干扰素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜防止椎板切除后的硬膜外瘢痕粘连

背景:应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除后硬膜外瘢痕粘连的一种方法,而制备既有机械阻隔能力,又有抑制成纤维细胞的能力的复合膜是其中一个重要的研究方向.目的:制备壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]与干扰素/PLGA复合膜,观察其防止兔椎板切除后硬膜外瘢痕粘连的作用.方法:大耳白兔120只行L2椎板切除,随机分为6组:对照组硬膜外不放任何物质;自体游离脂肪移植组取皮下脂肪贴于硬膜表面;透明质酸钠组将透明质酸钠1 mL 滴于硬膜外;PLGA膜组、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜组,分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外.术后2,4,6,8 周处死动物,观察L2术区的瘢痕形成及与硬膜粘连的情况并评分.术后4周,透射电镜下观察成纤维细胞的超微结构.结果与结论:随着时间的延长,对照组形成较广泛的瘢痕.游离脂肪组和PLGA膜组的瘢痕量少于对照组.透明质酸组早期瘢痕形成量明显少于自体游离脂肪组和PLGA膜组,后期无显著性差异,但优于对照组.壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/PLGA膜组硬膜外瘢痕的形成量最少,与硬膜无或轻微粘连,其作用明显优于其他各组,但两种复合膜组间差异不明显.术后4周,对照组、游离脂肪组和PLGA膜组的成纤维细胞的状态和功能明显好于壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/ PLGA膜组.壳聚糖/PLGA复合膜与干扰素/ PLGA复合膜是预防椎板切除后硬膜外瘢痕粘连的有效材料.     

干扰素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的实验

背景: 应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的一种方法,而制备既有机械阻隔能力,又有抑制成纤维细胞的能力的复合膜是其研究方向.目的: 制备壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly (lactic-co-glycolic acid), FLGA]与干扰素/PLGA复合膜,观察其防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的作用.设计、时间及地点: 2005-05/2007-04在中科院长春应用化学研究所完成材料制备,随机对照动物实验在解放军第〇八医院实验动物室完成.材料: PLGA膜、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜由中科院长春应用化学研究所制备.方法: 大耳白兔120只行L2及L4椎板切除,随机分为6组,每组20只,于椎板缺损区处理如下:①空白对照组:硬膜外不放任何物质.②自体游离脂肪组:取皮下脂肪贴于硬膜表面.③透明质酸钠组:透明质酸钠1mL涂于硬膜外.④PLGA膜组、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜组:分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外.主要观察指标: 术后2,4,6,8周处死动物,观察L2手术区硬膜外瘢痕形成及粘连程度并评分,然后完整取下L4节段脊柱,行苏木精-伊红染色及Masson染色,光镜下观察并行组织学评分.结果: 随着时间的延长,空白对照组形成较广泛的瘢痕;自体游离脂肪组和PLGA膜组的瘢痕量少于对照组,前两者比较差异无显著性;透明质酸组早期瘢痕形成量明显少于自体游离脂肪组和PLGA膜组,后期差异无显著性,但仍优于空白对照组:壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/PLGA膜组硬膜外瘢痕的形成量最少,与硬膜无或轻微粘连,明显优于其他各组,两种复合膜组间差异不明显.结论: 壳聚糖/PLGA与干扰素/PLGA复合膜均可预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连,效果相近.     

干扰素／聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚耕聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的实验

背景：应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的一种方法，而制备既有机械阻隔能力，又有抑制成纤维细胞的能力的复合膜是其研究方向。 目的：制备壳聚糖／聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly（lactic—co—glycolic acid），PLGA]与干扰素／PLGA复合膜，观察其防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的作用。 设计、时间及地点：2005—05／2007—04在中科院长春应用化学研究所完成材料制备，随机对照动物实验在解放军第二○八医院实验动物室完成。 材料：PLGA膜、壳聚糖／PLGA及干扰素／PLGA复合膜由中科院长春应用化学研究所制备。 方法：大耳白兔120只行L2及L4椎板切除，随机分为6组，每组20只，于椎板缺损区处理如下：①空白对照组：硬膜外不放任何物质。②自体游离脂肪组：取皮下脂肪贴于硬膜表面。③透明质酸钠组：透明质酸钠1mL涂于硬膜外。④PLGA膜组、壳聚糖／PLGA及干扰素／PLGA复合膜组：分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外。 主要观察指标：术后2，4，6，8周处死动物，观察L2手术区硬膜外瘢痕形成及粘连程度并评分，然后完整取下L4节段脊柱，行苏木精-伊红染色及Masson染色，光镜下观察并行组织学评分。 结果：随着时间的延长，空白对照组形成较广泛的瘢痕；自体游离脂肪组和PLGA膜组的瘢痕量少于对照组，前两者比较差异无显著性：透明质酸组早期瘢痕形成量明显少于自体游离脂肪组和PLGA膜组，后期差异无显著性，但仍优于空白对照组；壳聚糖／PLGA膜组与干扰素／PLGA膜组硬膜外瘢痕的形成量最少，与硬膜无或轻微粘连，明显优于其他各组，两种复合膜组间差异不明显。 结论：壳聚糖／PLGA与干扰素／PLGA复合膜均可预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连，效果相近。     

