放射敏感性不同鼻咽癌细胞株的蛋白质组学比较研究

鼻咽癌（NPC）是我国南方常见的恶性肿瘤，放射治疗是鼻咽癌治疗最有效的手段之一。预测肿瘤的放射敏感性将有助于制定合理的放疗方案。目前采用的常规放疗方案没有考虑到不同个体存在放射敏感性的差异，影响了肿瘤的放疗控制率。所以，寻找能准确地预测肿瘤细胞的放射敏感性的蛋白质，对不同患者采用更合理的个体化放疗方案极为重要。蛋白质组学方法使高通量地研究生物个体功能成为可能。在本研究中，将应用蛋白质组学技术初步研究放射敏感性不同鼻咽癌细胞株中差异表达蛋白。     

鼻咽癌组织中HO-1蛋白表达与放射敏感性及预后的关系

放射治疗是鼻咽癌(NPC)首选的治疗手段,但不同患者的治疗效果却有较大差异,除了受病理类型、分期早晚、患者年龄、体质等的影响外,个体放射敏感性的差异是一个重要的因素.     

鼻咽癌细胞系放射敏感性的异质性

鼻咽癌多发于我国南方 ,放射治疗为首选治疗手段。鼻咽癌患者放射治疗后 5年生存率为 34%～ 5 3% ,多数死于局部复发和 或远处转移。肿瘤细胞群中存在放射敏感性差的亚群是复发和转移的主要原因 ,更有效的治疗方案的设计应针对这些放射抵抗的细胞。本室已从鼻咽癌细胞系ＣＮＥ 2Ｚ中分离出 2 5个单克隆株 ,这些克隆株在倍增时间、细胞分裂指数、成瘤率、体外侵袭能力、转移能力和途径等方面存在异质性[1 ] 。为分离出放射敏感性不同的细胞亚系并研究产生放射抵抗的机理 ,本实验对这 2 5个克隆株中生物学特性差异较大的 10个克隆作进一步研究…     

间期FISH检测液基薄层涂片预测宫颈癌细胞的放射敏感性

目前,宫颈癌放疗后复发率仍然较高,一个重要原因是由于个体之间肿瘤细胞的放射敏感性差异~([1-4]).因此,开发快速、简便的宫颈癌细胞内在放射敏感性预测方法,对临床个体化治疗方案设计及提高肿瘤局部控制率和治疗率具有重要意义.     

广西产何首乌GXHSWAQⅠ对鼻咽癌细胞的放射增敏作用

对鼻咽癌主要采用放射治疗，但是在临床实际中，却很难控制，主要原因是肿瘤周围的正常组织对放射线的低耐受性限制了肿瘤部位的放射剂量。此外，实体瘤内多为乏氧细胞，肿瘤细胞乏氧对射线的敏感性不高，从而使得鼻咽癌照射后仍然得不到满意的效果。例如单纯放疗鼻咽癌5年生存率约为50％，放射抗拒是治疗失败的原因之一，因此，研究鼻咽癌放射抗拒机制、寻找放射增敏剂是提高治愈率的途径之一。     

鼻咽癌的放射敏感性预测初探

目的　探索原位缺口平移、早熟凝集染色体分析和胞质分裂阻断微核法等技术成为判断鼻咽癌放射敏感性预测指标的可能性。方法　以原位缺口平移法研究了鼻咽癌细胞株ＣＮＥ、ＣＮＥ－ ２Ｚ细胞对γ射线的放射效应;以早熟凝集染色体分析技术和胞质分裂阻断微核法研究了鼻咽癌活检组织的放射敏感性。结果　在０ ～８ Ｇｙ 之间,ＣＮＥ 及ＣＮＥ－ ２Ｚ 的脱氧三磷酸核苷（ｄＮＴＰ） 掺入率与照射剂量间有良好的剂量效应关系,来源于低分化肿瘤的ＣＮＥ－ ２Ｚ细胞株的放射敏感性高于ＣＮＥ;３２ 例鼻咽活检标本进行早熟凝集染色体分析,其早熟凝集染色体周期分布与鼻咽癌患者放疗疗效有明显关系,临床上对放疗呈高敏的患者,晚Ｇ１ 细胞比例显著升高;胞质分裂阻断微核法提示２０ 例患者照射后微核形成有显著个体差异,其中低反应者２ 例有复发倾向。结论　实验结果提示上述３ 项指标可望成为综合判断鼻咽癌放射敏感性的重要参数。     

鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射敏感性的异质性及其机理探讨

目的　进一步证实人鼻咽癌细胞系CNE 2Z确实存在着放射敏感性的异质性 ,并探讨其有关机理。方法　观察人鼻咽癌细胞系CNE 2Z亚克隆株H5和S1的裸鼠移植瘤放射敏感性的不同 ;用流式细胞仪、荧光显微镜、Western blot检测H5和S1凋亡能力的不同及凋亡相关蛋白表达的差异 ;用3H掺入法说明DNA合成抑制率与放射敏感性的不同 ;用RT PCR观察相关癌基因 (fas、p5 3)的表达与放射敏感性的关系。结果　鼻咽癌细胞系CNE 2Z中确实存在放射敏感性的异质性 ,H5、S1两种细胞的凋亡率都随着照射后时间的延长而增加 ,但H5比S1高且差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。两种细胞的DNA合成率于放射前无差别 ;照射后都较放射前受到抑制 (P <0 0 5 ) ,H5受抑制程度大 (P <0 0 5 )。H5与S1细胞fas、p5 3基因的表达差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　本实验再次证实了鼻咽癌细胞系CNE 2Z确实存在放射敏感性异质性 ,并证实了其异质性的机理与细胞受射线照射后引起凋亡的能力不同有关、与DNA合成的抑制率成正相关、与癌基因fas、p5 3的表达无关。     

微核法研究青蒿素和蒿甲醚对人鼻咽癌细胞的放射增敏作用

青蒿素( artemisinin)是从黄花蒿中提取的一种含内过氧化基团的倍半萜内酯化合物,在临床上治疗恶性疟疾和脑型疟疾有显著疗效.近年发现,青蒿素及其衍生物对肿瘤细胞有显著的杀伤作用及放射增敏作用[1-4].但是,有关青蒿素的另一个衍生物蒿甲醚的放射增敏作用,目前国内外相关报道较少.本研究以人鼻咽癌CNE-1细胞为实验对象,采用胞质分裂阻滞微核法(cytokinesis-block micronucleus method,CBMN)研究青蒿素与蒿甲醚对人鼻咽癌CNE-1细胞放射敏感性的影响.Fenech和Morley[5]提出了胞质分裂阻滞微核法比常规法更敏感,检测染色体断片的效率更高,能较为精确、快速、简便地衡量染色体损伤程度[6],故本实验采用胞质分裂阻滞微核法来研究青蒿素与蒿甲醚对人鼻咽癌CNE-1细胞放射敏感性的影响.     

鼻咽癌放射抗拒相关的信号通路

目的 研究具有不同放射抗拒性的人鼻咽癌细胞株CNE-2R与CNE-2的基因表达谱差异,筛选与鼻咽癌放射抗拒相关的基因信号通路.方法 验证已构建的鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R的放射抗拒性,选用Human-6v3.0全基因组表达谱微珠芯片,筛选这2种细胞的差异表达基因.对差异基因进行生物信息学分析,寻找与鼻咽癌放射抗拒...     

低强度He-Ne激光血管内照射配合放疗治疗鼻咽癌的临床研究

目的探讨低强度He-Ne激光血管内照射(intravascularlowlevellaserirradiation,ILLLI)配合放疗治疗鼻咽癌的放射反应及远期疗效。方法将122例接受放疗的鼻咽癌患者随机分为单纯放疗组(对照组)和放疗+ILLLI组(治疗组),比较两组患者的急性放射反应发生率,出现急性放射反应的放疗剂量,局部复发率,远处转移率及5年生存率。结果治疗组与对照组比较,中重度急性放射反应及并发症发生率明显减少(P<0.01),出现急性放射反应的剂量明显提高(P<0.01),局部复发率,远处转移率及5年生存率两组差异无显著意义(P>0.05)。结论ILLLI可提高鼻咽癌患者放疗耐受性,降低急性放射反应及并发症发生率,不增加远处转移,可作为鼻咽癌患者放疗的有效辅助治疗措施。     

