促排后行未成熟卵泡穿刺术治疗多囊卵巢综合征的效果观察

目的观察促排卵后超声下行未成熟卵泡穿刺术（IMFP）治疗多囊卵巢综合征（PCOS）的效果。方法选择多囊卵巢综合征患者共86人,分2组。观察组43例,穿刺前用少量人类尿促性腺激素（HMG）促排卵;对照组43例,穿刺前未用HMG。在超声引导下行未成熟卵泡抽吸术,尽可能将能看到的卵泡全部抽吸干净,连续2—3个周期,穿刺后检查患者的内分泌和卵巢基础窦卵泡计数,直至达到基础窦卵泡计数≤10个／卵巢,并随访6个月记录其妊娠情况。结果两组患者窦卵泡计数、LH、LH／FSH、T值均较术前降低;卵巢过度刺激综合征发生率降低而妊娠率升高,其中观察组效果优于对照组（P〈0．01）。结论超声引导下IMFP可在一定时间内有效改善PCOS患者的内分泌状态,明显减少卵巢内窦卵泡计数,使其在以后的促排卵周期中OHSS发生率降低,排卵率及妊娠率提高,是治疗重度PCOS的一种有效途径。     

前列腺素E1对大鼠卵泡壁发育和分化影响的形态学观察

本文应用组织学方法和电镜对PGE1引起未成熟大鼠卵泡颗粒细胞和卵泡膜外层细胞的形态学变化作了研究。结果表明:外源性PGE1刺激了颗粒细胞的发育和黄体化,同时也促进了卵泡膜外层细胞的发育和从成纤维细胞向平滑肌细胞分化。文中对有关PGE1在排卵过程中的作用机制等问题进行了讨论。     

大鼠胰腺卵泡刺激素(β)及其受体的免疫荧光定位及原位杂交

目的探讨大鼠胰腺组织中是否表达卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR),为进一步研究FSH对胰腺的功能调节提供理论依据。方法采用单标记免疫荧光技术和原位杂交方法进行研究。结果大鼠胰岛大部分细胞及部分胰腺外分泌部细胞呈FSH蛋白和mRNA,FSHR蛋白和mRNA免疫荧光反应阳性,阳性物质分布于细胞质,细胞核呈阴性反应。结论大鼠胰腺细胞具有自身合成和分泌FSH及其受体的功能,说明FSH对胰腺细胞的作用可能通过旁分泌或自分泌的作用实现的。     

白藜芦醇拮抗卵泡颗粒细胞氧化应激的损伤

目的 探讨白藜芦醇是否可以拮抗过氧化氢诱导的卵泡颗粒细胞氧化应激损伤。方法 收集体外受精/单精子卵泡浆内注射（IVF/ICSI）患者捡卵后卵泡液中的颗粒细胞并进行培养。将培养后的颗粒细胞分为4组：对照组,损伤模型组,10 μmol/L白藜芦醇组和50 μmol/L白藜芦醇组。采用CCK-8法测定细胞活性,硫代巴比妥酸（TBA）法测定丙二醛（MDA）含量,水溶性四氮唑-1（WST-1）法测定超氧化物歧化酶（SOD）水平,竞争ELISA 法测定孕酮分泌量,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞仪测定细胞凋亡,Western blotting测定Bcl-2、Caspase-3和沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）蛋白表达。结果 与对照组比较,损伤模型组的细胞活性、SOD水平、孕酮分泌量和Bcl-2蛋白表达均明显降低,而MDA含量、细胞凋亡率和Caspase-3凋亡蛋白表达均明显增加（P<0.05）。与损伤模型组比较,10 μmol/L白藜芦醇组各项指标未显示出统计学差异;而50 μmol/L白藜芦醇组的细胞活性、SOD水平、孕酮分泌量和Bcl-2及SIRT1蛋白表达均明显升高,MDA含量、细胞凋亡率和Caspase-3凋亡蛋白表达均明显下降（P<0.05）。结论 50 μmol/L白藜芦醇可以通过增加SIRT1的活性,增强颗粒细胞的抗氧化及抗凋亡能力,改善颗粒细胞的功能。     

