微小RNA-29a通过沉默信息调节因子2相关酶类1基因调控肝细胞脂肪变性的机制

目的探讨人肝细胞株L02脂肪变性时微小RNA-29a(miR-29a)的表达变化及其靶向沉默信息调节因子2相关酶类1(silent mating type information regulation 2 homolog-1,Sirt1)调节脂肪肝细胞脂肪沉积的机制。方法采用油酸和棕榈酸混合物诱导建立非酒精性脂肪肝细胞模型,验证模型成功后,PCR检测miR-29a和Sirt1的表达变化;生物学预测miR-29a的靶基因;分别转染miR-29a模拟物和抑制剂,过表达miR-29a和抑制miR-29a后再建立人脂肪肝细胞模型。油红O染色观察细胞中脂质蓄积情况并测定甘油三酯含量,荧光定量PCR和免疫印迹法检测Sirt1基因和蛋白表达变化。结果脂肪肝细胞模型组miR-29a相对表达量和甘油三酯含量显著高于对照组(P<0.01),Sirt1相对表达量显著低于对照组(P<0.01);生物学预测Sirt1是miR-29a的靶基因,过表达miR-29a后,细胞内脂滴明显增多,脂肪沉积加重,甘油三酯含量显著增加(P<0.05),细胞中miR-29a的表达显著上调(P<0.01),而Sirt1 mRNA表达显著下调(P<0.05),Sirt1蛋白表达呈下降趋势;与之相反,抑制miR-29a后,细胞中脂滴相对减少,脂肪沉积减轻,甘油三酯含量显著下降(P<0.05),细胞中miR-29a的表达被有效抑制(P<0.01),而Sirt1 mRNA的表达显著上调(P<0.05),Sirt1蛋白表达较对照组呈上升趋势。结论 miR-29a在非酒精性脂肪肝细胞中表达显著上调,miR-29a通过表达上调负调控Sirt1表达从而促进脂肪肝细胞中脂肪沉积。     

miR-29a在胎盘滋养细胞中的功能

目的研究miR-29a对胎盘滋养细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法采用Real-time PCR技术检测miR-29a和MCL1 mRNA的表达情况,CKK-8法检测miR-29a对人绒毛外滋养细胞增殖的影响;流式细胞术检测miR-29a对滋养细胞凋亡的影响。结果过表达miR-29a后人绒毛外滋养细胞的增殖能力降低、凋亡水平增加。Real-time PCR和Western blot结果显示,过表达miR-29a抑制MCL1的mRNA表达,下调MCL1蛋白水平。干扰miR-29a后,人绒毛外滋养细胞的增殖能力升高,凋亡水平降低,并且MCL1的mRNA和蛋白水平升高。结论 miR-29a通过下调MCL1蛋白水平抑制人绒毛外滋养细胞增殖,促进滋养细胞凋亡。     

鱼藤酮下调对BV-2小胶质细胞中Drosha蛋白水平和白介素-1β表达影响的研究

目的在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,观测细胞中Drosha蛋白水平的变化以及相关炎症因子的表达改变。方法在不同浓度及时间的鱼藤酮处理后,用蛋白免疫印迹检测细胞中Drosha的蛋白水平,同时通过荧光定量PCR的方法检测Drosha下游miR-181a及其靶向炎症因子白介素-1β的表达。随后,在使用miRNA mimics补偿miR-181a的水平降低后,进一步观测白介素-1β的表达改变。结果在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,Drosha蛋白水平呈现为浓度和时间依赖地降低,同时,其下游miR-181a的表达水平也被下调,而miR-181a的靶向炎症因子白介素-1β的表达增强。在使用miRNA mimics增加miR-181a的水平后,可抑制白介素-1β的表达增强。结论鱼藤酮在BV-2小胶质细胞通过影响Drosha蛋白及其下游miR-181a的水平,调节白介素-1β的表达。     

唑来膦酸对乏氧骨肉瘤细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

目的研究唑来膦酸在乏氧的环境下对骨肉瘤LM8细胞株缺氧诱导因子1-α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立骨肉瘤细胞体外乏氧培养模型,观察唑来膦酸对骨肉瘤LM8细胞HIF-1α和VEGF表达影响。RT-PCR法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;免疫组化和ELISA法分别检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果与常氧组相比,单纯乏氧组和唑来膦酸乏氧组的HIF-1α mRNA转录水平无明显改变（P〉0．05）;但在乏氧条件下,唑来膦酸能明显抑制HIF-1α蛋白的表达。而唑来膦酸能剂量依赖性抑制乏氧条件下VEGF mRNA及其蛋白表达水平（P〈0．05）。结论在乏氧条件下唑来膦酸能够抑制骨肉瘤LM8细胞HIF-1α蛋白的表达,从而使VEGF mRNA及其蛋白表达水平明显下降。     

