睾丸一氧化氮合酶与雄性生殖

一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）在NADPH（还原型辅酶Ⅱ）存在下催化L－精氨酸分解生成一氧化氮（nitric oxide,NO）。NOS有以下几种形式：神经型NOS（nNOS），诱导型NOS（iNOS），内皮型NOS（eNOS）。NO是目前研究最多的体内信息分子和效应分子，广泛存在于人体的心血管系统、神经系统、消化系统、免疫系统、生殖系统等。NOS和NO对生殖活动的作用已被广泛研究，如对睾丸微循环的调解，参与睾酮分泌，调解精子活动等。本文对睾丸NOS／NO与雄性哺乳动物生殖关系的研究进展作一概述。     

血流切应力调控内皮型一氧化氮合酶的分子机制

血流切应力（flowshear stress，rss）是生理或病理条件下调节血管内皮细胞产生一氧化氮的最重要的刺激因素。FSS对内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）的调控包括基因转录的调节、转录后的调节和翻译后的调节。eNOS基因转录以及转录后mRNA的稳定性能被FSS诱导加强。FSS通过游离钙离子浓度、磷酸化、eNOS相关蛋白以及细胞内易位等途径调节eNOS的催化活性。此外，FSS还能调控eNOS催化反应的辅助因子。     

一氧化氮合酶(NOS)在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的检测膀胱移行细胞癌中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的表达,并分析其表达与肿瘤病理特性的关系.方法采用免疫组织化学技术检测35例膀胱移行细胞癌标本、12例癌旁粘膜标本及8例正常膀胱粘膜标本中一氧化氮合酶三种亚型的表达情况.结果 35例肿瘤标本中nNOS、iNOS、eNOS阳性表达率分别为74.3%、85.7%、42.9%,膀胱移行细胞癌中iNOS表达较正常膀胱粘膜增高.但移行细胞癌、癌旁粘膜、正常粘膜三组间nNOS及eNOS表达无差别.nNOS、iNOS、eNOS表达与膀胱移行细胞癌分期分级可能无相关性.结论 iNOS在膀胱移行细胞癌中表达增高,可能参与膀胱移行细胞癌的发生发展.     

一氧化氮与脓毒性休克的关系

在脓毒性休克中,巨噬细胞和血管平滑肌细胞等细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达上调,使血管内皮源性舒张因子即一氧化氮(nitric oxide,NO)生成增多,引起血管过度扩张、微循环淤血、血管平滑肌对缩血管物质的反应性降低、心肌功能抑制等,导致严重的...     

精索内动静脉高位结扎iNOS的表达与睾丸生精细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨精索内动静脉高位结扎术后，诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase．iNOS）的表达与生精细胞增殖和凋亡的关系。方法：免疫组化结合计算机图像分析系统检测iNOS阳性细胞光密度值；免疫组化方法检测并计算PCNA增殖指数（PCNA-Labeling index，PI）；原位末端标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-endlabeling method，TUNEL）检测生精细胞凋亡指数（apoptosis index，AI）。分析iNOS的表达与增殖、凋亡的相关性。结果：iNOS在术后3-15d表达增强，第7d呈强阳性表达。结扎组生精细胞PCNA增殖指数（PI）明显低于对照组（P〈0．01），凋亡细胞指数（AI）明显高于对照组（P〈0．01）。结论：精索内动静脉高位结扎，iNOS的表达与生精细胞PCNA增殖指数呈负相关，与生精细胞凋亡指数呈正相关。iNOS基因表达增强是生精细胞增殖减少和凋亡增加的重要原因。     

