HPLC测定钩藤药材中钩藤碱、异钩藤碱的含量

目的：用HPLC法建立钩藤药材中钩藤碱（Rhynchophylline）、异钩藤碱（Isorhynchophylline）的含量测定方法,用于钩藤药材的质量控制。方法：色谱柱为Diamonsil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇：水=65：35（V/V,含0.01mmol/L三乙胺,冰醋酸调PH7.0）为流动相,流速为1.0 ml.min-1,在245nm检测波长下,测定钩藤药材中钩藤碱、异钩藤碱含量。结果：钩藤碱及异钩藤碱的回归方程分别为Y=1.0E＋6x-21142和Y=1.1E＋6x-13566,线性范围分别为0.254～1.524μg和0.216～1.296μg,相关系数分别0.9999和0.9999。结论：本法正确、简便、快速,对于控制和评价钩藤药材的品质有重要意义。     

钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用分析

目的:探讨钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用。方法:采取水煎液以及甲醇提取液的方式对钩藤中的钩藤碱及异钩藤碱进行提取,并使用高效液相色谱系统分别对其提取的含量进行测定。结果:在2.5~80μg/m L的范围内钩藤碱的线性关系良好,此时的回归方程为Y=76.717 0X-0.072 7(r=0.999 8),RSD8.7%;在2.0~80μg/m L的范围内异钩藤碱的线性关系良好,此时的回归方程为Y=87.472 9X-0.366 6(r=0.999 7),RSD7.3%。甲醇提取液的方式所提取钩藤碱和异钩藤碱的含量高于水煎液的方式,并且使用二十倍质量的甲醇量,24 h的冷侵时间以及60 min的超声时间最合适。结论:使用甲醇进行提取在用于钩藤中钩藤碱及异钩藤碱中作用优异,对其质量的控制性好,重复性高,操作方法简单,可提高预后,值得在临床上应用推广。     

反相HPLC法测定大鼠组织中异钩藤碱含量

目的建立测定大鼠组织中异钩藤碱的方法。方法应用甲醇沉淀蛋白,然后氮吹仪吹干甲醇复溶后用反相HPLC法直接测定。以WatersTM RP18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,前置保护柱为WondasilC18(4.0mm×10mm,5μm),甲醇-水(70∶30)含0.03%的三乙胺为流动相,流速为0.8mL/min,检测波长为254nm。卡马西平做内标。结果异钩藤碱在大鼠组织中的含量标准曲线方程为:Y=48.558X+0.2076(n=6),r=0.9996,在0.16～16.0μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.66%,RSD=1.56%。结论该方法灵敏、快速、简便,专一性和重复性好。     

高效液相色谱法测定安神养血口服液中钩藤碱和异钩藤碱含量

目的:建立安神养血口服液的含量测定方法.方法:运用HPLC测定安神养血口服液中钩藤碱和异钩藤碱含量.色谱柱:依利特Kromasil C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相:甲醇-水(55: 45)(含0.01mol/L三乙胺,用冰醋酸调pH值至7.5);柱温:25℃;检测波长:254nm; 流速:1.0mL/min.结果:钩藤碱的平均回收率为99.04%,异钩藤碱为98.75%.钩藤碱在进样量0.12～1.20μg 范围内线性关系良好(r1=0.9999),异钩藤碱在进样量0.08～0.80μg 范围内线性关系良好(r2=0.9993).结论:该方法简便、快速、准确,可用于安神养血口服液的质量控制.     

超高效液相色谱法测定钩藤中的钩藤碱和异钩藤碱的含量

目的:用超高效液相色谱法同时测定钩藤中的钩藤碱和异钩藤碱的含量。方法:以ACQUITYUPLCR BEH130C18(2.1mm×100mm,1.7μm)为色谱柱,乙腈-0.01mol/L三乙胺水溶液(45:55,冰醋酸调pH7.0)为流动相,检测波长为245nm,流速0.2mL/min。结果:钩藤碱在0.052-0.309μg具有良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为98.3%,RSD为0.88%,异钩藤碱在0.060μg-0.363μg具有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为97.7%,RSD为1.29%。结论:该方法简便快捷、精密度高、结果准确。可用于钩藤的质量控制。     

HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量

目的：研究建立了黔产钩藤药材中钩藤碱与异钩藤碱的含量测定方法。方法：采用HPLC法：KromosilC18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相以甲醇一0．2％氨水溶液（65：35）,流速：1．0mL·min-1,柱温：35℃;进样器温度：5℃;检测波长为245nm,结果：异钩藤碱和钩藤碱分别在0．13064～1．17576μg（r=1．0000）和0．09744～0．87696μg（r=-0．9998）范围内呈良好的线性关系。异钩藤碱平均回收率（n=6）为98．88％,RSD为O．38％：钩藤碱平均回收率（n=6）为98．28％,RSD为0．72％;结论：本检测方法快速、简便、灵敏、准确、可靠,重复性好,为黔产钩藤药材的质量控制提供了科学依据。     

