肠道致病菌的鉴定方法

目的：建立一种以粪便为标本的细菌学检验方法。方法：取粪便标本直接涂片做革兰染色，镜检观察标本中细菌数量、种类及比例；对粪便标本进行菌群培养，分离病原菌，并与镜检结果进行对照。结果：因菌群失调导致的腹泻，直接镜检表现为细菌数量和种类普遍减少，或某一类细菌增多或减少，或呈单一种类细菌；由某种病原菌引起的腹泻，直接涂片多数只能见到革兰阴性杆菌，要进一步做细菌培养和分离。结论：粪便细菌菌谱分析能直接或间接为临床提供腹泻患者的肠道微生态资料，尤其能准确地提示因各种原因造成菌群失调而导致的腹泻，为临床诊断和制定治疗方案提供快捷、科学的依据。     

粪便中细菌微生物检验的鉴定方法

目的：建立一种以粪便为标本的细菌学检验方法。方法：取粪便标本直接涂片做革兰染色，镜检观察标本中细菌数量、种类及比例。并进行显徽照相；对粪便标本进行菌群培养，分离病原菌，并与镜检结果进行对照；结果：因菌群失诃导致的腹泻。直接镜检表现为细菌数量和种类普遍减少，或某一类细菌增多或减少，或呈单一种类细菌；由某种病原菌引起的腹泻，直接涂片多数只能见到革兰阴性杆菌，且细菌数量少或极少!一般均与培养结果相符。结论粪便细菌菌谱分析能直接或间接为临床提供腹泻患者的肠道微生态资料。尤其能准确地提示因各种原因造成菌群失调而导致的，腹泻。为临床诊断和制定治疗方案提供快捷、科学的依据。     

用16S rRNA基因克隆文库研究腹泻粪便中菌群分布

目的 建立16S rRNA基因克隆文库分析菌群的方法,用于临床标本菌群分布的检测.方法 临床标本直接提取核酸,用16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增、纯化、连接、克隆和测序,建立16s rRNA基因克隆文库,序列与数据库进行比对分析.结果 通过16S rRNA基因克隆文库分析,腹泻标本中检出4种细菌,脆弱拟杆菌为绝对优势菌,占91%;腹泻恢复后的粪便标本中菌群呈多样性,检出12种确定种属的细菌,其中脆弱拟杆菌占14%.结论 16S rRNA基因克隆文库是一种较好地研究粪便标本菌群的方法,可直接进行粪便标本的菌群分析和研究各种细菌在腹泻中的作用.     

089ELISA法直接检测粪便标本中的E.ColiO_(157)

[英]／BrendaL…／／JClinMicrobiol.-1995,33(1).222～224E.ColiO_(157):H_7可引起出血性结肠炎并与溶血性尿毒症有关。直接从粪便标本中快速检测E.COlO_(157):H_7可迅速确诊并避免不适当的抗生素治疗。E.COliO_(157)：H_7的常用测定方法是经粪便培养后分离细菌，然后再作生化反应和免疫学方法鉴定，一般需要72h报告。本文介绍一种快速ELISA法直接检测粪便中E.COliO_(157)，并用标准培养方法加以对照。材料和方法：标本取自161例患者，总数为185份粪便标本。30份标本当天作ELISA试验，其余15份标本保存于──20C作ELISA法…     

素食人群与非素食人群肠道菌群分布对比分析

目的通过比较素食人群与非素食人群肠道菌群分布,探讨饮食习惯与人体肠道菌群分布之间的关系。方法将50例素食者纳入研究组,50例非素食者纳入对照组,收集所有研究对象粪便标本,测定粪便标本pH值,使用经典的细菌分离培养和鉴定方法,比较两组研究对象粪便标本的细菌总数及肠杆菌、肠球菌、拟杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌的数量。结果研究组粪便标本pH值低于对照组粪便标本pH值,差异有统计学意义(P<0.05)。两组细菌总数差异无统计学意义(P>0.05),研究组的双歧杆菌与乳酸杆菌数量明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论从肠道益生菌数量的角度来看,非素食饮食更有利于健康,素食人群可通过服用微生态活菌制剂或适量增加蛋奶制品的摄入来增加肠道益生菌的数量,以增强人体的抗病能力。     

感染性腹泻中致病性弧菌的调查

为了调查我市感染性腹泻中致病性弧菌的分布情况,作者在2001～2003年夏秋季节,对从医院采集的329份腹泻病人粪便标本进行了弧菌科细菌的分离培养。结果报告如下。1材料与方法1.1标本来源采集烟台市区综合医院门诊腹泻病人的粪便,直接接种1%氯化钠碱性蛋白胨水增菌液,送实验室分     

腹泻患儿粪便中真菌和细菌分离率的比较

腹泻患儿粪便中真菌和细菌分离率的比较刘海梅李珍大（南京区军南京总医院检验科，南京２１０００２）关键词真菌细菌腹泻粪便１９９０年１月～１９９３年１２月，对腹泻患儿的６５４份粪便进行了真菌和细菌培养，现将结果报告如下。１材料与方法１．１标本来源儿科门诊...     

