霍奇金病的病理及免疫组织化学研究

为探讨ＨＤ中Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞的组织学起源，应用免疫组织化学方法检测４８例ＨＤ中ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ１５、ＣＤ３０和ＭＩＢ１的表达。结果显示，９例ＬＰＨＤ中６例Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞表达ＣＤ２０，１６例ＮＳＨＤ中３例表达ＣＤ２０，所有的Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞不表达ＣＤ３，大部分Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞表达ＣＤ１５，所有的ＲＳ细胞表达ＣＤ３０和ＭＩＢ１。提示，ＨＤ中ＲＳ细胞可能为Ｂ细胞来源，ＣＤ１５和ＣＤ３０可作为ＨＤ的诊断参考依据     

可溶性胃癌抗原和抗CD_3单抗共同诱导杀瘤细胞的实验研究

用盐析法提取胃癌可溶性抗原（ＴＳＡ），并用抗ＣＤ３单抗和ＩＬ－２共同刺激正常人的外周血单核细胞，培养１０天后，经流式细胞仪表型分析，表明其免疫效应细胞以ＣＤ８Ｔ细胞为主，其细胞增殖速度、增殖水平与ＣＤ３ＡＫ和ＬＡＫ相比明显升高，且对其抗原来源的胃癌细胞具有极强的杀伤活性（９８．５％），高于ＣＤ３ＡＫ（８２．１％）和ＬＡＫ（６２．０％）。     

CD3AK细胞与LAK细胞的比较

抗ＣＤ３单抗和ｒＩＬ－２共刺激法诱生扩增的ＣＤ３ＡＫ与用等量ｒＩＬ－２诱生扩增的ＬＡＫ间有明显差异：１）扩增倍数和细胞毒活性强度及其动态学不同：在诱生初期，ＣＤ３ＡＫ细胞数下降，细胞扩增倍数低于ＬＡＫ；对Ｋ５６２的细胞毒不知 性低于ＬＡＫ，诱生８天后ＣＤ３ＡＫ的扩增倍数和     

CD3AK对晚期肝癌疗效初步观察

目的观察晚期肝细胞癌（ＨＣＣ）患者采用抗ＣＤ３抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）治疗的效果。方法５８例晚期ＨＣＣ患者分为三组，Ａ组［ＣＤ３ＡＫ＋肝动脉化学栓塞（ＴＡＣＥ）］２２例，Ｂ组（ＣＤ３ＡＫ）１５例，Ｃ组（ＴＡＣＥ）２１例。结果部分缓解率（ＰＲ）Ａ，Ｂ，Ｃ组分别为４５．５％、１３．３％（Ｐ＜０．０５）和１４．３％（Ｐ＜０．０５），中位生存期分别为１１．３月、４．９月（Ｐ＜０．０１）和４．１月（Ｐ＜０．０１），半年和１年生存率分别依次为６８．２％，３３．３％（Ｐ＜０．０５）和２３．８％以及４０．９％、６．６％（Ｐ＜０．０５）和９．５％（Ｐ＜０．０５）。结论本组结果表明ＣＤ３ＡＫ＋ＴＡＣＥ治疗晚期ＨＣＣ疗效最佳     

CD_(30)和CD_(15)在霍奇金病R-S细胞的表达及其临床意义

应用免疫组织化学技术，用ＣＤ３０和ＣＤ１５单克隆抗体对３３例霍奇金病（ＨＤ）进行标记检测。结果显示，３３例ＨＤ中ＣＤ３０阳性率为７８．８％，ＣＤ１５阳性率为８１．８％，两者之间以及ＨＤ各亚型之间阳性率无明显差异（Ｐ＞０．０５），其阳性表达部位均位于Ｒ－Ｓ细胞浆内。但ＣＤ３０除了ＨＤ外，还在大细胞间变性淋巴瘤中的大细胞及Ｒ－Ｓ样细胞等表达。结果提示，用免疫组织化学对ＨＤ的诊断，鉴别诊断以及判断肿瘤的组织学来源有一定价值，ＣＤ１５的特异性强于ＣＤ３０，而ＣＤ３０和ＣＤ１５的双阳性表达对诊断ＨＤ的临床意义更大。     