卵泡刺激素调节大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的表达及磷酸化

目的:研究卵泡刺激素(FSH)对大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的调节。方法:21dSD雌鼠,腹腔注射孕马血清20IU,对颗粒细胞进行原代培养,用转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)抗体中和卵巢颗粒细胞表面TβRⅡ,以阻断TGFβ/Smads信号通路,再以不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,免疫印迹法检测TGFβ信号通路中TβRⅡ、Smad2/Smad3及P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达。结果:TβRⅡ、Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量与FSH的作用呈时间依赖性显著增强;TGFβ/Smads信号通路被阻断后再用FSH处理,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量没有明显变化;细胞表面TβRⅡ恢复后,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量有少量增加。结论:FSH刺激大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3的表达和磷酸化;FSH对Smad2/Smad3的激活作用在相当程度上依赖于TβRⅡ。     

大鼠排卵前期卵泡膜超微结构的动态观察

本文用电已显微镜对大鼠成熟卵泡膜外层进行了动态观察。结果表明:在排卵前,卵泡膜外层细胞成分发生改变,部分成纤维细胞分化为平滑肌细胞。此结果表明:平滑肌细胞可能参与排卵过程。     

转化生长因子β信号通路对卵泡刺激素调节卵巢颗粒细胞功能的影响

目的 探讨大鼠卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素(FSH)和转化生长因子β(TGF-β)信号通路之间的相互作用.方法 取21 dSD大鼠卵泡分离的颗粒细胞原代培养,实验分为对照组、FSH处理组和转化生长因子β Ⅱ型受体(TGF-β R Ⅱ)中和组.通过免疫细胞化学和Western blotting定位和检测TGF-β R Ⅱ以及...     

大鼠牙髓细胞的分离培养及超微结构观察

目的 探讨牙髓细胞的培养方法和生长状况,观察其形态结构特征,为进一步研究牙齿的发育提供实验基础.方法 采用胶原酶消化分离的方法分离大鼠的牙髓细胞并在DMEM培养液中培养,运用透射和扫描电镜技术观察细胞的形态结构特征.结果 培养的牙髓细胞呈梭形,细胞生长状况良好,细胞器发育正常,并且有细胞增殖和分裂能力.结论 利用酶消化分离的方法分离培养的牙髓细胞,能够保持其生活状态及增殖分裂能力.     

卵泡刺激素受体基因多态性与西北地区汉族妇女卵巢反应性的关系

目的探讨卵泡刺激素受体基因（FSHR）-29（rsl394205）和Asn680Ser（rs6166）位点多态性与西北地区汉族妇女控制性超排卵（COH）中卵巢反应性的关系。方法采用限制性酶切技术对卵巢高反应患者45例,卵巢低反应患者27例和卵巢正常反应的对照69例的FSHR基因-29（rsl394205）位点和第10号外显子Asn680Ser（rs6166）位点进行分型,并通过Fisher’s精确检验的方法分析基因型和等位基因的分布频率。结果①FSHR基因-29位点基因型、等位基因频率在三组间分布无差异。②Asn680Ser位点基因型、等位基因频率在卵巢高反应组与正常对照组间无统计学差异（P〉0．05）;Ser／Ser基因型频率在卵巢低反应中占40．7％,与正常对照组差异有统计学意义（P〈0．01）;携带G等位基因者发生卵巢低反应的风险增加（OR=2．37,％95CI=[1．25-4．52]）。结论FSHRAsn680Ser位基因多态性与西北地区汉族妇女COH中的卵巢低反应相关。当Asn680Ser（rs6166）位点G等位基因的存在增加卵巢低反应的风险。     

大鼠脑组织细胞培养的形态学观察

为观察原代培养 SD大鼠大脑组织 ,包括神经干细胞在内的各种细胞的形态 ,取新生大鼠 ,无菌操作下取出整个大脑 ,制备成单细胞悬液 ,接种培养 ,免疫细胞化学鉴定各类细胞的同时用光镜和扫描电镜对不同阶段和种类的细胞进行形态学观察。结果显示 :在体外培养出神经元、胶质细胞和神经干细胞 ;神经细胞在体外的发育时程跟体内基本一致 ,神经干细胞在体外 2 0 d左右分化成熟 ,获取了神经细胞和干细胞体外培养的光镜和扫描电镜形态。结果提示 ,成体神经细胞体外分离、培养的条件关键点在于尽可能贴近自然 ,由此可保证细胞培养的质量 ,获得可靠的神经干细胞、神经元和胶质细胞。为各类神经细胞提供了形态学资料。     