一氧化氮合酶在新生鼠肠损伤中的作用

目的建立新生鼠肠损伤模型,探讨不同类型一氧化氮合酶在其发生发展中的作用.方法新生鼠随机分为对照组8只,实验组每一时相点各8只.将E coli O55:B5脂多糖5mg/kg注入新生鼠胃内,分别于注入后3h、6h、12h、24h处死动物,分离胃肠道.取部分回肠末端组织固定,包埋切片,常规HE染色,光镜下观察其组织学改变,进行损伤评分.其余回肠组织用于测定原生型一氧化氮合酶(constitutive nitric oxide synthase, cNOS)和诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)活性,并分别与组织学评分进行相关性分析.结果实验组3h、6h、12h、24h损伤评分分别为(1.54±0.87)、(1.79±0.75)、(1.92±0.43)、(2.29±0.60),均明显高于对照组(0.08±0.15)(P<0.05); 6h、24hcNOS活性分别为(34.28±7.34)、(22.96±2.93) nmol/gprot/min,显著低于对照组(47.59±14.55) nmol/gprot/min (P<0.05).6h iNOS活性(6.73±2.40) nmol/gprot/min,显著低于对照组(10.27±3.36) nmol/gprot/min(P<0.05).实验组24h内回肠组织cNOS活性与其平均损伤程度呈显著负相关(P<0.001);iNOS活性与损伤程度无显著相关性(P>0.05).结论 cNOS和iNOS在新生鼠肠损伤中作用不同,因此治疗新生儿坏死性小肠结肠炎时应慎重选择NOS抑制剂.     

内皮型一氧化氮合酶基因G894T突变与中国人冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关研究

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,e NOS）基因第7外显子G894T点突变与中国人冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）发病之间的关系。方法 应用聚合酶链反应技术，限制性内切酶分析和病例－对照方法，检测了108名中国汉族正常人，106例冠心病患者的eNOS基因G894T点突变频率。比较各组间的基因型频率与等位基因频率。结果 （1）中国汉族正常人eNOS基因G894T突变GG，GT，TT基因型频率分布为0.9095,0.0883和0.0021;G,T等位基因频率分别为0．9537和0．0463。（2）冠心病及其心肌梗塞亚组eNOS基因GT＋TT型频率分别为0．2219和0．2387，与GG型相比，均显著高于正常人（P＜0．05；冠心病组及心肌梗塞亚组T等位基因频率分别为0．1179和0．1275，均极显著高于正常人（P＜0．01。（3）冠状动脉造影确诊的冠心病患者eNOS基因G894T突变频率在单支，双支和多支病变组之间差异均无显著性（P＞0．05）。结论 eNOS基因G894T突变可能是中国人冠心病遗传易感性的基因标志之一。     

一氧化氮与缺血性脑血管疾病

在脑缺血性损伤过程中,一氧化氮(n itric oxide,NO)发挥着复杂的作用,多途径参与生理和其病理过程。NO在脑缺血过程中起着保护与损伤双重作用,其对脑组织的损伤或保护取决于脑缺血的不同时期和一氧化氮合酶(n itric oxide synthase,NOS)的同工酶类型等因素。脑缺血早期内皮细胞型一氧化氮合酶(endothelial NOS,eNOS)催化生成的NO对脑缺血有防护作用,而在脑缺血缺氧的大部分时期由诱生型一氧化氮合酶(induc ib leNOS,iNOS)和神经元型一氧化氮合酶(neuronal NOS,nNOS)催化生成的一氧化氮对脑缺血则具有损伤作用。     

内源性一氧化氮在急性高原病中的研究进展

1一氧化氮(nitric oxide,NO)与内源性一氧化氮(endogenous NO,eNO) NO是具有调节血管张力、血流等众多生物学作用的脂溶性气体信号分子,eNO是由L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)经过体内一氧化氮合酶[nitric oxide synthase,NOS;主要有神经源型(neuronal NOS,nNOS)、诱导型(inducible NOS,iNOS)和内皮源型(endothelial NOS,eNOS)3种]催化合成的,广泛存在于全身组织[1].NO通过一些生物分子和细胞间相互作用参与机体的保护、调节及逆转等生理过程[2].近年来的研究发现NO在调节血管张力、抑制炎症以及抗动脉粥样硬化中发挥关键作用[1-2].     

