梓醇对2型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用

目的探讨梓醇对2型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用及作用机制。方法 8周龄雄性Wistar大鼠,随机分为正常组10只,实验组90只。实验组以高脂高糖饮食饲养8周,之后腹腔注射链脲佐菌素(STZ,15mg/kg),以空腹血糖≥16.7mmol/L作为2型糖尿病成模标准,将符合2型糖尿病成模标准的60只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组、梓醇高剂量组。正常组和模型组灌胃蒸馏水[5mL/(kg·d)],二甲双胍组灌胃二甲双胍[90mg/(kg·d)],梓醇低、中、高剂量组分别灌胃梓醇2.5mg/(kg·d)、5mg/(kg·d)、10mg/(kg·d)。各组大鼠干预12周后,测定空腹血糖、空腹血清胰岛素(FINS),并计算胰岛素分泌指数(HOMA-β),HE染色检测大鼠胰岛细胞形态。结果与模型组比较,各药物干预组大鼠胰岛素分泌指数均有所增加;与模型组比较,HE染色结果显示二甲双胍组,梓醇低、中、高剂量组胰岛细胞结构相对完整。结论梓醇可保护胰岛细胞,促进胰岛素分泌。     

丝胶对糖尿病大鼠胰岛细胞神经肽Y表达的影响

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞神经肽Y(NPY)表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠胰岛细胞NPY的表达。结果 NPY蛋白阳性产物位于胰岛α细胞细胞质,呈棕黄色颗粒状。糖尿病模型组大鼠胰岛α细胞NPY蛋白的表达明显高于正常对照组大鼠(P<0.01);丝胶治疗组大鼠胰岛α细胞NPY蛋白的表达明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过降低神经肽Y的表达保护糖尿病时胰岛细胞损伤。     

糖尿病大鼠胰岛β细胞Fox01表达对细胞凋亡的影响

以高糖高脂饲料及链脲佐菌素诱导SD大鼠建立2型糖尿病模型,结果发现叉头转录因子(Fox01)[细胞核内(15.00+1.15 vs 6.45±0.62)%,P<0.05]、半胱天冬蛋白酶3(caspase-3)[(23.73±1.48vs 6.30±2.20)%,P<0.01]在糖尿病大鼠胰岛β细胞的表达和β细胞凋亡率[(22.29±1.84 vs 6.25±2.42)%,P<0.01]均高于正常大鼠;并且Fox01(核内)与caspase-3高表达的胰岛细胞正是发生凋亡的胰岛细胞.因此,Fox01可能参与2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的调控.     

梓醇对糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制探讨

探讨梓醇对糖尿病大鼠肾脏是否具有保护作用及其可能机制.RT-PCR、免疫组化和Western印迹法检测糖尿病大鼠肾脏组织中胰岛素样生长因子I和蛋白激酶B表达,结果发现两者mRNA及蛋白表达均上调,梓醇可下调其表达并减轻肾脏损伤.     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白表达的作用

目的观察丝胶对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只大鼠。链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白的表达情况。结果胰岛素蛋白免疫阳性产物位于胰岛β细胞胞质,呈棕黄色颗粒状。糖尿病模型组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.392±0.017),明显低于正常对照组大鼠(0.729±0.017)(P<0.01);丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.619±0.039),明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛素蛋白的表达保护糖尿病时胰岛β细胞损伤。     

STZ诱导糖尿病大鼠胰岛细胞MHC-1表达的研究

目的探讨链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病的作用机制。方法将20只健康大鼠分为模型组及对照组各10只。模型组采用一次性注射STZ60mg／kg制作1型糖尿病模型,对照组不做任何处理。成模后3d两组各处死5只大鼠,提取胰腺组织做MHC-1免疫组织化学染色及HE染色;成模14d天处死剩余5只大鼠,同上处理。光镜下观察成模后3d及14d胰腺组织MHC-1表达,计数每张切片胰岛细胞表达MHC-1阳性细胞数。结果两组成模后3d及14d胰岛细胞MHC-1表达均为阳性,无异常表达;MHC-1阳性细胞数比较无显著差异。结论大剂量STZ诱导1犁糖尿病模型过程中对MHC—I表达无明显影响。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的影响

