鱼粉代替谷氨酸生产麦角新碱的研究

在以前工作的基础上,我们进一步采用鲫鱼粉代替谷氨酸生产麦角新碱取得了比较好的效果。 通过试验证明,鲫鱼粉不仅可代替谷氨酸作为氮源,并能促进麦角新碱的形成,其麦角新碱含量比对照高近一倍,且其来源容易,价格低廉。 麦角菌在200l发酵罐内培养,从第四天开始产生麦角碱,发酵至11天麦角碱含量已达最高峰。在发酵过滤液中麦角总生物碱及麦角新碱含量分别为0.0203％及0.0178％,而在菌丝体中分别达到0.1609％及0.0495％。     

从野生小草生产麦角的新方法

本文报道由野生的小叶荩草(Arthraxon lanci-folius Hochst)分离所得的麦角菌株(Clavicepspurpurea)用人工接种感染黑麦(Secale cereale L.)使产生麦角的新方法。实验成功地从每公顷黑麦获得麦角370公斤。所得麦角用比色法测得总生物碱含量为0.5%。以TCL及HPLC对总生物碱进行定性定量分析,结果显示总碱中含麦角新碱(Ergometrine)33%,麦角胺(Ergotamine)17.6%,麦角高碱(Ergocor-     

麦角菌发酵物中生物碱的化学研究

利用麦角菌生物合成制取麦角新碱的方法已推广应用于生产。该菌种在小麦种子培养基上培养以后,除麦角新碱外,根据薄层层离鉴定结果证明还产生三种麦角生物碱。为了利用麦角新碱生产过程中母液里的其他麦角生物碱,并为进一步研究生物合成机制提供资料,必须先对母液中所含麦角生物碱进行分离和鉴定。曾采用无粘合剂的氧化鋁薄层层离法,从母液中分离出了四种生物碱。除麦角新碱外,其余三种生物碱通过薄层层离鉴定;熔点、比旋度测定;紫外吸收光谱、红外吸收光谱和元素分析等分别鉴定,证明为麦角异新碱、麦角生碱和麦角异生碱。     

麦角菌发酵物中生物碱的化学研究

利用麦角菌生物合成制取麦角新碱的方法已推广应用于生产。该菌种在小麦种子培养基上培养以后,除麦角新碱外,根据薄层层离鉴定结果证明还产生三种麦角生物碱。为了利用麦角新碱生产过程中母液里的其他麦角生物碱,并为进一步研究生物合成机制提供资料,必须先对母液中所含麦角生物碱进行分离和鉴定。曾采用无粘合剂的氧化鋁薄层层离法,从母液中分离出了四种生物碱。除麦角新碱外,其余三种生物碱通过薄层层离鉴定;熔点、比旋度测定;紫外吸收光谱、红外吸收光谱和元素分析等分别鉴定,证明为麦角异新碱、麦角生碱和麦角异生碱。     

麦角菌在寄主植物上的接种栽培 Ⅰ.麦角菌 Claviceps microcephala(Wallr.)Tul.及 C.purpurea(Fr.)Tul.不同菌系在麦类上的接种栽培

1957—1959年以麦角菌Claviceps microcephala (Walir.)Tul.的Ce5,Ce5-29-1及Ce5-35-1等3个优良菌系分別在大麦、小麦及黑麦等的23个品种上进行了接种栽培。Ce5菌系在不同麦类上有很强的寄生力,在三种麦类上的穗寄生率,黑麦类較大麦及小麦高,且感染力也强,在黑麦类中冬黑麦又比春黑麦易于感染,三种麦类所产麦角千粒重以黑麦类为高,大麦类及小麦类为低。其麦角千粒重分别为37—76克,25—44克及21—34克。Ce5菌系在不同麦类上所产麦角的含碱量为0.078—0.4%,其中以裸大麦麦角含碱量最高,达0.4%。Ce5-29-1及Ce5-35-3菌系,无論从寄生性或是产碱能力方面来看均不次于原菌系Ce5。白麦角变异菌系Ce5-W亦有較强的寄生性,并可产生一定量的麦角碱。經分析証实Ce5及Ce5-29-1 2个菌系在不同黑麦品种上所形成的麦角中含有极有价值的麦角新碱,其含量分別为0.029—0.036%及0.042%。黑麦麦角菌Claviceps purpurea (Fr.) Tul.的Sc-2-4,Sc-6-2及Sc9-5 3个菌系分別接种在张北等5种黑麦上,其穗寄生率达48—98%;其麦角碱含量最高者不超过0.015%或不含麦角碱。     