干扰素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜对椎板切除后脊髓c-fos表达的影响

背景：应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的一种方法,而制备既有机械阻隔能力,又有抑制成纤维细胞能力的复合膜是其研究方向。目的：制备壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物（poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA）与干扰素/PLGA复合膜,观察其减少脊髓伤害性刺激因子c-fos表达的作用。设计、时间及地点：2005-05/2007-04在中科院长春应用化学研究所完成材料制备,随机对照动物实验在解放军第二○八医院实验动物室完成。材料：PLGA膜、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜由中科院长春应用化学研究所制备。方法：大耳白兔120只行L2及L4椎板切除,然后随机分为6组,每组20只,于椎板缺损区处理如下：①空白对照组：硬膜外不放任何物质。②自体游离脂肪组：取皮下脂肪贴于硬膜表面。③透明质酸钠组：透明质酸钠1mL涂于硬膜外。④PLGA膜组、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜组：分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外。主要观察指标：术后2,4,6,8周处死动物,取L1～2节段脊髓,对L2脊髓横切片并行免疫组化染色,显微镜下观察并计数Fos样免疫反应阳性细胞。结果：脊髓内有c-fos的表达,随时间的增长,其表达量逐渐增多,主要在脊髓背角浅层;实验各组Fos样免疫反应阳性细胞计数均低于空白对照组（P〈0.01）,晚期以壳聚糖/PLGA复合膜及IFN/PLGA复合膜组的表达量少,与其他组比较差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：壳聚糖/PLGA与干扰素/PLGA复合膜可减少椎板切除术后脊髓c-fos的表达。     

自体脂肪颗粒与尿激酶联合应用预防硬膜外粘连

背景：椎板切除后,易发生硬膜外粘连。术后在硬膜外单独应用1种药品或隔离物,效果不甚理想。目的：观察自体脂肪颗粒与尿激酶联合应用预防椎板切除后硬膜外粘连的效果。方法：64只成年新西兰兔随机分为模型组、尿激酶组、自体脂肪颗粒组、尿激酶＋自体脂肪颗粒组,各16只。手术切除L5椎板造成12mm×5mm硬脊膜裸露区,探查神经根。模型组注入生理盐水,尿激酶组注入尿激酶（25U/kg）,自体脂肪颗粒组用自体游离脂肪颗粒覆盖,尿激酶＋自体脂肪颗粒组用尿激酶（25U/kg）注入后再用自体游离脂肪颗粒覆盖。术后2,4周行大体观察及组织学观察,6周时行硬膜外瘢痕面积定量分析。结果与结论：模型组椎板切除部位明显粘连,尿激酶组、自体脂肪颗粒组轻度粘连,尿激酶＋自体脂肪颗粒组无明显粘连。尿激酶组、自体脂肪颗粒组、尿激酶＋自体脂肪颗粒组成纤维细胞数显著低于模型组（P〈0.05）,尿激酶＋自体脂肪颗粒组成纤维细胞数低于尿激酶组、自体脂肪颗粒组（P〈0.05）。自体脂肪颗粒组、尿激酶＋自体脂肪颗粒组瘢痕面积显著低于模型组、尿激酶组（P〈0.05）,尿激酶＋自体脂肪颗粒组瘢痕面积低于自体脂肪颗粒组。提示脂肪颗粒及尿激酶联合应用对预防椎板切除后硬膜外粘连具有协同作用,效果显著。     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工硬脊膜在兔脊髓损伤模型中的应用