氨基胍缓解糖尿病大鼠主动脉内皮损伤

糖尿病大血管病变是糖尿病严重慢性并发症之一,其病理基础是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)。血管内皮损伤被认为是AS的始动和关键环节。氨基胍(aminoguani-dine,AG)对糖尿病主动脉内皮的保护作用,是否通过抑制诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS),进     

罗格列酮对改善糖尿病大鼠心肌微血管内皮细胞功能的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠心肌微血管内皮细胞功能的影响。方法腹腔注射小剂量链脲佐菌素结合高能量饲料制备2型糖尿病大鼠模型，随机分为未治疗组与治疗组：罗格列酮4mg／（kg·d）。16周后定量测定血管内皮损伤标志物：可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）、可溶性血栓调节蛋白（sTM）、血管性血友病因子（VWF）和一氧化氮（NO）的血浆浓度。分光光度法及免疫组化法分别测定心肌组织内NO浓度、NO合酶（NOS）的活性及内皮型NO合酶（cNOS）在微血管内皮细胞的表达。结果罗格列酮治疗组血糖及血浆中sEPCR、sTM、vWF显著低于未治疗组，但高于非糖尿病对照组。与未治疗组比较，罗格列酮治疗组心肌组织中NO、结构型NOS（cNOS）含量增高，eNOS阳性反应产物量增多，而诱导型NOS（iNOS）含量降低。结论罗格列酮可以降低糖尿病大鼠血糖，减轻内皮细胞损伤与改善心肌微血管内皮细胞功能，有助于减少糖尿病时心肌微血管病的发生与发展。     

Isosorbide dinitrate improves the efficacy of bone mesenchymal stem cell transplantation via endothelial nitric oxide synthase-dependent mechanism

This study investigated the effect of treatment wientry isosorbide dinitrate (Isoket) on bone mesenchymal stem cell (BMSC) transplantation in a rat model of myocardial infarction (MI) and its possible mechanism. Sprague-Dawley (SD) rats were randomized to a sham operation group, MI control group, BMSC transplantation group, and Isoket-BMSCs transplantation group. Isosorbide dinitrate (Isoket, 5?μg/m) was administered by intraperitoneal injection (10?ml/kg) at 0, 12, and 24?hours following ischemia/reperfusion induction of MI models. Left ventricular function, myocardial infarct size (MIS), the survival of engrafted BMSCs, and expression of vascular endothelial growentry factor (VEGF), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and endothelial nitric oxide synthase (eNOS) proteins were detected 2?weeks post-transplantation. The results showed isosorbide dinitrate attenuated cardiac dysfunction, increased the survival of engrafted cells in the ischemic heart and promoted iNOS, eNOS, and VEGF protein expression. It is suggested that isosorbide dinitrate enhances mesenchymal stem cell therapy for MI via an eNOS-dependent mechanism.     

PDTC可改变TNF-α诱导的eNOS基因表达下调

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中内皮型一氧化氮合酶基因（eNOS）表达的作用以及PDTC对此作用的改变。方法将培养的内皮细胞分为3组：1组为无任何处理的HUVEC,2组为子痫前期（PE）患者血清作用的HUVEC,3组为用正常晚孕妇女血清作用的HUVEC。用逆转录-聚合酶链反应检测三组细胞中eNOS mRNA的表达。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测PE患者和正常孕妇血清中TNF-α含量。用1ng/ml、3ng/ml、5ng/ml 3种浓度的TNF-α分别作用三组细胞6h,以及用浓度为3ng/ml的TNF-α作用三组细胞分别长达6h、12h、24h,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测eNOS mRNA的表达;将二硫代氨基甲酸吡硌烷（PDTC,5mmol/ml）与TNF-α（3ng/ml）同时作用以及TNF-α（3ng/ml）单独作用三组细胞6h,RT-PCR检测eNOS基因mRNA的表达。结果三组细胞中都有eNOS表达,2组表达量显著低于1组和3组（P〈0.01）。ELISA结果显示,PE患者血清中TNF-α含量显著高于正常晚孕妇女（P〈0.01）。TNF-α作用HUVEC细胞后eNOS表达显著低表达,并成时间和剂量依赖关系（P〈0.01）。PDTC和TNF-α同时作用的HUVEC和TNF-α单独作用的HUVEC相比,其eNOS表达显著增高（P〈0.01）。结论可下调eNOS在HUVEC中的表达,PDTC可改变TNF-α诱导的eNOSN表达的下调。     