HPLC法测定不同产地钩藤中异钩藤碱和钩藤碱的含量

目的：建立高效液相色谱测定不同产地的钧藤中异钩藤碱和钩藤碱的方法。方法：采用Diamonsil—C18色谱柱,流动相为甲醇：0．2％氨水（65：35）,检测波长245nm。结果：线性范围0．08805—0．8805μg和0．04076-0．4076μg,相关系数为0．9996和0．9997,平均回收率异钩藤碱为97．03％,钩藤碱为98．95％,RSD分别为1．79％和2．55％。结论：高效液相色谱法可为钩藤质量控制标准的制定提供相应的依据。     

钩藤碱含量测定方法研究概述

钩藤碱是钩藤中的主要生物碱之一,主要作用于心血管系统和中枢神经系统,具有降低血压、扩张血管、减慢心率和抑制心肌收缩力等生物效应.为了更好地开发利用钩藤碱,对其进行质量控制,对近五年来学者采用的钩藤碱含量测定方法进行了综述.     

钩藤药材中异钩藤碱含量的超高效液相色谱和高效液相色谱法测定

目的 比较钩藤中异钩藤碱含量测定方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)方法进行转换并优化为超高效液相色谱(UPLC)方法.高效液相色谱方法色谱柱为Alltech prevail C18柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相:乙腈-水(含三乙胺,冰醋酸调pH 7.5),流速:1 ml·min-1,检测波长:246 nm,柱温:25℃.超高效液相色谱方法色谱柱为Waters ACQUITY UPLCTM T3 C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相:乙腈-水(含三乙胺,冰醋酸调pH 8.0),流速:0.6 ml·min-1,检测波长:246 nm,柱温:50℃.结果 两种方法所得含量测定结果一致.结论 超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定钩藤药材中异钩藤碱含量,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度.     

HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的方法学探讨

目的:探讨钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法.方法:采用RP-HPLC,对钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法学进行考察,同时采用HPLC-ESI-MS研究钩藤碱和异钩藤碱在加热过程中的化学成分转化情况.结果:钩藤碱在0.064～5.100 mg线性关系良好,精密度良好;当样品采用同流提取时,平均加样回收率87.51％～88.83％,提取回收率12.60％;当样品采用超声提取时,平均加样回收率99.48％ ～ 103.2％,提取回收率47.08％.异钩藤碱在0.064～5.110 mg线性关系良好,精密度良好;当样品采用回流提取时,平均加样回收率107.9％～113.9％,提取回收率40.00％,当样品采用超声提取时,平均加样回收率97.00％～99.59％,提取回收率51.03％.质谱分析结果表明回收率不合格的原因是钩藤碱在提取过程中大部分转化为异钩藤碱,有一小部分转化为未知成分;异钩藤碱在提取过程中转化为钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱及22-O-β-D-glucopyranosyl isocorynoxeinic acid4种成分.结论:HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱宜采用超声提取法,并应注意同收率问题.     

钩藤及其有效成分的药理研究进展

回顾分析近年来国内外对钩藤及其所含主要化学成分的药理研究进展，提示钩藤对心血管系统、中枢神经系统以及血液系统等多方面均有作用。     

酶解法辅助提取钩藤中钩藤碱的工艺优选

目的:优选酶解法辅助提取钩藤中钩藤碱的工艺条件,为该药材的资源利用提供参考。方法:采用HPLC测定钩藤碱含量,流动相甲醇-水(60∶40),检测波长254 nm。以钩藤碱提取率为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察加酶量、酶解温度、酶解时间、酶解p H对酶解提取工艺的影响。结果:最佳酶解提取工艺条件为纤维素酶用量1%,p H 4.5,酶解温度50℃,酶解时间2 h。钩藤碱提取率0.54%,较加热回流法提高了54.29%。结论:酶解法有利于提高钩藤碱的得率,优选的提取工艺稳定可行,适合推广于药材中生物碱类成分的提取。     

