渗漉法提取祖师麻中瑞香素的工艺研究

<正>中草药祖师麻的主要有效成分为瑞香素,具有祛风除湿、舒筋活血等功效,是治疗风湿、类风湿关节炎以及跌打损伤等症的主要有效成分。目前,对祖师麻的主要有效成分瑞香素的提取传统工艺为油煎等方法,对其提取的有效成分及含量有一定的影响。本文在优选渗漉法为提取方法的基础上,通用正交实验最终确定了祖师麻的最佳提取工艺。     

祖师麻总香豆素的理化性质研究

目的考察祖师麻总香豆素的平衡溶解度和油水分配系数等理化常数,及其吸湿性和稳定性。方法采用紫外分光光度法,测定祖师麻总香豆素在不同介质中的平衡溶解度、不同pH条件下的油水分配系数(Papp)、不同湿度条件下平衡吸湿量;以祖师麻总香豆素含量变化率为指标,考察光照、高温和高湿条件对其稳定性的影响。结果祖师麻总香豆素在水、0.1mol.L-1HCL、pH 6.86磷酸缓冲液中的平衡溶解度(48h)分别为1.83mg.mL-1、2.07mg.mL-1、1.17mg.mL-1;祖师麻总香豆素在pH 1.2,2.1,3.5,4.7,5.8,7.4,8.9下的PapP值分别为12.14,11.67,10.98,10.11,9.86,9.12,8.63;祖师麻总香豆素在相对湿度为23%、43%、56%、59%、69%、75%、85%、95%条件下的含水量分别为10.10%、12.57%、15.37%、23.74%、32.98%、45.54%、56.90%、68.14%;祖师麻总香豆素在光照度为4500lx条件下5d和10d的含量变化率分别为99.6%和99.2%;在60℃条件下5d和10d的含量变化率为100.2%和98.5%,在相对湿度为95%的室温条件下5d和10d的含量变化率分别为90.6%和87.9%。结论祖师麻总香豆素的PapP值随着pH增大而减小,具有pH依赖性,表明其亲脂性较强;温度和光照对祖师麻总香豆素的含量和重量影响较小;祖师麻总香豆素的临界相对湿度为59%,在高湿度条件下吸湿明显,因此应在干燥条件下保存。     

祖师麻止痛喷雾剂的制备工艺

目的:研究祖师麻止痛喷雾剂的最佳制备工艺。方法:用家兔的皮肤刺激性试验来评价祖师麻药材提取物的去毒效果;以祖师麻甲素为指标,用正交试验法优化祖师麻的提取工艺;用水蒸气蒸馏法确定丁香、当归、肉桂挥发油的最佳提取时间;考察不同浓度乙醇的溶解效果来确定最佳的成型溶媒。结果:未观察到祖师麻提取物有皮肤刺激性;祖师麻最佳提取工艺为:用13倍量的水提取3次,每次1.5 h;丁香、当归、肉桂挥发油的最佳提取时间分别为:36,28,36 h;80%乙醇为最终成型溶媒。结论:该制备工艺稳定、可行,为祖师麻止痛喷雾剂的制备提供了理论依据。     

促渗剂对后交联祖师麻凝胶贴膏体外经皮渗透影响的研究

目的 考察不同促渗剂对后交联祖师麻凝胶贴膏中药效成分祖师麻甲素体外经皮渗透特性的影响,筛选出其最佳的透皮促渗剂。方法 采用Franz扩散池法,以离体小鼠皮肤和Strat-M™膜为渗透屏障进行体外透皮试验,采用单因素及正交试验法,以祖师麻甲素72 h内单位面积的累积透过量为评价指标,考察冰片、薄荷脑、樟脑对祖师麻甲素的促渗效果。结果 以离体小鼠皮肤和Strat-M™人工膜为透皮屏障时,祖师麻甲素72 h内单位面积的累积透过量分别为33.85,15.96 μg·cm^-2,稳态透皮速率分别为4.451 2,2.394 5 μg·cm^-2·h^-1,增渗倍数分别可达4.255 0,1.746 4。结论 后交联祖师麻凝胶贴膏以1%薄荷脑、1%冰片、2%樟脑联用时促渗效果最佳。     

