黄芪对兔急性心肌梗死心室肌细胞钠通道电流的影响

目的 :研究黄芪对兔急性心肌梗死 （AMI）后心室肌细胞钠通道电流 （INa）的影响。方法 :采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立 AMI动物模型 ,应用膜片钳全细胞记录方法 ,观察 AMI后 1周心外膜梗死区心肌细胞 INa的变化。结果 :AMI后 1周 INa的 I- V曲线明显上移。对照组 INa电流密度峰值 （- 30 m V）为 4 5 .5 0± 5 .33p A/ p F（n=12 ） ,AMI组为 2 2 .4 8± 4 .6 2 p A/ p F（n=14 ） ,显著低于对照组 （P<0 .0 1） ;黄芪组为 37.14± 3.79p A / p F（n=15 ） ,与 AMI组相比 ,显著增大 （P<0 .0 5 ）。结论 :AMI后 1周梗死区心室肌细胞 INa明显下降 ,黄芪可以使 AMI后下降的 INa趋于正常 ,逆转 AMI后形成的电重构。     

兔急性心肌梗死后心室肌细胞L-钙离子通道电流的变化

目的 :研究急性心肌梗死 （AMI）后心室肌细胞钙离子通道电流的变化。方法 :采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立 AMI动物模型 ,应用膜片钳全细胞记录方法 ,观察 AMI后 1周及 2月心外膜梗死区心肌细胞 L -钙通道电流 （ICa- L）的变化。结果 :1梗死后 1周组、2月组与对照组相比 ,I- V曲线上移。ICa- L电流密度峰值 （0 m V时 ）的比较显示 :对照组为 5 .6± 1.5 p A/ pf（n=10 ） ;梗死后 1周组为 3.5± 0 .9p A / pf（n=6 ） ,较对照组显著减小 ,P<0 .0 5 ;梗死后 2月组为 4 .8± 1.5 p A/ pf（n=11） ,较对照组减小 ,较梗死后 1周组增大 ,但均无统计学差异 ,P>0 .0 5。 2梗死后 1周组、梗死后 2月组与对照组相比 ,失活曲线明显左移 （即向超极化方向移动 ） ,以梗死后 1周组左移更加明显。梗死后 1周组半数失活电压 （V0 .5）为 - 2 6± 7m V（n=6 ） ,与对照组 （- 13± 4 m V ,n=8）比较相差显著 ,P<0 .0 5。梗死后 2月组半数失活电压 V0 .5为 - 2 1± 6 m V（n=8） ,与对照组比较无统计学差异 ,P>0 .0 5。结论 :AMI后1周梗死区心室肌细胞 ICa- L下降、钙通道动力学发生变化 ,在 AMI后 2月这种电生理异常有恢复趋势     

辛伐他汀对急性心肌梗死兔的心室肌细胞钠离子通道电流的影响

目的 研究辛伐他汀预处理对兔急性心肌梗死（AMI）后24 h心室肌细胞钠离子通道电流的影响,并探讨他汀类药物抗心律失常的细胞学离子机制。方法 采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法,建立AMI动物模型。将45只新西兰大耳白兔随机分为3组:心梗组、辛伐他汀治疗组［他汀组,手术前3 d给予辛伐他汀 5 mg/(kg·d)］及假手术对照组（只开胸不结扎血管）。采用酶解法分离心室肌外膜单个心室肌细胞;采用全细胞膜片钳技术,记录跨膜钠离子通道电流（INa）,同时应用全自动生化分析仪检测各组血脂的水平。结果 各组动物血脂的水平无显著差异。对照组、心梗组和他汀组的INa电流密度峰值（-30 mV）分别为(-42.78±5.48)pA/pF(n=16)、(-23.26±5.18)pA/pF(n=12)和(-39.23±5.45)pA/pF(n=13)。心梗组较对照组明显下降（P<0.01）,他汀组较心梗组明显升高（P<0.01）。另外,心梗组INa失活曲线左移,失活后恢复时间延长,他汀组这些异常也明显恢复。结论 AMI可导致梗死区心肌细胞INa明显下降,辛伐他汀预处理可减轻INa的异常变化,逆转电重构,而不依赖于降血脂的效应,可能为他汀类药物降低心律失常发生率的细胞学离子机制。     