背景：自体组织、异体组织、动物来源的硬脊膜替代材料都难达到降低脊髓损伤后致残率与致死率的修复结果。目的：观察聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工硬脊膜修复大白兔脊髓损伤的疗效。方法：70新西兰大白兔随机分为4组：假手术组（n=10）：单纯切除椎板,不损伤脊髓;模型组（n=20）：脊髓损伤硬脊膜缺损后未进行修复;壳聚糖组（n=20）：脊髓损伤硬脊膜缺损处植入壳聚糖人工硬脊膜;复合膜组（n=20）：脊髓损伤硬脊膜缺损处植入聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工复合膜。结果与结论：脊髓损伤24h后,壳聚糖组和复合膜组运动功能评分均明显高于模型组（P〈0.01）,复合膜组运动功能评分高于壳聚糖组（P〈0.05）。脊髓损伤之后潜伏期均有明显延长,模型组、壳聚糖组、复合膜组潜伏期明显高于假手术组,在6h各组潜伏期有明显增加,在24h左右到达高峰,而后开始逐渐下降,脊髓损伤2d后模型组、壳聚糖组、复合膜组潜伏期差异无显著性意义。各组细胞凋亡率均大于假手术组（P〈0.05）,损伤后6,24h壳聚糖组和复合膜组细胞凋亡率均明显低于模型组（P〈0.05）。结果提示在大白兔脊髓损伤模型中应用聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工硬脊膜有利于脊髓损伤恢复。     

持续闭式灌洗预防椎板切除后硬膜粘连

目的 观察持续闭式灌洗预防椎板切除后硬膜粘连的效果。方法 选成年健康新西兰大白兔 30 只,每只兔的背部做两处切口,分别切除L2 和L6 棘突、椎板,显露硬膜囊,其中一处直接缝合,作为对照组;另一处持续灌洗 72 h,作为冲洗组。术后4周、8周、12周取样行大体和光镜检查,12周样本增加透射电镜检查及计算机图像分析。结果 术后 4 周和 8 周样本见对照组硬膜外腔被大量瘢痕组织填充,直达肌筋膜层,瘢痕与硬膜及周围肌肉组织粘连紧密,难以剥离;冲洗组见硬膜与肌肉之间为膜性物、浸润脂肪或少量瘢痕,与硬膜无粘连或部分粘连,易于钝性分离。术后 12 周样本见对照组硬膜外瘢痕致密而广泛,与硬膜紧密粘连,难以区分;冲洗组硬膜外瘢痕形成少而疏松,与硬膜轻度粘连或无粘连,与对照组存在显著性差异( P <0.05)。透射电镜下见,对照组硬膜外组织为致密瘢痕组织;冲洗组主要为脂肪组织,脂肪细胞间夹杂少量胶原纤维。结论 兔椎板切除后持续生理盐水灌洗72 h可有效防止硬膜粘连     

聚乳酸-聚乙醇酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖复合人工硬脊膜的生物相容性

背景：聚乳酸-聚乙醇酸共聚物（poly-D,L-lactic-co-glycolic acid,PLGA）具有可吸收、细胞毒性小及硬度可调性的特点,符合作为人工硬脊膜材料的基本条件。但由于PLGA的表面缺乏功能性基团,生物相容性难以达到满意的要求。目的：通过加入Ⅰ型胶原和壳聚糖对PLGA进行表面改性,观察其作为人工硬脊膜材料的生物相容性。设计、时间及地点：对比观察实验,于2007-05/12在上海中医药大学生化与分子生物学实验室完成。材料：多孔PLGA膜由济南岱罡生物科技有限公司提供,Ⅰ型胶原蛋白由美国Sigma公司提供,壳聚糖由上海其胜生物制剂医疗器械公司提供,L929小鼠成纤维细胞由中国科学院上海生命科学院细胞所提供。方法：制作多孔PLGA膜、PLGA/Ⅰ型胶原复合膜（简称PG膜）、PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖（9∶1）复合膜（简称PGC9∶1膜）、PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖（5∶5）复合膜（简称PGC5∶5膜）。主要观察指标：各膜接触角、吸水率测定。L929小鼠成纤维细胞体外培养1,3,7d后纤维镜下观察细胞形态变化,并采用MTT法测定细胞毒性。结果：接触角分别为：PG膜0.05）。第3,7天,多孔PLGA膜与PG膜、PGC9∶1膜各组间,PGC9∶1膜与PGC5∶5膜组间差异有显著性意义（P〈0.05）。PGC9∶1膜可进一步改善复合膜的细胞黏附及增殖,PGC5∶5膜可抑制细胞增殖与分化。结论：PLGA膜的表面复合Ⅰ型胶原和壳聚糖可提高复合膜的生物相容性;PLGA/Ⅰ型胶原/壳聚糖（9∶1）复合膜在生物相容性方面基本符合人工硬脊膜的材料要求。     

