黄芪多糖对IL－2／LAK抗肿瘤增强作用的动物实验研究

采用Ｃ５７ＢＬ／６鼠荷其自发产生的黑色素瘤Ｂ＿１６细胞，以生存期为指标，建立了黄茂多糖（ＡＰＳ）增强ＩＬ－２／ＬＡＫ抗肿瘤作用的动物模型，结果表明：ＡＰＳ自身具有一定的抗肿瘤作用，ＡＰＳ（５ｍｇ／ｋｇ）与ＩＬ－２／ＬＡＫ（５×１０￣３Ｕ／ｋｇ、５×１０￣７／ｋｇ）的抗肿瘤作用相似，荷瘤鼠生存期分别为２１．５７±１．８１天和２０．８６±１．８６天（荷瘤对照鼠为１５．７１±０．４９天）；ＡＰＳ对ＩＬ－２／ＬＡＫ的抗肿瘤效应有明显的增强作用，二者在上述剂量下联合应用，荷瘤鼠生存期为２４．８６±２．７３天（Ｐ＜０．０１）。并对荷瘤鼠进行动态细胞免疫功能观察，提示：ＡＰＳ和ＩＬ－２／ＬＡＭ均具有抵抗鼠脾ＮＫ细胞活性，ＩＬ－２产生能力和腹腔Ｍψ吞噬能力下降的作用，ＡＰＳ对ＩＬ－２／ＬＡＫ仍有显著增强效应。     

脂蛋白（a）杂交瘤细胞株的建立及鉴定

用脂蛋白（ａ）［Ｌｎ（ａ）］免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，应用淋巴细胞杂交技术，将免疫小鼠的脾细胞与ＮＳ１骨髓瘤细胞进行融合，得到６Ｇ８、９Ｆ１１２株分泌抗Ｌｐ（ａ）单克隆抗体的杂交瘤细胞株，对２株细胞进行免疫学鉴定，应用间接ＥＬＩＳＡ法证明，培养上清效价１×１０－３～２×１０－３，培养上清与Ｌｐ（ａ）呈阳性反应，而与ａｐｏＡⅠ、ＡⅡ、Ｂ、ＣⅢ、Ｅ及血浆纤溶酶原（ＰＬＣ）均无交叉反应，ＥＬＩＳＡ相加实验证明：２株杂交瘤细胞株分别识别Ｌｐ（ａ）分子上２个不同的抗原决定簇。     

T-AK细胞和IL-2脂质体联合硒酸酯多糖抗白血病效应的研究

目的研究抗ＣＤ３单克隆抗体与ＩＬ－２共同诱导的Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体（Ｌ－ＩＬ－２）联合硒酸酯多糖（ＫＳＣ）对Ｌ１２１０小鼠白血病的治疗作用。方法用ＤＢＡ／２小鼠建立Ｌ１２１０白血病模型，正常小鼠脾细胞诱生制备Ｔ－ＡＫ细胞，按设计方案转输Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体，ＫＳＣ灌胃，检测ＮＫ细胞活性、脾淋巴细胞增殖活性和ＩＬ－２诱生水平，观察荷瘤小鼠生存期。结果Ｌ１２１０白血病小鼠的免疫功能急剧降低，生存期为１６．４３±１．９２天；转输Ｔ－ＡＫ细胞（５×１０６）和Ｌ－ＩＬ－２（１０４Ｕ／ｋｇ）能部分逆转白血病小鼠低下的细胞免疫功能，生存期延长（２４．７８±３．９４天），并有１４．３％小鼠长期存活；ＫＳＣ（４０ｍｇ／ｋｇ）对Ｔ－ＡＫ／Ｌ－ＩＬ－２的抗白血病作用有明显的增强效应，荷瘤小鼠细胞免疫功能进一步增强，生命延长率、长期存活率分别提高３６％和９９．９％。结论硒酸酯多糖具有生物反应调节剂（ＢＲＭ）样作用；以应用Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体为主体，硒酸酯多糖为辅佐的生物治疗方案对白血病小鼠具有显著的免疫抑瘤作用     

嗜酸性粒细胞IL—2RmRNA表达及IL—2的趋化作用

本文报道从多粘菌素Ｂ诱导的豚鼠腹腔渗出液，分离嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ），提取总ＲＮＡ，以地高辛配基标记的ＩＬ－２ＲａｃＤＮＡ探针进行点杂交，检测出ＥｏｓＩＬ－２ＲａｍＲＮＡ表达。测定ｒｈＩＬ－２对豚鼠Ｅｏｓ的趋化作用，ＥＤ＿（５０）为１０￣（－１３）ｍｏｌ／Ｌ、最大趋化作用浓度为１０￣（－１２）ｍｏｌ／Ｌ。但在１０￣８～１０￣（－１２）ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，ＩＬ－２对４８ｈＥｏｓ存活率及Ｅｏｓ过氧化物酶活性均无显著作用。表明Ｅｏｓ有功能性ＩＬ－２受体表达，其作用主要为极强的趋化反应。     