心肌梗死1周后梗死边缘区心室肌细胞快钠通道电流跨壁异质性的变化

目的探讨心肌梗死1周后梗死边缘区心肌细胞快钠通道电流（INa）跨壁异质性的变化。方法30只兔随机分为3组,其中两组结扎家兔左前降支建立心肌梗死动物模型,分别为心肌梗死组和假手术对照组,另一组为正常对照组。1周后,用膜片钳技术研究左心室梗死边缘区三层心肌细胞INa的改变。结果正常对照组左室三层细胞的钠电流存在异质性,M细胞的峰值INa是心内膜和心外膜细胞的2倍多;M细胞的INa失活最快;对照组与假手术组无明显差别。心肌梗死组三层细胞的INa I—V曲线均上移,以M细胞变化最显著,INa稳态失活曲线均左移,以心外膜细胞变化最显著。结论左室心肌细胞的INa存在跨壁异质性;心肌梗死对INa的跨壁异质性有明显影响。     

心肌梗死1周后梗死边缘区心室肌细胞快钠通道电流跨壁异质性的变化

目的 探讨心肌梗死1周后梗死边缘区心肌细胞快钠通道电流(INa )跨壁异质性的变化.方法 30只兔随机分为3组,其中两组结扎家兔左前降支建立心肌梗死动物模型,分别为心肌梗死组和假手术对照组,另一组为正常对照组.1周后,用膜片钳技术研究左心室梗死边缘区三层心肌细胞INa 的改变.结果 正常对照组左室三层细胞的钠电流存在异质性, M细胞的峰值INa 是心内膜和心外膜细胞的2倍多;M细胞的INa 失活最快;对照组与假手术组无明显差别.心肌梗死组三层细胞的INa I-V曲线均上移,以 M细胞变化最显著, INa 稳态失活曲线均左移,以心外膜细胞变化最显著.结论 左室心肌细胞的INa 存在跨壁异质性;心肌梗死对INa 的跨壁异质性有明显影响.     

兔冠状动脉结扎1小时缺血区心室肌细胞瞬间外向钾通道的变化

为探讨在急性心肌梗死 (AMI)早期瞬间外向钾通道的变化及其在室性心律失常发生中的作用 ,以开胸冠状动脉 (简称冠脉 )结扎法制备兔急性心肌缺血模型 ,1h后处死动物分离心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳记录技术观察缺血区心外膜心室肌细胞瞬间外向钾通道电流 (Ito)的变化 ,以正常心肌Ito为对照。结果 :急性冠脉结扎 1h兔缺血区心室肌细胞Ito受到抑制 ,电流密度$C电压关系曲线下移 ,测试电压 + 60mV时的Ito电流密度对比显示 :对照组为 1 7.39± 5 .2 4pA/pF (n =1 2 ) ,冠脉结扎 1h组为 7.75± 3.1 1pA/pF (n =1 0 ) ,与对照组相比下降了 5 7% ,P <0 .0 0 1 ;其失活曲线左移 ,半数最大失活电压 (V1 /2 )对照组为 - 35 .2± 5 .3mV(n =1 2 ) ,冠脉结扎 1h组为 - 5 5 .1± 5 .6mV(n =1 0 ) ,与对照组比较失活速度加快 ,P <0 .0 1 ;冠脉结扎后 1h组Ito恢复明显减慢 ,恢复时程延长 ,P <0 .0 5。结论 :冠脉结扎后 1h缺血区心室肌细胞瞬间外向钾通道受抑制 ,影响动作电位复极 ,容易诱发 2相折返 ,可能为AMI后室性心律失常发生的机制之一。     