祖师麻风湿膏对实验性炎症和疼痛的对抗作用

目的观察祖师麻风湿膏的抗炎、镇痛作用,为其临床应用提供实验依据。方法于大鼠右后肢足跖处注入甲醛或蛋清,制备动物急性实验性炎症模型,给大鼠右后肢踝关节以下局部贴敷不同剂量的祖师麻风湿膏,观察其抗炎作用。以机械压痛法和热板法制备动物实验性疼痛模型,观察祖师麻风湿膏的镇痛作用。结果祖师麻风湿膏0.5g和1.0g局部贴敷用药能明显抑制甲醛致大鼠足肿胀作用,对甲醛所致大鼠足跖肿胀的最大抑制率分别为40.4%和42.6%(P<0.01),同剂量的祖师麻风湿膏能显著抑制鸡蛋清致大鼠足跖肿胀度,最大抑制率分别为57.7%(P<0.05)和67.8%(P<0.01)。祖师麻风湿膏0.5g、1.0g贴敷用药均能明显提高大鼠机械性压痛阈值;并使给药后热板法测定的小鼠热痛阈值较给药前显著延长(P<0.05),与对照组给药后的热痛阈值比较显著提高(P<0.05)。结论祖师麻风湿膏对实验性炎症和疼痛具有良好的抗炎、镇痛作用。     

祖师麻定性定量方法的研究

目的 完善祖师麻药材的质量标准.方法 对祖师麻药材的性状和粉末特征进行显微观察及薄层鉴别,采用HPLC法测定祖师麻中祖师麻甲素、紫丁香苷含量.结果 显微观察的粉末组织特征、薄层色谱方法可作为鉴定依据,祖师麻甲素和紫丁香苷分别在0.105 6～3.168 0 mg、0.008 656～0.259 68 mg与其峰面积呈良好线性关系;平均回收率(n=6)分别为92.8％,93.7％.结论 该方法简便、重现性好,可用于祖师麻的质量控制.     

祖师麻巴布剂的质量标准研究

目的建立祖师麻巴布剂的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对祖师麻巴布剂中祖师麻、香附进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对祖师麻巴布剂中瑞香素进行含量测定,色谱柱为ODS-BP(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸(12∶88),流速为1.0ml/min,检测波长为327nm,进样量为20μl。结果在薄层色谱中能检出祖师麻、香附的特征斑点;高效液相色谱法测得瑞香素在10~100μg/ml范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为101.2%,RSD为2.8%。结论本方法简便准确,专属性强,可用于控制该制剂质量。     

祖师麻总香豆素的提取工艺研究

目的 优选祖师麻总香豆素的提取工艺.方法 建立祖师麻总香豆素的紫外分光光度测定方法,采用L9(34)正交设计,对祖师麻总香豆素的提取条件进行优化.结果 方法学考察表明,精密度、稳定性、重现性、回收率等均符合要求;祖师麻总香豆素的最佳提取工艺为10倍量乙醇、回流提取1.5h、提取3次,以此条件提取祖师麻总香豆素的提取率达...     

祖师麻不同提取部位的抗炎镇痛作用研究

目的 研究祖师麻叶与祖师麻皮抗炎镇痛作用.方法 采用二甲苯所致小鼠耳肿胀和大鼠角叉菜胶足肿胀方法,研究祖师麻叶与祖师麻皮的抗炎作用;采用热板法、醋酸扭体法、光照甩尾法,研究祖师麻叶与祖师麻皮的镇痛作用.结果 祖师麻叶与祖师麻皮对小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀均有显著的抑制作用,能明显延长热板所致的小鼠舔后肢的时间,显著减少小鼠扭体反应的次数,显著提高光电引起的痛阈值.结论祖师麻叶与祖师麻皮均具有较强的抗炎、镇痛作用,祖师麻叶作用更强.     

祖师麻质量标准研究

目的 提高祖师麻的质量标准。方法 采用HPLC法测定祖师麻中祖师麻甲素的含量。结果 祖师麻甲素的线性范围在21.0～210μg/ml范围内有良好的线性关系,相关系数为0.9996,加样回收率为100.9％,RSD为1.76％。结论 所建立的方法简便、快速、重现性好、结果可靠、准确,可用于祖师麻的质量标准。     

祖师麻药材鉴别及祖师麻甲素含量的测定

建立祖师麻的TLC鉴别及祖师麻甲素的含量测定方法.采用TLC法鉴别祖师麻,斑点清晰,分离度好,专属性强.采用HPLC法测定祖师麻中祖师麻甲素的含量,色谱柱为shimpack VP-ODS,流动相为甲醇-0.5%醋酸(35∶65),检测波长为327 nm,流速为1.0 mL·min-1,祖师麻甲素在12.23～110.07μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.86%,RSD为1.2%(n=9).建立的方法能有效地控制祖师麻的质量.     

