慢性乙型肝炎患者血清IL-12、IL-6的水平变化和CD_（28）表达的研究

目的探讨IL-12、IL-6和淋巴细胞CD28分子在慢性乙型肝炎发病中的作机制。方法严格按照病例入选标准选取50例患者和20例健康志愿者,每例空腹抽取外周静脉血5 ml,3000 rpm离心10 min,吸取上层血清1.0 ml,放置-70℃冰冻保存备检,同时通过流式细胞仪检测所有患者外周血CD2＋8淋巴细胞所占比例。采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测患者外周静脉血血清中细胞因子IL-12、IL-6的水平,比较慢性乙型肝炎患者与健康对照组及急性乙型肝炎之间Th1和Th2细胞因子表达的差异。结果HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者IL-12、IL-6水平显著高于健康对照组（P〈0.01）,HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者CD2＋8T淋巴细胞所占比例升高,显著高于健康对照组（P〈0.01）,急性乙型肝炎组水平最高,HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者CD2＋8T淋巴细胞水平低于HBeAg（＋）慢性乙型肝炎患者,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论慢性乙型肝炎患者Thl型细胞因子表达强弱与HBV感染肝脏的炎症活动密切相关;Th2细胞因子表达增强,与HBV的持续感染、免疫耐受形成有关;CD28分子在乙型肝炎病毒的清除过程中起重要作用。     

慢性乙型肝炎肝组织T淋巴细胞亚型表达与病变关系

目的探讨HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝组织T淋巴细胞亚型CD4^＋、CD8^＋表达情况与病变的关系。方法选择83例总T淋巴细胞（CD3^＋）阳性的病人，进行淋巴细胞亚型CD4^＋、CD8^＋免疫组化观察。结果两种不同临床类型慢性乙型肝炎肝组织内T淋巴细胞亚型CD4^＋．CD8^＋有以下特点：（1）两种不同临床类型慢性乙型肝炎肝组织CD4^＋、CD8^＋表达无显著差异（P〉0．05）。（2）两种不同临床类型的肝炎肝内CD4^＋表达均与肝组织炎症程度相关，随肝脏病变损伤加重，CD4^＋增多（P〈0．05）。（3）HBeAg阴慢性乙型肝炎肝内CD8^＋表达与肝组织炎症程度有相关性（P〈0．05），与HBeAg阳性慢性乙型肝炎无相关性（P〉0．05）。结论提示CD8^＋在HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝脏损伤中起到一定作用，与HBeAE阳性慢性乙型肝炎所引起的免疫应答有所不同。     

慢性乙型肝炎合并肺结核患者37例临床分析

目的探讨慢性乙型肝炎合并肺结核患者的乙肝病毒标志物阳性情况、肝功能指标异常的特点,为临床治疗此类患者提供参考。方法对37例慢性乙型肝炎合并肺结核患者（实验组）资料与45例慢性乙型肝炎患者（对照组）资料进行临床分析,对比两组患者的HBsAg、HBeAg、HbeAb、HbcAb血清阳性表达情况和肝功能指标异常情况。结果两组患者的HBsAg、HBeAg、HbeAb、HbcAb血清阳性表达情况差异无统计学意义（P〉0.05）;实验组患者ALT高于对照组（P〈0.05）,实验组患者TB高于对照组（P〈0.05）,实验组转折A/G值低于对照组（P〉0.05）。结论慢性乙型肝炎合并肺结核患者的肝功能损害较慢性乙型肝炎患者重,在灵床治疗时需注意保护肝功能,避免使用肝毒性药物。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中FasL表达

目的：检测慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单核细胞中的FasL的表达,探讨HBV诱导外周血单核细胞凋亡的可能作用机制。方法：PCR检测外周血单核细胞中HBV—DNA,流式细胞术检测凋亡,蛋白印迹检测FasL表达。结果：30例慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中共检出HBV—DNA阳性24例,阴性6例。阳性组凋亡率为（38．14±5．23）％,阴性组凋亡率为（22．37±6．47）％,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。阳性组FasL表达明显高于阴性组。结论：慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中FasL高表达可能参与HBV诱导外周血单核细胞凋亡。     

