可溶性IL-2受体及NK细胞活性在噬血细胞性淋巴组织细胞增多症中的意义

本研究通过检测噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(HLH)患者外周血中可溶性IL-2受体(sCD25)及NK细胞活性,探讨它们在HLH中的意义。应用酶联免疫吸附法检测20例HLH患者、15例正常对照者、20例急性髓系白血病(AML)患者及20例系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血血清sCD25水平;用流式细胞术CD107a标记法及传统的LDH释放法检测HLH组及正常对照组外周血NK细胞活性。结果显示:HLH组血清sCD25水平较正常对照组、AML组及SLE组均明显升高(P<0.001);HLH组NK细胞活性明显低于正常对照组(P<0.05);将流式细胞术CD107a标记法与传统的LDH释放法检测NK细胞活性进行相关分析,该两种检测方法之间具有显著相关性(r=0.73,P<0.05)。结论:血清sCD25及外周血NK细胞活性检测是HLH重要的辅助诊断指标,流式细胞术CD107a标记法检测NK细胞活性简单、稳定、重复性高,有助于HLH的临床诊断。     

NK细胞活性在诊断继发性噬血细胞综合征中的意义探讨

本研究探讨继发性噬血细胞综合征（hemophagocytic syndrome，HPS）患者外周血NK细胞活性水平及其在早期诊断中的意义。采用LDH释放法检测16例凝似HPS患者和25名正常健康人外周血NK细胞的活性，并将确诊继发性HPS患者的NK细胞活性与正常人NK细胞活性进行比较。结果表明：16例疑似HPS患者中有8例最终确诊为继发性HPS，其NK细胞活性均明显低于正常对照组，两者相比差异有显著统计学意义（p〈0．001），且已确诊患者的NK细胞活性在疾病早期即出现异常。结论：NK细胞活性的检测对于HPS的早期诊断可能具有重要意义。     

糖化铁蛋白在诊断继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症中意义的探讨

本研究探讨血清糖化铁蛋白在诊断继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症（HLH）中的意义。收集2007年10月至2008年10月继发性HLH疑似病例29例，并根据HLH-2004诊断标准分为确诊组和排除组，另外选择正常健康人员25名作为对照。采用植物血凝素吸附法检测外周血糖化铁蛋白的比例，比较各组血清糖化铁蛋白比例与总血清铁蛋白水平的差异，并比较两者在疾病诊断中的特异性和敏感性。结果表明：29例疑似患者中有22例确诊为继发性HLH，7例未被确诊；确诊组总血清铁蛋白水平为（2897．6±1837．2μg／L），明显高于排除组（653．1±249．1μg／L）（P〈0．01）及对照组（414．6±212．6μg/L）（P〈0．01）；确诊组中血清糖化铁蛋白的中位百分比（17．0±4．2％）明显低于排除组（40．7±4．5％）（p〈0．01）及对照组（53．6±13．3％）（p〈0．01）。血清糖化铁蛋白百分比在HLH疾病诊断中的灵敏度和特异度均高于总血清铁蛋白。结论：血清糖化铁蛋白百分比的降低在诊断继发性HLH中具有重要的意义。     

噬血细胞性淋巴组织细胞增多症患者血清中新蝶呤的检测及意义

本研究通过检测噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(HLH)患者外周血血清中新蝶呤(Npt)水平,探讨其在HLH中的意义。应用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测20例HLH患者治疗前后和15例正常对照者外周血血清Npt水平及sCD25水平。结果显示,HLH组诊断时血清Npt和sCD25水平分别较正常对照组明显升高(P<0.0001)。HLH组患者治疗后血清Npt和sCD25水平分别较治疗前明显下降(P<0.0001)。将治疗前后Npt水平与sCD25水平分别进行相关性分析,发现两者具有显著相关性(治疗前r=0.81,P<0.05;治疗后r=0.65,P<0.05);与此同时,治疗前Npt水平与血清铁蛋白亦有显著相关性(r=0.55,P<0.05)。结论:血清Npt可能在HLH的发病机制中起着重要作用,其水平的升高对疾病的早期诊断及病情评估具有重要意义。     