自体脂肪颗粒与尿激酶联合应用预防硬膜外粘连

背景:椎板切除后,易发生硬膜外粘连。术后在硬膜外单独应用1种药品或隔离物,效果不甚理想。目的:观察自体脂肪颗粒与尿激酶联合应用预防椎板切除后硬膜外粘连的效果。方法:64只成年新西兰兔随机分为模型组、尿激酶组、自体脂肪颗粒组、尿激酶+自体脂肪颗粒组,各16只。手术切除L5椎板造成12mm×5mm硬脊膜裸露区,探查神经根。模型组注入生理盐水,尿激酶组注入尿激酶(25U/kg),自体脂肪颗粒组用自体游离脂肪颗粒覆盖,尿激酶+自体脂肪颗粒组用尿激酶(25U/kg)注入后再用自体游离脂肪颗粒覆盖。术后2,4周行大体观察及组织学观察,6周时行硬膜外瘢痕面积定量分析。结果与结论:模型组椎板切除部位明显粘连,尿激酶组、自体脂肪颗粒组轻度粘连,尿激酶+自体脂肪颗粒组无明显粘连。尿激酶组、自体脂肪颗粒组、尿激酶+自体脂肪颗粒组成纤维细胞数显著低于模型组(P<0.05),尿激酶+自体脂肪颗粒组成纤维细胞数低于尿激酶组、自体脂肪颗粒组(P<0.05)。自体脂肪颗粒组、尿激酶+自体脂肪颗粒组瘢痕面积显著低于模型组、尿激酶组(P<0.05),尿激酶+自体脂肪颗粒组瘢痕面积低于自体脂肪颗粒组。提示脂肪颗粒及尿激酶联合应用对预防椎板切除后硬膜外粘连具有协同作用,效果显著。     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工硬脊膜在兔脊髓损伤模型中的应用

背景:自体组织、异体组织、动物来源的硬脊膜替代材料都难达到降低脊髓损伤后致残率与致死率的修复结果.目的:观察聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工硬脊膜修复大白兔脊髓损伤的疗效.方法:70 新西兰大白兔随机分为4 组:假手术组(n=10):单纯切除椎板,不损伤脊髓;模型组(n=20):脊髓损伤硬脊膜缺损后未进行修复;壳聚糖组(n=20):脊髓损伤硬脊膜缺损处植入壳聚糖人工硬脊膜;复合膜组(n=20):脊髓损伤硬脊膜缺损处植入聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工复合膜.结果与结论:脊髓损伤24 h 后,壳聚糖组和复合膜组运动功能评分均明显高于模型组(P<0.01),复合膜组运动功能评分高于壳聚糖组(P<0.05).脊髓损伤之后潜伏期均有明显延长,模型组、壳聚糖组、复合膜组潜伏期明显高于假手术组,在6 h 各组潜伏期有明显增加,在24 h 左右到达高峰,而后开始逐渐下降,脊髓损伤2 d 后模型组、壳聚糖组、复合膜组潜伏期差异无显著性意义.各组细胞凋亡率均大于假手术组(P<0.05),损伤后6,24 h 壳聚糖组和复合膜组细胞凋亡率均明显低于模型组(P<0.05).结果提示在大白兔脊髓损伤模型中应用聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原/壳聚糖人工硬脊膜有利于脊髓损伤恢复.     

持续闭式灌洗及灌洗后给药预防椎板切除后硬膜外瘢痕粘连

目的:目前的研究表明:粘连是导致下腰椎手术失败的重要原因,并且对粘连造成的手术失败,其二次手术的效果不佳.因此如何防止下腰椎手术术后粘连,提高脊柱功能,成为困扰临床医师的难题.为此探讨持续闭式灌洗及灌洗后给药对椎板切除后硬膜粘连的预防作用及其效果.方法:实验于2001-08/2002-08在大连医科大学第二临床学院骨科实验室完成.选用成年健康新西兰大白兔30只,采用自身对照,每只兔的背部3处切口,分别切除L1,L4,L7棘突、椎板,显露硬膜囊.其中一处直接缝合,作为对照组.另两处持续灌洗72 h后,随机选一处在拔管前注入透明质酸钠与确炎舒松A的合剂作为给药组,剩余的一处作为冲洗组.术后4,8,12周分批取材,4周和8周的标本只行大体和光镜检查;12周的标本行大体、光镜、透射电镜检查及计算机图像分析.光镜检查采用苏木精-伊红(HE)染色和Massion染色.结果:术后4周和8周时大体及光镜检查见对照组硬膜外腔被大量瘢痕组织填充,直达肌筋膜层;瘢痕与硬膜及周围肌肉组织粘连紧密,难以剥离;冲洗组和给药组见硬膜与肌肉之间为膜性物、浸润脂肪或少量瘢痕,与硬膜无粘连或部分粘连,易于钝性分离.术后12周大体及光镜检查见对照组硬膜外瘢痕致密而广泛,与硬膜紧密粘连,难以区分;冲洗组和给药组硬膜外瘢痕形成少而疏松,与硬膜轻度粘连或无粘连.分别按Rydell、改良Nussbaum标准分级,并进行计算机图像分析,经统计分析显示:冲洗组和给药组与对照组之间差异显(P＜0.05),给药组的防粘连效果优于冲洗组(P＜0.05).透射电镜下见,对照组硬膜外组织为致密瘢痕组织;冲洗组和给药组硬膜外组织主要为脂肪组织,脂肪细胞之间夹杂少量胶原纤维.结论:兔椎板切除后持续生理盐水灌洗72 h,可有效防止硬膜粘连.在持续闭式灌洗的基础上,联合应用透明质酸钠和确炎舒松A,可以更有效的预防硬膜外瘢痕粘连.局部应用确炎舒松A可能增加术后感染的机会.     