目的小剂量链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠罗格列酮治疗8周,胰岛β细胞形态学及功能等明显改善,说明罗格列酮不仅改善胰岛素抵抗,也保护了胰岛β细胞功能。     

罗格列酮对糖尿病大鼠残存胰岛表达肝细胞生长因子的影响

目的 观察罗格列酮对实验性1型糖尿病大鼠残存胰岛表达肝细胞生长因子(HGF)的影响. 方法 SD大鼠随机分为3组,正常对照(Con)组24只,糖尿病(DM)组24只,罗格列酮干预(RGZ)组24只.于应用罗格列酮后5个时间段分别测定各组FBG、FIns.免疫组化法检测胰岛中Ins及HGF的表达,并进行形态学量化分析. 结果 与DM组相比,RGZ组经罗格列酮干预后2周,血清胰岛素水平逐渐上升;血糖水平逐渐下降;胰腺相对β细胞量明显增多;胰岛HGF表达水平提高(P均<0.05).RGZ组胰岛HGF表达水平与胰腺相对β细胞量(r=0.766,P<0.05)及血清胰岛素水平(r=0.740,P<0.05)呈正相关. 结论 罗格列酮能增加实验性1型糖尿病SD大鼠β细胞数量,其机制可能与上调胰岛HGF的表达有关.     

梓醇对糖尿病及其并发症作用的研究进展

梓醇是从地黄根部分离出来的一种环烯醚萜类化合物,具有降血糖、抗氧化、抗炎等药理作用。本研究对其在糖尿病其并发症的作用、机制、疗效研究进展作一综述。对梓醇功能作进一步研究,可为糖尿病及其并发症的治疗提供新的选择。     

参芪复方对2型糖尿病GK大鼠胰岛β细胞凋亡及Caspase-表达的影响

目的观察参芪复方对自发性2型糖尿病（T2DM）动物GK大鼠胰岛8细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法选取4月龄SPF级雄性GK大鼠50只，随机分为模型组、盐酸二甲双胍组、参芪复方低、高剂量组并另设正常对照组。连续灌药4w后，TUNEL染色观察各组胰岛β细胞凋亡指数（AI），并采用免疫组化染色，Mias-2000图像分析系统观察各组大鼠胰岛β细胞Caspase-3阳性物质积分光密度。结果模型及低剂量组β细胞AI较正常组显著增高（P〈0．01），各治疗组β细胞AI显著低于模型组（P〈0．01），高剂量组及二甲双胍组β细胞AI显著低于低剂量组（P〈0．01）且与正常组比较无统计学意义（P〉0．05）；模型及低剂量组胰岛Caspase-3积分光密度显著高于正常组（P〈0．01），高剂量组、二甲双胍组Caspase-3积分光密度显著低于模型组和低剂量组（P〈0．01），且与正常组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论参芪复方能够抑制GK大鼠胰岛β细胞凋亡，机制可能与其抑制β细胞Caspase-3表达有关。     

西格列汀对2型糖尿病大鼠Nrf2表达调控及胰岛β细胞功能的影响

目的研究西格列汀对2型糖尿病大鼠Nrf2表达调控及胰岛β细胞功能的影响。方法雄性Wistar大鼠80只适应性饲养1 w后,采用随机数字表选取20只胰岛β细胞功能指数作为正常对照组,其余60只构建2型糖尿病模型,造模成功后根据随机数字表分为模型组和治疗组,每组20只。模型组灌胃0.9%生理盐水,治疗组灌胃0.9%生理盐水配制的西格列汀,给药剂量为100 mg·kg~(-1)·d~(-1),灌胃周期为20 w。对各组大鼠胰岛β细胞功能,Nrf2表达水平进行分析。结果干预20 w后,治疗组血糖水平显著低于模型组(P<0.05),血清胰岛素水平显著高于模型组(P<0.05)。治疗组(HBCI)、胰岛β细胞分泌功能指数(FBCI)显著均高于模型组(P<0.05)。治疗组大鼠血清和胰腺丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α显著低于模型组(P<0.05)。治疗组大鼠血清和胰腺总超氧化物歧化酶(T-SOD)均显著高于模型组(P<0.05)。治疗组大鼠Nrf2表达水平显著高于模型组(P<0.05)。结论西格列汀可显著上调2型糖尿病大鼠Nrf2表达水平,改善其胰岛β细胞功能,对2型糖尿病具有确切的临床疗效。     