内质网应激、miR-375在高糖高脂介导胰岛β细胞凋亡中的作用

目的观察不同糖脂浓度时内质网应激及miR-375表达的改变对大鼠胰岛RINm5F细胞增殖、凋亡的影响。方法RINm5F细胞分别培养在含不同糖脂浓度的培养液中,利用CCK-8法检测细胞的增殖活性,实时荧光定量PCR(qt-PCR)检测内质网应激相关基因XBP-1,CHOP以及miR-375的表达,Western blot检测凋亡基因caspase-3以及CHOP蛋白的表达。结果相同葡萄糖浓度时,随着棕榈酸浓度的增加,内质网应激相关基因XBP-1 mRNA、CHOP mRNA以及miR-375的表达水平增高(P0.05),胰岛β细胞的增殖活性下降(P0.05),Western blot检测可见CHOP及caspase-3蛋白表达均增加。结论在高糖高脂的作用下,内质网应激的诱导及miR-375的增加与胰岛β细胞的凋亡相关。     

燕麦β-葡聚糖对糖尿病大鼠胰岛功能的影响

目的:探讨燕麦β-葡聚糖(Oglu)对四氧嘧啶致糖尿病大鼠(DM)胰岛功能的影响。方法:大鼠腹腔注射四氧嘧啶建立DM模型后灌胃Oglu,剂量200mg/kgbw,连续14d,实验结束后测定大鼠血清胰岛素和C肽含量,并取大鼠胰腺,观测胰岛细胞组织形态学变化、分析胰岛β细胞凋亡和p53、bcl-2基因表达。结果:经Oglu治疗后,DM大鼠血清胰岛素含量(29.34±5.1)和C肽含量(1.89±0.28)较治疗前(16.8±4.9和1.32±0.31)明显增高(P<0.01),胰腺细胞团由1～2个增加到2～4个,且受损胰岛细胞有明显好转迹象;胰岛bcl-2基因表达增强,p53基因表达受抑,同时胰岛β细胞的凋亡进程得到缓解。结论:Oglu对大鼠受损的胰岛细胞有一定修复作用,可促进bcl-2和抑制p53基因表达。     

miRNA200a调控二氧化硅诱导小鼠肺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路的相关基因表达

目的观察过表达miRNA200a（miR-200a）重组慢病毒对二氧化硅（SiO2）诱导的小鼠肺上皮细胞株MLE-12细胞中Wnt/β-catenin信号通路的相关基因表达的影响。方法实验分为SiO2对照组（SiO2）、病毒对照组（SiO2＋Lv-NC）、miR-200a病毒组（SiO2＋Lv-miR-200a组）。各组细胞均用终浓度为200 μg/ml的SiO2刺激,培养18 h后,用实时荧光定量PCR（realtime-PCR）和蛋白免疫印迹技术（western blot）检测各组细胞β-链蛋白（β-catenin）、基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9、T细胞因子4（TCF-4）和细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）mRNA和蛋白表达水平。结果miR-200a病毒组MLE-12细胞的miR-200a表达明显高于SiO2对照组和病毒对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。与SiO2对照组和病毒对照组比较,miR-200a病毒MLE-12细胞的β-catenin、MMP2、MMP9、TCF-4和Cyclin D1 mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。 结论过表达miR-200a能够抑制SiO2诱导的小鼠肺上皮细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达。     

体外培养胰岛干细胞分化为类胰岛样组织的研究

目的观察体外培养的胰岛干细胞是否可以被诱导分化为类胰岛样组织.方法体外培养胰岛干细胞,在胰岛素等外源性复合成分(ITS)诱导分化后,分别进行胰腺上皮干细胞特异性标志物CK-19、胰腺β细胞特异性成分胰岛素和胰腺α细胞特异性成分胰高糖素等的免疫细胞化学染色鉴定.结果体外培养的胰岛干细胞经诱导分化3 d后,在胰岛干细胞集落附近可见散在或成群分布的上皮样细胞,并呈CK-19免疫阳性反应.继续培养2～4周后,上皮样细胞增多,细胞圆形或呈鹅卵石样排列,进一步增生形成类胰岛样组织,其中大多数细胞呈胰岛素免疫反应阳性,少数细胞呈胰高糖素免疫反应阳性.结论体外培养的胰岛干细胞具有向类胰岛样组织分化的潜能,它能分化为胰岛的α细胞和β细胞.     