Ｃａｓｐａｓｅ ３与β-ｃａｔｅｎｉｎ在分化型甲状腺癌中的表达及意义

目的：研究Ｃａｓｐａｓｅ ３和β ｃａｔｅｎｉｎ蛋白在分化型甲状腺癌（ＤＴＣ）中的蛋白表达情况,探讨它们在ＤＴＣ发生发展中的作用及相互关系。方法：采用免疫组织化学ＳＰ法,对５２例ＤＴＣ组织和１０例正常甲状腺组织中的Ｃａｓｐａｓｅ-３和β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达情况进行检测。结果：ＤＴＣ组织中的Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白表达率为５１.９２％（２７／５２）,明显低于正常甲状腺组织的９０.００％（９／１０）,Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白的表达与ＤＴＣ病理分级有关（Ｐ＜０.０５）,但与临床分期及颈淋巴结转移无关;ＤＴＣ组织中的β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达率为６７３１％（３５／５２）,明显高于正常甲状腺组织的２０００％（２／１０）,β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的表达与ＤＴＣ颈淋巴结转移有关（Ｐ＜００５）,但与临床分期及病理分级无关;在ＤＴＣ组织中Ｃａｓｐａｓｅ ３和β ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的表达呈负相关（ｒｓ＝－０.６５９,Ｐ＜０.０１）。结论：Ｃａｓｐａｓｅ-３和β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的异常表达共同参与了分化型甲状腺癌的发生发展,可能成为判断分化型甲状腺癌恶性程度、转移及预后的指标。     

CD3AK细胞的体外诱导及免疫生物学特征的实验研究

目的：研究ＣＤ３ＡＫ细胞的体外诱导方法及其免疫生物学特征。方法：采用抗单克隆抗体（ａｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ）和基因重组人白细胞介素２（ｒＩＬ－２）、植物血凝素（ＰＨＡ０共同诱导人外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）制备ＣＤ３ＡＫ细胞,应用ＡＰＡＡＰ法、吉姆萨染色法分析ＣＤ３ＡＫ细胞的表型、核型等免疫生物学特征。结果：微量的ａｎ－ｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ（终浓度３０～５０００ｎｇ／ｍｌ）辅以少量的ｒＩＬ－２（１     

卵巢肿瘤中CD44变异型的免疫组织化学分析

细胞粘附因子ＣＤ４４的变异型（ＣＤ４４ｖ）出现在多种肿瘤的恶性转化过程中并与这些肿瘤的转移能力密切相关。然而，ＣＤ４４基因在良恶性卵巢肿瘤中的表达类型尚无定论。为此，本研究使用特异性识别ＣＤ４４分子不同抗原决定簇的单克隆抗体，对正常卵巢组织以及良性和恶性肿瘤的ＣＤ４４表达类型进行免疫组织化学分析。结果显示，ＣＤ４４ｖ在正常卵巢内呈阴性；２５例良性肿瘤中，２１例阴性，４例有灶局性变异型外显子ｖ８－ｖ１０的表达；相反，２６例卵巢癌手术切除标本和２株卵巢癌细胞系Ｃａｏｖ３和Ｏｖｃａ３有多种形式的ＣＤ４４ｖ存在；其中，ｖ７的表达明显上调。２例交界性肿瘤的表达形式与卵巢癌相似，但呈灶局阳性。本结果因而提示，ＣＤ４４ｖ尤其是ｖ７出现在卵巢癌恶性转化的过程中；它（们）可能成为该类肿瘤新的生物标志物并在癌细胞转移中起促进作用。     

