窝沟封闭剂Densply的体外细胞毒性研究

目的：研究临床常用的窝沟封闭剂Densply的体外细胞毒性。方法：用细胞培养液浸提窝沟封闭剂Den-sply24h,配置不同浓度的浸提液（0.1～100 mg/mL）,将小鼠成纤维细胞（L-929）在不同浓度的窝沟封闭剂Densply浸提液中分别培养24 h,通过Alamar Blue比色法,检测窝沟封闭剂Densply对L-929细胞相对增殖率（RGR）的影响,评价其细胞毒性。结果：L-929细胞呈现高的细胞增殖率,各浓度窝沟封闭剂Densply浸提液之间差异无显著性意义（P〉0.05）,其细胞毒性为0～1级。结论：高分子交联聚合物聚磷酸酯无明显的细胞毒性,具有较好的生物相容性。     

壳核型n-HA／ZrO2支架材料对L929细胞增殖活性的影响

目的研究核壳型纳米羟基磷灰石包覆二氧化锆（壳核型n-HA／ZrO2）复合生物陶瓷支架材料对L929细胞增殖活性的影响及细胞毒性反应。方法将L929细胞接种于96孔板,随机分为3组进行培养,实验组用壳核型n-HA／ZrO2支架材料浸提液处理,阳性对照组用苯酚溶液,阴性对照组用聚乙烯浸提液,于24、48、72h后观察细胞生长形态,通过MTT比色法检测各组细胞的相对增殖率（relative growth rate,RGR）,按GB／T16175-1996标准评价材料的细胞毒性。结果实验组L929细胞24、48、72h后的RGR随时间延长而升高,分别为95.86％、98.29％和102.73％,与阴性对照组L929细胞在增殖活性方面的差异无统计学意义,两组受试材料细胞毒性评级为0-I级。结论核壳型n-HA／ZrO2支架材料不影响L929细胞的增殖活性,无细胞毒性。     

钴铬钼合金对L929细胞生物学行为的影响

目的：研究牙科用钴铬钼合金对L929细胞生物学行为的影响。方法：制备医用纯钛、钴铬钼合金、钴铬合金、镍铬合金的浸提液,在浸提液与L929细胞作用24 、48 、72 h后,用倒置相差显微镜观察细胞的生长情况,并通过CCK-8实验评定4种材料的细胞毒性;采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI 双染法评价材料对细胞凋亡的影响;应用吖啶橙染色法检测L929细胞在材料表面的黏附情况;采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：倒置相差显微镜下观察,各时间点除镍铬合金组可见少量细胞核固缩,呈现轻微中毒状态外,其余3组细胞生长情况良好;钴铬钼合金组在各时间点的OD值、细胞凋亡率、细胞黏附数量均显著低于医用纯钛组(P<0.05),而高于钴铬合金组 (P<0.05)和镍铬合金组(P<0.05);观察期内,医用纯钛组、钴铬钼合金组、钴铬合金组细胞毒性均为1级,镍铬合金组为2级,表现为轻微毒性。结论：钴铬钼合金对L929细胞的生物学行为无明显不良影响,符合口腔生物材料的临床应用要求,具有良好的生物相容性。     

尼古丁对L-929细胞凋亡与细胞调控蛋白bcl-2和BAX表达的影响

目的探讨尼古丁诱导L-929细胞凋亡及细胞调控蛋白bcl-2和BAX的表达。方法①用不同浓度的尼古丁（1000μg/ml、10μg/ml和0.1μg/ml）作用L-929细胞48h后,采用流式细胞术检测活细胞凋亡率;②不同浓度的尼古丁（10μg/ml、1μg/ml和0.1μg/ml）刺激L-929细胞24h后,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定Bcl-2和BAX的活性。结果①与对照组相比,尼古丁实验组诱导L-929细胞凋亡。浓度越大时,则凋亡率越高。②尼古丁与L-929细胞共同作用后,BAX的活性与正常对照组相比表达上调,而Bcl-2的活性表达下降。结论 bcl-2和BAX参与了尼古丁诱导的L-929细胞凋亡。     

