且浓度40 ng/ml时尤其明显(P<0.01);与浓度0 ng/ml外源性CXCL12比较,浓度20 ng/ml和40 ng/ml外源性CXCL12显著上调宫颈癌Hela细胞ERK表达量(P<0.05)。结论外源性CXCL12可经活化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路而促进Hela宫颈癌细胞增殖活性。     

顺铂和苦参素对人肝癌细胞株HepG2端粒酶活性的影响

观察顺铂、苦参素对人肝癌细胞株HepG2端粒酶活性的影响,进一步探讨两种药物的可能作用机制。采用人肝癌细胞株HepG2作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性的变化。两种药物均具有抗HepG2细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导凋亡及抑制端粒酶活性的作用。对端粒酶活性的抑制可能是两种药物发挥抗肿瘤作用的机制之一。     

中药清毒栓对宫颈癌Hela细胞的抑制作用

目的探讨中药清毒栓诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及增殖抑制作用。方法采用胆囊收缩素-8肽(CCK-8)法检测清毒栓对Hela细胞增殖的作用,线粒体膜电位法检测Hela细胞凋亡的变化。结果高剂量清毒栓在24 h时对Hela细胞增殖具有明显的抑制及诱导细胞凋亡的作用,分别与空白对照组及清毒栓中、低剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05),清毒栓中剂量组与低剂量组比较无显著性差异(P>0.05)。结论中药清毒栓对宫颈癌Hela细胞抑制作用可能通过抑制肿瘤血管内皮细胞的增殖及降低线粒体膜电位诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

夏枯草提取物对人淋巴瘤Raji细胞增殖的影响及机制探讨

目的 观察夏枯草提取物对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法 Raji细胞分别加入不同浓度夏枯草提取物进行培养,MTT法检测Raji细胞增殖抑制率,倒置显微镜观察细胞学形态,琼脂糖凝胶电泳观察Raji细胞DNA凋亡情况;流式细胞仪检测Raji细胞凋亡率.结果 不同浓度的夏枯草提取物对Raji细胞增殖有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为(18.01±0.92)μg/ml;随夏枯草提取物作用时间的延长Raji细胞DNA凋亡条带增宽变亮,细胞凋亡率升高.结论 夏枯草提取物可抑制Raji细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关.     

β-榄香烯对不同分化程度胃癌细胞株端粒酶活性及细胞凋亡的影响

目的:探讨β-榄香烯治疗胃癌的作用机制.方法:应用四唑蓝(MTT)比色法、端粒重复扩增(TRAP)-微孔板杂交法、光镜检查和DNA末端原位标记染色法(TUNEL)研究β-榄香烯对胃癌细胞株SGC-7901(中分化)、MKN-45(低分化)和MKN-28(高分化)的细胞毒作用及其对端粒酶活性、细胞形态学变化和细胞凋亡的影响.结果:β-榄香烯对不同分化程度的胃癌细胞均具有较强的细胞毒作用;其抗癌作用与抑制端粒酶活性和诱导凋亡有关.β-榄香烯抑制端粒酶活性及诱导凋亡的效果与作用时间、浓度及细胞分化程度相关.结论:β-榄香烯对胃癌细胞具有很强的细胞毒作用,这一作用与抑制端粒酶活性和诱导凋亡有关.     

人端粒酶反义寡脱氧核苷酸对胃癌细胞系SGC-7901的生长抑制和诱导凋亡的研究

背景端粒酶活性在胃癌组织中表达率很高,在正常胃黏膜组织中则基本不表达.因此,以端粒酶为靶点的反义治疗有望成为胃癌治疗的有效途径之一.目的检测特定的人端粒酶反义寡脱氧核苷酸(AS-ODN)对胃癌细胞系SGC-7901生长的抑制作用,并证明其主要机制为抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡.方法用改良的聚合酶链反应(PCR)-端粒重复扩增协议(TRAP)法定量检测端粒酶AS-ODN作用前后SGC-7901细胞的端粒酶活性;台盼蓝染色法观察SGC-7901细胞活力;光镜和电镜观察凋亡细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果SGC-7901细胞有端粒酶活性表达.不同浓度的端粒酶AS-ODN作用于SGC-7901细胞48～96 h后,细胞端粒酶活性和生长受到明显抑制,光镜、电镜观察和流式细胞仪检测均证实有细胞凋亡存在.错义AS-ODN(N-ODN)处理组SGC-7901细胞则无显著变化(P＜0.05).结论端粒酶AS-ODN通过抑制胃癌细胞的端粒酶活性和诱导细胞凋亡,最终抑制胃癌细胞生长,其抑制作用呈剂量、时间依赖性和序列特异性.端粒酶AS-ODN对端粒酶活性的抑制比对细胞生长的抑制更敏感,两种抑制作用并不完全平行.     