胺碘酮对心肌梗死一月后非梗死区心室肌细胞快钠通道电流跨壁异质性的影响

探讨胺碘酮对心肌梗死 (MI)后非梗死区心肌细胞快钠通道电流 (INa)跨壁异质性的影响。 36只兔随机分为4组 ,其中两组建立急性MI动物模型 ,分别为胺碘酮组和MI组 ,其余两组为正常对照组和假手术对照组。 1个月后 ,用膜片钳技术研究左室非梗死区三层心肌细胞INa的改变。结果 :正常对照组左室三层细胞的钠电流存在异质性 ,M细胞的峰值INa是心内膜 (Endo)和心外膜层 (Epi)的 2倍多 ;M细胞的INa失活最快 ;对照组与假手术组无明显差别。MI组三层细胞的INa电流密度下降 ,以M细胞变化最显著 ,INa稳态失活曲线均左移 ,以Epi变化最显著 ;胺碘酮组三层细胞INa电流密度下降显著 ,稳态失活曲线左移最明显并趋向一致 ,灭活后恢复曲线均恢复减慢。结论 :左室心肌细胞的INa存在跨壁异质性 ;MI对INa的跨壁异质性有明显影响 ;而胺碘酮减弱MI后INa的跨壁异质性。     

腺苷对心肌梗死兔非梗死区心室细胞快钠通道跨壁异质性的影响及其离子机制

目的 探讨腺苷（Ado）对急性心肌梗死（AMI）后非梗死区心肌细胞快钠通道电流（INa）跨壁异质性的影响.方法 36只兔随机分为4组,其中两组建立AMI动物模型,分别为Ado组和MI组,其余两组为正常对照组和假手术对照组.1个月后,用膜片钳技术研究左室非梗死区3层心肌细胞INa的改变.结果 正常对照组左室3层细胞的钠电流存在异质性,中层心肌（M）细胞的峰值INa是心内膜层（Endo）和心外膜层（Epi）的2倍多;M细胞的INa失活最快;对照组与假手术组无明显差别.MI组3层细胞的INa电流密度下降,以M细胞变化最显著,INa稳态失活曲线均左移,以Epi变化最显著;Ado组3层细胞INa电流密度下降显著,稳态失活曲线左移最明显并趋向一致,失活后恢复曲线均恢复减慢.结论 左室心肌细胞的INa存在跨壁异质性;AMI对INa的跨壁异质性有明显影响;而Ado减弱AMI后INa的跨壁异质性.     

二十二碳六烯酸对大鼠心室肌细胞钠通道和瞬时外向钾通道的影响

目的 研究二十二碳六烯酸(DHA)对大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)和瞬时外向钾通道电流(Ito)的动力学影响.探讨DHA抗心律失常的机制.方法 采用膜片钳技术在全细胞模式下,记录20、40、60、80、100和120μmol/L DHA对大鼠心室肌细胞INa和Ito的影响.结果 (1)DHA对INa呈浓度依赖性阻滞,使稳态失活曲线左移、失活后恢复时间延长,对稳态激活曲线无影响.在指令电压-30 mV,上述浓度DHA对INa阻滞分别为(1.51±1.32)%、(21.13±4.62)%、(51.61±5.73)%、(67.62±6.52)%、(73.49±7.59)%和(79.95±7.62)%(P<0.05,n=20),DHA对INa的半效作用浓度为(47.91±1.57)μmol/L.(2)DHA对Ito呈浓度依赖性阻滞,使稳态失活曲线左移、失活后恢复时间延长,对稳态激活曲线无影响.在指令电压+70 mV,上述浓度DHA对Ito阻滞分别为(2.61 ±0.26)%、(21.79±4.85)%、(63.11±6.57)%、(75.52 ±7.26)%、(81.82 ±7.63)%和(84.33±8.25)%(P<0.05,n=20),DHA对Ito的半效作用浓度为(49.11±2.68)μmol/L.结论 DHA对钠通道和瞬时外向钾通道的抑制作用可能是其抗心律失常机制之一.

