青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝小鼠肝组织NF-κB、TNF-α的影响

目的:观察非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝组织核因子-κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达及青蒿琥酯对其表达的影响。方法:高脂饮食12周构建NAFLD小鼠模型,正常组予普通饮食,模型构建成功后分为青蒿琥酯15mg/(kgod)、30mg/(kgod)、60mg/(kg·d)治疗组、阳性药物(多烯磷脂酰胆碱)80mg/(kg·d)对照组及模型对照组,治疗组及阳性药物对照组予腹腔注射药物干预,模型对照组和正常组予腹腔注射生理盐水对照,干预12周后,检测肝组织NF-κB、TNF-α表达和血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、空腹血糖(GLU)水平及肝脏病理学改变。结果::模型组与正常组比较,NF-κB、TNF-α、ALT、AST、TG、CHOL、GLU水平显著升高(P<0.05),肝脏病理学检查显示脂肪变性和炎症改变,相关分析提示NF-κB与TNF-α呈正相关(P<0.01),NF-κB、TNF-α与炎症程度呈正相关(P<0.05),TNF-α与脂肪变呈正相关(P<0.05);青蒿琥酯干预后,治疗组与模型组比较,NF-κB、TNF-α、ALT、AST、TG、CHOL、GLU水平显著下降,肝脏病理脂肪变、炎症坏死程度减轻,青蒿琥酯60mg/(kg.d)治疗组改善最显著。结论:在NAFLD小鼠模型肝组织NF-κB、TNF-α表达增高,且NF-κB、TNF-α与肝脏炎症呈正相关;青蒿琥酯可能通过下调NF-κB、TNF-α的表达,起到抗炎作用,从而改善肝脏组织病理学改变。     

五灵胶囊对脂多糖诱导枯否细胞内核转录因子-κB表达的作用

目的:通过体内、体外实验探讨五灵胶囊(WL)对免疫性肝脏炎症反应的作用机制。方法:制备卡介苗(BCG)+免疫佐剂+脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤模型,WL灌胃给药12d,处死小鼠分离血清并制备肝组织蛋白;予大鼠WL 10、6.25g/kg灌胃4d,腹主动脉取血并制备含药血清;另取SD大鼠分离原代肝细胞和原代枯否细胞(KCs);采用Transwell小室下层培养KCs,含药血清-KCs条件培养上清对小室上层肝细胞作用。酶法测定免疫性肝损伤小鼠血清AST、ALT及条件培养上清中AST、ALT和LDH-L活性。取KCs培养成单层并同步化24h,PDTC和WL分别干预KCs 24h,再加入60μg/L的LPS诱导12h,Real-time PCR检测LPS诱导KCs表达MCP-1、IL-1、TNF-αmRNA水平,Western Blot检测免疫性肝损伤肝组织中和体外培养KCs表达TNFRⅠ、NF-κBs亚蛋白及IκKβ、IκB。结果:WL明显降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性并抑制肝组织内活化NF-κB信号通路;含药血清Ⅰ、Ⅱ组明显抑制活化KCs分泌促炎因子损伤肝细胞,WL抑制LPS诱导KCs表达NF-κBs信号通路蛋白,下调MCP-1、IL-1、TNF-αmRNA表达。结论:WL治疗慢性肝病炎症反应的作用机制与下调活化NF-κBs信号通路蛋白,阻滞KCs释放过量促炎因子所致肝细胞损伤相关。     

益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠保护作用及细胞因子表达的影响

目的:研究益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其可能的药理学机制。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予不同浓度的益肝胶囊14 d后,取材检测肝脏指数和脾脏指数;生化法检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;HE染色观察肝组织病理学变化;ELISA法检测血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ水平。结果:益肝胶囊能明显降低肝损伤模型组小鼠肝指数和脾指数,降低血清中AST和ALT活性,减少肝组织中炎细胞浸润和肝细胞坏死,抑制IL-6、TNF-α和IFN-γ表达。结论:益肝胶囊可能通过抑制炎性细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ水平,从而对Con A所致免疫性肝损伤小鼠起到保护作用。     