抗菌不锈钢材料的细胞毒性评价研究

目的 评价一种新型抗菌不锈钢材料的细胞毒性,并与商品化的两种正畸材料纯钛和普通不锈钢的细胞毒性进行比较。方法 用倒置相差显微镜观察L-929细胞在普通不锈钢、抗菌不锈钢和纯钛浸提液中的生长情况,用CCK-8试剂盒检测L-929细胞在不同材料浸提液中培养1、2、3d的吸光度,判断细胞毒性的级别。结果 细胞在3种材料的浸提液中均生长旺盛,形态正常。抗菌不锈钢组与普通不锈钢组的吸光度值均低于纯钛组,但2种不锈钢的吸光度值没有统计学差异。细胞毒性分级为1级或0级。结论 抗菌不锈钢材料无明显细胞毒性,符合口腔正畸材料的临床应用标准。     

氟化氨银添加谷胱甘肽后的细胞毒性及对牙齿着色的影响

目的 研究氟化氨银（silver diamine fluoride,SDF）添加谷胱甘肽（Glutathione,GSH）涂于牙齿后的细胞毒性及对牙本质着色的影响。方法 45个离体牙分成SDF组、SDF+20% GSH和空白组3组。每组15个样本,将暴露牙本质面涂药后,用电脑比色仪采集涂药后1 h、1 d、1周和1个月4个不同时间点的牙本质颜色值; CCK-8试剂盒评定SDF加20% GSH后对L929细胞毒性影响;将3组不同药物配制成适宜浓度培养L929细胞,最后用酶标仪检测吸光度值;倒置相差显微镜观察细胞生长形态。结果 电脑比色仪结果显示SDF组颜色改变最明显,且随时间延长着色明显加深,SDF+GSH组在各时间段可以明显降低牙釉质的着色程度,空白组各时间均未见牙齿颜色的改变;细胞毒性实验显示： 3组均没有细胞毒性作用。结论 SDF添加GSH涂于牙齿后可以降低牙本质着色,同时对L929细胞生长没有影响。     

控释性可注射牙槽骨修复材料中小分子单体的体外细胞毒性研究

目的：研究控释性可注射牙槽骨修复材料中小分子单体的体外细胞毒性。方法：用细胞培养液分别浸提4种小分子单体NVP、NMP、BPO、DMT 30 min和24h,配置成不同浓度的浸提液（0.1～100mg/ml）,将小鼠成纤维细胞（L-929）在浸提液中分别培养24h,通过Alamar Blue比色法,检测4种小分子单体对L-929细胞相对增值率的影响,评价其细胞毒性。结果：种小分子单体的细胞毒性均与时间及浓度有密切关系,浸提时间越长、浸提液浓度越高,其细4胞毒性越强。结论：控释性可注射牙槽骨修复材料中小分子单体的细胞毒性需受到重视,研制时应采取措施提高其生物相容性。     

六种纳米载银无机抗菌剂的体外细胞毒性比较

目的通过分析6种纳米载银无机抗菌剂不同浓度稀释液的体外细胞毒性，初步评价纳米载银无机抗菌剂的生物安全性。方法将载银磷酸锆（FUMAT T200-4）、载银磷酸复盐（HN300）、载银氢氧化钠锆（Novaron）、载银磷酸锆（康旺）、载银二氧化硅（MOD）、载银磷酸锆（SR1000）配置成100、50、25、12．5g/L 4种不同质量浓度的稀释液，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测各浓度稀释液对小鼠成纤维细胞L-929的体外细胞毒性并进行比较。结果6种纳米载银无机抗菌剂的高浓度稀释液对小鼠成纤维细胞L-929均有毒性，随着浓度下降，细胞毒性亦下降，当浓度≤25g／L时已无毒性。对6种纳米载银无机抗菌剂的体外细胞毒性进行比较，结果显示其安全性为FUMAT T200-4、康旺、SR1000〉HN300〉Novaron、MOD。结论纳米载银无机抗菌剂FUMAT T200-4、康旺及SR1000的生物安全性较好，具有作为口腔材料应用的可行性。在应用时，其浓度应≤25g／L，以确保对人体的安全性。     

