SPA协同凝集试验诊断流脑早期的临床价值

1984～1986年,我们应用葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验对52例流脑病人的脑脊液、血清及尿液进行了检测,认为其对流脑的早期有一定价值。1.检测方法:A群流脑血清SPA诊断液、SPA稳定液及正常兔血清SPA液阴性对     

聚合酶链反应快速诊断流行性脑脊髓膜炎

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增脑膜炎奈瑟氏菌（Ｎｍ）ＩＳ１１０６插入序列的方法诊断流行性脑脊髓膜炎（流脑）。所试２１株Ｎｍ均扩增产生预期长度５９６ｂｐ的特异性片段，１４株非Ｎｍ菌株未见此片段。扩增灵敏度为１２ｆｇ。Ｎｍ菌ＩＳ１１０６重复序列扩增产物构成特征性ＰＣＲ指纹图，Ａ群菌株图谱一致；Ｂ群菌株呈明显多态性变化。临床标本的ＰＣＲ检测结果为：２１份流脑患者脑脊液中２０份为阳性（９５．２％）；１４份流脑患者急性期血清中１２份阳性（８５．７％）；在所检标本中Ｎｍ培养阳性的８份脑脊液和４份急性期血清ＰＣＲ检查也同样阳性。作为对照的１２份恢复期血清、３份密切接触者血清和２０份正常人血清均为阴性。作者认为，ＩＳ１１０６－ＰＣＲ是诊断流脑的一种简便快速、灵敏特异的方法。     

流脑的快速诊断法——SPA玻片协同凝集试验

葡萄球菌A蛋白(SPA)用于脑脊液中流脑菌抗原的检测,报道不多。为了探讨对流脑的早期快速诊断,我们于1980～1981年收集了流行季节流脑患者脑脊液及正常人脑脊液标本共70份,做了玻片协同凝集试验,并用培养法、电泳法作对照,初步结果较为理想。     

神经系统疾病

141份脑脊液中,流脑6份,化脑36份,结脑33份,病毒脑36份,脑血管瘤13份,非中枢神经系统疾病17份。碱性磷酸酶(A LP)含量流脑最高(8 .3309±4.112ku/dl),化脑次之(1.80±0.336ku/dl),脑血管疾病最低(0.034±0.019ku/dl).流脑与其它组比较,P<0.01;     

应用荧光定量PCR检测细菌性脑膜炎病原体DNA的研究

目的应用荧光定量PCR检测细菌性脑膜炎病原体DNA,并对脑膜炎奈瑟菌进行基因分群。方法提取脑膜炎患者脑脊液和血标本中待检菌DNA,采用荧光定量PCR扩增ctrA、bexA、lytA基因,对ctrA扩增阳性标本及部分流脑菌株进行基因分群。结果 685份脑脊液标本中19份检出脑膜炎奈瑟菌、8份检出肺炎链球菌、2份检出b型流感嗜血杆菌DNA基因片段;2份血清标本脑膜炎奈瑟菌DNA基因检测均为阳性。对ctrA基因扩增阳性标本进行A、B、C、W135、X及Y分群,有18份为C群,3份为B群;部分健康人群携带的流脑菌株有14份为B群,2份为C群,1份为X群。结论荧光定量PCR灵敏性高,检测快速,可用于细菌性脑膜炎病原体的检测、鉴别及对脑膜炎奈瑟菌的分群。     

2006～2010年湖北省流行性脑脊髓膜炎病原学和血清学监测分析

目的分析湖北省2006～2010年流行性脑脊髓膜炎(流脑)病原学和血清学监测结果,掌握湖北省流脑的变迁规律。方法对2006～2010年分离的脑膜炎奈瑟菌(Nm)菌株进行生化鉴定、血清学分型和药物敏感性检测,并采用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法进行分子分型;对所有的脑脊液和血液标本进行Nm种属特异性荧光PCR检测;对健康人群血清,运用血清杀菌试验(SBA)进行C群杀菌力抗体水平测定。结果 2007年湖北省Nm以B群为主,2008～2010年以来C群为优势菌群;对青霉素等6种抗生素均敏感,但对环丙沙星、米诺环素、萘啶酸、复方新诺明4种抗生素出现多重耐药;分子分型结果显示,湖北省B群Nm菌株具有高度的遗传多样性,未发现明显优势的克隆群,C群优势病原株为ST-4821型。RT-PCR检测(988份脑脊液)确诊29例流脑病例,其中C群22例,A群2例、B群5例。C群杀菌力总保护率(抗体滴度≥1︰8)为38.10%。结论湖北省流脑菌株发生了从B群散发到C群流行的变迁,人群对C群Nm的免疫力不足。     