白首乌C-21甾体总苷对肝损伤小鼠氧化应激通路的影响

通过观察白首乌C-21甾体总苷对肝损伤小鼠氧化应激的影响来探讨白首乌的保肝作用机制。雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组及白首乌总苷高剂量(8 g·kg~(-1))和低剂量(4 g·kg~(-1))组,用四氯化碳(CCl4)复制小鼠急性肝损伤模型,采集各组动物血液和肝组织标本,测定血清中ALT和AST水平,HE染色观察肝脏病理学改变,比色法检测肝组织SOD活性和MDA含量,Western blot法检测肝脏NF-κB p65,p-IκBα,i NOS和COX-2的表达,RT-PCR法测定肝组织中TNF-α和IL-6 mRNA的表达。与模型组比较,白首乌C-21甾体总苷可明显降低模型动物血清中ALT,AST水平(P0. 01),同时显著升高肝匀浆中SOD活性(P0. 01),并降低MDA含量(P0. 01); HE染色结果显示白首乌2个剂量组均不同程度地减轻肝细胞水肿、变性; Western blot和RT-PCR法结果显示,白首乌总苷组p-IκBα,i NOS,NF-κB p65和COX-2蛋白表达显著下降(P0. 01),TNF-α和IL-6 mRNA表达明显下调(P0. 05)。白首乌C-21甾体总苷对CCl4诱导的小鼠肝损伤有较好的预防作用,通过减轻氧化应激,从而发挥保肝作用,其机制与提高细胞SOD活性、降低MDA水平,抑制NF-κB通路激活,下调i NOS和COX-2蛋白表达有关。     

金银花总黄酮对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察金银花总黄酮(Lonicera gaponica total flavone,LJTF)对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用BCG 2.5mg静脉注射致敏小鼠,d10给于LPS 7.5μg静脉攻击造成小鼠免疫性肝损伤模型,ig给于LJTF(100、200、400mg/kg)连续10天。分光光度法测定血清ALT、AST浓度,肝匀浆中MDA、SOD的含量;免疫组化研究肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核因子(NF)-κB p65的表达。结果:免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST较正常组明显升高,肝脏中MDA明显升高而SOD较正常组明显降低。LJTF ig能降低免疫性肝损伤小鼠血清中升高的ALT、AST含量,降低肝匀浆中MDA水平,同时升高其低下的SOD水平,LJTF也能降低免疫性肝损伤小鼠TNF-α和NF-κB p65在肝脏中的强烈表达。结论:LJTF对免疫性肝损伤小鼠有保护作用,机制与减少自由基的产生、抑制细胞膜脂质过氧化、减少炎症介质的释放有关。     

刺五加多糖调控炎性因子对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

探讨刺五加多糖(ASPs)对刀豆蛋白A(Con A)造成的小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用和机制。将BALB/c小鼠随机分成7组,对照组,模型组,ASPs低、中、高剂量组(36. 25,72. 5,145 mg·kg~(-1)),联苯双酯滴丸(阳性药,200 mg·kg~(-1))组,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,NF-κB抑制剂,200 mg·kg~(-1))组。ASPs,联苯双酯滴丸组每天灌胃给药1次,连续7 d;对照组、模型组和PDTC组每天以10 m L·kg~(-1)生理盐水灌胃给药。于末次灌胃后,PDTC组灌胃PDTC,再于0. 5 h后,除对照组外均尾静脉注射20 mg·kg~(-1)Con A诱导肝损伤。8 h后处死动物取材,对肝脏组织进行组织病理学检查,试剂盒法检测肝组织匀浆中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH-PX)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用Western blot法检测肝组织中TNF-α,ICAM-1,i NOS和NF-κB蛋白的表达水平,探讨刺五加多糖对治疗免疫性肝损伤对肝的保护作用和机制。与模型组比较,炎性细胞浸润减轻,肝细胞胞浆疏松肿胀、核固缩浓染得以改善,ASPs显著降低肝组织匀浆中MDA,NO,IL-1β,TNF-α的含量;升高GSH-PX和SOD的含量;降低肝组织中TNF-α,ICAM-1,i NOS和NF-κB蛋白水平表达。ASPs降低炎性细胞因子和黏附因子的活性、减少炎性细胞因子的分泌和表达,对免疫性肝损伤有一定保护作用。     

