红景天苷衍生物对苯甲酰红景天苷对MCAO大鼠的神经保护作用

目的研究红景天苷衍生物对苯甲酰红景天苷(p-benzoyl salidroside, pOBz)对大脑中动脉闭塞模型(MCAO)大鼠的神经保护作用。方法 (1)30只健康成年♂SD大鼠,随机分为Sham组、MCAO组、MCAO+pOBz低中高剂量组(25、50、100 mg·kg^-1),线栓法造模,进行神经功能损伤评分,连续给药2 d。采用核磁共振成像检测MCAO大鼠脑梗死体积。(2)24只健康成年♂SD大鼠,随机分为Sham组、MCAO组、MCAO+pOBz组(50 mg·kg^-1)和MCAO+Sal组(50 mg·kg^-1),线栓法造模,给药1 d。Western blot检测NeuN、EGR1、Bcl-2和Bax蛋白表达。(3)18只健康成年♂SD大鼠,随机分成Sham组、MCAO组和MCAO+pOBz组(50 mg·kg^-1),连续给药2 d。免疫荧光染色观察NeuN的表达。结果 pOBz给药2 d可以降低MCAO大鼠的脑梗死体积,改善神经功能损伤,且升高NeuN和EGR1表达程度优于Sal, pOBz对MCAO大鼠脑组织Bcl-2/Bax比值的改善程度与Sal相当。结论 pOBz可改善MCAO大鼠脑梗死体积,具有优于红景天苷的神经保护作用。     

红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生及Akt/GSK-3β/CRMP-2表达的影响

目的研究红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生的影响及可能的机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型对照组、红景天苷给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO),ZeaLonga标准评分法评价大鼠神经功能损伤,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织p-Akt(Ser473)、Akt、p-GSK-3β(Ser9)、GSK-3β、p-CRMP-2(Thr514)、CRMP-2蛋白的表达,免疫荧光染色法检测大鼠缺血侧脑组织NF200蛋白的表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显改善大鼠的神经功能损伤,促进NF200、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达,抑制p-CRMP-2蛋白表达。结论红景天苷能改善局灶性脑缺血/再灌注大鼠的神经功能缺损,此作用可能与促进Akt、GSK-3β的磷酸化,抑制CRMP-2的磷酸化,进而促进轴突再生有关。     

冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用

目的:研究冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片组、三七组、冰片配伍三七组和尼莫地平组6组，连续灌胃给药7 d后复制大脑中动脉脑缺血(MCAO)模型，术后24 h进行神经功能缺损测定，检测血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量，观察脑组织病理形态，检测脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达及血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA表达。结果:冰片配伍三七组能降低MCAO大鼠的神经功能评分(P<0.01),改善脑组织病理形态，升高血清中SOD活性并降低NO、MDA含量(P<0.05),降低脑组织中Bax蛋白表达和MMP-2的mRNA表达(P<0.01),升高Bcl-2蛋白表达，以及BDNF、VEGF的mRNA表达(P<0.01)。结论:冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用，其机制可能是提高了MCAO大鼠血清中SOD活性并降低了MDA、NO含量，降低脑组织中Ba...     

红景天苷抑制补体成分对脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用

目的研究红景天苷对脑缺血/再灌注大鼠补体成分的作用,进一步探讨红景天苷神经保护的作用机制。方法♂成年SD大鼠45只,随机分为假手术(Sham)组、模型(MCAO)组、红景天苷(MCAO+Sal)组,线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),红景天苷浓度为50 mg·kg-1·d-1,连续给药6 d。检测脑组织线粒体内Bax、Bcl-xl蛋白表达,基因芯片聚类分析,q PCR检测补体成分C1qa、C1qb、C1qc等mRNA表达,Western blot检测补体C3的表达,免疫荧光法检测C3和Neu N的表达。结果与MCAO组相比,红景天苷给药后,降低线粒体内Bax蛋白表达,促进Bcl-xl蛋白表达;经基因芯片聚类分析及q PCR检测,红景天苷能够抑制C1qa、C1qb、C1qc等mRNA补体相关基因表达;经Western blot及免疫荧光法检测,红景天苷能够抑制C3的表达,同时促进Neu N的表达。结论红景天苷能够抑制补体成分,尤其是补体中枢成分C3,对MCAO大鼠具有神经保护作用。     