Abstract：

Objective To investigate the effects of docosahexaenoic acid(DHA)on sodium channel current(INa)and transient outward potassium channel current(Ito)in rat ventricular myocytes and to evaluate potential anti-arrhythmic mechanisms of DHA.Methods INa and Ito of individual ventricular myocytes were recorded by patch-clamp technique in whole-cell configuration at room temperature.Effects of DHA at various concentrations(0,20,40,60,80,100 and 120 μmol/L)on INa and Ito were observed.Results (1) INa was blocked in a concentration-dependent manner by DHA,stably inactivated curves were shifted to the left,and recover time from inactivation was prolonged while stably activated curves were not affected by DHA.At-30 mV,INa was blocked to(1.51 ±1.32)%,(21.13±4.62)%,(51.61 ±5.73)%,(67.62 ±6.52)%,(73.49±7.59)%and(79.95±7.62)%in the presence of above DHA concentrations(all P<0.05,n=20),and half-effect concentration(EC50)of DHA on INa was(47.91±1.57)μmol/L(2) Ito were also blocked in a concentration-dependent manner by DHA,stably inactivated curves were shifted to the left,and recover time from inactivation was prolonged with increasing concentrations of DHA,and stably activated curves were not affected by DHA.At+70 mV,Ito was blocked to(2.61 ±0.26)%,(21.79±4.85)%,(63.11 ±6.57)%,(75.52 ±7.26)%,(81.82 ±7.63)%and(84.33±8.25)%,respectively,in the presence of above DHA concentrations(all P<0.05,n=20),and the EC50 of DHA on Ito was(49.11±2.68)μmol/1.Conclusion The blocking effects of DHA on APD and Ito may serve as one of the anti-arrhythmia mechanisms of DHA.     

急性心肌梗死后一周对心室肌细胞瞬间外向钾电流的影响

研究急性心肌梗死 (AMI)心室肌细胞瞬间外向钾电流 (Ito)的变化。采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立AMI动物模型 ,应用膜片钳全细胞记录方法 ,研究AMI后 1周心外膜梗死区心肌细胞Ito的变化。结果 :正常对照组 (n =16 )心肌细胞在 - 30mV激活 ,心肌梗死 (简称心梗 )组细胞在 - 2 0mV激活 ,均呈线性电压依赖性。心梗组梗死区细胞 (n =12 )Ito的电流密度明显下降 ,I V曲线明显下移。心梗组Ito电流密度 (去极化电位 +6 0mV时 )明显低于对照组 (7.4 7± 2 .39vs 17.39± 5 .2 4pA/pF ,P <0 .0 1)。结论 :AMI可引起心室肌细胞Ito电流密度下降 ,导致梗死区细胞动作电位平台期相对延长 ,复极异常 ,造成心肌细胞之间动作电位及不应期离散度增大 ,容易形成折返 ,此可能是导致心肌梗死后出现折返性室性心律失常的原因。     

心肌梗死后大鼠左心室肌细胞钾通道的重构

目的:探讨心肌梗死后大鼠左心室肌细胞钾通道的重构及增加葡萄糖代谢对钾流的作用。方法:取体重200～250 g的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠8只,结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型(心肌梗死组),采用酶解法获得单个左心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术记录钾电流。对照组5只不结扎冠状动脉。结果:心肌梗死组大鼠心脏重量、心脏／体重比及左心室肌细胞膜电容均较对照组显著增加,但瞬间外向性钾流(Ito)密度则显著降低,分别用1．5 mmol／L二氯乙酸及5 mmol/L丙酮酸在体外预处理心肌梗死后大鼠左心窒肌细胞4～5小时,瞬间外向性钾流密度恢复到对照组水平。结论:心肌梗死后大鼠左心室肌细胞钾通道存在重构,而增加葡萄糖代谢能使之恢复,提示糖代谢和钾通道功能间存在一定关系。     