淋巴瘤相关性噬血细胞综合征14例临床分析

本研究分析淋巴瘤相关性噬血细胞综合征（LAHS）患者的,临床特征和诊疗手段,为进一步提高LAHS诊断率、选择及时有效的治疗方案提供临床依据。收集2005年6月至2008年5月经首都医科大学附属北京友谊医院确诊的LAHS患者14例,回顾性分析其原发病、临床特征、实验室检查指标、治疗与转归,探讨疾病特点,并比较LAHS患者在确诊前后各项诊断标准的符合情况,了解各项诊断指标在疾病诊断中的意义。14例患者确诊后均采用FDIg方案（氟达拉滨,甲基强的松龙,丙种球蛋白）治疗,观察治疗效果。结果表明,14例LAHS患者的NK细胞活性、sCD25水平在疾病早期100％出现异常,而骨髓中噬血现象仅见于不到40％的患者,即使在确诊后,也只有不到50％患者出现了噬血。经FDIg方案治疗的14例患者其中9例（64．3％）病情好转;5例（35．7％）死亡。结论：NK细胞活性、血清sCD25水平的检测对于LAHS的早期诊断可能具有重要的意义,而噬血现象在疾病的诊断中并不一定起主要作用。以氟达拉滨联合激素和免疫球蛋白的治疗方案（FDIg方案）为早期有效治疗LAHS提供新思路。     

噬血细胞现象在诊断噬血细胞性淋巴组织细胞增多症中意义的探讨

本研究探讨噬血细胞现象在诊断噬血细胞性淋巴组织细胞增多症（hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH）中的意义。收集2005年6月至2008年10月继发性HLH疑似病例61例,根据HLH-2004诊断标准分为确诊组及排除组,比较各组骨髓、脾或淋巴结活检中噬血细胞现象的发生率。结果表明,61例疑似患者中有43例确诊为继发性HLH,18例排除HLH;确诊组中有33例发生噬血细胞现象,排除HLH组中有4例出现噬血细胞现象;噬血细胞现象在诊断HLH时的敏感性为76．7％,特异性为77．8％。结论：噬血细胞现象在诊断大部分继发性HLH的中具有重要的意义,但没有噬血细胞现象并不能排除HLH的诊断。     

妊娠相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症临床诊疗分析

目的：观察妊娠相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（HLH）的临床特点,探索有效的治疗手段。方法对妊娠相关 HLH 患者的临床表现、实验室检查及疗效、预后进行综合分析。结果8例妊娠相关 HLH 患者均为初次妊娠,2例患者发生于妊娠早期,6例患者发生于围产期;发热（100％）、脾大（75.0％）、消化系统症状（62.5％）是妊娠相关HLH 的主要临床表现;所有患者均有 sCD25的显著升高和 NK 细胞活性的下降,肝功能损害、高甘油三酯血症在妊娠相关 HLH 患者中的发生率更为突出;8例患者有2例患者病情进展迅速,于1月内死亡,6例获得长期生存并仍在随访中。结论妊娠期及产褥期存在异常的免疫调节可能是继发 HLH 的高危因素。及时正确的诊断和恰当的治疗有望改善预后。     

多种细胞因子检测在儿童噬血细胞综合征诊断中的意义

目的检测噬血细胞综合征患儿多种细胞因子水平,观察和比较它们在HLH诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测18例HLH患儿、20例对照组儿童及7例一般感染患儿血清中8种细胞因子[干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、可溶性IL-2受体β(IL-2R-β)、可溶性IL-2受体α(sCD25)和sCD163],分析它们在HLH中的表达水平,以及与诊断的相关性。结果与对照组、非HLH感染组相比,HLH组中各细胞因子水平明显升高,3组之间差异有统计学意义(P0.05)。IL-12、sCD25和sCD163 3种细胞因子受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)均在0.9以上,诊断HLH的准确性高,尤其是sCD163和sCD25,AUC高达0.95。采用Pearson相关分析sCD163与sCD25的相关程度,二者呈高度正相关(r=0.970,P0.05)。IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-2R-β4种细胞因子AUC在0.7~0.9,IL-10的AUC小于0.7。结论 HLH患儿多种细胞因子水平高表达是导致一系列临床表现的重要因素。sCD163与sCD25有同等意义,是诊断HLH特异又敏感的标记。细胞因子IL-12的诊断价值亦高。此外,IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-2R-β有诊断参考意义;而IL-10的准确性较差,不宜作为独立的诊断指标。     

