p73基因在鼻咽癌组织中的表达与临床意义

目的:探讨p73基因在鼻咽癌组织中的表达及其与临床预后的相关性.方法:采用定量RT-PCR技术检测35例鼻咽癌组织中p73基因的表达程度.结果:定量RT-PCR检出p73基因在26例鼻咽癌组织中呈高表达.在20例中高分化标本中检出13例呈中高表达,在15例低分化标本中检出13例呈中高表达,两者之间差异有统计学意义(P＜0.01);p73基因在9例(9/18)Ⅰ-Ⅱ期鼻咽癌标本中呈中高表达,在17例(17/17)Ⅲ-Ⅳ期鼻咽癌标本中呈中高表达.p73基因表达程度在鼻咽癌Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期之间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论:p73基因mRNA的表达可能与鼻咽癌分化程度有关,与不良预后有关,与临床分期有关.     

非霍奇金淋巴瘤组织中p73基因印迹状态及甲基化

目的:探讨p73基因启动子区甲基化及基因印迹状态与非霍奇金淋巴瘤的关系.方法:取淋巴结活检新鲜标本40例,其中非霍奇金淋巴瘤20例(B细胞淋巴瘤16例,T细胞淋巴瘤4例),淋巴结反应性增生20例.采用逆转录聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(RT-PCR-RFLP)的方法及甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)的方法...     

非霍奇金淋巴瘤中p73基因甲基化与mRNA表达的相关性研究

目的：探讨NHL中p73基因启动子甲基化与其mRNA表达的相关性。方法：用甲基化特异性PcR（MsP）方法对24例非霍奇金淋巴瘤（NHL）p73基因启动子的甲基化状况进行检测,用RT—PCR检测其1TIRNA表达。结果：24例NHL中21例发生甲基化,甲基化阳性率87．5％;对照组均未出现甲基化。24例NHL中20例p73mRNA阴性表达,占83．33％,对照组p73mRNA表达阳性。结论：在NHL中p73tuRNA表达下调,且p73基因表达与p73基因启动子的甲基化呈显著负相关;p73基因启动子的甲基化可能是造成p73基因表达下调进而导致NHL发病的原因之一。     

乳头状甲状腺癌p16基因蛋白表达及启动子甲基化的研究

目的 研究抑癌基因p16在乳头状甲状腺癌中的表达,分析其启动子区甲基化与肿瘤发生的关系.方法 对50例乳头状甲状腺癌组织和32例对照组织(20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)提取RNA后,反转录为cDNA,进行PCR,检测p16基因的表达情况,运用巢氏MSP(nMSP)检测上述组织中p16基因启动子区甲基化的情况.结果 p16基因启动子在50例乳头状甲状腺癌中有27例发生甲基化,甲基化率为54%,在32例对照组中有5例发生甲基化,甲基化率为15.6%,两组甲基化率差异有统计学意义(x2=12.08,P<0.01),经DNA测序后证实发生了启动子区甲基化的存在.p16基因在50例乳头状甲状腺癌组织中17例(34%)存在表达缺失,在32例对照组中有6例(18.8%)存在表达缺失,两组差异无统计学意义(x2=2.29, P>0.05),乳头状甲状腺癌mRNA的半定量的值为0.51±0.17,对照组mRNA半定量的值为0.72±0.22,乳头状甲状腺癌mRAN的表达明显低于对照组织,两者差异有统计学意义(t=3.66,P<0.01).结论 p16基因启动子甲基化与乳头状甲状腺癌的发生和发展相关.     

鼻咽癌p53基因的表达及功能状态研究

目的:研究鼻咽癌(NPC)中p53表达及功能。方法:对38例N:PC和16例对照样本中的p53、p21 mRNA进行RT—PCR定量分析。结果:(1)NPC组p53mRNA的水平较高,差异有统计学意义(t=2.14,P<0.05);p21 mRNA的水平两组相同。(2)在相关分析中,对照组p21mRNA水平随p53 mRNA的水平升高而升高,相关具有高度显著性,[(γ p53一p21)=0.654,P相似文献   

AFP基因启动子区甲基化与其表达的关系

【目的】研究细胞系中AFP基因启动子甲基化模式与其基因表达的关系。【方法】应用RT-PCR方法检测人源HepG2、SMMC-7721肝癌细胞系和人成纤维细胞中AFP基因的表达,应用甲基化特异性聚合酶链反应（MS-PCR）法和亚硫酸氢盐-DNA测序法检测AFP基因启动子甲基化密度及特定位点的甲基化水平。【结果】HepG2细胞高表达AFP,AFP基因启动子非甲基化程度较高;SMMC-7721细胞低表达AFP,AFP基因启动子部分甲基化;正常细胞不表达AFP,AFP基因启动子甲基化程度很高;位于AFP全基因组序列-2494bp,-2431bp处的两个CG位点有可能作为肝癌的检测位点。【结论】AFP基因启动子甲基化程度与基因表达水平存在负相关,AFP基因沉默与其启动子甲基化有关,AFP基因启动子低甲基化可能是AFP高表达的分子机理。     