端粒、端粒酶和辐射的研究进展

目前肿瘤的治疗主要以手术、放射治疗及化疗为主，其中有50％～70％的肿瘤患者需要接受放射治疗。但由于肿瘤细胞放射敏感性的不同，放射治疗效果差异较大，因而检测肿瘤细胞放射敏感性对指导临床治疗尤为重要。染色体是细胞遗传信息的中心，也是放射损伤的主要靶点。端粒是染色体的重要结构，而端粒酶则是大部分细胞合成端粒的必需条件，     

鼻咽癌细胞放射敏感性的比较蛋白质组学研究

目的 探讨与鼻咽癌细胞放射敏感性相关的并可能预测鼻咽癌细胞放射敏感性的蛋白质。方法 以人鼻咽癌细胞株CNE-2诱导建立放射抗拒的鼻咽癌细胞株CNE-2(R743),通过克隆形成实验及流式细胞术检测以比较CNE-2和CNE-2(R743)细胞的放射敏感性及细胞周期的特征。提取细胞总蛋白质,进行双向凝胶电泳,Image Master 7.0图像分析软件分析图谱以识别差异蛋白质点,MALDI-TOF/TOF肽质量指纹图谱分析,蛋白质质谱数据库搜索鉴定差异蛋白。应用RT-PCR和Western blot验证2种细胞中相关差异蛋白的表达。 结果 得到7个差异表达较显著的蛋白质,与CNE-2相比较,CNE-2(R743)细胞中6个上调,1个下调。Western blot及 RT-PCR证实膜联蛋白A2、原肌球蛋白及糖调节蛋白78在CNE-2(R743)的表达均上调(t=24.22、24.20和29.19,P<0.05),与蛋白质组学结果一致。结论 不同放射敏感性鼻咽癌细胞存在差异表达的蛋白质,其中膜联蛋白A2、原肌球蛋白及糖调节蛋白78有可能成为预测鼻咽癌细胞放射敏感性的候选生物标志物。     

鼻咽癌2008分期方案解读

由中华医学会放射肿瘤治疗学分会、中国抗癌协会放射肿瘤专业委员会和中国抗癌协会鼻咽癌专业委员会共同组建的中国鼻咽癌临床分期工作委员会对鼻咽癌1992分期[1]的修订内容经过近1年的充分沟通和讨论,形成鼻咽癌2008分期方案,并已颁布使用[2].新分期最重要的修订是确立了MRI作为鼻咽癌分期的首选影像检查技术.下面从影像学方面阐述新分期的修订要点和解剖结构定义等相关问题.     

沉默STAT1基因增强放射抗拒鼻咽癌CNE-2R细胞放射敏感性

目的 研究基因STAT1沉默对人放射抗拒鼻咽癌细胞放射敏感性的影响.方法 慢病毒介导的STAT1基因转染放射抗拒鼻咽癌细胞CNE-2R,荧光定量RT-PCR技术检测沉默效果.MTT法检测转染前后细胞增殖活性,流式细胞技术检测细胞周期及凋亡,克隆形成实验检测转染前后细胞放射敏感性变化.结果 慢病毒转染后放射抗拒鼻咽癌细胞STAT1表达降低(F=429.87,P<0.05)、细胞生长抑制(F3=.88~4.63,P<0.05)、凋亡率增加(F=38.13,P<0.05)、放射敏感性增加(F=252.80,P<0.05)、细胞周期中G₀/G₁、S和G₂/M期未见明显差异(P>0.05).结论 沉默STAT1基因能增加放射抗拒鼻咽癌细胞 CNE-2R的放射敏感性.     