α-干扰素治疗慢性乙型肝炎患者血清肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-8水平与抗病毒应答的关系

目的：观察慢性乙型肝炎患者经α-干扰素（IFN－α）抗病毒治疗后血清中肿瘤坏死因子－α（TNF－α）和白细胞介素－8（IL－8）水平的变化与乙型肝炎病毒消长之间的关系。方法：收集治疗前后血清标本－20℃保存，通过ELISA法同步检测并与正常人做对照。结果：IFN－α应答组（n=10)在治疗前血清中TNF－α水平明显低于非应答组（n=15)和正常组（n=10)，P＜0．01；但IFN－α治疗后无论是应答组还是非应答组均较治疗前下降，尤其是非应答组下降更明显。所有慢性乙型肝炎病例血清中IL－8水平较正常组低，经IFN－α治疗后均较治疗前升高接近正常人水平，但应答组和非应答组之间比较无显著差异。结论：慢性乙型肝炎患者体内存在免疫功能的失调，IFN－α具有抑制TNF－α和增进IL－8表达的调节作用，但体内病毒复制消长与TNF－α和IL－8表达水平没有相关性。     

黄芪对心肌炎小鼠心肌穿孔素mRNA和CVB3m mRNA表达的影响

为探讨黄芪注射液治疗小鼠柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎（VMC）的疗效及其机制，给Balb／C小鼠24只腹腔感染CVB3亲心肌细胞株（CVB3m）后，随机等分为两组：黄芪治疗组（黄芪注射液10g／kg&;#183;d腹腔注射）和对照组。实验第8天留取心肌，分别进行心肌病理检查，心肌穿孔索（perforin，PFP）mRNA和CVB3m mRNA逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）分析，并对心肌组织PFP mRNA和CVB3m mRNA表达水平进行相关性分析。结果表明：①黄芪组心肌组织病理改变明显轻于对照组；②黄芪组心肌PFP mRNA的表达明显低于对照组（1．10&;#177;0．07比1．31&;#177;0．12，P〈0．01）；③黄芪组心肌CVB3m mRNA表达明显低于对照组（1．07&;#177;0．04比1．18&;#177;0．02，P〈0．01）；④心肌PFP mRNA水平与CVB3m mRNA水平星显著正相关（r=0．68，P〈0．01）。结论：PFP介导的细胞毒性作用在病毒性心肌炎的发病中起重要作用；黄芪对心肌组织CVB3m病毒复制有明显的抑制作用，对CVB3m诱导的小鼠急性心肌炎模型有显著的治疗作用。     

肾移植急性排斥反应患者血清IL-15、穿孔素及颗粒酶B mRNA的表达

目的 探讨白细胞介素15(IL-15)、穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GraB)mRNA在肾移植急性排斥反应(AR)、环孢素A(CsA)肾毒性、细菌感染时的变化.方法 采用SYBR Green I实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)方法动态检测45例肾移植患者外周血淋巴细胞(PBL)中IL-15、PFP及GraB mRNA表达的变化.结果 AR组IL-15、PFP及GraB mRNA的表达均高于肾功能稳定组,较临床症状出现早2～3 d;经激素冲击治疗后,PFP及GraB mRNA的表达减弱,但IL-15mRNA未见明显减弱.细菌感染组PFP和GraB mRNA的表达水平亦上升,但IL-15 mRNA的表达水平未见明显升高.CsA中毒组三项指标在监测过程中均未见明显变化.结论 FQ-PCR测定PBL中IL-15、PFP及GraB mRNA表达是一种无创、较敏感的早期检测AR的方法,并可以预测抗排斥反应的治疗效果.IL-15作为CD8记忆T细胞生长和活化必须的细胞因子,可能是介导AR发生的重要因子.它受细菌感染因素干扰少,与PFP和GraB mRNA同时检测对AR的判断更为准确.     