Micro-CT联合硬膜外造影在医用自交联透明质酸钠凝胶预防椎板切除后硬膜外粘连中的应用

背景：二维平面角度已证实医用自交联透明质酸钠凝胶能够在术后8周有效预防兔椎板切除后硬膜外粘连的发生。目的：应用Micro—CT联合硬膜外造影技术观察和评估自交联透明质酸钠凝胶预防椎板切除后硬膜外粘连的可行性。方法：将18只L5椎板全切除的新西兰大白兔随机分组：埘照组用生理盐水冲洗术区后关闭切口;HyaRegen／SPI组用医用自交联透明质酸钠凝胶HyaRegen／SP10．5mL覆盖暴露硬脊膜后关闭切口;HyaRegen／SPII纽用医用自交联透明质酸钠凝胶HyaRegen／SP110．5mL覆盖暴露硬脊膜后关闭切口。结果与结论：各组体感诱发电位潜伏期均无明显延长,3组间差异无显著性意义（P〉0．05）。Micro—CT联合硬膜外遗影扫描并三维重建后显示,HyaRegen／SPI组及HyaRegen／SPII组对比剂能够顺利充盈硬膜外间隙,列照组对比剂允盈不顺畅,在术区局部形成多处充盈缺损。HyaRegen／SPI组及HyaRegen／SPII组术区硬脊膜外单位体积内对比剂充盈体积均高于对照组（P〈0．05）,前2组间差异无显著性意义（P〉0．05）。对照组硬膜外粘连程度要远高：rHyaRegen／SPI组及HyaRegen／SPII组（P〈0．05）。证实医用自交联透明质酸钠凝胶可有效预防兔椎板切除后硬膜外粘连的发生,应用Micro—CT联合硬膜外造影技术能有效观察和评估硬膜外粘连。     

持续闭式灌洗及灌洗后给药预防椎板切除后硬膜外瘢痕粘连

目的:目前的研究表明:粘连是导致下腰椎手术失败的重要原因,并且对粘连造成的手术失败者,其二次手术的效果不佳。因此如何防止下腰椎手术术后粘连,提高脊柱功能,成为困扰临床医师的难题。为此探讨持续闭式灌洗及灌洗后给药对椎板切除后硬膜粘连的预防作用及其效果。方法:实验于2001-08/2002-08在大连医科大学第二临床学院骨科实验室完成。选用成年健康新西兰大白兔30只,采用自身对照,每只兔的背部3处切口,分别切除L1,L4,L7棘突、椎板,显露硬膜囊。其中一处直接缝合,作为对照组。另两处持续灌洗72h后,随机选一处在拔管前注入透明质酸钠与确炎舒松A的合剂作为给药组,剩余的一处作为冲洗组。术后4,8,12周分批取材,4周和8周的标本只行大体和光镜检查;12周的标本行大体、光镜、透射电镜检查及计算机图像分析。光镜检查采用苏木精-伊红(HE)染色和Massion染色。结果:术后4周和8周时大体及光镜检查见对照组硬膜外腔被大量瘢痕组织填充,直达肌筋膜层;瘢痕与硬膜及周围肌肉组织粘连紧密,难以剥离;冲洗组和给药组见硬膜与肌肉之间为膜性物、浸润脂肪或少量瘢痕,与硬膜无粘连或部分粘连,易于钝性分离。术后12周大体及光镜检查见对照组硬膜外瘢痕致密而广泛,与硬膜紧密粘连,难以区分;冲洗组和给药组硬膜外瘢痕形成少     

聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物复合膜修复坐骨神经损伤

背景：聚乳酸和聚羟基乙酸复合膜具有良好的生物相容性,稳定的机械强度,无毒副作用,可控的降解速率等特点。目的：观察聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法：手术显露36只Wistar大鼠坐骨神经,随机分成3组：假手术组游离坐骨神经后不作任何处理,对照组切断坐骨神经后行神经断端直接吻合,实验组于神经吻合断端包裹聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜。结果与结论：①神经电生理学检测：术后4,6周神经传导速度及波幅比较,对照组〈实验组〈假手术组（P均〈0.05）。②组织学检测：对照组神经与周围组织粘连严重,实验组吻合口光滑平整,聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜明显降解吸收,与周围组织无粘连,对照组有髓神经数量较假手术组、实验组明显减少,且轴突再生率和再生轴突成熟度较低。③辣根过氧化物酶逆行示踪检测：对照组被辣根过氧化物酶标记的阳性有髓神经纤维数量较假手术组、实验组明显减少。表明聚乳酸和聚羟基乙酸共聚物膜能减轻神经术后粘连,促进神经再生。     