增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响

目的观察不同月龄大鼠的糖代谢指标变化,了解在基础和糖刺激下增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响。方法以4月龄（青年组,n=15）、14月龄（中年组,n=15）和24月龄（老年组,n=15）健康雄性Wistar大鼠为研究对象,进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素释放试验（IRT）,比较三组间基础血糖和胰岛素水平的差异,计算糖负荷后胰岛素增值与血糖增值的比值（ΔI10/ΔG10）,120min葡萄糖、胰岛素曲线下面积（AUCg,AUCi）,葡萄糖与胰岛素曲线下面积比值（AUCi/g）,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）等,以分析各组间胰岛功能的差异。结果随着月龄的增长,空腹血糖有升高的趋势,但未达到统计学差异。OGTT后老年组大鼠表现为血糖达峰时间延长,血糖峰值增加,OGTT2h血糖及AUCg增加,即老年组大鼠出现糖耐量异常状态,主要表现为餐后高血糖。青年组、中年组和老年组大鼠空腹胰岛素水平分别为（0.59±0.14）、（1.60±0.15）、（2.37±0.04）μg/L（两两相比均P〈0.01）;IRT中,老年组大鼠胰岛素达峰时间延迟,ΔI10/ΔG10降低,AUCi增加（P〈0.05）。使用稳态模型评估,HOMA-β在青年、中年和老年组中呈递增趋势,但未达到统计学差异;而HOMA-IR在青年、中年和老年组分别为3.09±0.80、8.34±0.72、13.14±1.59（两两相比均P〈0.01）。结论正常老龄大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,但由于胰岛素分泌的早期时相受损,仍然出现糖负荷后血糖增高状态。     

甲状腺素对大鼠胰岛β细胞功能的影响

目的探讨甲状腺素（T4）对大鼠胰岛β细胞功能的影响及作用机制。方法选取60只健康SD大鼠,随机分为对照组[生理盐水10 m l/（kg.d）]、低剂量组[甲状腺素（T4）100μg/（kg.d）]和高剂量组[T4600μg/（kg.d）]各20只。采用左旋甲状腺素灌胃20 d后,分别检测各组血清胰岛素（INS）、空腹血糖（FPG）及胰腺细胞凋亡相关因子bax、bc l-2蛋白表达。结果与低剂量组、对照组比较,高剂量组血清INS降低,FPG升高（P均〈0.05）;与对照组比较,高剂量、低剂量组bax蛋白表达升高（P〈0.05）;三组bc l-2蛋白表达无统计学差异（P〉0.05）。结论大剂量T4有促进大鼠胰岛β细胞凋亡的作用。     

通络方药对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用

目的研究通络方药（TLR）对链脲佐菌素（STZ）所致大鼠胰岛β细胞损伤的保护作用。方法建立糖尿病大鼠模型前8天开始给予TLR直至实验结束。实验结束时测血糖、体重;取胰腺测定胰腺匀浆中丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平,透射电镜检测胰岛口细胞。结果与正常组相比,STZ组胰腺内MDA水平明显升高（P〈0．05）,GSH—Px活性明显降低（P〈0．05）,血糖明显升高。TLR预处理明显降低STZ组大鼠的血糖水平,同时降低大鼠胰腺匀浆内MDA含量（P〈0．05）,升高GSH—Px活性（P〈0．05）。透射电镜显示TLR预处理使胰岛β细胞的损伤明显减轻。结论TLR通过减轻胰腺内氧化应激水平保护胰岛β细胞完整并有效防止STZ诱导的糖尿病发生。     