CD3AK细胞及其抗肿瘤研究进展

抗ＣＤ３抗体激活的杀伤细胞－ＣＤ３ＡＫ是一种新型抗瘤免疫活性细胞。Ｔ细胞经抗ＣＤ３单克隆抗体激活后，采用极低剂量ＩＬ－２维持即可长期活性增殖，发挥明显的抗肿瘤细胞效应。依诱导培养过程中ＣＤ３单抗持续存在与否，形成ＣＤ３ＡＫ＾＋和ＣＤ３ＡＫ＾－两种亚类，其作用及方式亦有所差异。ＣＤ３ＡＫ的体内外广谱、高效抗肿瘤作用明显优于ＬＡＫ细胞，临床初步应用亦显示出良好疗效。     

低剂量IL-2诱导的人胚胎脾脏CD_3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤效果及实验研究

用ＣＤ３ＭｃＡｂ和低剂量ＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）诱导的人胎脾ＣＤ３ＡＫ细胞治疗４３例晚期恶性肿瘤患者，取得疗效。经２～８疗程治疗，多数患者症状缓解，生活质量改善，ＰＲ＋ＭＲ１８例（４１．９％），Ｓ＋Ｐ２５例（５８．１％），死亡９例（２０．９％）。全组无严重毒副反应发生。同时比较ＣＤ３ＡＫ细胞和常规ＬＡＫ细胞体外增殖及其杀伤活性，表明前者１４４ｈ增殖力高于后者（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。初步表明ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２疗法效果肯定，毒副作用小，可能成为继ＬＡＫ／ＩＬ－２之后更为有效的肿瘤辅助治疗。     

双特异抗体介导的CD3AK对人小细胞肺癌细胞株的细胞毒作用

目的：研究在双特异性抗体的介导下ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３单克隆栓激活的杀伤细胞）对人小细胞肺癌细胞株ＬＴＥＰ－ｓｍｌ的细胞毒作用。方法：用＾３１Ｃｒ－Ｎａ２ＣｒＯ４释放试验检测单抗（２Ｄ６、ＵＣＨＴ１）和双特异性抗体（ＷＳＴ－Ｈ７）与ＣＤ３ＡＫ共同对人小细胞肺癌细胞株的杀伤活性。持异性抗体体外能明显增强ＣＤ３ＡＫ细胞对人小细胞肺细胞株ＬＴＥＰ－ｓｍｌ的杀伤活性结论：与单纯ＣＤ３ＡＫ相比,加入双特异性     

肺癌单克隆抗体3C9及其相关抗原的研究

用肺腺癌细胞系Ａ５４９免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，常规细胞融合，获得一株ＩｇＭ型单抗３Ｃ９。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ研究发现该抗体识别５６．４ＫＤ蛋白带。免疫组化研究发现，３Ｃ９相关抗原（３Ｃ９Ａｇ）在肺癌组织中表达阳性率高达９２．５％。３Ｃ９Ａｇ血清学研究发现，其诊断肺癌的敏感性为６４．７％，特异性为９３．０％，准确性为８２．５％。其血清水平与组织学分布相关，在高、中分化的肺癌病人阳性率高于低分化者（Ｐ     

CD44V3和CD44V6在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义的研究

目的　为了探讨ＣＤ４４Ｖ３和ＣＤ４４Ｖ６ 在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义。方法应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白过氧化物酶连接法（Ｓ－ Ｐ法），对６２ 例有５ 年随访资料的非小细胞肺癌组织进行了ＣＤ４４Ｖ３ 和ＣＤ４４Ｖ６ 蛋白的检测。结果　非小细胞肺癌的ＣＤ４４Ｖ３ 和ＣＤ４４Ｖ６ 阳性表达率分别为６６．１％ 和６７．７％ ，皆与肿瘤病理分级及组织学类型无明显相关性；ＣＤ４４Ｖ３ 和ＣＤ４４Ｖ６阳性表达与非小细胞肺癌临床分期、淋巴结转移有显著相关性；非小细胞肺癌的ＣＤ４４Ｖ３ 和ＣＤ４４Ｖ６ 阳性表达在１ 年、３ 年术后生存率分别与５ 年比较有显著意义；结果还表明ＣＤ４４Ｖ３ 和ＣＤ４４Ｖ６ 阳性表达率与肿瘤大小有关，肿瘤直径＞ ３ｃｍ 者明显高于肿瘤直径≤３ｃｍ 者（Ｐ＜ ０．００５）。结论　在非小细胞肺癌中，ＣＤ４４Ｖ３ 和ＣＤ４４Ｖ６阳性表达提示容易发生淋巴结转移，多见于晚期肺癌，预后较差。ＣＤ４４Ｖ３和ＣＤ４４Ｖ６可作为临床评估非小细胞肺癌进展的辅助指标之一。     