尿液HIV-1抗体检测实验室能力验证质控品的制备及应用

目的研发制备尿液1型艾滋病病毒(HIV-1)抗体检测实验室能力验证质控品,并应用于艾滋病检测实验室的尿液HIV-1抗体检测能力的验证工作,提高艾滋病检测实验室对尿液HIV-1抗体的检测水平。方法对20份HIV-1抗体阳性和8份HIV-1抗体阴性的尿液样本,用酶联免疫吸附试验筛选后,选择3份阳性样本和2份阴性样本,制备能力验证质控品,并对能力验证质控品进行稳定性、均一性评价。将能力验证质控品分发给参加尿液HIV-1抗体检测的实验室,对其检测结果进行分析,评价各实验室的尿液HIV-1抗体检测能力。结果能力验证质控品均一性试验中,5份样本的变异系数(CV)分别为5.40%、27.96%、12.04%、20.24%、5.77%。能力验证质控品稳定性试验中,尿液质控品在37℃放置时,5份样本的CV值分别为5.62%、9.19%、7.98%、57.81%、7.43%;在20℃放置时,5份样本的CV值分别为18.57%、3.41%、5.21%、43.93%、5.58%;在4℃放置时,5份样本的CV值分别为7.67%、14.35%、9.61%、6.35%、9.43%;在-20℃放置时,5份样本的CV值分别为25.83%、17.29%、35.97%、20.73%、22.22%。共12家艾滋病检测实验室参加本次尿液HIV-1抗体检测能力验证,得分情况:11家实验室得分为100分,1家实验室对两份样本检测错误,得分为60分;检测数值(S/CO)偏离情况:4家实验室对阳性质控检测结果有偏离,3家实验室分别对3份阳性样本(164 101、164 103和164 105)检测结果有偏离。结论尿液HIV-1抗体能力验证质控品具有较好的稳定性、均一性,可以用于实验室能力验证。参加此次尿液HIV-1抗体能力验证的实验室结果判定大都正确,但是个别实验室在检测数值(S/CO)方面存在偏离。     

乌鲁木齐地区部分健康人群流脑A群、C群抗体水平监测与分析

目的 了解乌鲁木齐市7区1县健康人群A群、C群流行性脑脊髓膜炎(流脑)IgG抗体水平情况.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对525份血清样本进行IgG抗体水平检测.结果 A群流脑抗体总阳性率为26.29%,抗体几何平均滴度(GMT)为1:1.42;仅5～岁组与35～岁组有显著性差异(χ2 =31.82,P<0.01).C群抗体总阳性率为13.33%,GMT为1:1.18.结论 流脑A群、C群获得免疫性较低,平均流脑抗体水平阳性率为39.62%,GMT为1:1.68, 对于防止脑膜炎球菌的感染保护作用低.为提高人群免疫力,建议将A C群脑膜炎球菌多糖菌苗纳入儿童计划免疫程序,并对菌苗接种后的人群进行流脑抗体水平的随防监测.     

斑点免疫结合试验诊断囊虫病

1988年,我们用斑点免疫结合试验(DIA)诊断囊虫病,与间接血凝试验(IHA)比较,结果满意。1.受检对象:实验组受检血清共137份,脑脊液共77份。受检患者为皮肌型囊虫病40例,单纯脑囊虫病47例,混合型脑囊虫病47例,眼囊虫病3例。对照组受检血清共285份,脑脊液64份。其中健康者血清91份,肠     

Mac ELISA测定乙脑患者血清和脑脊液中特异性IgM的评价

用抗体捕捉ELISA法(Mac ELISA)检测临床疑似流行性乙型脑炎(下称乙脑)病人脑脊液88份,阳性51份,阳性率57.95％;血清91份,阳性56份,阳性率为61.53％,两者无显著性差异(X~2=0.238 P>0.05);包括取自同一患者的脑脊液和血清各72份,阳性率分别为61.11％和68.05％;而分析其中14例IgG呈4倍以上增高,乙脑患者脑脊液IgM阳性13例,而血清IgM阳性却只有8例,提示在疫区流行季节内仅仅血清学IgM阳性有时可能为乙脑隐性感染的同时还伴其它有关病毒感染。     

肝病时脑脊液中的乙型肝炎抗原

体内的乙型肝炎抗原(HBAg)起初从血液和肝脏等脏器内检出,以后在腹水、唾液、类便、尿液、关节液和羊水内也被检出;但尚未见从脑脊液中检出的。作者对4例血清HBAg阳性的慢性肝炎和2例HBAg携带者、1例合并有慢性复发性多发神经炎(CRP)的慢性肝炎、1例血清HBAg阴性的CRP,共8例的脑脊液以放射免疫法(RIA)和单向放射扩散法(SRID)进行测定,结果仅合并有CRP的1     