薄层层离法在研究天然化合物中的应用 Ⅱ.麦角新碱、麦角胺、麦角毒碱的定量

本文研究了应用无粘合剂氧化鋁薄层层离和光电比色相結合的方法,測定麦角中三种主要生物碱的含量。回收率試驗表明,本方法具有較高的准确性,如麦角新碱的平均回收率为97.3%,标准誤差±1.7%;麦角胺的平均回收率为96.2%,标准誤差±2.2%;麦角毒碱的平均回收率为99.3%,标准誤差±0.9%。加量試驗的結果表明,本方法可以应用于麦角中三种主要生物碱的含量測定。作者用此方法測定了披碱草、老芒麦、高滨麦三种野生麦角和二种麦角菌发酵物中各种麦角生物碱的含量。操作簡便,有机溶剂用量很少。     

麦角单菌核中麦角生物碱的薄层分离及荧光光密度法测定

本文介绍了麦角单菌核中麦角新碱、麦角酰胺、麦角胺及麦角克碱的薄层分离及荧光光密度法定量的分析方法。本法快速、灵敏,检出限度为1×10^-8g,四种生物碱的平均变异系数为6.10%,层离后的薄层斑点避光保存可稳定24小时。本法为探索麦角单个菌核问含麦角生物碱的质和量的变化以及为定向选育菌种提供了可能性。     

麦角菌在寄主植物上的接种栽培 Ⅰ.麦角菌 Claviceps microcephala(Wallr.)Tul.及 C.purpurea(Fr.)Tul.不同菌系在麦类上的接种栽培

1957—1959年以麦角菌Claviceps microcephala (Walir.)Tul.的Ce5,Ce5-29-1及Ce5-35-1等3个优良菌系分別在大麦、小麦及黑麦等的23个品种上进行了接种栽培。 Ce5菌系在不同麦类上有很强的寄生力,在三种麦类上的穗寄生率,黑麦类較大麦及小麦高,且感染力也强,在黑麦类中冬黑麦又比春黑麦易于感染,三种麦类所产麦角千粒重以黑麦类为高,大麦类及小麦类为低。其麦角千粒重分别为37—76克,25—44克及21—34克。 Ce5菌系在不同麦类上所产麦角的含碱量为0.078—0.4％,其中以裸大麦麦角含碱量最高,达0.4％。Ce5-29-1及Ce5-35-3菌系,无論从寄生性或是产碱能力方面来看均不次于原菌系Ce5。白麦角变异菌系Ce5-W亦有較强的寄生性,并可产生一定量的麦角碱。經分析証实Ce5及Ce5-29-1 2个菌系在不同黑麦品种上所形成的麦角中含有极有价值的麦角新碱,其含量分別为0.029—0.036％及0.042％。黑麦麦角菌Claviceps purpurea (Fr.) Tul.的Sc-2-4,Sc-6-2及Sc9-5 3个菌系分別接种在张北等5种黑麦上,其穗寄生率达48—98％;其麦角碱含量最高者不超过0.015％或不含麦角碱。     

分离麦角新碱的新方法

研究了利用离子交换树脂从麦角中分离麦角新碱的方法.用0.05N盐酸溶液从麦角粉末中提取出总生物碱,然后通过离子交换树脂.在6种国产不同交联度的苯乙烯磺酸氢型树脂中,以强酸1—2树脂对酸水提取液中麦角生物碱的交换量最高.酸水提取液的pH以3.5—5.9较为合适.试验证明,采用先碱化树脂,使麦角生物碱游离,再在Soxhlet提取器中用丙酮-乙醚(3:7)或丙酮-氯仿(7∶3)混合溶剂洗脱生物碱的方法,不但可以得到较高的洗脱率,同时节省了有机溶剂.以后利用麦角新碱能与氯仿形成复合结晶,却又难溶于氯仿的特性,可以使麦角新碱与其他麦角生物碱分离.小量试制结果,麦角新碱的收率为60—70%.     