胃粘膜上皮异型增生和胃癌组织CD44V6表达的免疫组化研究

为了探讨ＣＤ４４Ｖ６表达与胃癌发生发展的关系，采用ＳＰ免疫组化染色方法，检测２０例正常胃粘膜上皮，４３例异型增生和８５例胃癌组织ＣＤ４４Ｖ６的表达情况。结果显示，正常胃粘膜无ＣＤ４４Ｖ６表达；异型增生ＣＤ４４Ｖ６阳性表达率为３０．２％（１３／４３），其中Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级异型增生阳性率分别为１３．６％（３／２２）、３３．３％（４／１２）和６６．７％（６／９），提示ＣＤ４４Ｖ６表达阳性率与异型增生严重程度密切相关（Ｐ＜０．０５）；胃癌组织阳性表达率为７４．１％（６３／８５），其表达阳性率和染色强度均高于异型增生，Ⅰ期、Ⅱ期胃癌ＣＤ４４Ｖ６染色强度和阳性表达率均显著低于Ⅲ期和Ⅳ期（Ｐ＜０．０５）。结果表明ＣＤ４４Ｖ６表达与胃癌发生发展密切相关，并发生于癌变的早期阶段，检测ＣＤ４４Ｖ６表达将有助于胃癌的早期诊断     

可溶性胃癌抗原和抗CD3单抗共同诱导杀瘤细胞的实验

用盐析法提取胃癌可溶性抗原（ＴＳＡ），并用抗ＣＤ３单抗和ＩＬ－２共同刺激正常人的外周血单核细胞，培养１０天后，经流式细胞仪表型分析，表明其免疫效应细胞以ＣＤ８Ｔ细胞为主，其细胞增殖速度、增殖水平与ＣＤ３ＡＫ和ＬＡＫ相比明显升高，且对其抗原来源的胃癌细胞具有极强的杀伤活性（９８．５％），高于ＣＤ３ＡＫ（８２．１％）和ＬＡＫ（６２．０％）。     

消化系恶性肿瘤脾虚证患者T淋巴细胞亚群分布关系的初步观察

本文采用ＷｕＴ系列单克隆抗体试剂建立的碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）免疫桥法检测了３０例正常人和３６例晚期消化系恶性肿瘤脾虚证患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群，同时测定免疫球蛋白含量。结果表明，晚期肿瘤脾虚证患者不仅总Ｔ（ＣＤ３）细胞降低，ＣＤ４及ＣＤ４／ＣＤ８亦显著降低，ＣＤ８活性显著升高。提示患者细胞免疫功能紊乱，Ｔｓ处于高活性状态，Ｔｈ／Ｔｓ比例失调。而免疫球蛋白含量正常说明肿瘤病人的免疫功能低下主要是以Ｔ细胞改变为主。     