不同时期视网膜前体细胞的培养

目的 研究不同时期视网膜前体细胞的培养.方法 分离E14和E18 SD大鼠的视网膜前体细胞,用改进DMEM/F12无血清培养基悬浮培养并利用体外诱导分化、免疫细胞化学、扫描电镜和透射电镜等方法对细胞进行鉴定.结果 视网膜前体细胞在DMEM/F12无血清培养基中悬浮成球,贴壁后,细胞逐渐从细胞球向周围迁移分化.扫描电镜可见细胞球和分化细胞的形态,透射电镜可见细胞球和分化细胞的超微结构.免疫细胞化学显示,悬浮培养的细胞球中大部分细胞表达神经外胚层源性干细胞标志物nestin和细胞分裂增殖标志物BrdU.贴壁后,视网膜前体细胞能分化为多种视网膜细胞类型,包括Thy1.1阳性的视网膜神经节细胞.E14和E18视网膜神经节细胞的百分比分别为16.91%±4.05%和4.65%±1.88%,两组比较,差异有统计学意义(t=15.04,P＜0.001).结论 改进DMEM/F12无血清培养基可成功培养视网膜前体细胞,培养的细胞具有无限增殖和多向分化潜能.早期视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比较高.     

感染高原属兔的皮蝇蛆Ⅲ期幼虫的电镜形态学比较研究

为了观察感染高原鼠兔与感染牦牛、藏羚羊的皮蝇蛆Ⅲ期幼虫之间形态学上的区别,在青海省玉树县和称多县收集感染高原鼠兔的皮蝇蛆与本研究室以往收集保存的感染牦牛、藏羚羊皮蝇蛆进行比较研究。取出蝇蛆晾干酒精,用戊二醛液固定,切下幼虫的头部和尾部用锇酸溶液固定,不同浓度的酒精脱水、临界点干燥、表面喷金后,扫描电镜观察。感染鼠兔的皮蝇蛆伪头部口裂背侧没有明显的肉质突起,腹面棘成连续的1簇,伪头突起与口裂之间有许多细密的小棘,气门板稍凸起,圆形,上面无棘;第10节腹面前缘棘大,圆形,后缘棘小,散在。与感染牦牛的牛皮蝇蛆、纹皮蝇蛆、中华皮蝇蛆及感染藏羚羊的皮蝇蛆在形态上有明显的区别。     

孤雌生殖长角血蜱各虫期形态的扫描电镜观察

用扫描电镜对采自四川地区孤雌生殖的长角血蜱的各期虫体及虫卵进行了形态学观察。结果:雌成蜱的口下板齿式4︱4或4—5︱5—4,多孔区小孔30～35个,两多孔区的间距为孔区长径的2倍,气门板“D”字状,肛毛5对;若蜱齿式2—3︱3—2,须肢第3节背面后缘无刺,无多孔区和生殖孔,气门板亚圆形,无气门斑,肛毛3对;幼蜱齿式2︱2,无气门板,肛毛1对,无肛后沟,爪垫明显超过爪长的2/3。各期虫体的哈氏器结构基本相同,但成蜱前窝内感毛7根,而若蜱、幼蜱均为6根。卵表面光滑无特殊结构。首次观察到孤雌生殖长角血蜱成蜱气门板腹面前方有7、8个小孔,肛瓣下方有密集成带的小刺以及十几个气孔样物。     

人肝癌细胞RNA电转染至未成熟树突状细胞的扫描电镜观察

目的 观察电转染人肝癌细胞RNA前后未成熟树突状细胞(imDCs)的表面形态学变化.方法 取人外周血,纯化获取单核细胞后诱导其成为imDCs,然后通过电转染方法将人肝癌细胞RNA导入其内;用7种特异性抗体的免疫细胞化学技术对电转染前后的树突状细胞鉴定后,进行扫描电镜观察.结果 电转染人肝癌细胞RNA后imDCs内TERT表达显著增加,其他分子表达无显著改变.电转染前,imDCs多呈圆形、椭圆形或不规则形,体积较单核细胞大,但大小不均,在细胞表面可见长短不一的微绒毛,或/许多泡状、面纱状或云朵状细胞突起;电转染后,可在imDCs表面见到由于电转染所造成的孔,并有一定数量的细胞融合和细胞死亡,但绝大多数细胞可恢复至正常结构状态.结论 电转染打孔可为外源物质(如肝癌细胞RNA或其他肿瘤细胞RNA)导人细胞内提供可行性,并为进一步利用imDCs制作肿瘤疫苗,开展肿瘤的生物治疗提供一种可行方案.     