红景天苷对大脑中动脉闭塞模型大鼠的神经保护作用

目的探讨红景天苷(salidroside,Sal)对MCAO模型大鼠的神经保护作用。方法健康成年,♂,SD大鼠45只,随机分成3组:假手术组(sham)、模型对照组(MCAO),红景天苷给药组(MCAO+Sal),采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),连续给药6 d,同时评价神经功能损伤,检测脑梗死体积,基因芯片分析,检测caspase-3、cleaved caspase-3蛋白和IL-6、Vgf、Hbaa2、Hbb-b1、Hbb、CD44、Pnpla2、Slc6a5、Slc5a7的基因表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显改善大鼠的神经功能损伤,降低脑梗死体积;抑制cleaved caspase-3蛋白和IL-6基因的表达;并能够促进Vgf、Hba-a2、Hbb-b1、Hbb基因的表达,能够降低CD44、Pnpla2、Slc6a5、Slc5a7基因的表达。结论红景天苷能够降低MCAO模型大鼠神经功能评分,减少脑梗死体积,具有神经保护作用,其作用机制可能与促进Vgf、Hba-a2、Hbb-b1、Hbb的表达和下调cleaved caspase-3、IL-6、CD44、Pnpla2、Slc6a5、Slc5a7的表达有关。     

CRMP2可通过改善神经细胞凋亡减轻缺血/再灌注大鼠神经功能缺损

目的探讨CRMP2(collapsin response mediator protein2)对大鼠脑缺血/再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法 192只♂成年SD大鼠分成4组:假手术组(sham)、脑缺血/再灌注组(MCAO)、脑缺血+质粒对照组(MCAO+GFP)、脑缺血+CRMP2真核质粒干预组(MCAO+CRMP2/GFP)。大鼠MCA阻塞手术前1 d将真核质粒注射入脑内,缺血/再灌注后48 h、1周,采用RT-PCR检测各组大鼠脑组织CRMP2、BCL2、p53、Caspase-3和Caspase-8的mRNA的表达;Western blot检测脑组织CRMP2蛋白的表达;TUNEL染色检测凋亡细胞;免疫组化检测脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达;TTC染色检测脑梗死体积并进行神经功能缺损评分。结果脑缺血/再灌注48 h及1周,与sham组比较,MCAO组及MCAO+GFP组CRMP2和BCL2的表达水平明显降低(P<0.01),而Caspase-3、Caspase-8及p53的mRNA表达升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞数量明显升高(P<0.01)。MCAO+CRMP2/GFP组CRMP2和BCL2较MCAO及MCAO+GFP组明显增高(P<0.01),同时该组p53、Caspase-3及Caspase-8表达明显降低(P<0.01)。过表达CRMP2使TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01)。脑缺血/再灌注后BDNF表达升高(P<0.01),而脑内过表达CRMP2使BDNF的水平上调更明显(P<0.01)。TTC染色显示,MCAO+CRMP2/GFP组脑梗死体积较MCAO组及MCAO+GFP组明显减小(P<0.01),且神经功能缺损明显减轻(P<0.01)。结论过表达CRMP2可能通过对线粒体凋亡通路的调控减少了脑缺血/再灌注损伤后的神经细胞凋亡、减少脑梗死体积而起到神经保护作用。     

通心络胶囊诱导大鼠脑缺血耐受的作用

目的观察凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白在脑缺血时的表达以及通心络胶囊对其表达和脑缺血耐受的影响。方法采用大鼠全脑-局灶脑缺血模型,将健康♂SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、通心络胶囊组。观察有脑缺血史的大鼠再次大脑中动脉梗死再灌注(MCAO)后24 h的神经行为、Bcl-2、Bax阳性细胞数和TUNEL阳性细胞数。结果MCAO后24 h,通心络胶囊组神经行为评分、TUNEL阳性细胞及Bax阳性细胞低于模型组,而Bcl-2阳性细胞增加。结论通心络胶囊能促进Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达而发挥诱导脑缺血耐受的作用。     