住院腹泻患者粪便培养产超广谱β-内酰胺酶菌株观察

产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌是医院感染的主要致病菌之一,但是对粪便标本产ESBLs菌株报道不多．我们对111例住院腹泻患者的粪便标本进行细菌培养、鉴定、药物敏感试验(简称药敏)及ESBLs检测,以了解粪便标本产ESBLs菌株的检出率。     

实时荧光定量PCR法与常规细菌鉴定法检测肠道致病菌的对比研究

目的探讨常规细菌鉴定法及实时荧光定量PCR法检测肠道致病菌的价值。方法就诊的3330例腹泻患者的粪便标本,同时进行常规细菌鉴定法及实时荧光定量PCR法检测,观察肠道致病菌中沙门菌及志贺菌检测阳性率。结果 3330例粪便标本中,常规细菌鉴定法检测沙门菌阳性率为3.90%(130/3330),志贺菌阳性率为1.65%(55/3330);实时荧光定量PCR法检测沙门菌阳性率为4.11%(55/3330),志贺菌阳性率为1.80%(60/3330),两种方法检测沙门菌及志贺菌阳性率比较,差异无统计学意义(P均0.05)。所有实时荧光定量PCR法检测阳性标本均经常规细菌鉴定确诊,阳性率为100%。结论实时荧光定量PCR法可直接从粪便中提取DNA,检测肠道致病菌,具有简便、快速等优点,大大缩短了检出时间,为临床早期诊断和治疗提供了依据,值得临床推广。     

艾滋病患者容易忽视的几种肠道细菌感染

收集艾滋病患者粪便标本40例和正常人群粪便标本40例。提取细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR测定双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌的数量。结果滋病患者粪便的双歧杆菌、乳酸杆菌的数量明显少于正常人群的。艾滋病患者粪便中大肠杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌的数量比正常人群粪便中数量明显增加。差异具有统计学意义。艾滋病患者肠道肠道细菌微生态发生变化,艾滋病患者肠道肠道微生态已经发生紊乱。     

粪便标本中细菌DNA提取方法的比较

目的比较粪便标本中细菌DNA三种提取方法的优缺点。方法采用传统法,溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)提取法和试剂盒法提取粪便标本中细菌DNA,比较其作为模板用于PCR扩增细菌16SrDNA的优缺点。结果三种方法制备的细菌DNA均能成功用作后续PCR扩增的模板。传统法经济可靠,但提取的DNA量及纯度均较低。利用CTAB法进行提取可有效去除粪便中的色素和多糖成分,但操作要求较高,难以标准化。试剂盒法提取方便,操作简单,质量稳定,易标准化,且价格适中,是临床值得推荐的提取方法。结论三种方法各具优缺点,应根据实验室条件和实验要求进行选择。     

其他检验与临床

粪便常规检查临床价值的探讨;用16S rRNA基因克隆文库研究腹泻粪便中菌群分布;以UF-100尿分析仪的WBC和细菌定量结果建立阈值筛选尿细菌培养标本;急性肾小球肾炎患儿单核细胞趋化蛋白-1的表达及意义;     

弧菌科细菌分离鉴定

弧菌科细菌分离鉴定吴秋梅，谭力，高小平，崔娴维，杨书宁，李宝强我们对１９９３～１９９４年夏秋季我院肠道门诊５９４份急性感染性腹泻患者粪便标本进行了弧菌科细菌（３个菌属）的分离鉴定。报道如下：一、材料和方法１．标本来源：随机抽样５９４份本院肠道门诊急性...     

一株福氏志贺菌Y变种的分离鉴定

福氏志贺菌各型在临床腹泻患者粪便培养中常见，但Ｙ变种菌株并不多见。我们从一腹泻患儿的粪便中分离出一株福氏志贺菌Ｙ变种。一、病例　男４岁，因腹泻就诊，于１９９８年４月入院。粪便呈脓血性，伴腹痛及发热。粪便镜检见脓细胞稀少，红细胞少许。血常规检查：ＷＢＣ：７４×１０９／Ｌ。作粪便培养以协助诊疗，同时应用头孢噻肟钠和红霉素，五日后好转出院。二、细菌分离鉴定　１粪便标本接种ＳＳ和麦康凯平板，３５℃、２４ｈ培养，在ＳＳ和麦康凯平板上生长的菌落呈无色透明、光滑、湿润、细小、凸起。分别挑取单个菌落接种２支…     

毛细管电泳法快速检测金黄色葡萄球菌

目的建立一种利用毛细管电泳（CE）从混合细菌标本中快速、选择性检测金黄色葡萄球菌的方法,以适应快速病原学诊断的要求。方法在电泳缓冲液中加入抗金黄色葡萄球菌特异性抗体包被的乳胶粒子,改变金黄色葡萄球菌的电迁移性质,达到目的菌与其他细菌分离的目的。结果该方法能在20min内从大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌的混合物中分离出金黄色葡萄球菌;通过对加入金黄色葡萄球菌的健康志愿受试者粪便标本不同时间流出组分的培养证实了方法的可靠性。结论抗体包被胶乳结合CE检测方法是一种快速的金黄色葡萄球菌检测技术,有进一步开发利用的价值。     