麦角生物碱的层离研究——Ⅲ.麦角生药的纸层离定量

在以前的紙层离工作基础上,拟定出麦角新碱、麦角胺与麦角毒碱的紙层离定量方法。紙用緩冲液、甲酰胺、丙酮的混合液(2:1:1)处理,点上样品后以氯仿扩展。然后根据生物碱位置,或收集氯仿洗胱液,或用稀硫酸浸泡洗下,用对二甲氨基苯甲醛显色后定量。緩冲液之pH值对生物碱移动距离有影响,可改变之以达到不同測定目的。麦角胺与麦角毒碱的回收率分别为93.7%与94.4%。曾用此法分析麦角样品,結果与柱层离法相符合。     

麦角生物硷的层离研究 Ⅰ.我国野生麦角的成分鉴定及麦角新硷的定量

近年来国内发现几种野生麦角,本院药用植物系进行了调查研究,从分怖地区及麦角外部形态方面作了初步报导,为进一步了解和探讨其中生物硷成分及麦角新硷含量,我们用纸屑离法进行研究。一般化学测定法只能测定麦角总硷含量及水溶性生物硷含量,对于个别生物硷无法测定,自1949年Foster应用纸屑离法后,就大大方便了从事研究麦角复杂成分的方法。 Foster用正丁醇、醋酸、及水的混合液作扩展溶剂,把水溶性及水不溶性生物硷在     

麦角菌在黑麦品种上的接种栽培

1957年在北京及哈尔滨以各种野生麦角所分离的不同菌种在张北、佳木斯等9个不同的黑麦品种上进行了接种栽培。春黑麦较冬黑麦的感染力强,春黑麦中又以张北及佳木斯最易感病,对自拂子茅(Calamagnostis epigeios(L)Roth)、披碱草(Clinelymus dahuricus Nevski)、老芒麦(Clinelymus sibiricus(L)Nevski)、黑麦(Secale cereale L.)、高滨麦(Clinelymus excelsus Nevski),及Agropyrum sp.6个不同寄主所分离的菌种亦均感染;公主岭及平鲁黑麦感染性较差.不同菌种中以分离自拂子茅的菌种寄生性最强,侵染所有4个春黑麦品种及一个冬黑麦品种.分离自拂子茅的6个不同菌系中以B₅的寄生性最强,公主岭、张北及佳木斯3个品种对B₅的感染率均在70%以上;B₁次之,3个黑麦品种对B₁的感染率均在50%以上;B₇最差,公主岭及张北黑麦对B₇的感染率为5—10%, 不同接种方法以孢子液注射法效果最佳,侵渍法次之,喷雾法最差。每min³接种液中孢子数目在600—9600间浓度愈高致病力愈强。分离自拂子茅麦角(Claviceps microcephala)的不同菌系在各种黑麦品种上所生的菌核较原寄主上的菌核大34倍.B₁与B₅在不同黑麦品种上所生麦角的含硷量为0.22—0.40%,远较自然条件下所产黑麦麦角(C.purpurea Tul.)的含硷量(0.06%)为高,也超过我国药典所规定0.2%的标准。B₅的产硷能力高于B₁。不同品种中以佳木斯黑麦所产菌核的含硷量较高,公主岭及平鲁次之,张北黑麦的麦角含硷量最低。     