猫运动皮层内篮状细胞的立体重构,递质性质及突触分布

用细胞内HRP染色的方法显示该神经元位于猫运动皮层十字沟后,在第Ⅱ/Ⅲ层之间(软膜以下438μm处),胞体截面积为15.6×28.1μm~2,呈多极形,树突呈串珠状,向四周扩展,无侧棘,轴突由胞体下方伸出,返折向上,包绕胞体周围,以软膜平行的吻尾方向行走为主,有一分枝向白质方向延伸.从立体重构图的不同角度观察,其形态不对称,如沿X轴方向旋转60°后,其形态呈扁平形,用胶体金免疫电镜观察,该神经元的递质性质为GABA能的.胞体及树突上分布有非对称型和对称型的突触,对称型的突触中有的是GABA能的,有的是非GABA能的.其轴突有髓鞘包绕,末梢与其它神经元的胞体形成一处以上相连或不相连的对称型突触,也可与其它树突形成对称型的突触.根据该神经元的形态,递质性质及突触分布的特征,可确认它是篮状细胞.     

人早幼粒白血病细胞与小鼠网织红细胞融合的胞质杂交细胞形态学观察

本研究对HGPRT缺失的人早幼粒白血病细胞突变株(HL-60-AR)与小鼠网织红细胞融合所形成的胞质杂交细胞,进行了光镜和电镜的形态学观察。所得结果显示:胞质杂交细胞在短期培养过程中,可见大量细胞呈现核固缩和核偏位,甚至出现排核现象;长期培养的胞质杂交细胞沿不同途径向较成熟的方向分化。本文并讨论了网织红细胞胞质因子对人早幼粒白血病细胞分化途径的影响。     

大鼠心肌细胞形态学增龄变化的定量研究

目的　探讨大鼠心肌细胞的增龄变化规律。　方法　取雄性大鼠 30只 ,分为幼年组 (出生后 2 0～ 2 5d)、青年组 (3～ 5月 )和老年组 (13～ 15月 )。常规石蜡切片 ,磷钨酸苏木精染色 ,图像分析仪测量心肌细胞的胞面积、核面积、核浆比和核椭圆度。　结果　随着年龄增长 :1 心肌细胞面积、核面积增大 ,核浆比降低 ,核椭圆度增高。 2 心室的细胞面积大于心房 ,左心房、左心室的细胞面积大于右心房、右心室 ,室间隔的细胞面积介于左右心室之间。 3 心肌细胞增粗增长 ,闰盘逐渐清晰、复杂。　结论　细胞核的增长速度相对慢于细胞的增长速度 ;细胞核的形态由圆形逐渐变为椭圆形 ;圆形细胞核是细胞幼稚的重要特征之一 ;心房较心室更具幼稚性。     

小鼠胸腺上皮细胞株MTECB与胸腺细胞结合的形态学观察

用本室建立的小鼠胸腺上皮细胞株ＭＴＥＣＢ，分别在１．无钙镁Ｈａｎｋ液中（４℃）；２．无钙镁Ｈａｎｋ液中（３７℃）；３．含钙镁Ｈａｎｋ液中（４℃）下；４．含钙镁Ｈａｎｋ液中（３７℃）与胸腺细胞共育（基质细胞：胸腺细胞＝１：１０），光镜和扫描电镜下观察它们之间的结合特点。发现在各种实验条件下，９０％的ＭＴＥＣＢ能与胸腺细胞结合，这种结合从形态上分为两种形式，其一为胸腺细胞均匀结合于ＭＴＥＣＢ周围，呈花     

显示蠓类形态特征技术的探讨（双翅目：蠓科）

蠓科昆虫雄虫尾器是分类的重要依据,但长期以来在普通光学显微镜检视中常存有结构方面的疑点,本文在运用光学显微镜照相、显微镜投影绘图同时,应用扫描电子显微镜对郧县细蠓和台湾蠛蠓尾器的形态结构进行比较观察,全面、准确地显示了郧县细蠓和台湾蠛蠓雄虫尾器的真实结构及其形态特征。并对3种方法进行了比较。