ODDD调节HSV-TK/GCV对乏氧环境宫颈癌Hela细胞特异杀伤作用的研究

目的:构建一种由氧依赖降解结构域(oxygen dependent degradation domain,ODDD)调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因表达的真核表达载体,观察ODDD能否使HSV-TK/GCV(gancyclo-vir)系统对乏氧环境中的宫颈癌Hela细胞有特异杀伤作用。方法:RT-PCR从Hela细胞中钓取ODDD片段,将PCR产物克隆入荧光报告载体pEGFP-C1,获得质粒pEGFP-ODDD;PCR扩增HSV-TK基因,将其克隆到pEGFP-ODDD和pEGFP-C1的下游,获得重组质粒pEGFP-ODDD-TK及pEGFP-TK。荧光报告载体pEGFP-ODDD转染Hela细胞,24h后应用流式细胞术检测在乏氧(O2浓度为1%)和常氧(O2浓度为21%)环境下细胞中EGFP表达强度。将具有相同转染效率的pEGFP-ODDD-TK和pEGFP-TK的Hela细胞分别予以GCV处理,5天后用MTT法检测GCV对培养细胞的杀伤效果。结果:ODDD序列和HSV-TK序列与预期一致;含有ODDD片段荧光报告载体的Hela细胞在正常氧浓度下EGFP的表达量为11.96%,低于缺氧条件下39.92%;在乏氧环境下,转染pEGFP-ODDD-TK的Hela细胞对GCV的敏感性高于正常氧含量组(P<0.0),而转染pEGFP-TK的Hela细胞在常氧和乏氧环境下对GCV的敏感性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功地构建了含有ODDD序列调控的HSV-TK真核表达载体,ODDD能特异发挥HSV-TK/GCV系统对乏氧环境Hela细胞的杀伤作用。     

基于MXD1蛋白miR-19a调节肺癌细胞增殖与转移的研究

目的了解miR-19a在肺癌患者外周血中的表达情况及不良预后的相关性,进一步探讨miR-19a对肺癌细胞侵袭和转移的影响。方法经miR-19a和miR-19a inhibitor慢病毒颗粒感染建立miR-19a和miR-19a inhibitor的稳定表达非小细胞肺癌细胞系H1299和H460,通过细胞增殖分析试验、侵袭试验、细胞周期检测等,利用荧光定量PCR、Western blot、细胞DNA含量和光散射法分析肺癌细胞株中miR-19a表达水平,并与正常肺黏膜上皮细胞系BEAS-2B的结果作比较。结果 miR-19a在肺癌细胞系中的表达显著高于BEAS-2B,差异有统计学意义;miR-19a能够促进肺癌细胞增殖、浸润转移、并使细胞周期加快,并抑制MXD1基因的表达水平。结论 miR-19a的靶基因MXD1参与了miR-19a促进肺癌细胞增殖和转移过程,miR-19a可通过MXD1参与调节肺癌细胞的增殖、转移能力,影响患者的预后。     

宫颈癌患者血清miR-29a、miR-92a水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清中miR-29a、miR-92a的表达水平及临床意义,为临床诊治提供参考依据。方法选取2016年1月-2017年7月在荆门市中医医院进行手术的宫颈癌患者73例为研究对象(观察组),另选取正常志愿者40人作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测所有对象血清中miR-29a、miR-92a表达水平,采用ROC曲线分析miR-29a、miR-92a对宫颈癌的诊断效能,并分析miR-29a、miR-92a与宫颈癌临床参数的关系。结果与健康对照组相比,宫颈癌组患者血清中miR-29a表达水平明显升高,miR-92a表达水平均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。血清miR-29a、miR-92a诊断宫颈癌ROC曲线下面积分别为0.712、0.653,诊断敏感度分别为81.03%、87.54%。宫颈癌患者血清中miR-29a和miR-92a的表达水平在不同临床分期患者中的差异有统计学意义(P<0.05),而在年龄、肿瘤大小、病理分级及淋巴结有无转移方面的差异无统计学意义(P>0.05)。结论宫颈癌患者血清中miR-29a表达水平均明显下调,miR-92a表达水平均明显上调,推测,miR-29a、miR-92a未来可能为宫颈癌筛查和潜在的监测标志物。     