铁镍软磁合金细胞毒性研究

目的探讨铁镍软磁合金应用于临床的生物安全性。 方法将5种材料（纯钛、铁镍合金、电镀Cr⁶⁺的铁镍合金、钴铬合金、PVC）制成2 cm × 2 cm × 0.2 cm的方块,消毒灭菌后制取材料浸提液。取5块无菌96孔板,每孔加入100 μl浓度为6 × 10⁴个/ml对数生长期L-929细胞悬液,贴壁生长24 h后置换各组材料浸提液。培养1、2、3、4、5 d后各取出1块板,于倒置显微镜下观察各组细胞形态和贴壁情况,然后向每孔加入10 μl CCK-8试剂,避光培养1.5 h后用酶标仪测定各孔吸光度（A）值。利用各组之间A值计算细胞相对增殖率（RGR）,并对各组实验材料细胞毒性进行分级评价。 结果在倒置显微镜下,除PVC出现大量细胞溶解、固缩外,其余各组细胞均形态正常、贴壁生长良好。根据各组材料细胞RGR进行毒性分级可知,除外PVC组为3级,其余各实验组材料毒性级别均为0~1级,可以应用于人体。 结论铁镍合金原样和电镀Cr⁶⁺后的细胞毒性均在安全范围。     

纳米羟基磷灰石-氧化锆复合陶瓷体外细胞毒性研究

目的:为今后将纳米羟基磷灰石-氧化锆复合陶瓷应用于口腔种植修复,先对该材料进行体外细胞毒性试验,评价其初步生物安全性.方法:体外培养L929小鼠成纤维细胞用不同材料的浸提液培养1、4、7天,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;用四氮唑盐比色法(MTT)检测,计算细胞相对增殖度,用六级毒性分类法评级.结果:培养期细胞贴壁生长,形态良好,随着培养天数增加细胞大量增殖,毒级为0～1级.结论:初步证实了该材料具有人体应用的生物安全基础,无细胞毒性.     

根管桩用石英纤维复合材料及其树脂基体的细胞毒性研究

目的：研究白行研制的根管桩用复合材料及其环氧树脂基体的体外细胞毒性，以初步评价材料的生物安全性。方法：采用四唑盐比色法（MTT法），分别用50％和100％的石英纤维复合材料以及50％和100％环氧树脂的浸提液培养小鼠成纤维细胞L-929细胞2d、4d、7d后，测定吸光度值（OD值），并计算细胞相对增殖率，以6级毒性分类法评级，采用单因素方差分析法对各实验组及对照组的OD值进行统计学分析，显微镜观察细胞的生长状况。结果：各观察期细胞生长良好，形态正常，复合材料及其环氧树脂基体的细胞毒级为0—1级。结论：自行研制的根管桩用复合材料及其树脂基体无细胞毒性。     

镍离子对小鼠成纤维细胞毒性的实验研究

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Evaluation of cytotoxicity of two root canal filling materials by MTT assay

The aim of this study was to assess the cytotoxicity of two root filling materials GuttaFlow (GF) and gutta-percha (GP) on mouse fibroblasts cell line L-929. In this study there were four groups: GP and GF were considered as study groups and the other two were negative control groups. GP and GF were prepared according to manufacturer's instruction. L-929 fibroblast cells of mouse were passaged with trypsin (Merck, Germany) after elimination of freeze phase. Adequate trypsin was added to cells and they were prepared with 95% of cell vitality. After 24 h, 150 000 cells were put in each well. The cell and dimethyl methacrylate were used as negative and positive controls. Ten specimens from each group were brought into contact with the culture medium and were incubated under sterilised conditions 24 h later. The cytotoxicity of all samples was assessed by dimethylthiazol diphenyltetrazolium bromide test after 1 h, 24 h and 72 h. The results showed that cytotoxicity of GF was less than GP when assessed at 24 h and 72 h, but there was no significant difference at 1 h. In GF, the most and least cytotoxicity were observed at 24 h and 72 h while cytotoxicity of GP increased with time.     