驱梅治疗后血清TRUST滴度不降的梅毒患者的脑脊液CXCL13检测结果分析

目的对驱梅治疗半年后,梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)滴度下降4倍或升高的、艾滋病病毒阴性的梅毒患者,检测其血清和脑脊液(CSF)中B淋巴细胞趋化因子-1(BLC-1/CXCL13)的浓度,探讨其与神经梅毒的相关性。方法共68例梅毒患者,实施腰穿检测其脑脊液常规、生化、IgG指数,并进行TRUST、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)及性病研究实验室试验(VDRL)检测;采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测该组患者血清和脑脊液CXCL13的浓度,同时检测正常对照组和治疗阴转组血清CXCL13浓度。结果 68例患者中,有17例(25.0%)为神经梅毒,其脑脊液白细胞计数升高,IgG指数升高,脑脊液CXCL13浓度、脑脊液/血CXCL13比值在有症状神经梅毒组高于无症状神经梅毒组;无症状神经梅毒组同时高于非神经梅毒组;三组之间比较差异有统计学意义(F=17.86,P=0.000)。实验组、对照组和治疗阴转组血清CXCL13浓度比较差异无统计学意义。结论神经系统受累可能是血TRUST滴度不下降的原因之一,神经梅毒患者脑脊液CXCL13浓度、脑脊液/血CXCL13比值异常升高,存在体液免疫反应异常。     

尿液HIV-1抗体快速检测(胶体金法)实验室能力验证质控品的制备与应用

目的研究制备尿液HIV-1抗体快速检测(金标法)实验室能力验证质控品,并应用于艾滋病检测实验室的能力验证工作,以评估实验室尿液HIV-1抗体快速检测(金标法)的能力,为进一步推广尿液HIV-1抗体自我检测提供依据。方法对10份HIV-1抗体阳性和5份HIV-1抗体阴性尿液样本用酶联免疫法和胶体金免疫层析试验筛选后,选择3份阳性和2份阴性样本,制备能力验证质控品5个批号;每批号质控品随机抽取10管(0.5mL/管)进行均一性评价;质控品在37℃下放置1～7天,进行稳定性评价;将能力验证质控品应用于20家实验室的能力验证中,收集分析检测结果,评价各实验室的尿液HIV-1抗体快速检测(金标法)的能力。结果质控品(编号194106-194110)均一性评价结果表明,酶联免疫法(OD值)与胶体金法(GOD值)CV%值分别为26.9%、4.3%、4.4%、19.8%、5.0%和0、11.2%、9.0%、0、9.5%,单因素方差分析检测值均无差异(P0.05);质控品(编号194106-194110)37℃放置1～7天后的稳定性评价结果表明,酶联免疫法和胶体金法的定性检测结果均与预期结果一致,酶联免疫法(OD值)与胶体金法(GOD值)CV%值分别为40.2%、3.4%、2.3%、26.3%、2.2%和0、16.7%、9.3%、0、5.8%,OD值与GOD值的t检验分析中,3支样本无差异(P 0.05),2支样本有差异(P 0.05);参加能力验证的20家实验室对5支HIV-1抗体质控品的快速检测(金标法)结果均与预期结果一致,得分均为100分。结论尿液HIV-1抗体(金标法)能力验证质控品具有良好的均一性和稳定性,且参加本次尿液HIV-1抗体快速检测(金标法)能力验证的实验室均具备准确检测能力。     

逆转录-聚合酶链反应在乙型脑炎诊断中的建立

目的　运用逆转录 -半套式 -聚合酶链反应技术 (RT -semi-nested -PCR) ,建立一种新的早期快速检测乙型脑炎病毒的方法。方法　收集临床诊断的 37例乙脑和 15例非乙脑病人标本 (包括血清、脑脊液 )分别为 6 3份和 30份 ,同时用RT -semi-nested -PCR、IgM捕获法ELISA(MacELISA)进行检测。 结果　血清和脑脊液中可成功检测出JEVRNA ,经1 5 %凝胶电泳 ,出现特异性条带 ,符合预计值 4 0 0bp。结论　RT -semi-nested -PCR对检测JEV感染 ,从实验设计到实验条件 ,都是合理的 ,有较高的敏感性和特异性。可用于乙脑的早期诊断。     

美国《Emerging Infectious Diseases》2002年第12期有关人兽共患病论文摘译

P136 7　首次从美国脑炎的患者中分离出西尼罗河病毒作者 :CinniaHuang等从一个脑炎患者中分离出西尼罗河病毒 (WNV) ,当时用CHOP (环磷酰胺 ,hydroxydoxorubicin ,长春新碱 [On covin],predisone)治疗处理 ,并用rituximab治疗非何杰金氏B细胞淋巴瘤。从脑脊液 (CSF)建立标准的逆转录PCR(RT-PCR)和TaqmanRT -PCR来诊断WNV感染。几份全血和一份血清标本进行了进一步的测试。脑脊液和血清WNV抗体阴性 ,但所有标本对两种RT -PCR方法都是阳性 ,从一份全血标本中获得感染的病毒 ,并且用WNV特异的免疫荧光方法检测证实 ,从CSF…     