p73基因DNA甲基化与儿童急性白血病的关系

目的探讨p73基因DNA甲基化在儿童急性白血病发病中的作用。方法选取142例(年龄<15岁)初发急性白血病儿童作为病例组,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)112例,急性髓性白血病(AML)30例;以接受健康体检或就诊的性别、年龄匹配的123儿童(排除血液系统疾病和肿瘤性疾病)作为对照组。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)分析病例组与对照组儿童p73基因的甲基化状态。随机选取p73基因DNA甲基化片段与非甲基化片段样本各1例进行PCR产物序列分析。结果病例组p73基因DNA甲基化发生率(7.7%)显著高于对照组(0.8%),差异有统计学意义(P<0.05);病例组和对照组p73基因缺失率分别为6.3%和4.1%,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例组中ALL患儿的p73基因DNA甲基化发生率为8.9%,显著高于对照组(P<0.01)。随机选取的2个样本的测序结果与MSP结果一致。结论 p73基因DNA甲基化可能在儿童急性白血病尤其是ALL的发病中发挥重要作用。     

乳头状甲状腺癌TSHR基因转录表达和启动子区甲基化研究

目的观察抑癌基因促甲状腺激素受体(TSHR)在乳头状甲状腺癌(PTC组)中的表达,分析其启动子甲基化与肿瘤发生的关系。方法选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤(对照组,包括20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)患者,对两组患者手术获取的标本提取RNA后,反转录为cDNA,进行PCR检测TSHR基因的表达情况;运用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述组织中TSHR基因启动子区甲基化的情况。结果PTC组患者中有34例(68%)TSHR基因启动子发生甲基化,16例(32%)TSHR基因mRNA表达缺失;对照组患者中有7例(21.9%)TSHR基因启动子发生甲基化,4例(12.5%)TSHR基因mRNA表达缺失。PTC组织TSHR基因启动子甲基化率及TSHR基因mRNA表达缺失率均显著高于对照组(χ2值分别为16.61和4.02,P<0.05)。34例发生了TSHR基因启动子甲基化的PTC患者中,有14例(41.2%)TSHR mRNA表达缺失;16例未发生甲基化的PTC患者中,2例(12.5%)发生了mRNA表达缺失,二者mRNA表达缺失率差异有统计学意义(χ2=4.11,P<0.05)。TSHR基因mRNA在...     

肺癌中细胞凋亡水平和p73基因的转录表达的研究

目的：通过观察肺癌癌组织,对应癌旁组织和远癌肺组织中细胞凋亡及p73基因转录表达水平的变化,探讨细胞凋亡及P73基因转录表达水平与肺癌发生,发展的关系。方法：采用TUNEL及RT－PCR技术检测32例非小细胞肺癌癌组织,癌旁组织和7例肺良性病变组织,以及对应正常肺组织细胞凋亡和P73 mRNA的表达水平,并结合临床病理学资料进行统计学分析,结果：（1）肺癌组织中的凋亡指数明显高于癌旁肺组织和远癌肺组织（P＜0．01）,细胞凋亡水平与肺癌组织学类型,分化程度和P－TNM分期无明显关系（P＞0．05）;（2）肺癌组织中p73 mRNA表达水平和表达率明显高于癌旁肺组织,远癌肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）;（3）组织中凋亡指数的升高和P73基因转录表达水平的增加呈显著的正相关（P＜0．01）。结论：肺癌组织中存在细胞凋亡水平的升高和P73基因的过度转录表达。     

p27kip1和 p16INK4A 基因在鼻咽癌组织中的甲基化表达及意义

目的探讨 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化在鼻咽癌早期诊断和治疗中的作用.方法采用甲基化特异性PCR 方法对54例鼻咽癌组织(观察组)和20例正常鼻咽上皮组织(对照组)的 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化状态进行检测及对比分析.结果观察组患者 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化检出率分别为62.96%(34/54)和46.30%(25/54),两者同时甲基化19例,总检出率为74.1%(40/54);对照组均未检测到 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化;两组间差异有统计学意义(P<0.01).p27kip1和 p16INK4A 基因启动子甲基化与鼻咽癌患者年龄、性别、T 分期、N 分期、TNM 分期、病理类型等临床特征均无相关性(P >0.05).鼻咽癌患者 p27kip1基因甲基化与 p16INK4A 基因甲基化无明显相关关系(r=0.2507,P >0.05).结论鼻咽癌中 p27kip1基因甲基化可能是其基因表达调节的一种重要方式,p27kip1和 p16INK4A 基因甲基化具有肿瘤特异性,为鼻咽癌早期事件,有望成为早期分子生物学诊断的标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点.     