控释性可注射牙槽骨修复材料聚磷酸酯的体外细胞毒性研究

目的:研究控释性可注射牙槽骨修复材料聚磷酸酯交联物的体外细胞毒性.方法:用细胞培养液浸提聚磷酸酯24 h,配置不同浓度的聚磷酸酯浸提液 (0.1～100 mg/mL),将小鼠成纤维细胞(L-929)在不同浓度的聚磷酸酯浸提液中分别培养24 h,通过MTT比色法和Alamar Blue比色法,检测聚磷酸酯对L-929细胞相对增值率的影响,评价其细胞毒性.结果:两种测定方法均呈现高的细胞增值率,各浓度聚磷酸酯交联物浸提液之间差异无显著性意义(P>0.05),其细胞毒性为0～1级.结论:高分子交联聚合物聚磷酸酯无明显的细胞毒性,具有较好的生物相容性.     

不同镀膜钕铁硼磁体细胞毒性的体外实验研究

目的：比较不同镀膜钕铁硼磁体对L929小鼠成纤维细胞的增殖及凋亡的影响,以评价其细胞毒性。方法：制备100%、50%、25%这3种浓度未镀膜钕铁硼磁体,氮化钛（TiN）镀膜钕铁硼磁体,类金刚石（DLC）镀膜钕铁硼磁体浸提液。以上述9组浸提液和阴性对照液,阳性对照液分别进行L929小鼠成纤维细胞培养后以MTT法检测各组细胞相对增殖率。采用流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染法检测不同镀膜磁体组中正常活细胞和凋亡细胞数量差异。结果：MTT结果显示TiN组、DLC组、未镀膜组、阳性对照组的细胞毒性分别为1级,0～1级,2级,4级。流式细胞仪散点图显示,空白对照组中以正常活细胞为主;DLC组和TiN组中主要为正常细胞和早期凋亡细胞;未镀膜组中主要为早期凋亡和晚期凋亡、坏死细胞。结论：未镀膜钕铁硼磁体具有一定的细胞毒性,TiN镀膜和DLC镀膜磁体的细胞毒性符合细胞毒性测验制定的安全标准。     

超顺磁性氧化铁纳米粒子标记羊骨髓间充质干细胞的体外实验研究

目的：探究超顺磁性氧化铁纳米粒子体外标记羊骨髓间充质干细胞的最佳方案,进行磁共振扫描,观察与三维打印组织工程骨支架复合培养的效果。方法：取超顺磁性氧化铁纳米粒子与多聚左旋赖氨酸的复合物标记第3代羊骨髓间充干细胞,将两者（各mg/L）按配比分为4组,A组：25：0.75、B组：50：1.5、C组：100：3和D组：200：6,分别在4h、24h和48h检测细胞标记阳性率、存活率和增殖活力,选最佳方案组进行磁共振成像、观察细胞内外粒子分布并与支架复合培养。结果：A组、B组细胞标记24h和48h普鲁士蓝染色阳性率最高,均达100%,细胞外未见纳米粒子聚集块形成;A组细胞标记4h、24h细胞存活率最高,与对照组差异无统计学意义;4组纳米粒子标记不同时间均未影响细胞增殖活力;在3.0T磁共振成像下至少可检测到A组5×103个细胞;纳米粒子分布于胞浆内、可与支架有效粘附。结论：超顺磁性氧化铁纳米粒子与多聚左旋赖氨酸配比为25：0.75（mg/L）时,标记第3代羊骨髓间充质干细胞24h为最佳方案,可粘附于三维打印组织工程骨支架表面。