壬基酚亚慢性染毒对大鼠胰腺结构及功能的影响

目的研究壬基酚对大鼠胰腺的亚慢性毒性作用。方法 32只6周龄雄性SD大鼠随机分为0 mg/kg、20 mg/kg、60 mg/kg和180 mg/kg壬基酚染毒组,每组8只。采用每日灌胃染毒,持续90 d。染毒结束后测定空腹血糖、血清胰岛素、胰高血糖素和胰腺组织内胰岛素浓度;分离胰岛进行胰岛分泌胰岛素实验;采用酶联免疫法检测肝脏组织中肝糖原含量;采用免疫组织化学法观察胰岛面积、胰岛α、β细胞相对容积以及β细胞与α细胞比率。结果与对照组比较,180 mg/kg染毒组大鼠体重减轻,血清胰岛素、胰岛分泌胰岛素及肝糖原水平下降,胰岛面积减小,β细胞相对容积增大,差异具有统计学意义(P0.05)。60 mg/kg染毒组胰高血糖素、胰腺组织内胰岛素、肝糖原升高,差异具有统计学意义(P0.05)。各染毒组空腹血糖水平、α细胞相对容积和β细胞与α细胞比率与对照组相比无明显差异。结论壬基酚能够改变胰岛形态结构,影响胰腺组织的正常分泌功能。     

潜伏结核感染者CD4+T细胞miR-29家族、靶基因IFN-γ的表达及生物信息学分析

目的 探讨潜伏结核感染和活动性肺结核感染对患者外周血CD4+T细胞内miR-29家族及其靶基因IFN-γ表达的影响.方法 于2012年3-12月,在山东省潍坊市某两家医院选取调查对象并分为3组:活动性肺结核组(30例)、潜伏结核感染(LTBI)组(25例)和健康对照组(30名).分离纯化3组受试者外周血中的CD4+T细胞;用核酸杂交与荧光定量PCR检测CD4+T细胞内miR-29a、miR-29b和miR-29c的表达;用定量PCR检测miR-29靶基因IFN-γ的表达;用TargetScan与PicTar联合预测miR-29家族的靶基因;用David数据库和Cytoscape软件对miR-29家族的预测靶基因进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)生物通路富集分析.结果 miR-29a、miR-29b和miR-29c在活动性肺结核组、LTBI组和健康对照组CD4+T细胞中的表达水平均不同(P ＜0.05):miR-29b和miR-29c在活动性肺结核组的表达(561.63±65.36,281.85±42.78)高于健康对照组(260.74±38.69,128.21±19.98),低于LTBI组(2030.29±321.68,620.93±79.14);miR-29a在对照组的表达水平(913.95±104.73)高于活动性结核组(323.37±54.38),低于LTBI组(4782.13±567.81).靶基因IFN-γ在3组之间的表达水平亦不同(P ＜0.05):LTBI组(0.45±0.09)低于健康对照组(1.00),而高于活动性结核组(0.11±0.03).miRNA-29家族的预测靶基因的GO功能富集于细胞外基质结构成分、转录调节活性等分子功能方面;在KEGG的通路数据库中,miR-29家族预测靶基因集合显著富集于局部黏附信号通路、调节细胞骨架与mTOR信号通路等方面.结论 LTBI和活动性结核感染明显增加了患者外周血CD4+T细胞内miR-29家族的表达,降低了其靶基因IFN-γ的表达,从而影响了信号通路等生物学过程.     

miR-29、miR-200a在妊娠期糖尿病者外周血中表达及临床意义

目的:探讨miR-29、miR-200a在妊娠期糖尿病(GDM)患者外周血中的表达特征及临床意义。方法:选取本院接诊的80例GDM患者与80例糖耐量正常孕妇分别作为观察组与对照组,对两组孕妇进行外周血miR-29、miR-200a、miR-375检测,并进行血浆FINS、FPG、2hPG、HbAlc检测。分析miR-29、miR-200a、miR-375与血糖相关指标的相关性。结果:观察组FINS水平低于对照组,FPG、2hPG、HbAlc水平高于对照组(P0.05)。观察组外周血miR-29表达量低于对照组,miR-375、miR-200a表达量均高于对照组(P0.05)。相关性分析显示,miR-29表达与FPG、2hPG、HbAlc均呈正相关,与FINS呈负相关(P0.05);miR-375、miR-200a表达均与FPG、2hPG、HbAlc呈负相关,与FINS呈正相关(P0.05)。结论:外周血中miR-29、miR-200a、miR-375表达与血糖相关指标密切相关,miR-29、miR-200a、miR-375表达异常预示着GDM易感性,临床可通过测定外周血miR-29、miR-375表达为临床早期诊断GDM提供一定的参考依据。     