心肌梗死后神经过度增生对心肌动作电位影响的膜片钳研究

为探讨心肌梗死 (简称心梗 )后神经过度增生对心肌细胞动作电位 (AP)的影响 ,1 8只兔随机分为三组 ,神经生长因子 (NGF)组结扎左回旋支并通过皮下置管于左侧星状神经节 ,给予NGF 4 0 0U ,共 30d。陈旧性心梗 (HMI)组结扎冠状动脉左回旋支和皮下置管 ,假手术 (Sham)组皮下置管和开胸但不结扎冠状动脉 ,3个月后应用膜片钳技术记录心外膜下心肌细胞AP。结果 :HMI组心肌细胞的膜电容较Sham组增加 1 9% ,而NGF组的膜电容较HMI组增加 2 2 % (P <0 .0 5 )。NGF组非梗死区 (NIZ)的心肌细胞的动作电位时程 (APD)较HMI组和Sham组明显延长 ,P <0 .0 5 ;而NGF组梗死周边区 (IBZ)的心肌细胞的APD与HMI组相近 ,均较Sham组明显缩短 ,P <0 .0 5。NGF组中NIZ与IBZ间心肌细胞APD的复极离散 (DR) ,较HMI组和Sham组明显增加 ,P <0 .0 5。NGF组的NIZ早期后除极的发生率为 6 3.2 % (1 2 / 1 9) ,HMI组为 1 6 .7% (3/ 1 8) ,Sham组为 0 % (0 / 2 0 )。结论 :NGF组DR的增加和易于产生早期后除极可能是NGF组心室颤动阈值进一步降低的重要原因     

兔急性心肌梗死后梗死周边带心肌细胞L-型钙通道的变化

探讨L型钙通道在急性心肌梗死 (AMI)后室性心律失常发生中的作用及其机制。方法 :以开胸冠状动脉结扎法制备兔AMI模型 ,1周后处死动物分离心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳记录技术观察梗死周边缺血带心外膜心室肌细胞L型钙通道电流 (ICa L)的变化 ,以正常心肌ICa L为对照。结果 :AMI 1周时兔梗死周边区心室肌细胞L型钙电流受到抑制 ,其电流峰值由正常状态下的 - 5 .58± 1 .53pA/pF(对照组 ,n =1 0 )降至 - 3 .52± 0 .93pA/pF(AMI组 ,n=6) ,最大峰电流下降 2 9.1 % ,P <0 .0 5 ,I V曲线上移 ;其失活曲线左移 ,半数最大失活电位由 - 1 3 .1± 4 .2mV左移至 - 2 5 .9± 7.0mV ,P <0 .0 5 ,失活速度加快。结论 :AMI后 1周梗死周边带心外膜心室肌细胞L型钙通道受抑制 ,可能为AMI后室性心律失常发生的机制之一。     

Effects of Simvastatin on Ion Channel Currents in Ventricular Myocytes from Acute Infarcted Heart of Normocholesterolemic Rabbits

Objectives To investigate the effects of simvastatin on membrane ionic currents in left ventricular myocytes of rabbit heart suffering from acute myocardial infarction （ AMI）, so as to explore the ionic mechanism of statin treatment for antiarrhythmia. Methods Forty-five New Zealand rabbits were randomly divided into three groups： AMI group, simvastatin intervention group （ Statin group） and sham-operated control group （CON）. Rabbits were infarcted by ligation of the left anterior descending coronary artery after administration of oral simvastatin 5 mg · kg^-1·d^-1 （Statin group） or placebo （AMI group） for 3 days. Single ventricular myocytes were isolated enzymatically from the epicardial zone of the infracted region 72 h later. Whole cell patch clamp technique was used to record membrane ionic currents, including sodium current （INa）, L-type calcium current （Ica-L） and transient outward potassium current （Ito）. Results （1） There was not significant difference in serum cholesterol concentration among three groups. （2） The peak INa current density （at -30 mV） was significantly decreased in AMI group （ -25.26±5.28, n = 13 ）, comparing with CON （ - 42. 78± 5.48, n = 16）, P 〈 0. 05, while it was significantly increased in Statin group （ - 39.83 ±5.65 pA/pF, n = 12） comparing with AMI group, P 〈0. 01 ; The peak Ica-L current density （ at 0 mV） was significantly decreased in AMI group （ -3. 43 ±0. 92 pA/pF, n = 13） comparing with CON （ -4. 56 ±1.01 pA/pF, n = 15）, P 〈0. 05, while it was significantly increased in Statin group （ -4. 18±0. 96 pA/pF, n = 12） comparing with AMI group, P 〈0. 05; The Ito current density （ at ＋ 60 mV） was significantly decreased in AMI group （ 11.41 ± 1.94 pA/pF, n = 13 ） comparing with CON （17.41 ±3.13 pA/pF, n = 15）, P 〈0. 01, while it was significantly increased in Statin group （16. 11 ± 2. 43 pA/pF, n = 14） comparing with AMI group, P 〈 0. 01. Conclusions AMI induces signific     