促甲状腺素释放激素对小鼠脾细胞产生细胞因子的影响

观察促甲状腺素释放激素在体内和体外对小鼠脾细胞产生ＩＮＦ和ＩＬ－２的影响。结果表明，正常小鼠每天腹腔注射ＴＲＨ０．２μＧ／只，共１０ｄ，其脾细胞受ＣｏｎＡ刺激产生的ＩＮＦ和Ｉ Ｌ－２产量无显著增高，对氢化可的松处理的免疫抑制小鼠，加用以上剂量，ＴＲＨ后，其脾细胞产生ＩＮＦ和ＩＬ－２的能力明显提高。     

T_H2细胞经TCR和IL-1R协同刺激后可产生独特的自分泌型IL-1α介导的增殖反应

以往研究认为，Ⅱ型辅助性Ｔ细胞（ＴＨ２）经Ｔ细胞抗原（ＴＣＲ）单独刺激后即可产生自身生长因子—ＩＬ４，细胞进一步的增殖反应虽然严格需要ＩＬ１的存在，却具有ＩＬ４依赖性。但是，最近的实验表明，大多数ＴＨ２细胞克隆株经ＴＣＲ及ＩＬ１受体（ＩＬ１Ｒ）协同激活后的增殖反应并不需要内源性ＩＬ４依赖性增殖反应的作用机制。方法：取感染硕大利什曼原虫的６周龄ＢＡＬＢ／ｃ小鼠月国部受损淋巴结，采用免疫陶洗和免疫磁珠分离技术提纯ＣＤ４＋ＴＨ２细胞，将此种体内诱导产生的ＴＨ２细胞与Ｄ１０·Ｇ４·１ＴＨ２细…     

糖皮质激素对大鼠脾淋巴细胞表达IL－2受体的调节

采用荧光标记的抗ＣＤ２５单抗，观察了地塞米松对大鼠脾淋巴细胞表达低亲和力ＩＬ－２受体（ＣＤ２５抗原）的影响。结果显示，在ＣｏｎＡ激活的淋巴细胞培养体系中加入地塞米松后，低亲和力ＩＬ－２受体的表达明显受到抑制；表达ＣＤ２５抗原的阳性细胞率亦明显减少。采用￣（１２５）Ｉ－ｒＩＬ－２结合分析实验，进一步研究了地塞米松对高亲和力ＩＬ－２受体的影响。结果证实，１０ｎｍｏｌ／Ｌ地塞米松使高亲和力ＩＬ－２受体的数量由１０．０±０．７３降至６．５１±１．８２ｆｍｏｌ／１０￣７细胞（ｎ＝４），但亲和力无显著变化。糖皮质激素的上述调节作用可能是其抑制免疫功能的重要分子机制之一。     

全反式维甲酸可增强大鼠系膜细胞基质金属蛋白酶-2表达

一、材料与方法１．大鼠系膜细胞（ＭｓＣ）的培养与鉴定：１５０～２００ｇＳＤ大鼠购自本校动物部，取肾皮质，分离肾小球，培养与鉴定ＭｓＣ按本实验室常规方法进行［１］。实验用细胞为１０～１５代。２．Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法检测基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）ｍＲＮＡ：当ＭｓＣ长至亚融合状态后，分别在完全培养液中加入全反式维甲酸（ＡＴＲＡ，Ｓｉｇｍａ公司）１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、０ｍｏｌ／Ｌ处理２４小时；另在亚融合状态ＭｓＣ加１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸分别处理０、６、１２、２４、４…     

T细胞疫苗抗同种移植排斥反应的研究

应用Ｔ细胞疫苗于同种心脏移植的研究，用Ｃｏｎ Ａ和ＣＤ３单抗诱导受同种特异性抗原（Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２＾ｂ）小鼠脾细胞）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠，取后者脾细胞所制备的Ｔ细胞疫苗具有延长同种心脏移植物的存活期。受Ｔ细胞疫苗接种的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）鼠脾细胞对经Ｃｏｎ Ａ激活或未激活的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞皆表现出特异的强烈的增殖反应，而对同系脾细胞呈低的反应。Ｔ细胞疫苗表型分析     