转化生长因子-β1对α粒子诱发人支气管肺癌细胞miR-200表达影响

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β1及其特异性抑制剂SB431542分别作用于α粒子诱发人支气管上皮细胞系(BEP2D)恶性转化的支气管肺癌细胞RHT35细胞后,miR-200a、-200b、-200c表达的变化.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应检测TGF-β1作用RHT35细胞后miR-200a、-200b、-200c表达的时程变化;同时分析SB431542作用RHT35细胞48h后,miR-200a、-200b、-200c的表达变化.结果 与对照组比较,TGF-f1作用之后,miR-200家族总体下调.对于miR-200a,除72 h外,其余时间点表达上调(P＜0.001);miR-200b在TGF-β1作用之后,144 h下降地最明显(P＜0.05);miR-200c在TGF-β1作用之后,除72 h之外,其余各点均显著下调(P ＜0.001).SB431542作用RHT35细胞48h后,miR-200a、-200b、-200c分别是对照组的1.68(P ＜0.05)、1.86(P ＜0.001)和1.46倍(P＜0.05).结论 TGF-β1及其抑制剂能使RHT35细胞中miR-200家族表达发生变化.     

糖尿病模型胰岛细胞凋亡与多种细胞因子的相关性

目的 探讨糖尿病大鼠模型中胰岛细胞凋亡与胰腺组织多种细胞因子的相关性.方法 Wistar大鼠16只,诱发糖尿病模型,分为2组.正常组和糖尿病组大鼠各8只,各组凋亡检测为6只.统计分析各组大鼠血糖、C反应蛋白、多种细胞因子、以及胰腺组织多种细胞因子mRNA定量和蛋白表达水平的差异.分离胰岛细胞,进一步做细胞凋亡的半定量分析.Person 相关性分析胰岛细胞凋亡与细胞因子的关系.结果 糖尿病组胰腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达和mRNA显著升高(P＜0.05);糖尿病组与正常组的细胞凋亡率比较,差异有统计学意义[(17.52±9.95)％ vs (8.45±2.01)％,P＜0.05].糖尿病组胰腺组织TNF-α蛋白表达和mRNA含量与胰岛细胞凋亡率呈正相关(r=0.45,P=0.02;r=0.44,P=0.00).结论 糖尿病大鼠模型中胰腺组织TNF-α可能直接作用于胰岛细胞凋亡.     

小鼠miR-29c过表达慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建小鼠miR-29c过表达重组慢病毒载体,并对表达产物进行鉴定。方法应用PCR法从小鼠MLE-12细胞中提取pre-miR-29c基因,测序后将其克隆到pLenti-CMV-EGFP慢病毒载体,通过PCR筛选及测序对阳性克隆进行鉴定。将miR-29c过表达慢病毒载体转染至293T细胞,进行慢病毒的包装和滴度测定。以RT-PCR检测慢病毒转染MLE-12细胞中miR-29c的表达量。结果构建miR-29c慢病毒表达载体Lv-miR-29c经PCR和测序鉴定正确,并获得滴度为5.65×108 IU/ml的病毒浓缩液,转染MLE-12细胞后miR-29c基因成功过表达。结论成功构建miR-29c过表达慢病毒载体,为进一步研究miR-29c的功能奠定实验基础。     