野生麦角调查研究

1957年作者等在华北盛产野生麦角的地区张北及沽源进行了生态因子的调查,并在东北搜集了不同寄主上野生麦角的样本作含硷量的此较分析.张北及沽源禾本科植物对麦角病感染程度由重至轻的顺序为碱草、赖草、大麦草、紫穗大麦草、黑麦、偏穗冰草及披碱草,其平均感染百分数分别为68.48、60.97、60.00、50.00、42.00、14.00及6.59.此外拂子茅亦有轻度感染.大麦、小麦、燕麦及无芒雀麦均未发现感染.野生寄主植物中以赖草和碱草分布最广,其大片单独群落的密度每平方米平均分别为61茎和79茎,披碱草亦有大片羣落,平均密度每平方米为38茎,其他禾草的分布极为零星.估计张北及沽源麦角的年产量至少有12万市斤。张北及沽源盛产野生麦角的生态因子为:(1)有大量的感染寄主,(2)每年积累大量菌源,(3)长期寒冷的冬季,及6、7、8月阴雨气候.麦角形成最盛期为7月下旬至8月上旬,采收最合宜的时期为8月中旬.华北及东北地区各种寄主植物所产麦角含硷量差别很大,由高至低的顺序为:拂子茅(麦角总硷计0.577%),老芒麦(0.44%),披碱草(0.30-0.34%),赖草(0.13-0.15%),碱草(0.115%),黑麦(0.061-0.065%);同一寄主植物在不同地区所产麦角的含硷量差异很少.含硷量的高低与菌核的大小,颜色等关系亦不大.寄生于赖草、碱草、披碱草、老芒麦及黑麦的麦角菌经鉴定均为Clavicepspurpurea,寄生于拂子茅的麦角菌为C.microcephala。     

A Targeted UHPLC-MS/MS Method Validated for the Quantification of Ergot Alkaloids in Cereal-Based Baby Food from the Belgian Market

Following pending new legislation in the European Union setting a maximum of 20 ng g⁻¹ for the total sum of ergot alkaloids in dry cereal-based baby food, a new UHPLC-MS/MS method was developed. It is suitable for the quantification of six ergot alkaloids: Ergocornine, ergocristine, ergometrine, ergosine, ergotamine, α-ergocryptine, and their corresponding epimers. The method is able to reliably detect individual ergot alkaloids at a level as low as 0.5 ng g⁻¹. The method uses a modified QuEChERS extraction approach before UHPLC-MS/MS analysis. The method showed good sensitivity, accuracy, and precision. It has been applied to 49 samples from the Belgian market. In 26 samples, not a single ergot alkaloid was detected while in 23 out of 49 samples at least one ergot alkaloid was detected with 2 samples containing 12 ergot alkaloids. Ergometrine was the alkaloid most frequently detected i.e., 16 out of 49 samples. Only one sample, testing positive for all 12 ergot alkaloids, would be non-conforming to the newly proposed Maximum Residue Level (MRL).     

A new commercial strain of ergot adapted from a wild grass

A strain of CLAVICEPS PURPUREA (F R.) T UL. isolated from ARTHRAXON LANCIFOLIUS H OCHST. was successfully adapted on rye. Experimental cultivation on rye showed 370 kg/ha yield of sclerotia containing 0.5% total alkaloid which consisted of 33% ergometrine, 17.6% ergotamine, 18.7% ergocornine and 22.7% ergokryptine. The results also reveal that alkaloid profile of the ergot strain depends largely on its host. Significantly high yield of the sclerotia and the valuable alkaloid profile of the new strain indicate its commercial potential.     

Cleaving Ergot Alkaloids by Hydrazinolysis—A Promising Approach for a Sum Parameter Screening Method

Ergot alkaloids are mycotoxins formed by fungi of the Claviceps genus, which are some of the most common contaminants of food and feed worldwide. These toxins are a structurally heterogeneous group of compounds, sharing an ergoline backbone. Six structures and their corresponding stereoisomers are typically quantified by either HPLC-FLD or HPLC-MS/MS and the values subsequently summed up to determine the total ergot alkaloid content. For the development of a screening method targeting all ergot alkaloids simultaneously, the alkaloids need to be transferred to one homogeneous structure: a lysergic acid derivative. In this study, two promising cleaving methods—acidic esterification and hydrazinolysis—are compared, using dihydroergocristine as a model compound. While the acidic esterification proved to be unsuitable, due to long reaction times and oxidation sensitivity, hydrazinolysis reached a quantitative yield in 40‒60 min. Parallel workup of several samples is possible. An increasing effect on the reaction rate by the addition of ammonium iodide was demonstrated. Application of hydrazinolysis to a major ergot alkaloid mix solution showed that all ergopeptines were cleaved, but ergometrine/-inine was barely affected. Still, hydrazinolysis is a suitable tool for the development of a sum parameter screening method for ergot alkaloids in food and feed.