慢性乙型肝炎患者血清胃蛋白酶原及胃泌素－17检测结果分析

目的：探讨慢性乙型肝炎患者血清中胃蛋白酶原及胃泌素－17的变化。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对72例慢性乙型肝炎患者标本进行胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）及胃泌素－17（G－17）检测分析,同时选择47例健康志愿者作为对照组。结果慢性乙型肝炎患者血清 PGⅠ水平与对照组比较,差异无显著性（P ＞0．05）;血清 PGⅡ、PGⅠ／PGⅡ及 G－17水平与对照组比较,差异有显著性（P ＜0．01）。结论慢性乙型肝炎患者胃黏膜的分泌功能发生改变。     

260例慢性乙型肝炎住院患者药物治疗分析

目的：了解本院慢性乙型肝炎住院患者药物治疗的基本情况，评价联合用药的合理性。方法：随机抽查2002年—2006年的住院病历260份，对慢性乙型肝炎药物治疗情况进行调查分析。结果及结论：本院慢性乙型肝炎住院患者药物治疗基本合理，符合亚太肝病学会慢性乙型肝炎治疗指南要求，抗病毒治疗比例（50％）高于我国大陆抗病毒治疗比例（19％），但需规范个体化给药，确保临床用药的安全、有效、合理、经济。     

大剂量胸腺肽对慢性乙型肝炎的疗效及免疫调节的关系

目的：探讨胸腺肽对慢性乙型肝炎的治疗作用及其机制。方法：按诊断标准选择轻度慢性乙型肝炎77例，随机分为胸腺肽治疗组（47例）和对照组（30例），观察胸腺肽对慢性乙型肝炎患者ALT和乙肝标记物的作用，及其免疫指标的变化和相互关系。结果：胸腺肽治疗组ALT复常的时间较对照组明显缩短，促进HBeAg的阴转，抑制HBV的复制（P＜0．05），提高细胞免疫应答能力，恢复机体的免疫平衡状态（P＜0．05）。结论：胸腺肽能促进慢性乙型肝炎ALT的复常，抑制HBV的复制。     

重组人粒细胞集落刺激因子对慢性重型乙型肝炎患者肝功能改善作用的临床研究

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对慢性重型乙型肝炎患者肝功能的改善作用。方法选择慢性重型乙型肝炎31例,在综合治疗的基础上给予rhG-CSF 5μg/（kg.d）皮下注射、1/d,连用5 d,治疗前后观察患者临床症状、体征,治疗后1、2、4、12周分别查肝功能、凝血酶原活动度。结果 31例中有效20例,无效6例,恶化5例（其中3例死亡）,有效率为64.5%。结论粒细胞集落刺激因子能改善慢性重型乙型肝炎患者的肝功能,降低病死率,治疗慢性重型乙型肝炎安全、有效。     

Isolation of human herpesvirus-6 (HHV-6) from patients with collagen vascular diseases.

The prevalence and activity of human herpesvirus-6 in patients with collagen vascular diseases (CVD) was determined. One hundred and fifty patients with CVD (56 with systemic lupus erythematosus-SLE, 92 with rheumatoid arthritis-RA, 1 with Sharp's syndrome and 1 with atypical polyclonal lymphoproliferation-APL and rheumatoid features) were screened serologically (IFA and ELISA) for antibodies against human herpesvirus-6 (HHV-6), Epstein-Barr virus (EBV) and cytomegalovirus (CMV). Virus isolation was attempted from peripheral blood lymphocytes (PBL) of 25 persons with various disorders. PBL were grown in tissue culture and tested with standard HHV-6-positive antisera for viral antigen expression. Supernatants of the patient's lymphocyte cultures were used to infect HSB2 cells, and virus infection in these cells was proven by IFA, in situ hybridization and by electron microscopy. Fifty-five percent of the SLE patients, 6.5% of the RA patients and both patients with Sharp's syndrome or with APL had antibody titers indicative of active HHV-6 infection. Virus cultures were positive in 9 of the 25 attempts with establishment of stable virus lines. These patients were 5 with SLE or UCVD, and one each with RA, CFS, APL as well as one healthy control. Reactivated and chronic active HHV-6 infections are frequent in SLE like EBV in RA. The role of these viruses in the pathogenesis of the diseases or in their reactivation still needs further investigation.     