天麻钩藤复方提取物对Beagle犬血流动力学的影响

目的观察天麻钩藤复方提取物对开胸麻醉犬心、肾血流动力学的影响,初步探讨该方的降压机制。方法 Beagle犬麻醉开胸后,十二指肠单次给予天麻钩藤复方提取物3、12 g/kg,股动脉插管测定系统血压,心脏插管测定左室内压,四肢针状电极测定心电图,电磁流量计测定主动脉弓及肾动脉血流量,各种模拟信号经采集转换成数字信号存储在计算机中,采用专用软件测定相应的血流动力学参数。左颈总动脉插管取动脉血,右颈外静脉插心导管至冠状静脉窦取静脉血,测定心肌耗氧量,并计算肾动脉阻力和总外周阻力。结果单次给予天麻钩藤复方提取物3 g/kg后,各项血流动力学指标无明显变化;12 g/kg明显降低血压、肾动脉阻力及总外周阻力,其他血流动力学指标无明显变化;天麻钩藤复方提取物不影响心肌耗氧量。结论天麻钩藤复方提取物通过扩张肾动脉及外周血管起到降压作用。     

钩藤神经保护机制的研究进展

钩藤是中医传统常用要药,近年来研究发现其有显著的神经保护作用。钩藤中的有效成分可通过互作,多途径、多靶点发挥神经保护作用。在神经保护中,钩藤可通过抗氧化清除自由基,调节神经递质及其相关受体、调节炎症因子及相关通路、抗神经细胞凋亡、降低胞内Ca²⁺超载、改善神经退行性病变等途径发挥功效。该文就近年来钩藤的神经保护作用相关机制的研究作一简要综述。     

熄风通脑胶囊中钩藤的薄层色谱鉴别研究

目的：建立熄风通脑胶囊中主药钩藤的薄层色谱鉴别方法,为其制定质量控制提供实验依据。方法：按有关文献方法及改进法分别对熄风通脑胶囊中钩藤进行薄层色谱试验。结果：其中的方法四操作简便,色谱斑点清晰,分离效果好,而且阴性对照无干扰。结论：所建立的方法四具有可行性,专属性强,可作为定性鉴别熄风通脑胶囊中钩藤的方法。     

正交设计法对复方中钩藤碱水煮工艺的研究

采用正交设计法对钩藤复方中钩藤碱的水煮时间和工艺条件进行了优选研究,确定了合理可行的工艺条件,即：用碎钩藤、无须浸泡,水煮２次,共５０ｍｉｎ,共加水２５倍,在此工艺条件下,钩藤碱的提取率为３９．７１％。含量测定方法为薄层扫描法。     

中药钩藤不同药用部位异钩藤碱含量分析

目的：测定钩藤的不同药用部位中异钩藤碱的含量。方法应用高效液相色谱法(HPLC)测定8批不同产地钩藤的不同药用部位中异钩藤碱含量。采用Waters Symmetry C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.01 mol/L醋酸铵缓冲液（pH 8.0）（60∶40）,柱温25℃,进样量20μl,流速1.0 ml/min,检测波长246 nm。结果8批不同产地钩藤药材中均能检测出异钩藤碱,但产地间差异较大;不同药用部位中异钩藤碱的含量：主杆＞带钩茎枝＞无钩茎枝＞无茎枝钩＞叶。结论钩藤不同药用部位大部分含异钩藤碱成分,为扩展钩藤植物的药用部位提供试验依据。     

钩藤提取工艺研究

目的 筛选制定出确保钩藤制剂质量的提取工艺。方法 用薄层扫描法对钩藤在常规制剂中所用的水煮浓度法及７０％～７５％乙醇提取法提取的钩藤有效成分进行了定量比较。结果用７０％乙醇提取的钩藤有效成分含量明显高于水提液。结论 浓缩、干燥温度低于８１℃。     

天麻与钩藤配伍前后效应成分在SHR大鼠脑组织的分布

目的:建立SHR大鼠脑组织中天麻苷元的含量测定方法,考察天麻与钩藤配伍前后效应成分天麻苷元在脑组织中的分布情况。方法:采用HPLC测定脑组织中天麻苷元含量,流动相乙腈-0.03%磷酸溶液(7∶93),检测波长221 nm。检测天麻与钩藤配伍前后效应成分天麻苷元在脑组织中的分布情况。结果:大鼠血浆中天麻苷元的线性范围0.5~100 mg·L-1(R2=0.999 9),方法回收率>74.89%,准确度>98%。配伍前、后天麻苷元在大鼠脑组织的药代动力学参数Cmax分别为0.485,0.373μg·g-1,AUC依次为111.366,213.585μg·g-1·min。结论:该方法能准确、灵敏测定大鼠脑组织中天麻苷元含量。天麻与钩藤配伍对天麻苷元在SHR大鼠脑组织中分布具有先抑制后促进影响。