COX-2和p73蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的:探讨鼻咽癌组织中COX-2蛋白和p73蛋白的表达及其临床意义。方法:免疫组化SP法检测86例鼻咽癌组织中COX-2蛋白和p73蛋白的表达。结果:COX-2和p73在鼻咽癌中的阳性表达率为80.2%、60.5%;二者呈显著正相关(r=0.668,P<0.01)。结论:COX-2蛋白和p73蛋白的过度表达在鼻咽癌的发生进展过程中起重要作用。     

p53 p63及 p73在鼻咽癌患者组织中的表达及临床意义

目的：研究 P53、P63和 P73在鼻咽癌患者组织中的表达情况及临床意义。方法：选择2012年8月至2014年8月在我院确诊的鼻咽癌患者89例为观察组。并选择同期在我院接受治疗的鼻咽黏膜慢性炎症患者50例为对照组。对比两组组织中 P53、P63和 P73表达情况,并分析其不同临床病例特征的意义。结果：观察组 P53、P63和 P73阳性率为67．4％（60／89）、87．6％（78／89）以及53．0％（48／89）,均高于对照组的28．0％（14／50）、36．0％（18／50）、20．0％（10／50）,差异均具有统计学意义（P＜0．05）。不同性别、年龄中 p53、p63和 p73表达阳性率差异均无统计学意义。在具有颈淋巴转移的鼻咽癌患者中 p53、p63表达阳性率更高、在 TNM 分期为Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中 p63、p73表达阳性率更高以及病理类型为非角化癌鼻咽癌患者中 p63表达阳性率更高。差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：鼻咽癌患者组织中 P53、P63和 P73基因高表达,并且对临床分期、淋巴转移以及病理分型有显著的相关性。通过对 P53、P63和 P73在两种基因的监测,对鼻咽癌临床治疗和预后都有较好的指导作用。     

PTEN 与 p53在鼻咽癌中的表达及意义

目的：探讨PTEN基因缺失和p53基因突变在鼻咽癌中的表达及临床意义。方法：本实验以50例鼻咽癌标本作为病例组,以50例正常子鼻咽部组织作为对照组,应用免疫组织化学技术检测二组中PTEN和p53的表达,分析其不同临床病理特征中的意义及对预后的判断价值。结果：病例组PTEN阴性24例,对照组阴性0例,两组比较差异有显著的统计学意义（P＜0．01）,Ⅲ期和Ⅳ期以及有淋巴结转移的患者PTEN 阴性比例明显高于PTEN 阳性患者,差异有有显著的统计学意义（ P＜0．01）,病例组PTEN阳性38例,对照组阳性22例,两组比较差异有显著的统计学意义（P＜0．01）,有淋巴结转移的患者p53阳性比例明显高于p53阴性患者,差异有有显著的统计学意义（ P＜0．01）。结论：PTEN基因缺失和p53基因突变与鼻咽癌发生和发展密切相关。     

P73基因在鼻咽癌组织中表达的意义

目的:研究鼻咽癌组织中P73基因的表达及其临床意义。方法:运用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)及单链构象多态性分析技术(SSCP)检测P73mRNA的表达及P73基因的突变情况。运用免疫组化SABC技术检测P73蛋白的表达情况。结果:47例鼻咽癌组织中29例P73mRNA表达阳性,15例鼻咽粘膜慢性炎症组织中3例P73mRNA表达阳性。鼻咽癌组织中P73mRNA的表达与鼻咽粘膜慢性炎症组织相比,其差异具有显著性(P<0.05)。鼻咽癌组织中P73mRNA的表达与TNM分期存在密切关系,Ⅲ~Ⅳ期患者P73mRNA的阳性表达率较Ⅰ~Ⅱ期高(P<0.05)。P73基因在所检测的标本中未发现有突变。免疫组化技术检测证实鼻咽癌中存在P73蛋白的过表达(P<0.05)。结论:鼻咽癌组织中存在P73基因的过表达现象,P73基因的异常表达与鼻咽癌的发生发展存在一定的关系。     

限制性内切酶结合半巢式PCR法检测人肝癌P16抑癌基因启动子区甲基化研究

目的 建立甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法,研究原发性肝癌P16基因启动子区甲基化状态.方法 针对P16基因启动子区富含CpG的序列,设计3条引物,进行半巢式降落PCR扩增,检测原发性肝癌P16基因启动子区甲基化状态;并将P16基因启动子区340 bp片段克隆到pMD18-T载体,E.coli JM109扩增此质粒后经CpG甲基化酶M.Sss Ⅰ处理,再用Hpa Ⅱ酶切验证获得P16基因启动子区甲基化阳性的质粒P16Pm 并进行特异性和灵敏度实验.以此甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法检测40例人原发性肝癌和3例正常人肝组织DNA样品的P16基因启动子区甲基化状态.结果 所采用的Hpa Ⅱ酶切后半巢式PCR方法的特异性强,灵敏度达100 fg;对40例人原发性肝癌组织DNA样品P16基因的启动子区甲基化状态检测显示甲基化阳性率为30%(12/40),3例正常人肝组织均为阴性(0/3).结论 P16抑癌基因启动子区甲基化可能与肝癌发生发展有关.本实验方法简便、成本低廉,并有高度的特异性与灵敏度,在大规模检查中有实际应用价值.     