丹参多酚酸盐对刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察丹参多酚酸盐(Salvianolate,SVL)对刀豆蛋白A(Con A)诱导BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,观察丹参多酚酸盐对模型小鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α,肝组织匀浆SOD、MDA水平以及肝组织病理学改变的影响。结果:丹参多酚酸盐可显著降低小鼠血清中ALT和AST水平,减少炎症因子IL-6、TNF-α释放,同时能降低肝匀浆MDA含量,升高SOD活性,改善肝组织病理性损伤。结论:丹参多酚酸盐对刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤具有保护作用,其机制可能与减少炎症因子IL-6、TNF-α的释放有关。     

波棱素对ConA诱导的免疫性肝损伤的影响

目的:探讨波棱瓜子有效成分波棱素抗Con A诱导的免疫性肝损伤作用机制。方法:一次性给予动物尾静脉注射刀豆求(球)蛋白(20mg/kg)造成小鼠免疫性肝损伤模型,取肝脏组织,考察药物对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS1)和核因子-κB(NF-κB)的影响。结果:HE显示肝细胞出现肿胀与坏死,部分出现细胞变形,说明Con A诱导肝损伤模型造模成功。波棱素给药后发现,与模型组对比,20mg/kg剂量组NF-κB、TNF-α、IFN-γ、iNOS和IL-4酶活性有不同程度的下降;HE显示各组肝细胞不同程度的损伤,部分肝细胞坏死,与模型组比较波棱素各组细胞破坏程度较轻,肝窦之间的炎症因子变少。结论:波棱素可降低Con A引起的肝损伤的酶活力,保护肝脏组织免受侵害,其机制可能与提高自身的抗氧化能力和抑制TNF-α/NF-κB信号通路,减少炎症反应有关。     

衢枳壳提取物对CCl_4诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症及NF-κB/NLRP3炎性体通路的影响

研究衢枳壳提取物(QAF)对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及其机制。将60只C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法随机分为对照组(蒸馏水灌胃)、模型组(蒸馏水灌胃)、秋水仙碱组(Col,秋水仙碱2 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)、QAF低剂量组(QAF-L,QAF 100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)和QAF高剂量组(QAF-H,QAF 300 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)。模型组和各给药组用1 mL·kg~(-1)CCl_4(CCl_4-橄榄油1∶4)腹腔注射,每周2次。给药和造模共6周。末次给药后16 h,处死小鼠,收集血清以及肝脏组织。检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)水平,并观察小鼠肝功能情况;HE染色法观察各组小鼠肝组织病理学变化;F4/80免疫组化法观察各组小鼠肝脏炎症细胞浸润情况;采用RT-PCR法检测各组小鼠肝脏肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin, IL)-18和IL-1β mRNA表达;采用Western blot法检测各组小鼠肝脏IκBα,p-IKKα/β,p-p65,NLRP3,caspase-1和cleaved caspase-1表达情况。结果显示,不同剂量QAF显著缓解肝损伤程度,并降低肝纤维化小鼠肝功能指标血清ALT和AST水平。免疫组化结果显示,QAF显著减少肝纤维化小鼠肝脏炎症细胞浸润。RT-PCR和Western blot结果显示,QAF显著降低肝纤维化小鼠肝组织TNF-α,IL-18和IL-1β基因表达,并抑制肝脏IκBα蛋白降解,以及p-IKKα/β,p-p65,NLRP3和cleaved caspase-1蛋白表达。综上所述,QAF具有改善CCl_4诱导的小鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3炎性体介导的炎症信号通路有关。     