金莲花黄酮对人乳腺癌细胞作用的研究

目的 探讨金莲花黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞增殖抑制作用及对端粒酶活性的影响.方法 不同浓度金莲花黄酮作用于MCF-7细胞24 h,以CCK-8法检测细胞增殖抑制作用、流式细胞术检测端粒酶活性.结果 9.516、6.344、3.172、1.586、0.793 mg/ml 5个不同浓度金莲花黄酮作用于MCF-7细胞24 h,对细胞增值的抑制率依次为17%、28%、48%、50%、55%.各实验组A490与对照组比较差异均显著(P＜0.05,P＜0.01),且用药浓度与抑制率呈正相关;端粒酶活性均有不同程度降低、且端粒酶活性与用药浓度成正比.结论 金莲花黄酮对MCF-7细胞有明显抑制作用并降低端粒酶活性.     

小干扰RNA沉默bcl-2基因抑制胃癌细胞生长的研究

目的利用RNA干扰技术,研究靶向bcl-2的小干扰RNA(siRNA)在体内外对胃癌细胞生长的影响,探讨其对胃癌治疗的可行性。方法化学合成bcl-2基因的siRNA,脂质体法将bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞,采用实时定量PCR和Western印迹观察bcl-2 siRNA转染前后胃癌细胞bcl-2基因的表达变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、流式细胞检测技术和端粒重复序列扩增法(TRAP)分别检测胃癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性变化。并将转染bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种于裸鼠皮下,观察其在裸鼠体内成瘤及生长情况。结果数据经方差分析,bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,明显抑制bcl-2基因表达,并与其浓度和作用时间相关,以100 nmol/L bcl-2 siRNA对bcl-2基因表达抑制效果最佳。以该浓度的bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,bcl-2 mRNA和蛋白表达抑制分别为79．9%和85．3%；经bcl-2 siRNA作用的SGC 7901细胞生长明显缓于对照组(P＜0．05),细胞凋亡率高于对照组(P＜0．05),端粒酶活性明显低于对照组(P＜0．05)。转染100 nmol/L bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种裸鼠皮下后,肿瘤出现时间晚,体积小．生长受到明显抑制(P＜0．05)。结论靶向bcl-2的siRNA可明显下调靶基因bcl-2的表达,在体内外抑制胃癌SGC 7901细胞的生长,为探索胃癌基因治疗提供新的策略。     

三氧化二砷对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其机制。方法MTT法观察生长抑制情况;双参数流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡及测定Hela细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、凋亡相关蛋白Bcl-2表达。结果As2O3可显著抑制Hela细胞生长增殖,且剂量—效应关系显著（P〈0.01）。Hela细胞经As2O3处理后可发生凋亡,As2O3能显著下调PCNA表达（P〈0.01）,但对Bcl-2表达无影响。结论As2O3在体外可显著抑制人宫颈癌Hela细胞生长,其机制可能与诱导细胞凋亡、降低PCNA蛋白表达有关。     

SEA联合热疗对Hela细胞周期进程及凋亡的影响

目的探讨葡萄球菌肠毒素A(SEA)对人宫颈癌细胞株(Hela)细胞生长、增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同条件下对Hela细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测Hela细胞周期进程的变化及凋亡率,透射电子显微镜检测Hela细胞超微结构改变。结果单纯热疗组、单纯SEA组及SEA联合热疗组对Hela细胞增殖抑制率分别为18.4%、26.4%及46.8%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M1期细胞相对增多,且细胞凋亡率升高,组间比较差异显著。结论 SEA联合热疗能显著提高Hela细胞的增殖抑制率,抑制G1期细胞向S期细胞的转化进程,诱导Hela细胞凋亡及亚细胞结构改变。