调节性T淋巴细胞在HCV感染者病程不同阶段的表达

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在HCV感染者病程不同阶段的表达及其意义。方法收集非活动性HCV感染33例(A组)、活动性HCV感染32例(B组)、慢性丙型肝炎56例(C组)、HCV相关性肝硬化47例(D组)、HCV相关性肝癌45例(E组)和健康对照者60例(F组),采用流式细胞术检测外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率,并进行统计学分析。结果 B、C、D、E组外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率均明显高于F组(P<0.01)。组间比较,A组患者外周血的CD4+CD25+Treg细胞表达频率明显低于B、C、D、E组(P<0.01),D、E组表达频率明显高于B、C组(P<0.01)。结论 HCV感染导致CD4+CD25+Treg细胞的增殖与活化,使机体对其的免疫清除不完全,从而促进HCV感染者疾病的进展和肝癌的发生。     

慢性乙型肝炎病情与乙型肝炎病毒标志物表达模式的关系

目的观察乙型肝炎病毒(HBV)标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)表达模式与慢性乙型肝炎病情的关系。方法对582例5组慢性乙型肝炎和乙型肝炎后肝硬化患者,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV标志物,用OlympusAU2700全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、前白蛋白(PA)。依据HBV标志物阳性情况分为6组:A组173例,为HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性;B组218例,为HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性;C组161例,为HBsAg、HBcAb阳性;D组13例,为HBeAb、HBcAb阳性;E组6例,为HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性;F组11例,为HBsAb、HBcAb阳性。结果582例中,A组阳性率为29.7%;B组为37.4%;C组为27.7%;D组为2.2%;E组为1.0%;F组为1.9%。A、B、C模式组间阳性率有显著性差异(χ2=14.75,P<0.01),以B模式组的阳性率最高。5组慢性肝病间比较,A组阳性率有显著性差异(χ2=23.17,P<0.01),B组阳性率无显著性差异(χ2=3.72,P>0.05),C组阳性率有显著性差异(χ2=25.74,P<0.01)。HBeAg阳性的A组与HBeAg阴性的B、C组比较,TBIL、ALB、ALT、PA水平及其异常率均无显著性差异(F=1.91、2.48、0.58、1.37,P>0.05;χ2=2.09、5.97、2.35、2.26,P>0.05)。结论HBV标志物的表达模式与慢性乙型肝炎的病情无明显相关,临床上不能根据HBV标志物的表达模式来预测判断病情轻重和预后情况。     

核苷类药物停药后慢性乙型肝炎复发的临床特点

目的探讨核苷类药物停药后慢性乙型肝炎复发病例的临床特点。方法观察25例服用核苷类药物治疗的慢性乙型肝炎患者停药后的临床治疗过程。结果 25例患者中,核苷类药物治疗疗程不足12个月8例（32.0%）;患者自行停药23例（92.0%）,在医师指导下停药2例（8.0%）;17例（89.5%）患者停药后6个月内复发;停药时19例（76.0%）患者HBVDNA〈1.00×103copies/ml,其中病情复发时17例（89.5%）患者HBVDNA〉1.00×103copies/ml;肝硬化患者和慢性乙型肝炎患者停药后病情复发时加重的比率分别为91.7%和53.8%,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;4例（16.0%）患者死亡。结论大部分服用核苷类药物抗病毒治疗的乙型肝炎患者停药后病情复发,部分患者病情加重甚至死亡。停药后病情复发病例应再次给予抗病毒治疗。     