丹参卡波姆凝胶预防椎板切除术后硬膜外粘连

背景:采用不同方法和生物材料应用于动物实验及临床实践以预防硬膜外瘢痕形成。在材料学方面采用较多的为可生物降解以及黏性半流体凝胶类。丹参及卡波姆均是已被临床证实为安全有效的药物及凝胶制剂。目的:观察丹参卡波姆凝胶预防椎板切除术后硬膜外粘连的效果。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:中国广东省深圳市人民医院(暨南大学第二临床学院)骨科。材料:选用健康纯种新西兰大白兔36只,雌雄不拘,兔龄2～3岁。将动物按随机摸球法分为4组,每组9只:空白对照组、凝胶对照组、透明质酸钠组、丹参凝胶组。卡波姆934粉末(上海人民制药厂,批号20000510);透明质酸钠(山东博士伦福瑞达制药公司,国药准字H109601362mL(20mg))。方法:实验于2002-04/2003-08在深圳市人民医院动物实验室完成。①制备丹参卡波姆凝胶:丹参制成丹参浸膏粉备用。卡波姆934粉末加水溶胀过夜,依次加入丙二醇和甘油混匀,滴加三乙醇胺后,再加入丹参浸膏粉2g加纯化水搅匀至100.0g,制成丹参卡波姆凝胶。②麻醉动物后,分别于L3,L6水平完整切除椎板(保留上下关节突),制成10mm×5mm大小缺损,暴露硬膜。凝胶对照组、透明质酸钠组、丹参凝胶组动物的两处椎板缺损处分别加入1mL卡波姆凝胶、1mL20g/L透明质酸钠、1mL丹参卡波姆凝胶;空白对照组则不加任何试剂。③大体标本:分别于术后4,6,8周处死动物。每组每次处死3只动物。完整取出手术节段(L3,L6)脊柱,每次共24个标本。标本苏木精-伊红染色,光镜下观察。电镜标本:每组各取术后4周标本1个,利用日立H-600型透射电镜观察。④术后8周对4组24个标本行大体瘢痕组织与硬膜的粘连紧密度等级评定:共分4级;0级:硬膜囊与瘢痕组织无明显粘连;Ⅲ级:粘连广泛、致密,硬膜囊与瘢痕组织无法钝性分离,锐性分离后的硬膜囊无法保持完整。将每一脊柱节段标本均匀切成4段,每一段均制成切片染色后置于Tiger2000型图像分析仪上进行硬膜外瘢痕厚度测定。⑤大体瘢痕粘连紧密度等级评定进行秩和检验,硬膜外瘢痕厚度进行析因实验设计资料的方差分析、两两比较。主要观察指标:①各组术后8周脊柱节段标本大体瘢痕粘连紧密度等级评定结果及术后4,6,8周硬膜外瘢痕厚度比较。②各组术后大体观察、组织学检查以及超微结构检查结果。结果:兔36只均进入结果分析。①大体观察、组织病理学检查结果:术后各时间点空白对照组硬膜外均形成致密粘连;凝胶对照组和透明质酸钠组部分粘连;丹参凝胶组无明显粘连。②定量分析结果:术后8周空白对照组、凝胶对照组、透明质酸钠组大体眼瘢痕粘连度评级较低的只数明显少于丹参凝胶组(W=45～52,P<0.05～0.01)。术后4,6,8周丹参凝胶组瘢痕厚度均明显小于其他3组(F=128.657,152.246,80.891,P<0.01)。③透射电镜检查结果:术后4周时空白对照组、凝胶对照组、透明质酸钠组均可见增殖活跃的成纤维细胞,丹参凝胶组成纤维细胞增殖不活跃。结论:①丹参有抑制成纤维细胞增殖、分化与合成分泌胶原的功能,从而抑制硬膜外瘢痕粘连形成。②透明质酸钠过早被机体吸收,从而使其防粘连的作用减少;而卡波姆凝胶存留时间较长,在创伤修复全过程中起到了抑制和阻隔粘连形成的作用。     