红景天苷通过抑制补体C3的表达对MCAO大鼠缺血侧NeuN、Egr4影响的研究

目的探讨红景天苷(Sal)通过抑制补体C3对MCAO大鼠缺血侧NeuN、Egr4的影响。方法♂成年SD大鼠45只随机分成假手术组(sham)、模型组(MCAO)以及给药组(MCAO+Sal),采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)。连续给药1、2 d,免疫荧光及Western blot技术检测NeuN、Egr4、C3和C1的表达情况。健康成年♂SD大鼠60只,随机分为6组,即人工脑脊液+sham、C3aR抑制剂+sham、人工脑脊液+MCAO、C3aR抑制剂+MCAO、人工脑脊液+MCAO+Sal、C3aR抑制剂+MCAO+Sal,Western blot技术检测缺血侧脑组织NeuN、Egr4、C3的表达水平。结果与MCAO组相比较,经红景天苷分别作用1、2d能使C3的表达明显下降,NeuN表达明显上升;红景天苷给药1d对Egr4和C1没有明显影响,但能使2 d的Egr4表达明显升高,C1的表达明显降低;经连续2d侧脑室注射C3aR抑制剂或给予红景天苷后,均能够降低P50的表达,增加Egr4的表达。结论红景天苷对脑缺血/再灌注亚急性期的神经保护功能可能与抑制补体经典途径的激活,调控Egrs,从而减少细胞凋亡有关。     

Nogo-A及NgR在脑外伤大鼠脑组织中的表达

目的研究中枢神经系统损伤后Nogo-A及其受体Ng R在颅脑外伤大鼠脑组织中的表达变化。方法本课题采用SPF级SD大鼠100只,分为空白对照组(n=10)、假手术组(n=10)和损伤组(n=80)。对实验损伤组大鼠采用Feeney等自由落体撞击法制成急性中型脑外伤模型,损伤组随机分为1 d(n=16)、3 d(n=16)、5 d(n=16)、7 d(n=16)和10 d(n=16)5个组。用免疫组织化学的方法测定测量各组各时间点脑切片Nogo-A及Ng R蛋白的表达。结果颅脑创伤后1 d时创伤灶边缘脑组织中Nogo-A表达显著升高,伤后3 d Nogo-A表达有所下降,但仍高于假手术组(P<0.05),到伤后7 d Nogo-A表达又上升达到高峰,直至伤10 d,Nogo-A表达仍维持在较高的水平。创伤组Nogo-A表达均显著高于假手术组(P<0.05)。颅脑创伤后1天时创伤灶边缘脑组织中Ng R呈基础表达,与假手术组比较差别无统计学意义(P>0.05)。创伤后3 d Ng R表达较假手术组明显升高(P<0.05),在伤后7 d达到高峰值,直至伤后10 d Ng R表达仍处于峰值。结论颅脑创伤后Nogo-A呈双峰的表达规律,Nogo-A在创伤后急性期可能参与颅脑创伤的急性病理过程,在创伤修复期发挥抑制神经再生的作用,为开辟颅脑创伤救治的新方法提供依据。Ng R在颅脑创伤的恢复期显著升高,峰值持续时间长,Ng R介导颅脑创伤后神经再生的抑制,阻碍神经功能的恢复,为探寻颅脑创伤后神经功能恢复的治疗方法指出新的方向,提供实验依据。     

益气通络解毒胶囊抗脑缺血性再灌注损伤的作用及其机制

本文观察了益气通络解毒胶囊抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。选用SD大鼠,随机分为假手术组,模型组,益气通络解毒胶囊高、中、低剂量组,尼莫地平组,每组10只。采用大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,观察对大鼠神经缺损功能的恢复,脑梗死体积,缺血侧脑组织SOD活力、MDA含量、NO含量和NOS活力,Bcl-2和Bax蛋白表达,血清中IL-1β、IL-6和TNFα等炎症因子含量,以及缺血侧脑组织IL-1βmRNA表达的影响。结果表明,益气通络解毒胶囊可显著地减轻MCAO模型大鼠的神经功能缺损症状,促进神经功能缺损症状的恢复;显著地缩小大鼠MCAO后脑组织梗死体积,降低脑梗死体积百分率;显著地提高缺血再灌注后大鼠脑组织中SOD活性、明显降低MDA含量、NO含量和NOS活力,减轻自由基对脑的损伤;上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白表达;明显降低血清中IL-1β、IL-6和TNFα等炎症因子的含量以及缺血侧脑组织IL-1βmRNA表达水平。益气通络解毒胶囊具有明显抗细胞凋亡、抗氧化和抗炎等作用,对大鼠脑缺血性损伤具有明显的保护作用。