六味地黄丸对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用

[目的]观察六味地黄丸对糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用。[方法]将自发性2型糖尿病模型鼠——OLETF鼠分为阳性对照组、六味地黄丸组;非糖尿病对照鼠——LETO鼠为阴性对照组。给药32周后,对各组大鼠观察胰岛,检测胰岛β细胞、胰岛中核因子-κB（NF-κB）的表达。[结果]与阴性对照组比较,阳性对照组、六味地黄丸组大鼠均血糖升高（P〈0．05）、胰岛口细胞减少（P〈0．05）、NF-κB表达增加（P〈0．05）;与阳性对照组比较,六味地黄丸组大鼠胰岛β细胞增加（P〈0．05）,NF-κB表达减少（P〈0．05）。[结论]六味地黄丸可能是通过抑制胰岛中NF-κB的表达保护口细胞。     

参芪复方对2型糖尿病GK大鼠胰岛β细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的 观察参芪复方对自发性2型糖尿病(T2DM)动物GK大鼠胰岛β细胞凋亡的影响并探讨其可能机制.方法 选取4月龄SPF级雄性GK大鼠50只,随机分为模型组、盐酸二甲双胍组、参芪复方低、高剂量组并另设正常对照组.连续灌药4 w后,TUNEL染色观察各组胰岛β细胞凋亡指数(AI),并采用免疫组化染色,Mias-2000图像分析系统观察各组大鼠胰岛β细胞Caspase-3阳性物质积分光密度.结果 模型及低剂量组β细胞AI较正常组显著增高(P＜0.01),各治疗组β细胞AI显著低于模型组(P＜0.01),高剂量组及二甲双胍组β细胞AI显著低于低剂量组(P＜0.01)且与正常组比较无统计学意义(P＞0.05);模型及低剂量组胰岛Caspase-3积分光密度显著高于正常组(P＜0.01),高剂量组、二甲双胍组Caspase-3积分光密度显著低于模型组和低剂量组(P＜0.01),且与正常组比较无统计学意义(P＞0.05).结论 参芪复方能够抑制GK大鼠胰岛β细胞凋亡,机制可能与其抑制β细胞Caspase-3表达有关.     

猪胰岛与大鼠睾丸支持细胞共同移植对糖尿病大鼠胰岛生长的影响

目的　研究胰岛异种移植的方法。　方法　用SD大鼠睾丸支持细胞 (Sertoli细胞 )与新生猪胰岛样细胞团 (ICCs)共同培养后进行异种移植。　结果　对照组胰岛细胞存活率及存活时间分别为 (63 .6%± 4.2 %和 3 .4d± 1.2d) ,较共同培养组 (87.2 %± 2 .7%和 13 .5d± 4.6d)显著为低(P <0 .0 1) ;对照组大部分胰岛细胞超微结构破坏 ,而共同培养组胰岛细胞超微结构基本正常 ;对照组胰岛素 2 4h累积分泌量和对葡萄糖刺激的反应性下降 ,共同培养组胰岛素分泌量始终处于高水平状态 (P <0 .0 1)。　结论　猪胰岛细胞与Sertoli细胞共同培养移植可以促进胰岛生长 ,明显延长胰岛移植物的存活时间     