α干扰素对慢性乙型肝炎患者树突状细胞表型的影响

目的观察α干扰素治疗对慢性乙型肝炎患者树突状细胞(Dendriticcells,DCs)表型的影响,进一步探讨α干扰素治疗慢性乙型肝炎的具体机制。方法分离32例慢性乙型肝炎患者及10名健康人外周血中的单个核细胞(Peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs)进行体外诱导培养,使之发育成DCs,流式细胞仪测定其表面共刺激分子的表达。对32例慢性乙型肝炎患者进行α干扰素治疗3个月后,再次检测DCs表面分子的表达水平,并将治疗前后的数据进行分析、比较。结果与正常对照组相比较,慢性乙型肝炎患者组PBMCs来源的DCs表面共刺激分子CD83、CD86的表达水平明显降低(P<0.05)。在α干扰素治疗3个月后,慢性乙肝患者组其DCs表面CD83、CD86的表达水平与治疗前相比均明显升高(P<0.05),与正常对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论α干扰素可以上调DCs表面共刺激分子的表达水平,促进DCs的成熟,这可能是α干扰素治疗慢性乙肝的重要机制之一。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中YMDD变异的检测

目的:检测拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中HBV YMDD变异.方法:分别在拉米夫定治疗前、治疗后6月和12月应用微板核酸杂交-核酸定量法检测55例慢性乙型肝炎患者的HBV YMDD变异.结果:治疗前有3例存在YMDD变异,治疗后6月和12月分别有13%和20%的患者发生YMDD变异.结论:慢性乙型肝炎患者中YMDD变异株与野生株一样自然存在,拉米夫定治疗后YMDD变异明显增加.     

Comparison of cytochrome P4502E1 (CYP2E1) activity and hepatic and lymphocyte mRNA expression in patients with chronic hepatitis C

The induction of cytochrome P4502E1 (CYP2E1) is believed to play a role in the development of fibrosis in hepatitis C patients. However, information about CYP2E1 activity in chronic hepatitis C patients is fragmentary and the relationship between CYP2E1 activity and mRNA expression is unknown in this disease. The purpose of this study was (a) to characterise CYP2E1 activity in those patients and (b) to analyse its relationship with CYP2E1 mRNA expression in the liver and in peripheral blood lymphocytes (PBLs), previously proposed as a surrogate to assess changes in CYP2E1 activity. Fourteen chronic hepatitis C patients were submitted to a routine transcutaneous liver biopsy. CYP2E1 activity was assessed by using chlorzoxazone (CZX) pharmacokinetic parameters and hepatic and PBLs CYP2E1 mRNA expression was measured by real-time RT-PCR. The mean oral clearance of CZX (CLT: 21.5+/-10.1L/h) was within the normal range and the chlorzoxazone metabolic ratio (CMR) at t = 2 h was closely related to other CZX pharmacokinetic parameters. None of the pharmacokinetic parameters did significantly correlate with CYP2E1 mRNA, neither in the liver nor in PBLs. Furthermore, there was no significant relationship between CYP2E1 mRNA levels in paired liver and PBL samples. Our data indicate that early stages of chronic hepatitis C are not associated with CYP2E1 induction. In this disease, the determination of the CMR at t = 2 h represents a reliable index to assess CYP2E1 activity. The measurement of CYP2E1 expression, at the mRNA level, in PBLs or in liver is not useful for that purpose.     

乙肝免疫耐受分子机制的研究进展

乙肝免疫耐受期是乙肝病毒和免疫细胞和平共处的一段时期。目前,认为绝大多数乙肝患者的免疫耐受状态是由于母婴传播引起的,即其母亲是乙肝携带者的新生儿容易发展成免疫耐受,处于乙肝免疫耐受状态的慢性乙肝患者绝大多数是不需要治疗的。有关乙肝免疫耐受的分子机制的研究尚不透彻,对其机制的研究为慢性乙肝（CHB）活跃期及不活跃携带期的治疗提供新的方向。综述 HBV 表达产物与乙肝免疫耐受、肝脏天然免疫细胞与乙肝免疫耐受以及乙肝免疫耐受中的 T 细胞等研究文献资料,并对乙肝免疫耐受分子机制的最新研究进展作一分析。