毛细管电泳法快速检测金黄色葡萄球菌

目的建立一种利用毛细管电泳(CE)从混合细菌标本中快速、选择性检测金黄色葡萄球菌的方法,以适应快速病原学诊断的要求。方法在电泳缓冲液中加入抗金黄色葡萄球菌特异性抗体包被的乳胶粒子,改变金黄色葡萄球菌的电迁移性质,达到目的菌与其他细菌分离的目的。结果该方法能在20 m in内从大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌的混合物中分离出金黄色葡萄球菌;通过对加入金黄色葡萄球菌的健康志愿受试者粪便标本不同时间流出组分的培养证实了方法的可靠性。结论抗体包被胶乳结合CE检测方法是一种快速的金黄色葡萄球菌检测技术,有进一步开发利用的价值。     

形态学检查方法的标准化及其在细菌鉴定中的作用

形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察，对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。痰标本涂片中的白细胞数和鳞状上皮细胞数决定了这个标本是否做培养。同时，菌体形态及是否在白细胞内等信息为痰标本培养出的微生物是否为致病菌提供了重要线索。各种标本的抗酸染色是分枝杆菌感染诊断的重要经典方法。引起急性腹泻细菌从致病机理上分为两类，产毒素性细菌和组织浸袭性细菌。粪便标本直接染色镜检找到大量多核白细胞，提示组织侵袭性致病菌感染，如果肠道菌群紊乱腹泻革兰染色结果可以提示是酵母菌或者是葡萄球菌引起的，水样粪便标本暗视野观察穿梭运动，如果抑动试验阳性，对于霍乱快速诊断有很重要价值。如果脑脊液标本墨汁涂片见有厚荚膜圆形酵母样菌体，给新型隐球菌脑膜炎提供了快速的诊断方法。阴道分泌物涂片，革兰染色对于阴道炎和细菌性阴道病的诊断及其重要，现已有标准方法通过革兰染色涂片诊断细菌性阴道病。     

慢性腹泻病人粪便中肺炎克雷伯氏菌的分离及药敏分析

肺炎克雷伯氏菌是人体感染最常见的条件致病菌之一,由其引起的多种疾病已得到临床的广泛关注。但有关其与慢性腹泻关系的报道不多。我们在1996－1997年的细菌检测中,发现从87例慢性腹泻病人粪便中共分离出占优势的肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种16株,现报告如下。1材料与方法1．1标本来源87例粪便标本均采自本院门诊与住院的慢性腹泻患者。1．2细菌的分离与鉴定取送检粪便直接接种SS培养基、伊红美兰培养基,37℃培养24小时,挑取可疑菌落转种双糖管。革兰氏染色阴性,氧化酶阴性,分解葡萄糖,产酸产气,不产硫化氢,按肠杆菌科编码和《中华医…     

一起疑似产气荚膜梭菌食物中毒事件的实验室检测分析

  目的   通过一起疑似产气荚膜梭菌食物中毒事件的检测分析,为类似食物中毒事件提供诊断依据。  方法   采用多重实时荧光定量PCR方法和基因芯片检验方法快速筛查识别病原菌,根据初筛结果进行常规的细菌分离培养、生化鉴定和质谱分析,对分离到的菌株采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术进行分子分型,采用BioNumerics 8.0软件对菌株的PFGE指纹图谱进行聚类分析。  结果   多重实时荧光定量PCR方法提示4份粪便标本中均有产气荚膜梭菌和基因芯片检验方法提示1份鸡肝食品中有产气荚膜梭菌,并通过常规的细菌分离培养、生化鉴定和质谱分析从2份剩余鸡肝和4份腹泻患者粪便中分离到产气荚膜梭菌,其中只有3份粪便标本中产气荚膜梭菌计数＞1.0×106 CFU/g,但通过PFGE聚类分析从6份标本中检出的菌株图谱完全一致。  结论  通过从食物和腹泻标本中检出PFGE图谱相似度100%的产气荚膜梭菌,说明此次食物中毒可能是由被产气荚膜梭菌污染的鸡肝导致的,今后要提高由厌氧菌引起的食物中毒的认识水平,防止漏检。     

住院腹泻患者粪便培养产超广谱β-内酰胺酶菌株观察

产超广谱β 内酰胺酶 (ESBLs)细菌是医院感染的主要致病菌之一,但是对粪便标本产ESBLs菌株报道不多,我们对 111例住院腹泻患者的粪便标本进行细菌培养、鉴定、药物敏感试验(简称药敏)及ESBLs检测,以了解粪便标本产ESBLs菌株的检出率。一、材料和方法1.标本来源　2003年 7月~2004年 6月我院住院腹泻患者送检的粪便标本共 111例,分别接种SS平板和中国兰平板,按常规方法分离培养。2.仪器和鉴定卡、药敏卡　VITEK 32全自动微生物鉴定 药敏系统;GNI+鉴定卡、GNS 120药敏卡均为法国生物梅里埃公司产品。3.方法　菌株鉴定及药敏试…