抗酸性分枝杆菌快速培养仪960的应用与研究

在世纪之交 ,结核病仍是全球严重性的公共卫生问题 ,其死亡率居传染性疾病首位。由于耐药及耐多药结核病的增多及流行 ,使抗酸性分枝杆菌的快速分离培养成为实验室急需解决的问题。我院应用美国 BD公司 ( Becton Dickinson andCompany)的抗酸性分枝杆菌快速培养仪 ,现将结果分析并加以讨论。1　材料和方法1.1　标本来源 :本院住院和门诊病人 (包括已确诊结核病和鉴别诊断的患者 )标本 3 80份 (痰 3 60份 ,心包液 2份 ,胸水 13份 ,脑脊液 3份 ,支气管灌洗液 2份 )。其中 10 0份 (痰 93份 ,胸水 6份 ,心包液 1份 )同时采有 L- J培基分离培…     

四川省德格县旱獭鼠疫流行病学调查

目的证实喜马拉雅旱獭(旱獭)鼠疫在四川是否存在,为鼠疫防治提供依据。方法应用现场流行病学调查和实验室检测相结合。结果通过鼠疫间接血凝试验(IHA)检出犬阳性血清2份,从33份旱獭标本中检出鼠疫F1抗原阳性材料10份,17份旱獭检材中检获鼠疫菌4株。结论确定四川德格县为喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地。     

酶联免疫吸附试验和间接炭凝试验诊断肺吸虫病的评价

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接炭凝试验(ICAT)诊断肺吸虫病,已有报道,今年我们收集了肺吸虫病流行区和非流行区不同类型的血清标本,用两种方法进行观察。结果如下: 材料与方法 一、材料 实验用抗原为肺吸虫成虫炭抗原及ELISA所用可溶性抗原均按鲍行豪等制备。受检血清:(一)采自浙江省乐清县肺吸虫病流行区.痰检虫卵阳性血清38份;肺吸虫成虫抗原皮试阳性血清200份,皮试阴性血清538份(流行区不分性别、年     

人唾液、尿液中弓形虫抗原抗体的检测

目的探讨用唾液、尿液替代血清进行弓形虫感染免疫学诊断的可行性。方法用ELISA法对血清进行弓形虫循环抗原(CAg)、IgM、IgG抗体的检测,取上述各项免疫学指标阳性的血清样本80例,并随机抽取3项指标均为阴性的血清样本102例,分别与其唾液和尿液标本在同一反应板上同步进行测定,比较其阳性和阴性符合率。结果(1)554份血清样本中,CAg、IgM和IgG3项的阳性率分别为4.51%(25/554)、3.61%(20/554)、6.32%(35/554)。(2)唾液中检出IgM抗体阳性16例,与血清的阳性符合率为80%(16/20),检测CAg、IgG抗体均为阴性。(3)检测尿液中的抗原抗体均无一例阳性。结论采用唾液标本检测弓形虫IgM抗体,在弓形虫感染的诊断及流行病学调查中均具有一定的应用前景。     

血清与脑脊液PCT和NSE检测在小儿不同病因颅内感染中的含量变化比较

目的观察血清与脑脊液中降钙素原(procalcitonin,PCT)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)检测在小儿不同病因颅内感染中的含量变化。方法选取62例颅内感染患儿,其中细菌性脑膜炎(化脑组) 30例,病毒性脑炎(病脑组) 32例,设同期疑似中枢神经系统感染33例为对照组。测定患儿血清及脑脊液中PCT和NSE含量,并分析其与脑脊液糖及蛋白指标的相关关系。结果化脑组血清与脑脊液中PCT均高于病脑组和对照组,差异有统计学意义(P 0. 05);病脑组血清与脑脊液NSE含量显著高于化脑组和对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。化脑组脑脊液糖降低、蛋白水平升高,与病脑组及对照组比较差异有统计学意义(P 0. 05)。血清PCT、NSE与脑脊液中PCT、NSE含量均呈极强正相关(P 0. 001)。血清和脑脊液PCT与脑脊液蛋白升高呈正相关性(P 0. 001),血清和脑脊液PCT与脑脊液糖降低呈负相关性(P 0. 001)。结论检测血清和脑脊液PCT和NSE含量变化均有助于颅内感染类型及脑损伤程度的判断。检测血清PCT和NSE的含量较脑脊液检测更加简单、更易操作及快捷,值得在临床推广应用。