鼻咽癌患者T细胞,巨噬细胞及红细胞免疫功能研究

目的　探讨鼻咽癌患者体内多种免疫效应细胞功能的变化规律及其临床意义。方法　分别采用ＡＰＡＡＰ法、斑蝥皮泡法、免疫粘附法及酶免法检测了２９ 例鼻咽癌患者Ｔ细胞亚群、巨噬细胞吞噬率（ＰＲ）及吞噬指数（ＰＩ）、红细胞免疫粘附功能及血清ｓＩＬ２Ｒ水平,并分析其相互关系。结果　鼻咽癌组病人ＣＤ＋３ 细胞、ＣＤ＋４ 细胞、ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 比值降低、ＣＤ＋８ 细胞升高,与对照组比较有显著差异（Ｐ＜ ０．０１）;鼻咽癌患者ＰＲ与ＰＩ均显著低于对照组（Ｐ＜ ０．０１）;鼻咽癌组红细胞Ｃ３ｂ 受体花环率（Ｃ３ｂ ＲＲ）显著低于对照组（Ｐ＜ ０．０１）,循环免疫复合物花环率（ＩＣＲ）则显著高于对照组（Ｐ＜ ０．０１）;鼻咽癌患者血清ｓＩＬ２Ｒ明显升高。Ⅲ期以上的鼻咽癌患者与Ⅱ期以下组比较上述免疫指标均有显著差异（Ｐ＜ ０．０１）。鼻咽癌组Ｃ３ｂ ＲＲ与ＰＲ及ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ ,ＰＲ与ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 正相关。ｓＩＬ２Ｒ与Ｃ３ｂＲＲ、ＰＲ及ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 均显著相关（Ｐ＜ ０．０５）。结论　鼻咽癌患者多种免疫效应细胞功能下降,并随病情进展,免疫功能进一步下降。对鼻咽癌患者多种免疫效应细胞功能的联合检测有助于了解患者免疫功能的整     

抗表皮生长因子受体与抗CD_3双功能抗体的制备及细胞毒的研究

制备抗ＥＧＦ┐Ｒ与抗ＣＤ３双功能单克隆抗体及其细胞毒的研究方法通过杂交－杂交瘤技术制备双功能单克隆抗体细胞株Ｅｔ２２，并了解其与ＩＬ┐２联合体外激活ＰＢＬｓ细胞对Ａ４３１癌细胞的杀伤活性。结果ＩＬ┐２激活的ＰＢＬｓ和未经ＩＬ┐２刺激培养的ＰＢＬｓ对靶细胞Ａ４３１的杀伤活性，效靶比为２０∶１的条件下，杀伤率分别为４９％，１７％。Ｅｔ２２双功能抗体介导ＩＬ┐２激活的效应细胞杀伤靶细胞（Ａ４３１）为７５％。结论双功能单克隆抗体（ＥＱ７５×ＯＫＴ３）介导ＩＬ┐２激活的效应细胞杀伤靶细胞（Ａ４３１）活性高于两种亲本单抗（ＣＤ３或ＥＱ７５     

CD44v3基因蛋白在恶性卵巢肿瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨ＣＤ４４ｖ３基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达情况及其临床意义。方法用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法,检测４１例恶性卵巢肿瘤、２０例良性卵巢和２１例正常果组织中ＣＤ４４ｖ３基因蛋白的表达情况并分析相关的临床病理因素。结果：１）ＣＤ４４ｖ３表达性率恶性组显著高于良性组和正常组;２）有转移者ＣＤ４４ｖ３阳性率显著高于无转移灶阳阳性率高于原发灶;ＣＤ４４ｖ３阳性表达者近职效比阴性者差;３）ＣＤ４４ｖ３阳     

非小细胞肺癌中3p14的杂合性丢失的研究

目的探讨非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）细胞中３ｐ１４位点等位基因的杂合性丢失（ｌｏｓｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ,ＬＯＨ）与ＮＳＣＬＣ发生及发展之间的相关性。方法采用ＰＣＲ结合二核苷酸重复序列多态性方法并经ＬＯＨ┐银染法检测７４例非小细胞肺癌新鲜手术切除标本。结果７４例ＮＳＣＬＣ组织中３１例出现３ｐ１４ＬＯＨ,总丢失率为４３．２％;其中鳞癌的杂合性丢失为１４例（３８．９％,１４／３６）,腺癌为１３例（４４．８％,１３／２９）,３ｐ１４杂合性丢失在Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ期ＮＳＣＬＣ中分别为３１．６％（６／１９）,４２．９％（９／２１）,４７．４％（１６／３４）,而正常肺组织未见３ｐ１４ＬＯＨ。结论３ｐ１４杂合性丢失普遍出现于ＮＳＣＬＣ中,提示该位点可能存在着一个或多个抑癌基因,因此３ｐ１４丢失可能与肺癌的发生及发展相关