丙泊酚调控miR-133a/SOX4表达对结直肠癌HCT116细胞增殖凋亡的影响

目的探讨丙泊酚对结直肠癌HCT116细胞增殖凋亡的影响及其机制。方法以1、5和10μg/mL丙泊酚处理HCT116细胞后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞检测细胞凋亡,real-time PCR检测细胞中miR-133a的表达,Western blot检测细胞中SOX4蛋白的表达。采用双荧光素酶基因报告实验检测miR-133a与SOX4的靶向关系。将HCT116细胞分为对照组、丙泊酚组、丙泊酚+anti-NC组和丙泊酚+anti-miR-133a组,采用脂质体法将miR-133a inhibitor转染至HCT116细胞后,观察miR-133a低表达对10μg/mL丙泊酚作用下HCT116细胞增殖、凋亡和SOX4蛋白表达的影响。结果丙泊酚呈浓度-时间依赖性抑制HCT116细胞增殖,丙泊酚显著促进HCT116细胞凋亡和miR-133a表达并抑制SOX4蛋白的表达,且表现为浓度依赖性。双荧光素酶基因报告实验证实SOX4是miR-133a的靶基因。与对照组相比,丙泊酚组、丙泊酚+anti-miR-NC组和丙泊酚+anti-miR-133a组细胞中miR-133a表达显著升高,而SOX4蛋白的表达水平显著降低,细胞增殖能力显著受到抑制,而细胞凋亡显著增强,差异均有统计学意义(P<0.05);与丙泊酚组相比,丙泊酚+anti-miR-133a组中miR-133a表达水平显著降低,而SOX4蛋白的表达水平显著升高,细胞的增殖能力显著增强,而细胞凋亡能力显著减弱,差异均有统计学意义(P<0.05);而丙泊酚+anti-miR-NC组细胞中miR-133a和SOX4蛋白的表达以及细胞的增殖和凋亡能力均无显著改变,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚可通过调控miR-133a/SOX4表达抑制HCT116细胞增殖并促进细胞凋亡。     

miR-137靶向下调SETD7表达对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激的影响研究

目的探讨miR-137对缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤的作用及其机制。方法心肌细胞H9C2分为空白组、缺氧复氧组、缺氧复氧组+miR-con、缺氧复氧+miR-137组、缺氧复氧+miR-137+pcDNA组、缺氧复氧+miR-137+pcDNA-SETD7组。qPCR检测H9C2细胞中miR-137和SETD7 mRNA表达,Western blot检测SETD7、Cyclin D1、Cleaved Caspase-3蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,比色法检测LDH、MDA水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,TargetScan预测结合双荧光素酶报告实验分析miR-137和SETD7的靶向关系。结果缺氧复氧明显降低H9C2细胞中miR-137、Cyclin D1表达量和细胞存活率(P<0.05),显著提高SETD7 mRNA及蛋白水平、LDH活性、MDA含量、Cleaved Caspase-3蛋白水平和细胞凋亡率(P<0.05)。上调miR-137表达促进缺氧复氧处理H9C2细胞内miR-137、Cyclin D1表达量和细胞存活率(P<0.05),明显降低SETD7蛋白、LDH、MDA、Cleaved Caspase-3水平和细胞凋亡率(P<0.05)。miR-137靶向调控SETD7表达。过表达SETD7部分逆转miR-137保护缺氧复氧处理H9C2细胞的作用。结论 miR-137通过靶向下调SETD7表达来促进缺氧复氧处理的心肌细胞增殖并抑制细胞凋亡,保护缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤。     

前列腺素E2促进RL95-2细胞中整合素αv、β3的表达

目的：探讨外源性前列腺素E2（PGE2）通过影响整合素αv、β3对胚胎黏附率的改变及可能的机制。方法：使用实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）、蛋白质印迹（Western blotting）检测外源性给予PGE2后,RL95-2细胞的整合素αv、β3 mRNA及蛋白表达水平的变化。利用BeWo滋养层细胞和RL95-2上皮细胞株建立子宫内膜-滋养细胞相互作用的体外模型,观察BeWo细胞球在经过不同浓度PGE2预处理的RL95-2上皮细胞单层的黏附效率。结果：200 nmol/L PGE2预处理RL95-2细胞单层后促使整合素αv的mRNA及蛋白表达量比0 nmol/L组增加（均P＜0.05）;100 nmol/L PGE2预处理RL95-2细胞单层后促使整合素β3的mRNA及蛋白表达量比0 nmol/L组增加（均P＜0.05）。200 nmol/L PGE2预处理后BeWo细胞球黏附到RL95-2细胞单层的效率明显提高。结论：适当浓度的PGE2可上调整合素αv、β3的表达,促进胚胎黏附效率。提供了在植入期间促进整合素αv、β3表达的进一步证据,这将有助于阐明通过改善子宫内膜容受性促进胚胎黏附的分子机制。