缬草单萜氧化物对单个兔心室肌细胞钠通道的影响

利用全细胞膜片钳记录技术研究缬草单萜氧化物 (VMO)对兔单个心室肌细胞钠离子电流 (INa)的影响。结果 :30 μg/L和 6 0 μg/L的VMO使兔心室肌细胞INa峰值 (INamax)从 5 3.4 7± 5 .1 3pA/pF分别降至 4 0 .2 5± 4 .1 8pA/pF和 30 .89± 2 .95pA/pF(n =8,P <0 .0 5和P <0 .0 1 ) ,抑制率分别为 2 4 .7%和 4 1 .9% ;VMO使INa的电流 电压曲线上移 ,但不改变其激活电位、电位峰值和反转电位 ;VMO还减慢钠通道灭活后的恢复过程。结论 :VMO对INa具有浓度依赖性阻滞作用 ,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。     

钾流在糖尿病大鼠心室肌细胞的改变机制

目的研究糖尿病对大鼠心室肌细胞瞬间外向钾流(I_(to))的影响及其分子机制,探讨糖尿病引起的心脏损害与心律失常的关系。方法取体质量150～200 g 的雄性 Sprague-Dawley 大鼠,单次腹腔注射链脲菌素(STZ,65 mg/kg,pH=4.5)建立糖尿病大鼠模型,采用酶解法获得单个心室肌细胞,应用膜片钳全细胞方法记录I_(to);并用反转录聚合酶链式反应技术进一步半定量编码该电流通道α亚单位基因(Kv4.2、Kv4.3和 Kv1.4)mR-NA 的表达水平。结果与对照组比较,+70 mV 时,糖尿病大鼠心室肌细胞 I_(to)密度显著降低[对照组:(30.6±3.8)比糖尿病组:(18.9±3.3)pA/pF,P<0.01);半定量分析法显示糖尿病大鼠心室肌细胞 I_(to)通道α亚单位编码基因 Kv4.2、Kv4.3 mRNA 表达水平分别下调56.9%和46.6%;而 Kv1.4 mRNA 表达则上调约48.0%,3组基因表达水平的改变差异均有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病大鼠心室肌细胞 I_(to)密度显著降低主要与编码该通道α亚单位的基因表达下调有关。     

新生大鼠心肌细胞短暂外向钾电流下降与心肌肥大的相关性研究

在某些心力衰竭患者中常观察到心肌细胞短暂外向钾电流 (Ito)下降和动作电位时程 (APD)延长 ,笔者主要探讨Ito下降与心肌肥大的关系及内在机制。用Ito阻断剂 ,4 氨基吡啶 (4 AP) ,处理新生大鼠心室肌细胞 ,观察作为心肌肥大指标的细胞膜电容和3 H 亮氨酸 (3 H Leu)掺入量 ,同时测Ito振幅和APD。结果 :Ito振幅下降近 5 0 %(1 5 0 .3± 1 8.6pA ,n =7vs 74 .0± 1 1 .5pA ,n =1 1 ,P <0 .0 5 )。APD50 (5 0 %复极 )显著的延长 (75 .8± 1 4 .1ms,n =7vs2 0 1 .7± 2 3.5ms,n =1 1 ,P <0 .0 5 )。膜电容和3 H Leu掺入量分别增加 4 7%和 31 % (P均 <0 .0 5 )。L 型钙通道阻断剂维拉帕米 ,能抑制 4 AP诱导的APD延长以及膜电容和3 H 亮氨酸掺入量的增加。环孢素A(CsA)也可抑制 4 AP诱导的膜电容和3 H Leu掺入量的增加 ,但对APD影响不明显。结论 :Ito下降通过延长APD ,致细胞内钙增加 ,激活钙调神经磷酸酶反应途径 ,可能引起心肌肥大