TLC-UV法测定祖师麻熏洗液中祖师麻甲素的含量

目的:建立以TLC-UV法测定祖师麻熏洗液中祖师麻甲素含量的方法。方法:采用硅胶G薄层板,以甲苯-甲酸乙脂-甲酸(5∶4∶1)为展开剂,氨气显色定位分离,用95%乙醇-0.1mol·L-1盐酸(10∶1)洗脱,测定波长为328nm。结果:祖师麻甲素在1.04~5.20mg·mL-1浓度范围内与吸收度呈良好的线性关系(r=0.9999);加样回收率为98.89%,RSD=0.84%。结论:本方法简便、快速、重现性好,可用于祖师麻熏洗液的质量控制。     

祖师麻质量标准研究

目的提高祖师麻的质量标准.方法采用HPLC法测定祖师麻中祖师麻甲素的含量.结果祖师麻甲素的线性范围在21.0～210 μg/ml范围内有良好的线性关系,相关系数为0.9996,加样回收率为100.9%,RSD为1.76%.结论所建立的方法简便、快速、重现性好、结果可靠、准确,可用于祖师麻的质量标准.     

祖师麻基源及化学成分研究概况

目的对中药祖师麻的基源及化学成分进行综述;方法查阅相关文献。结果祖师麻主要来源于瑞香科瑞香属植物黄瑞香(Daphnegiraldii Nitsche)、凹叶瑞香(D.retusa Hemsl)及唐古特瑞香(D.tangutica Maxim)的干燥根皮及茎皮;祖师麻主要含有香豆素类、二萜类、木质素类、黄酮类、蒽醌类等化合物。结论祖师麻药材来源广泛,其中以黄瑞香最为常用;来源不同的祖师麻药材化学成分也有差别。     

高效液相色谱法测定祖师麻叶中祖师麻甲素含量

目的 建立测定祖师麻叶中祖师麻甲素含量的高效液相色谱法.方法 采用Ultrasphere C1s柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4％磷酸(20∶80),流速1.0 mL/min,检测波长为327 nm.结果 祖师麻甲素进样量在0.102 ～0.510μg范围内与峰面积具有良好的线性关系,r =0.999 9;平均加样回收率为99.03％,RSD为1.16％(n=6).结论 所用方法简便、准确,灵敏度高,重现性好,可作为控制祖师麻叶的质量控制方法.     

祖师麻质量标准研究

目的提高祖师麻的质量标准。方法采用HPLC法测定祖师麻中祖师麻甲素的含量。结果祖师麻甲素的线性范围在21．0～210μg／ml范围内有良好的线性关系，相关系数为0．9996，加样回收率为100．9％，RSD为1．76％。结论所建立的方法简便、快速、重现性好、结果可靠、准确，可用于祖师麻的质量标准。     

HPLC法测定祖师麻片中祖师麻甲素的含量

HPLC法测定祖师麻片中祖师麻甲不的含量。选用Kromasil C18柱；流动相为甲醇－0.5%醋酸（30：70）；检测波长为327nm。祖师麻甲素进样量在0.234-2.110μg范围内其峰面积与进样量呈良好的线性关系。回归方程：Y＝761444.8X-81.75，r=1.0000。平均回收率为98.09%（n=10)，RSD＝0.57%。方法简便、准确、重现性好。     

祖师麻去“毒”前后药理作用的比较

祖师麻临床主要用于治疗各类关节和肌肉疼痛,具有止痛消肿作用,常用的制剂有祖师麻关节止痛膏(橡皮膏药)、祖师麻膏药(黑膏药)祖师麻软膏和祖师麻搽剂等,     

祖师麻止痛喷雾剂对豚鼠的长期毒性研究

目的:观察祖师麻止痛喷雾剂对豚鼠的长期毒性,为临床安全用药提供依据。方法:将50只豚鼠随机分为空白对照组、高剂量完整皮肤组、高剂量破损皮肤组、低剂量完整皮肤组、低剂量破损皮肤组,连续给药4周。随时观察记录其一般情况,用药后做血液学及血液生化指标检查,计算脏器系数并进行组织病理学检查。结果:祖师麻止痛喷雾剂各剂量组未见毒性反应,与空白对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),停药后也未见药物延迟性毒性反应。结论:长期给予豚鼠祖师麻止痛喷雾剂无明显毒性,推论临床拟用剂量安全。     

透皮促进剂对祖师麻膏药透皮吸收的影响

目的:筛选祖师麻膏药的透皮促进剂,提高其透皮利用率.方法:采用TP-3扩散池,选择离体大鼠皮肤为渗透屏障,从接收池取样,用HPLC检测法测定样品中瑞香素的含量,比较氮酮、薄荷脑和冰片对祖师麻膏药透皮吸收的影响.结果:4%的氮酮对瑞香素的促渗透作用最强.结论:4%的氮酮明显促进祖师麻膏药中主要有效成分瑞香素的透皮效率.