胶原膜和聚乳酸-羟基乙酸共聚物对成纤维细胞分泌细胞因子的影响

目的:细胞因子中白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素8的分泌对加速创面愈合有重要作用,实验观察两种不同类型的组织工程皮肤生物支架材料胶原膜和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)对成纤维细胞分泌细胞因子的影响,探讨两种生物材料在创面愈合中的生物活性。方法:实验于2005-05/2007-02在福建省烧伤研究所完成。以密度为2×107/cm2的成纤维细胞接种于胶原膜和PLGA上,以相应的单层细胞培养为对照组,于第7和14天扫描电镜下观察细胞生长状况;在培养第1,3,5,7,14天收集细胞培养上清液,用ELISA法检测上清液中白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素8的水平;同时检测乳酸脱氢酶水平来反映细胞损伤程度。结果:①扫描电镜下所见:培养第7天,成纤维细胞黏附于胶原膜和PLGA上呈三维生长;培养第14天,细胞突起形成并锚定于胶原膜和PLGA上,相互交错排列形成网状铺于胶原膜和PLGA表面或延伸进入间隙中,并有大量纤维丝状细胞外基质生成。②乳酸脱氢酶水平:各组各时相点无显著性差异(P>0.05)。③成纤维细胞分泌细胞因子比较:胶原膜组第1~7天白细胞介素6水平高于对照组(P<0.01~0.05),而PLGA组则于第3和5天白细胞介素6水平高于对照组(P<0.01);胶原膜组和PLGA组中第1~5天和第14天白细胞介素8水平高于对照组(P<0.01~0.05);胶原膜组和PLGA组中白细胞介素1β水平略高于对照组,但无统计学意义(P>0.05);胶原膜组和PLGA组两组间各时相点各细胞因子水平均无显著性差异(P>0.05)。结论:胶原膜和PLGA均是良好的组织工程皮肤生物支架材料,对成纤维细胞无毒副作用,能促进成纤维细胞分泌某些细胞因子,为创面的修复提供有利的环境。     

几丁糖-钛网联合运用防治椎板切除术后的瘢痕粘连

背景:对椎板切除术后硬膜外瘢痕与神经根粘连的预防目前多采用术中局部放置各种隔离材料或术后应用药物控制炎性反应。目的:观察几丁糖-钛网联合运用对防治硬膜外瘢痕粘连形成的作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-06/12在贵阳医学院完成。材料:成年家兔80只,体质量(2.0±0.2)kg,用于制作椎板切除模型;几丁糖为上海其胜生物制剂实业公司产品;钛网由贵州科伦药业有限公司提供。方法:将80只成年兔随机摸球法分为4组,对照组:予生理盐水覆盖(0.5mL);钛网组:用1.0cm×0.8cm钛网模拟椎板成型后覆盖于椎板缺损处,缝合固定于上下锥体棘突与两侧肌肉及软组织上;几丁糖组:植入2mL医用几丁糖;几丁糖 钛网组:联合运用钛网和几丁糖凝胶。分别在术后第2,4周处死6只,8周时取8只家兔做标本。主要观察指标:动物瘢痕形态学的改变。结果:对照组瘢痕日趋明显;钛网组可减轻硬膜周围的瘢痕包裹,有效的隔绝周围瘢痕组织与硬脊膜;几丁糖组有明确的抗瘢痕粘连、抑制炎症反应的作用;几丁糖 钛网组能有效抑制硬膜周围瘢痕的增生。结论:几丁糖-钛网联合运用能有效抑制椎板切除术后硬膜周围的瘢痕粘连。     