p73、p63及p53基因表达与喉鳞状细胞癌预后相关性分析

目的 探讨p73、p63和p53蛋白在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用与意义,为喉鳞癌的临床诊断及治疗提供新的思路,并为基因治疗的探索提供理论依据.方法 采用免疫组织化学(S-P法)检测p73、p63、p53蛋白在50例喉鳞状细胞癌、10例癌旁组织及10例正常喉黏膜中的表达,分析3种基因蛋白与喉鳞癌的临床病理特征之间的关系.结果 (1)p73表达与局部淋巴结转移成正相关(P<0.01).p73阳性表达的患者生存率相对较低(P<0.05).(2)p63表达与临床分期成负相关(P<0.05),与其他临床特征及生存率无关(P>0.05).(3)p53表达与各临床特征均无关,p53阳性表达的患者生存率相对较低(P<0.05).结论 (1)喉鳞状细胞癌中的p73过表达可能与局部淋巴结转移有关.p73阳性表达可能是患者预后不良的指标.(2)p63过表达的肿瘤恶性度可能相对较低,p63的表达与患者预后无直接联系.(3)p53阳性表达的患者预后较差.(4)提示p53家族可能和喉鳞状细胞癌形成的早期阶段有关.     

醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞P16基因甲基化及mRNA表达的影响及其意义

目的 研究醋酸棉酚（gossypol acetic acid,GAA）对体外培养的人腺样囊性癌ACC-M细胞P16基因甲基化及mRNA表达的影响,初步探讨醋酸棉酚的抗肿瘤作用机制.方法 （1）应用甲基化特异性PCR （MSP）检测ACC-M细胞在GAA作用48、72 h后P16基因甲基化状态的改变情况; （2）应用实时荧光定量法（RFQ-PCR）检测ACC-M细胞在GAA作用48、72 h后P16基因mRNA的表达变化.结果 （1） MSP检测结果显示：分别以19、10 μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72 h后,P16甲基化条带的平均灰度值低于对照组（P＜0.05）; （2） RFQ-PCR检测显示：分别以19、10 μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72 h后细胞中P16mRNA的表达水平高于对照组（P＜0.05）.结论 GAA可降低P16基因的甲基化水平,且能增强P16基因mRNA表达,这可能是GAA抗肿瘤作用的机制之一.     

p73和p53在肾癌中的表达及其意义

目的:探讨p73、p53蛋白在肾癌中的表达及其相关性及与肾癌临床分期、病理分级、预后之间的关系。方法:采用免疫组织化学技术对46例肾癌p73、p53表达进行对比研究。结果:p73、p53蛋白阳性表达与各病理类型、病理分级之间差异元显著性(P>0.05)。p73、p53蛋白阳性表达与临床分期之间差异有显著性(P<0.05)。p73与p53蛋白共同阳性表达与肾癌患者预后显著相关(P<0.05)。结论:p73和p53阳性表达与肾癌病理类型、病理分级无关而与临床分期有关。肾癌p73和p53共同阳性表达患者生存率明显低于其余患者,可能是判断肾癌预后的指标之一。     

人原发性肝癌中p16基因表达及CpG岛甲基化状态的研究

目的　进一步探讨人原发性肝癌中 p16基因 m RNA转录水平变化与其基因启动子区 Cp G岛甲基化的关系 ,及其在肝癌发生中的意义。方法　采用狭缝印迹杂交检测 2 0例人原发性肝癌及相应的癌旁、远癌组织及 2例正常人肝组织中 p16基因 m RNA表达水平 ,以甲基化特异性 PCR分析各组织中 p16基因启动子区 Cp G岛的甲基化状况 ,并进行统计分析。结果　 2 0例人原发性肝癌中 14例 (70 % ) p16 m RNA水平比远癌组织显著降低 ;13例 (6 5 % )显示 p16基因启动子区 Cp G岛甲基化 ,其中 84 .6 % (11例 )伴 p16 m RNA转录水平降低。结论　人原发性肝癌中存在高频率的 p16基因表达失活 ,其主要机制可能是启动子区 Cp G岛甲基化抑制了基因的转录 ,在人原发性肝癌的发生发展中有重要作用。其临床诊断和治疗意义有待进一步深入研究。