应用蛋白质的相互作用网络图筛选鼻咽癌放射抗拒相关基因

目的 应用蛋白质相互作用网络图,寻找鼻咽癌放射抗拒相关的分子标志物,探讨鼻咽癌放射抗拒机制.方法 应用全基因组表达谱芯片,初步筛选出2种不同放射敏感性细胞株CNE-2R与CNE-2的差异表达基因.采用计算机软件随机选取4个差异表达基因,分别设计引物,用半定量RT-PCR技术检测验证.将2次实验中均出现的差异有统计学意义的基因导入SNOW在线数据库进行分析,绘制差异基因相互作用网络图,网络中心节点作为鼻咽癌放射抗拒相关分子标志物;进一步采用Western blot检测关键节点STAT1在CNE-2R与CNE-2表达差异.结果 CNE-2R与CNE-2相比,2次芯片实验中均出现的差异基因374个,其中差异有统计学意义的基因197个;随机选取的4个差异表达基因RT-PCR结果与芯片扫描结果相似,具有相同的方向性.197个共有的差异有统计学意义的基因编码蛋白经SNOW分析存在相互作用,并构成一个复杂的相互作用网络图,寻找到了关键性的节点为STAT1和JUN.Western blot结果显示,STAT1-d在CNE-2R中表达明显高于CNE-2(t =4.96,P＜0.05).结论 关键性的节点STAT1和JUN可能是引起鼻咽癌放射抗拒的分子标志物,STAT1-α可能与鼻咽癌放射抗拒发生密切相关.     

鼻咽癌2008分期方案解读

由中华医学会放射肿瘤治疗学分会、中国抗癌协会放射肿瘤专业委员会和中国抗癌协会鼻咽癌专业委员会共同组建的中国鼻咽癌临床分期工作委员会对鼻咽癌1992分期~([1])的修订内容经过近1年的充分沟通和讨论,形成鼻咽癌2008分期方案,并已颁布使用~([2]).新分期最重要的修订是确立了MRI作为鼻咽癌分期的首选影像检查技术.下面从影像学方面阐述新分期的修订要点和解剖结构定义等相关问题.     

肿瘤放射增敏药物的研究进展

放射治疗是临床肿瘤治疗的重要手段之一.肿瘤细胞的放射敏感性是影响肿瘤放疗疗效的关键因素.放射增敏药物能够增强机体的放射敏感性,通过提高肿瘤细胞的放射敏感性达到降低照射剂量、提高放疗疗效、降低正常组织损伤的目的.现有的放射增敏药物主要分为细胞毒类药物、靶向药物以及中药制剂3大类.该文将对肿瘤放射增敏药物的作用机制、现状及相关研究进展进行综述.     

DCE-MRI与DWI对鼻咽癌临床分期诊断价值的比较研究

目的 探讨磁共振动态增强(DCE-MRI)和扩散加权成像(DWI)对鼻咽癌不同临床分期的诊断价值.方法 初诊鼻咽癌患者42例,均行DCE-MRI和DWI检查.Ktrans、ADC对不同临床分期及T分期诊断采用ROC曲线分析.结果 Ktrans值、ADC值与鼻咽癌临床分期及T分期分别呈正、负相关.Ktrans与ADC对鼻咽癌早期及晚期诊断的敏感性、特异性、诊断效能分别为80％、88.9％、91.1％;53.3％、88.9％、68.1％.Ktrans与ADC对鼻咽癌T1、T2和T3、T4期诊断的敏感性、特异性、诊断效能分别为83.3％、77.8％、83.4％;70.8％、61.1％、67.4％.结论 Ktrans和ADC可以很好的对鼻咽癌临床分期进行诊断,且Ktrans对鼻咽癌的早期诊断效果要好于ADC的诊断效果.     

应用凋亡和微核检测法预测细胞辐射敏感性的可行性研究

细胞辐射敏感性的预测一直是放射生物学和肿瘤治疗研究领域的重要内容 ,是肿瘤放射治疗方案尤其放疗个体化方案制定的关键。在动物实验和临床研究中 ,已提出了许多检测细胞内在放射敏感性的方法[1 ] 。其中微核 (ＭＮ)检测法是被广泛应用的方法之一[2 ,3 ] 。但是人们仍对将其作为预测细胞辐射敏感性的可行性有争议。有作者报告 ,ＭＮ发生率与克隆形成率之间存在着内在联系 ,但也有报告认为并不存在这种相关性。影响这种相关性的因素一般认为有以下几个方面 :细胞受照射时所处的细胞周期、双核细胞的百分比、ＤＮＡ含量、细胞放射敏感性的不…     

鼻咽癌放疗后耳鼻及皮肤并发症的治疗

鼻咽癌以放射治疗为主,治疗鼻咽癌的同时也损害放射野内及周围正常组织,其中以照射区皮肤黏膜损伤及毗邻鼻咽腔的耳、鼻器官受累最为严重.我院肿瘤科自2001年1月至2003年3月共收治327例鼻咽癌患者,笔者探讨放疗并发症的防治,现总结归纳如下。