青蒿琥酯对人白血病K562细胞NF-κB活化的影响

目的:观察青蒿琥酯对白血病细胞K562核转录因子κB信号通路的影响。方法:采用Western blot法,检测青蒿琥酯对K562细胞IKKα,IKKβ,IKKγ)表达的影响,采用Western blot法,检测青蒿琥酯对K562细胞caspase 3和PARP cleavage的作用;采用EMSA法检测青蒿琥酯对白血病细胞NF-κB活性的影响。结果:青蒿琥酯能抑制核转录因子κB的表达,青蒿琥酯能够下调IKKα的表达。结论:青蒿琥酯通过下调IKKα的表达而抑制转录因子κB活化。     

绞股蓝总皂苷调节NF-κB信号通路改善糖尿病大鼠胰岛素敏感性的实验研究

该文主要研究绞股蓝总皂苷(GPS)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素敏感性及炎性因子的影响,并探讨其可能的分子机制。T2DM模型造模成功后,将大鼠随机分为模型组,GPS高、低剂量组(200、100 mg·kg~(-1)),盐酸二甲双胍组(100 mg·kg~(-1)),另设健康大鼠为对照组。各组大鼠灌胃给药6周,检测空腹血糖、口服糖耐量,ELISA法检测血清胰岛素、C-肽、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)的释放,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)。Western blot法检测骨骼肌中磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和脂肪组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制因子激酶β(p-IKKβ)、磷酸化NF-κB抑制因子α(p-IκBα)、磷酸化NF-κB p65(p-p65)的蛋白水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测骨骼肌中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和脂肪组织中NF-κB mRNA的相对表达量,并观察胰腺组织的病理学变化。结果显示,与模型组相比,GPS各剂量组大鼠血糖水平显著降低,口服糖耐量异常明显改善,ISI显著提高;GPS高剂量组明显降低HOMA-IR,减少炎性因子TNF-α、IL-1β和CRP的释放,升高p-IRS-1(Tyr)、p-Akt和GLUT4的相对表达,降低p-IRS-1(Ser)、p-IKKβ、p-IκBα、p-p65和NF-κB的相对表达;GPS低剂量组显著降低大鼠炎性因子CRP的释放及p-IRS-1(Ser)、p-IKKβ、p-IκBα和NF-κB的相对表达;然而,GPS各剂量组对血清胰岛素、C-肽、IL-6水平及胰岛细胞的损伤均无显著影响。结果表明GPS能降低糖尿病大鼠血糖,改善胰岛素敏感性,其机制可能是通过调控NF-κB信号通路,抑制炎症反应,进而调控胰岛素信号通路关键蛋白的表达。     

保肝合剂对急性免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的研究保肝合剂(柴胡、黄芩、法半夏,等)对刀豆蛋白A(Con A)诱导的小鼠急性免疫性肝损伤的保护作用。方法将72只C57BL/6J小鼠随机分为6组:正常组,模型组,保肝合剂低、中、高剂量组(22.5、45、90 mg/kg)和联苯双酯组(100 mg/kg)。每日灌胃(ig)给予小鼠不同剂量保肝合剂14 d后,末次ig后除正常组外,各组均采用尾静脉注射Con A 20 mg/kg制备急性免疫性肝损伤模型。8 h后称重,处死小鼠;检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)、白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)水平;计算肝、脾指数并同时对肝组织进行病理学检查。结果保肝合剂具有剂量依赖性地降低Con A所致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST的升高(P0.05),降低肝匀浆中TNF-α、IFN-γ、IL-1、IL-6、OTC的水平(P0.05)及降低肝、脾系数(P0.05),提高SOD的活性(P0.05),减轻Con A对肝组织的病理损伤程度。结论保肝合剂对Con A所致小鼠急性免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增强清除自由基的能力从而抑制脂质过氧化以及减少炎性因子的释放相关。     