胃旁路术对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的研究胃旁路术(RYGB)对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响。方法取10周龄雄性SD大鼠60只,随机分成对照组,2型糖尿病控制大鼠手术组(RYGB)和假手术组(S-RYGB)各20只。2型糖尿病控制大鼠以高脂高糖食物喂养并腹腔小剂量链脲佐菌霉素(STZ)注射以诱导大鼠成为2型糖尿病模型。注射STZ 3 d后测大鼠空腹血糖≥16.7 mmol/L为成功糖尿病模型。测量术前和术后1、2、3、4 w各实验组动物的体重和空腹血糖,术后4 w胰腺组织取材。原位末端标记法(TUNEL)检测胰岛细胞凋亡;应用免疫组化检测β-catenin和caspase-12蛋白的表达。结果术后4 w RYGB组空腹血糖下降到(3.9±0.7)mmol/L,体重下降至(238.0±16.6)g,明显低于同时间点S-RYGB组(P0.05)。术后4 w RYGB组胰岛凋亡率为(4.01±0.39)%,与S-RYGB组(17.94±0.53)%相比较,差异显著(P0.05)。术后4 w RYGB组大鼠胰岛细胞β-catenin和caspase-12蛋白阳性率表达与S-RYGB组比较差异(P0.05)。结论 RYGB能显著降低糖尿病大鼠血糖可能是通过促进胰岛β细胞内β-catenin蛋白增加,激活wnt通路,减少caspase-12蛋白表达从而抑制β细胞凋亡来实现。     

强化胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的 观察强化胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响.方法 将36只Wistar大鼠随机分为正常对照组和高脂组,正常对照组给予基础饲料喂养,高脂组给予脂肪乳灌胃+基础饲料喂养10 d,然后给高脂组大鼠腹腔注射链脲佐菌素,3 d后再将高脂组大鼠随机分为2个亚组,即糖尿病对照组和糖尿病胰岛素治疗组,治疗4 w.脂肪乳灌胃第10天、注射STZ第3天和治疗4 w末测大鼠各项指标;实验结束时采用TUNEL技术和流式细胞术检测胰岛β细胞的凋亡.结果 大鼠在强化胰岛素治疗4 w末,分别采用TUNEL和流式细胞术检测凋亡,与糖尿病对照组比较,糖尿病胰岛素治疗组胰岛β细胞凋亡率明显下降,分别为(0.73±0.02)% vs (0.19±0.04)%和(13.50±0.12)% vs (3.56±0.71)%,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 强化胰岛素治疗可减轻2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡.     

骨化三醇对糖尿病大鼠肾脏白细胞介素17表达的影响

目的 探讨骨化三醇对糖尿病大鼠肾脏白细胞介素17（IL-17）表达的影响.方法 8周龄健康雄性SD大鼠45只,链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组、低剂量骨化三醇治疗组（低剂量组,0.03μg/kg）、高剂量骨化三醇治疗组（高剂量组,0.10 μg/kg）,每组各15只.选取健康同龄大鼠10只作为正常对照组.治疗12周后,检测体重、血糖、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、血清IL-17、24 h尿白蛋白定量（UAlb）.处死动物后计算肾重指数（KI）;免疫组化法检测肾皮质内IL-17、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子-β1（TGF-βl）的表达;光镜下观察肾脏组织形态学变化.多组间比较采用单因素方差分析.结果 （1）糖尿病组大鼠BUN、Scr、UAlb均较对照组显著上升[分别为（16.1±1.6）比（6.9±1.8） mmol/L,（75±11）比（46±9）μmol/L,（1.14±0.13）比（0.45 ±0.ll）mg/24 h,t=12.627、7.534、12.762,均P＜0.05],而经骨化三醇干预后上述生化指标显著改善[低剂量组分别为（12.1±1.5） mmol/L、（58±8） μmol/L、（0.86±0.10） mg/24 h].（2）糖尿病组大鼠血清IL-17、肾皮质内IL-17水平（吸光度）均较正常对照组显著上升[分别为（510±47）比（133±22） ng/L,（164±9）比（82±4）,t=17.244、20.757,均P＜0.05],而骨化三醇干预后显著改善,且高剂量组[（253±27） ng/L、119±5]较低剂量组[（324±35） ng/L、132±5]改善更显著,差异均有统计学意义（t=3.379、3.615,均P＜0.05）.（3）光镜下显示正常对照组肾脏结构未见异常,糖尿病组肾脏系膜细胞增生及系膜基质增多,并可见近端肾小管上皮细胞空泡样变性,骨化三醇组肾脏病理较糖尿病组明显改善.结论 骨化三醇对糖尿病肾脏有保护作用,其机制可能是通过上调糖尿病大鼠血清及肾皮质内IL-17的表达.