血清C反应蛋白与2型糖尿病的关系

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者不同时期血清C反应蛋白（CRP）的水平及其意义。方法用免疫荧光双抗体夹心法检疫100例T2DM患者的血清CRP水平,其中无糖尿病肾病（DN）组55例,早期DN组25例,临床DN组20例,并与50例健康人对照比较。结果无DN组、早期DN组及临床DN组患者的血清cRP水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;早期DN组,临床DN组患者血清CRP水平明显高于无DN组,差异有统计学意义（P〈0．01）;临床DN组患者血清CRP水平高于早期DN组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论血清CRP水平检测对T2DM早期诊断和病情分析有重要临床价值。     

二期梅毒患者外周血细胞免疫水平的相关性研究

目的探讨二期梅毒患者外周血细胞免疫水平。方法应用流式细胞仪检测40例二期梅毒患者的外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤（NK）细胞,并以42名健康人的检测结果作对照,比较2组之间的差异。结果二期梅毒患者外周血CD3细胞与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,CD4、CD4/CD8及NK细胞数显著低于对照组（P〈0.05）,CD8细胞数高于对照组（P〈0.05）。结论二期梅毒患者存在细胞免疫功能异常,这可能是造成患者体内病原体不能完全清除的原因之一。     

流式细胞术检测NK细胞活性在获得性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症诊断中的应用

本研究目的旨在建立一种准确、稳定的NK细胞杀伤活性检测方法,应用于获得性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症诊断。21例疑似患者及20例健康对照者纳入本研究。根据HLH-2004标准将疑似患者分为确诊组和排除组,将pEGFP—N1质粒转染人NK细胞的天然靶细胞K562,经过G418筛选后进一步单克隆,得到稳定、均一表达绿色荧光蛋白的EGFP—K562细胞,将EGFP—K562细胞与人外周血单个核细胞按10：1的比例混合孵育2小时后,用碘化丙啶（PI）标记,用流式细胞仪分析呈红、绿色荧光的细胞数,最后计算NK细胞的杀伤效率;同时采用LDH释放法测定外周血NK细胞对单纯K562细胞的杀伤活性,并进行比较。结果表明：获得了稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP—K562细胞;流式细胞仪检测表明健康人NK细胞杀伤率与病人组之间存在明显差异,流式细胞仪技术检测NK细胞杀伤活性与传统LDH释放法检测NK细胞杀伤活性具有显著相关性。结论：EGFP—K562细胞株作为靶细胞用于流式细胞术检测NK细胞杀伤活性,无需预先染色和标记靶细胞,操作简便、省时、稳定、重复性高,可应广泛应用于获得性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症诊断。     

脑梗塞患者血清可溶性CD14水平的初步观察

目的　通过检测脑梗塞患者血清可溶性CD14 (sCD14 )水平,研究缺血性脑血管病患者外周血单核细胞的活化状态。方法　收集脑梗塞患者和正常人血清,用单多抗双夹心ELISA法检测血清sCD14含量并进行统计分析。结果　脑梗塞患者血清sCD14水平较同年龄正常人显著升高(P <0. 0 0 1) ,其中感染组、未感染组血清sCD14含量较正常人均显著升高(P值分别为0 .0 0 1和0 . 0 11) ;而感染组与未感染组之间血清sCD14含量无显著性差异(P =0 .175 ) ;血清sCD14含量与白细胞数无显著相关性(P =0. 17)。结论　脑梗塞患者血清sCD14水平升高,提示其外周血单核细胞处于活化状态,但与是否存在感染无明显相关性。     