维药黑种草子对急性乙醇性肝损伤小鼠保护作用及抑制NF-κB炎性反应信号通路的研究

目的:观察维药黑种草子对急性乙醇性肝损伤小鼠保护作用及对NF-κB炎性反应信号通路的抑制作用。方法:50只昆明小鼠随机分为模型组、空白组、阳性对照组、黑种草子水提液高剂量组(6 g/kg)、黑种草子水提液低剂量组(2 g/kg)。除空白组外,其余各组每日均灌胃给予56度白酒10 m L/kg,连续灌胃15 d。禁食不禁水10 h后,观察小鼠一般状态,检测体质量,肝重,肝指数,肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),肝组织核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,并进行肝组织病理学检查。结果:与空白组相比,模型组小鼠体质量和肝指数均降低,血清ALT及AST活性升高,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,黑种草子水提液各组小鼠肝体质量和肝指数有所升高,血清ALT及AST活性降低,差异有统计学意义(P0.05)。模型组小鼠肝细胞明显气球样变性、坏死和并伴有少量炎细胞浸润,黑种草子水提液组较肝损伤模型组病变情况显著减轻。模型组NF-κB及TNF-α表达强度均高于空白组,黑种草子各给药组较模型组NF-κB及TNF-α表达强度均下降。结论:黑种草子水提液对急性乙醇性肝损伤小鼠具有一定保护作用,并且能明显抑制小鼠肝细胞NF-κB及TNF-α的表达。     

鞣花酸对AKT基因转染诱导小鼠脂肪性肝病中炎症及氧化应激的影响

研究鞣花酸(ellagic acid,EA)对AKT基因转染诱导小鼠脂肪性肝病中炎症及氧化应激的影响。将20只雌性FVB小鼠随机分为正常对照组,模型组,EA低、高剂量给药组(150,300 mg·kg~(-1)·d~(-1))。模型组及EA给药组采用高压尾静脉转染法转入AKT质粒,EA连续给药5周,模型组及正常对照组给予等量生理盐水。取各组小鼠肝组织,采用HE染色法,油红O染色法观察小鼠肝组织病理学改变;检测各组小鼠肝功能以及血清和肝组织中的MDA和SOD水平;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测NF-κB,TNF-αmRNA的表达水平;Western blot法、免疫组织化学法检测肝组织中NF-κB,TNF-α,IL-6,COX-2等蛋白的表达水平。结果显示,与正常对照组相比,模型组小鼠血清中AST,ALT水平升高,血清及肝组织中MDA水平升高,SOD水平降低,组织病理学结果显示肝组织脂肪化明显,损伤严重。EA给药后,肝脂肪化显著减轻,AST,ALT,MDA水平降低,SOD水平升高,肝组织中NF-κB,TNF-α,IL-6,COX-2等表达水平降低。以上结果表明,EA对AKT基因转染诱导的小鼠脂肪性肝病具有治疗作用,其作用机制可能与抑制NF-κB,TNF-α,IL-6,COX-2等炎症相关因子的表达、抗氧化应激损伤有关。     