不同质量浓度丝裂霉素C干预椎板切除大鼠硬膜外瘢痕组织增生:定性和定量的结合检测

背景:目前较为常用的预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的措施是以各种半流体物质或者膜性材料作为硬膜与瘢痕之问的物理屏障,但效果并不令人满意.抑制作为修复细胞主要成分的成纤维细胞增殖,调节胶原代谢成为当前生物学防治病理性瘢痕的热点.目的:采用定性和定量结合的方法,比较局部应用不同浓度丝裂霉素C预防椎板切除术后硬膜外粘连的效果.设计:完全随机分组,对照动物实验.单位:连云港市第二人民医院骨科材料:选用健康成年SD大鼠40只,雄性,体质量200～220 g,由南京医科大学动物实验中心提供.实验用药丝裂霉素C由日本协和发酵工业株式会社富士工厂生产,批号:425ACI,进口药品注册证号:H20020163.方法:实验于2004-06/10在南京医科大学动物实验中心及江苏大学医学院基础实验中心完成.随机将40只大鼠分为4组:丝裂霉素C高、中、低浓度组和生理盐水组,每组10只.将鼠麻醉后,切除L1椎板,形成0.2 cm×0.5 cm缺损,暴露硬脊膜.对照组以浸透生理盐水棉片,丝裂霉素C高、中、低质量浓度组以浸透质量浓度分别为0.1,0.05,0.01 g/L的丝裂霉素C棉片置于裸露的硬脊膜后方5 min.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.主要观察指标:手术后4周将每组麻醉后各处死4只动物,切取手术段脊柱硬脊膜外瘢痕组织,计算其中羟脯氨酸含量.其余动物在麻醉后,切取手术段脊柱包括其后侧瘢痕组织及骶棘肌,测不规则形态的瘢痕横切面面积,并计数纤维细胞数.光镜下评估各组标本硬膜外瘢痕粘连的程度.结果:大鼠40只均进入结果分析.对照组标本硬膜外瘢痕组织致密,与硬脊膜形成紧密粘连.丝裂霉素C高质量浓度组组无明显硬膜外粘连,瘢痕组织中羟脯氨酸含量、胶原组织面积及成纤维细胞计数较对照组显著减少(P＜0.05).丝裂霉素C中、低质昔浓度组瘢痕组织中羟脯氨酸含量、胶原组织面积及成纤维细胞计数较对照组有小同程度的减少,其中只有丝裂霉素C中质量浓度组成纤维细胞计数与对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05);丝裂霉素C中、低质量浓度组瘢痕组织与硬膜间有不连续的粘连.结论:局部应用浓度为0.1 g/L的丝裂霉素C能够有效减少硬膜外瘢痕组织增生,避免椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连.     

PLGA薄膜与生物蛋白胶联合应用对兔椎板切除术后硬膜外及神经根粘连的预防作用研究

目的探究聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)薄膜与生物蛋白胶联合应用对椎板切除术后硬膜外及神经根粘连的预防作用。方法应用随机数字表法将160只新西兰雄兔随机分为薄膜组、生物蛋白胶组、联合组、明胶组以及对照组,每组32只。薄膜组在硬膜裸露区覆盖PLGA薄膜;生物蛋白胶组在硬膜裸露区喷洒生物蛋白胶1 ml;联合组先在硬膜裸露区喷洒1 ml生物蛋白胶,待其充分吸收后,覆盖PLGA薄膜;明胶组在硬膜裸露区覆盖明胶海绵处理;对照组在相应部位的硬膜裸露区喷洒生理盐水。分析5组术后疤痕增生个数、切口愈合时间、发生炎症反应个数之间的差异。观察比较5组术后粘连程度以及粘连分级。在术后第2、8周比较各组的成纤维细胞个数以及神经根活动范围。结果 5组在疤痕增生个数(χ~2=2.06,P=0.84)、切口愈合时间(F=0.91,P=0.46)、发生炎症反应个数(χ~2=1.10,P=0.95)之间无显著差异。联合组的粘连程度较其他4组低(χ~2=158.00,P0.01),硬膜外粘连分级等级低(χ~2=160.00,P0.01)。术后第2、8周情况:联合组的成纤维细胞个数明显低于其余4组(F=23.53,P0.01;F=142.20,P0.01);联合组的神经根活动范围均高于其余4组(F=70.90,P0.01;F=152.80,P0.01)。结论PLGA薄膜与生物蛋白胶联合应用对椎板切除术后硬膜外及神经根粘连具有预防作用,且不影响术后疤痕增生以及切口愈合。     

预防椎板切除术后硬膜外黏连的实验临床研究

目的观察膨体聚四氟乙烯(ePTFE)对预防椎板切除术后硬膜黏连的效果,并和自体游离脂肪、空白对照比较。方法①试验研究:8只成年新西兰白兔,在L2、3、L3、4和L4、5椎板间开窗1.0 cm×0.5 cm大小,分别覆盖膨体聚四氟乙烯,自体游离脂肪和空白对照,术后2、4、6、8周处死动物取材,并进行大体观察、组织学观察和透射电镜观察。②临床应用:28例节段性腰椎间盘突出或胸腰椎骨折患者行椎板切除,ePTFE膜覆盖椎板切除处。术后随访0.5～1.5年,观察临床症状及CT表现。结果①试验研究:在对照组观察到硬膜外有广泛的纤维黏连。脂肪组早期可见到存活的脂肪组织,使瘢疤与硬膜分开,晚期存活的脂肪组织部份萎缩,纤维化和硬膜黏连。ePTFE组,硬膜表面光滑,硬膜外间隙存在,6、8周时可见骨再生。②临床应用:28例患者均较术前明显好转,CT显示椎管扩大,脊髓无压迫,均未见排异反应。结论膨体聚四氟乙稀是一种生物相容性极佳,可以始终保持结构稳定,可防止成纤维细胞穿透,为二次手术提供了可分离的安全界面,是较理想的防黏连材料。游离脂肪可减少硬膜外瘢痕组织黏连,但不能提供二次手术可供分离的清晰界限。