Caveolin-1在高盐饮食损伤糖尿病大鼠血管中的作用

目的:观察1型糖尿病(DM)大鼠给予高盐饮食后内皮细胞功能障碍的可能机制。方法:SD大鼠(150~180 g)60只,腹腔注射链唑霉素(70 mg/kg),3 d后空腹血糖≥16.7 mmol/L为1型DM大鼠。正常大鼠和DM大鼠分别给予正常饮食和高盐饮食(8%Na Cl)6周。检测肠系膜动脉舒张功能,Western blot技术检测血管中Akt、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、caveolin-1(Cav-1)等蛋白的水平。结果:高盐饮食DM大鼠收缩压显著高于DM组,其肠系膜动脉乙酰胆碱和胰岛素的舒张作用显著下降(P0.01)。Akt、p-e NOS和NO水平均显著低于DM组(P0.01),Cav-1显著增高(P0.01)。结论:1型糖尿病大鼠高盐饮食血管功能障碍可能与抑制内皮细胞Akt激活及增强Cav-1表达导致的e NOS活性下降有关。     

参麦注射液对大鼠急性心肌缺血及eNOS mRNA表达的影响

目的：探讨参麦注射液(SMI)预处理可能对 大鼠急性心肌缺血及心肌内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达的影响。方法:大鼠随机分为对照组、模型组、处理组1和处理组2，应用异丙肾上腺素建立大鼠心肌 缺血模型,以心电图ST段抬高值作为心肌缺血指标，硝酸还原酶法测定血清和心肌的NO^-₂/NO^-₃，RT-PCR检测心肌eNOS mRNA表达。结果：模型组各时点的心 电图ST段均显著高于对照组，缺血20 min时达高峰，血清和心肌NO^-₂/NO^-₃含量及 心肌eNOS mRNA表达均低于对照组；两个处理组于缺血20、30、40 min时的心电图ST段抬高 幅度均显著低于模型组，血清和心肌NO^-₂/NO^-₃含量均显著高于模型组，心肌eNOS mRNA表达强于模型组；处理组1和处理组2比较，心电图ST段抬高幅度、血清和心肌的NO^-₂/NO^-₃含量及心肌eNOS mRNA表达差异均无显著。结论：参麦注 射液可能是通过促进心肌组织eNOS mRNA表达、增强eNOS活性而提高NO水平，达到抗心肌缺 血的作用。     

己烯雌酚对幼年香猪睾丸与附睾雌激素受体和一氧化氮合酶表达和分布的影响

目的 探讨己烯雌酚（DES）对幼年香猪睾丸和附睾中雌激素受体（ERs）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响,及DES对诱导雄性动物生精异常的作用机制。 方法 将20只20～25日龄幼年雄性香猪分成４组,对照组只注射生理盐水,实验组经腹腔每天注射DES(实验1组：0.03mg/kg;实验2组：0.3mg/kg;实验3组：3mg/kg),连续注射9d。最后１次注射24h后手术取出左侧睾丸和附睾组织经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,常规制备5μm石蜡切片,采用免疫组织化学SP法检测睾丸和附睾组织中ERα、ERβ和eNOS的表达。 结果 ERα只在输出小管上皮细胞胞核中表达;ERβ在输出小管上皮细胞、间质细胞及附睾管上皮细胞胞核中均有表达,在睾丸生精小管细胞胞质中也有少量表达。DES能够使ERα在输出小管中的表达率显著下降（P<0.05）。随着DES用量的增多,ERβ在输出小管和附睾管中的表达率显著升高（P<0.05）,当DES用量为3mg/kg时ERβ在输出小管和附睾管中的表达率明显高于用量0.03mg/kg和0.3mg/kg（P<0.05）。但0.03mg/kg用量的DES却使睾丸生精小管中ERβ的表达率显著性下降（P<0.05）,并在0.3mg/kg和3mg/kg用量时在睾丸生精小管中未能检测到ERβ受体的表达。eNOS在睾丸生精小管细胞和输出小管上皮细胞中都有表达,DES能促进eNOS在睾丸生精小管细胞中表达（P<0.05）而降低其在输出小管细胞中表达（P<0.05）。结论 DES明显影响ERs和eNOS在睾丸和附睾中的表达。     