血清HO-1水平在获得性噬血细胞综合征中的临床意义探讨

目的 探讨血清血红素氧合酶-1（HO-1）升高在获得性噬血细胞综合征（HPS）中的诊断价值及监测其病情变化的临床意义,为临床诊疗工作的进一步开展提供理论依据.方法 收集首都医科大学附属北京友谊医院2012年3月至2013年5月期间收治的HPS疑似患者129例,根据HLH-2004诊断标准最终分为原发性HPS患者8例,确诊获得性HPS组65例,排除组56例.并选取健康志愿者27例,采用酶联免疫吸附法检测所有获得性HPS患者确诊时、排除组患者、健康志愿者及部分获得性HPS临床治疗有效患者治疗2周后血清HO-1浓度,比较各组间差异.结果 获得性HPS确诊组患者血清HO-1浓度明显高于排除组及正常实验对照组（F=36.835,P=0.000）.自身免疫性疾病相关性HPS血清HO-1浓度高于感染相关性HPS及淋巴瘤相关性HPS患者,组间比较差异具有统计学意义（F=4.579,P=0.014）.监测36例获得性HPS临床治疗有效患者治疗2周后血清HO-1浓度发现,治疗后血清HO-1浓度明显降低,差异有统计学意义（t=2.536,P=0.01）.血清HO-1与NK细胞活性、可溶性白细胞介素-2受体（sCD25）均无明显相关性;与铁蛋白有一定相关,但相关系数较小（r=0.273,P=0.028）.结论 血清HO-1在获得性HPS患者中明显升高,尤其在自身免疫性疾病相关性HPS患者中明显高于淋巴瘤相关性HPS及感染相关性HPS,这对于诊断自身免疫性疾病相关性HPS具有重要提示意义,HO-1有可能成为监测获得性HPS病情变化的重要指标.     

Natural killer cell function and lymphocyte subpopulation profiles in inflammatory bowel disease

Peripheral blood natural killer (NK) cell activity and lymphocyte subpopulation profiles were studied in 23 patients with inflammatory bowel disease (IBD) and in 16 healthy control subjects. NK activity was assessed by a 4-hr 51Cr release assay using K-562 erythroleukemia cell line targets. Both monocyte depleted and nondepleted lymphocyte preparations were tested using 50:1 and 25:1 effector to target cell ratios. Lymphocyte subpopulation profiles were determined by incubation of cell suspensions with the monoclonal anti-lymphocyte antibodies (OK-M1, OK-T4, Leu-4 and Leu-2) labeling with goat anti-mouse FITC and sorting by flow cytometry on the fluorescence-activated cell sorter (FACS). NK activity in patients with IBD showed wide variation, but mean activity was not significantly different from normal controls. Analysis of patient subgroups by disease activity, disease type, duration or treatment also failed to reveal significant differences from controls. Parallel measurements of peripheral blood lymphocyte subpopulations using these phenotypic markers revealed no significant differences between patients with IBD and control subjects.     

Natural, lectin- and phorbol ester-induced cellular cytotoxicity in Crohn's disease and ulcerative colitis

Cellular cytotoxicity of peripheral blood cells was studied in patients with Crohn's disease or ulcerative colitis and healthy controls. The spontaneous cytotoxicity or natural killer (NK) cell activity, evaluated against the erythroleukemia K-562 and the colon cancer CaCo-2 and HT-29 cell lines, of total mononuclear cells and enriched lymphocytes was depressed in Crohn's disease and ulcerative colitis patients compared to the controls. Phytohaemagglutinin (PHA) increased the cytotoxicity in the patients, to a similar maximal level as the stimulated controls. In contrast, the phorbol ester, phorbol-myristate-acetate (PMA), enhanced the cytotoxicity in patients and in controls, but in the patients not to the levels of the controls. No cytotoxicity was observed in the monocyte-enriched fraction both in patients and controls using the same assay system. A similar small but significant stimulation of monocyte cytotoxicity was obtained by PHA and PMA in patients and in controls. In conclusion, inflammatory bowel disease is associated with a depressed NK cell activity in peripheral blood which is not target specific. PHA but not PMA could restore the deficient NK cell activity. Monocytes seem not to be involved in the decreased NK cell activity in patients with inflammatory bowel disease.