姜黄素联合二至丸抑制刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝炎机制的研究

目的对姜黄素联合二至丸对刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝炎的肝组织中炎性细胞因子(IL-6、IFN-γ)水平变化以及对NF-κB信号通路的影响。方法建立刀豆蛋白A(Con A)诱导小鼠免疫性肝炎模型;小鼠随机分为:正常组、Con A模型对照组、二至丸组、姜黄素组、二至丸+姜黄素组。原位末端凋亡法(TUNEL)观察肝内细胞凋亡情况;酶联免疫吸附法(ELISA)测定肝组织中细胞因子(IL-6、IFN-γ)水平变化;实时荧光定量PCR法(Realtime PCR)检测肝内IL-6、IFN-γ、IL-10 mRNA的表达情况;蛋白印迹法(Western Blot)检测肝内NF-κB信号通路相关蛋白表达变化。结果 ELISA结果显示二至丸联合姜黄素组小鼠血清中炎性细胞因子水平(IL-6、INF-γ)较Con A模型组均有显著下降(P0.05);Real-time PCR结果显示,与Con A模型对照组相比,二至丸联合姜黄素组小鼠肝脏内IL-6和IFN-γ上调以及IL-10下调的现象被明显抑制,差异有统计学意义(P0.05);Western Blot结果显示,给予Con A后,NF-κB信号通路被激活,二至丸+姜黄素组小鼠明显抑制了NF-κB的磷酸化,从而起到抗炎、抗氧化作用;同时还减少Caspase-3的活化,降低肝细胞凋亡率。结论在Con A诱导的小鼠自身免疫性肝炎模型中,二至丸和姜黄素联用可通过减少血清和肝脏中炎性细胞因子的释放,减少肝细胞坏死,而这种保护肝脏的免疫调节作用是与阻碍NF-κB信号通路的激活相关。     

黄精皂苷对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型的抗炎作用及其机制

目的在脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)中研究黄精皂苷通过NF-κB/MAPKs信号通路发挥体外抗炎作用及其机制。方法 MTT比色法检测黄精皂苷对RAW264.7细胞活性的影响,Griess试剂法检测NO释放,ELISA试剂法检测细胞释放TNF-α、IL-6的水平,流式细胞仪检测细胞释放ROS的水平,JC-1荧光染色法检测胞内线粒体膜电位水平变化,Western blot法检测细胞iNOS、COX-2、p-IKKα/β、p-IκBα、p-p65、p-p38、p-ERK、p-JNK蛋白表达。结果黄精皂苷质量浓度为20、40、80μg/mL时对RAW264.7细胞没有毒性。不同质量浓度的黄精皂苷对LPS诱导RAW264.7细胞导致的NO、TNF-α、IL-6、ROS的释放均有很好的抑制作用,对iNOS、COX-2、p-IKKα/β、p-p65、p-IκBα、p-p38、p-ERK、p-JNK蛋白表达也有抑制作用。结论黄精皂苷通过抑制NF-κB/MAPKs信号通路来发挥体外抗炎作用。     

柴胡皂苷b_2对LPS/GalN诱导的小鼠急性肝损伤炎症和能量代谢的影响

该研究旨在探讨柴胡皂苷b2(SS-b2)对注射脂多糖/氨基半乳糖(LPS/Gal N)诱导的小鼠急性肝损伤炎症因子的调控和对能量代谢的影响。将小鼠随机分为空白对照组(等量生理盐水),模型组(100μg·kg~(-1)LPS+400 mg·kg~(-1)Gal N),SS-b2低、中、高剂量组(5,10,20 mg·kg~(-1)·d-1)和阳性对照组(地塞米松,10 mg·kg~(-1))。除空白对照组外,其余各组每天腹腔注射LPS/Gal N建立急性肝损伤小鼠模型。计算脏器指数;血清生化指标检测ALT和AST的含量和肝脏ATP酶(Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量;微量酶标法测定肝脏LDH的含量; HE染色观察肝组织病理学变化;免疫组化法测定LDH-A的蛋白表达; Western blot法检测肝脏Sirt-6和NF-κB蛋白表达情况。结果显示,与模型组相比,SS-b2高剂量组小鼠脏器指数均有明显变化(P0. 05); SS-b2中、高剂量组能明显降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,TNF-α,IL-1β,IL-6的水平及LDH活性(P0. 01),随着SS-b2剂量的增加,小鼠肝脏病变范围减少,损伤程度减轻,各剂量组能够显著增强小鼠肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性(P0. 01); SS-b2中、高剂量组能够显著下调肝组织NF-κB的蛋白表达(P0. 01),同时,各剂量组能够显著提高急性肝损伤小鼠肝脏中Sirt-6蛋白表达量(P0. 01)。综上,SS-b2对LPS/Gal N诱导的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用,该作用可能与其下调NF-κB蛋白表达以及上调Sirt-6蛋白表达改善炎症损伤以及能量代谢有关。     

莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1细胞炎症的保护作用及机制研究

目的研究莫诺苷对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导成骨细胞MC3T3-E1炎症的保护作用,探讨Caspase、MAPK和NF-κB通路调控机制。方法 TNF-α(50 ng/m L)诱导MC3T3-E1细胞,制备细胞炎症模型;MTT法检测莫诺苷对MC3T3-E1细胞增殖的影响,并检测不同浓度的莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1细胞活力的影响;ELISA法检测细胞上清液中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的水平;Western blotting法检测Caspase-3、Caspase-9、p-ERK、p-JNK、p-p38、p-IκBα、IκBα和NF-κB等相关蛋白的表达。结果莫诺苷能够促进正常MC3T3-E1细胞增殖,TNF-α诱导MC3T3-E1细胞增殖受到抑制,而莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1细胞具有保护作用;莫诺苷可以抑制TNF-α诱导MC3T3-E1细胞IL-1β和IL-6的释放;降低Caspase-3、Caspase-9、p-ERK、p-JNK、p-p38、p-IκBα蛋白的表达,升高IκBα蛋白表达,对NF-κB p65无明显影响。结论莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1炎症细胞有保护作用,其机制为抑制炎性因子的释放、抑制MAPK和NF-κB通路的激活、抑制凋亡蛋白Caspase的表达,从而抑制MC3T3-E1细胞的凋亡。     

老鹳草素对D-氨基半乳糖诱导的肝损伤小鼠的保护作用及机制

目的:研究老鹳草素对D-氨基半乳糖(D-GalN)致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制。方法:60只小鼠随机分为正常组,模型组,水飞蓟素组(180 mg·kg~(-1)),老鹳草素低,中,高剂量组(50,100,200 mg·kg~(-1)),灌胃给药每天1次,正常组及模型组小鼠灌胃生理盐水连续10 d。末次给药2 h后,除正常组外,其余各组腹腔注射D-GalN(500 mg·kg~(-1)),建立D-GalN致小鼠急性肝损伤模型。16 h后,收集血清和肝组织。生化法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),总胆红素(TBIL)和肝脏中丙二醛(MDA),总超氧化物歧化酶(T-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性或含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和γ-干扰素(IFN-γ)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析肝组织中Toll样受体-4(TLR-4)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达情况;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清中ALT,AST,ALP,TBIL和肝脏MDA水平显著升高(P 0. 01),与模型组比较,老鹳草素各给药组能够明显降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,ALP,TBIL和肝脏MDA(P 0. 05,P 0. 01),且增强肝脏T-SOD和GSH-Px活性(P 0. 05,P 0. 01),同时抑制血清中TNF-α,IL-1β,IL-6和IFN-γ含量的升高和TLR-4,NF-κB的蛋白表达(P 0. 05,P 0. 01); HE染色结果显示其对肝组织损伤程度有明显改善作用。结论:综上所述,老鹳草素对D-GalN诱导的急性肝损伤小鼠具有显著的保护作用,其保肝作用机制可能与抑制氧化应激、炎症反应以及TLR-4/NF-κB信号通路有关。     

三叶木通总黄酮对急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究

目的:研究三叶木通总黄酮对四氯化碳(CCl_4)诱发的急性肝损伤小鼠的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:各组小鼠灌胃给予药物或溶剂干预10 d后,腹腔注射0.1%CCl_4花生油溶液建立急性肝损伤模型。生化法检测小鼠血清中门冬酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的含量,蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测肝组织中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达,HE染色观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,三叶木通总黄酮能显著降低小鼠血清AST、ALT活性,提高血清SOD、GSH-Px活性,降低血清MDA及肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,下调肝组织NF-κB蛋白表达,并改善肝组织病变。结论:三叶木通总黄酮对CCl_4诱导的急性肝损伤小鼠具有保护作用,其保肝作用机制可能与抗氧化和抑制炎症反应有关。