复方倍他米松注射液联合消痛贴膏治疗膝骨关节炎的临床疗效观察

目的探讨复方倍他米松注射液联合消痛贴膏治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法就诊患者随机分为两组,对照组予以消痛贴膏贴敷于关节间隙,每日1贴,连续用药4周为1疗程;治疗组同时予以复方倍他米松注射液1mL加2％利多卡因注射液2mL作关节腔内封闭治疗,每2周1次,2次为1疗程;于治疗前、疗程结束后分别进行症状分级量化评分;停药随访半年后观察复发情况,评估疗效。结果疗程结束后,治疗组有效率为86．87％,对照组为70．49％,X^2=4．89（P〈0．05）;随访半年后,治疗组复发率为15．79％,对照组为43．33％,X^2=6．32（P〈0．05）。结论复方倍他米松注射液联合消痛贴膏治疗膝骨关节炎起效迅速,疗效维持时间长,疗效满意,提高了患者的生活质量。     

腺苷对肺缺血再灌注大鼠NOS活性的影响

目的:观察腺苷(Adenosine)对大鼠肺缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用及一氧化碳合酶(NOS)活性的影响。方法:将60只清洁级SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,开胸但不阻断肺门)、I/R组(开胸后左肺门阻断60min+开放再灌注120min)、Adenosine预处理组,每组20只。A-denosine预处理组术前30min开始由股静脉持续静脉滴入Adenosine(0.1mg/kg/min)。实验结束前测定各组平均肺动脉压(mPAP)、动脉血氧分压(PaO2)、肺湿/干重比(W/D)及血清和肺组织匀浆中内皮型一氧化碳合酶(eNOS)、诱导型一氧化碳合酶(iNOS)活性。结果:I/R组mPAP、W/D均高于Sham组(P<0.01),PaO2低于Sham组(P<0.01)。与I/R组比较,Adenosine预处理组mPAP、W/D明显降低,PaO2显著增高。与Sham组比较,I/R组血清及肺组织匀浆中eNOS活性明显降低,iNOS活性显著增加(P<0.01);Adenosine预处理能明显升高I/R大鼠eNOS活性,降低iNOS活性(与I/R组比较,P<0.01)。结论:Adenosine可通过减轻再灌注后肺水肿、降低肺动脉压及改善肺组织氧合功能,从而有效实现对I/R肺组织的保护,其保护作用可能与NOS不同亚型的表达变化有关。     

从氧自由基、一氧化氮探讨四逆汤抗急性失血性休克的肝脏机制

目的:从氧自由基、一氧化氮探讨四逆汤抗急性失血性休克的肝脏机制。方法:复制急性失血性休克大鼠模型, 分为假手术对照组;单纯休克模型组;休克+生理盐水复苏组;休克+四逆注射液复苏组。四逆注射液(浓度1000g生药/L), 剂量0.1mL/200g大鼠。用生理盐水或四逆注射液治疗3h后处死动物并取组织。测定各组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平, 一氧化氮(NO)水平。采用免疫组化染色法, 观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肝细胞中的变化特点。RT-PCR观测肝细胞iNOS和内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的变化。结果:模型组在休克1h后SOD活性明显低于对照组(P＜0.01)、MDA水平明显高于对照组(P＜0.01)。四逆汤组复苏3h后肝组织SOD明显高于生理盐水组(P＜0.01)、MDA低于生理盐水组(P＜0.01)、NO水平明显高于生理盐水组(P＜0.01)。生理盐水组iNOS在肝细胞中染色阳性单位明显高于四逆汤组(P＜0.05)。生理盐水组促进iNOSmRNA的表达。四逆汤组eNOSmRNA的表达增强。结论:四逆汤通过清除氧自由基, 升高NO, 改善肝组织微循环, 减少诱导型iNOS表达的各种因素, 理论上减轻了NO与氧自由基生成的ONOO的细胞毒作用和血管的低反应性, 并对肝脏起到保护作用。