LFA-1/ICAM-1单抗对ConA诱导脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响

通过研究ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１单抗对ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞活化增殖及其分泌细胞因子的影响　，探　讨了ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１分子在Ｔ细胞活化过程中所起的共刺激作用。结果表明，单独应用ＬＦＡ－１α链单抗（Ｍ１７／４．４．１１．９）或ＩＣＡＭ－１单抗（ＹＮ１／１．７．４）均不能引起脾淋巴细胞的增殖，但在加入ＣｏｎＡ诱导脾淋巴细胞增殖反应的最初８小时内加入ＬＦＡ－１单抗可以剂量依赖性地抑制ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞增殖反应及脾淋巴细胞分泌ＩＬ－２、ＩＰＮ－γ，而加入ＩＣＡＭ－１单抗却无此效应。说明ＬＰＡ－１在ＣｏｎＡ诱导的Ｔ细胞活化过程中起着重要的共刺激作用，ＬＰＡ－１通过与除ＩＣＡＭ－１以外的其它配体分子（如ＩＣＡＭ－３）相互识别，提供Ｔ细胞活化所必需的共刺激信号。     

白介素2和血小板活化因子对嗜酸性粒细胞的趋化作用比较

用改良Ｂｏｙｄｅｎ法，测定重组人白介素２（ｒｈＩＬ－２）和血小板活化因子（ＰＡＦ）对豚鼠嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）和中性粒细胞（Ｎｅｕ）的趋化和化学激动作用，ｒｈＩＬ－２对Ｅｏｓ的最大趋化作用浓度为１０￣（－１２）ｍｏｌ／Ｌ，较ＰＡＦ的作用强约１００００倍，１０￣（－５）～１０￣（－９）ｍｏｌ／Ｌ范围内，ＰＡＦ对Ｅｏｓ和Ｎｅｕ有相似的趋化作用．但在对Ｅｏｓ呈趋化作用的１０￣－９～１０￣－１３ｍｏ１／Ｌ范围内。ｒｈＩＬ－２对Ｎｅｕ无明显作用．另外，１０￣（－１２）ｍｏｌ／Ｌ的ｒｈＩＬ－２对Ｅｏｓ的趋化和化学激动作用无显著差异（Ｐ＞０．０５），而１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＦ对Ｅｏｓ的趋化作用则显著大于化学激动作用（Ｐ＜０．０５）。以上结果表明，ＩＬ－２是一种极强的选择性Ｅｏｓ趋化介质．     

血管紧张素Ⅱ对血管内皮细胞整合素β3表达的影响

目的和方法：本实验采用细胞ＥＬＩＳＡ和ＲＴ－ＰＣＲ的方法分别从蛋白质和ｍＲＮＡ水平对血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）作用下的内皮细胞表面整合素β３的表达进行检测。结果：１０－８ｍｏｌ／Ｌ～１０－５ｍｏｌ／Ｌ的Ａｎｇ－Ⅱ在蛋白质水平能够促进内皮细胞整合素β３表达（Ｐ＜０．０５），且呈剂量依赖性。１０－６ｍｏｌ／Ｌ的Ａｎｇ－Ⅱ作用培养的人脐静脉内皮细胞１８ｈ后，细胞整合素β３ｍＲＮＡ量为正常对照组的１５倍。结论：提示Ａｎｇ－Ⅱ促进内皮细胞表面整合素β３的表达可能是单核细胞和内皮细胞之间粘附功能增加的机制之一。     

神经肽对肥大细胞内钙离子水平的影响

采用新型的钙荧光指示剂Ｆｕｒａ－Ⅱ检测了神经肽刺激后ＲＰＭＣ内ｃａ２＋的变化情况。在细胞外无钙离子存在下，用能诱导组胺释放的最适浓度的Ｐ物质（１０μｍｏｌ／Ｌ）、β－内啡肽（６μｍｏｌ／Ｌ）和强啡肽（２μｍｏｌ／Ｌ）刺激ＲＰＭＣ后，胞内Ｃａ２＋迅速上升，然后很快下降，该过程约需１５秒钟左右。这与组胺释放的时间基本吻合。推测上述三种神经肽触发胞内钙池释放Ｃａ２＋可能与组胺的释放有关。     

去甲肾上腺素对大鼠体外抗体生成的影响

目的 观察不同浓度甲肾上腺素（ＮＡ，１０＾－１～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）对大鼠体外抗体生成的影响，并初步探讨其作用机制。方法 在体外用百红细胞（ＳＲＢＣ）刺激大鼠肠系结Ｂ细胞转化成形成细胞（ＡＦＣ），然后检测其抗体生成量。结果 （１）１０＾－１０、１０＾－６、１０＾－８和１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ ＮＡ都能显著高于外抗体生成，其中１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ ＮＡ的作用最强。（２）γ受体激动剂异丙肾上腺素亦能明显     

分泌抗CRF单克隆抗体杂交瘤的建立及初步鉴定

采用淋巴细胞杂交瘤技术，获得了５株稳定分泌抗促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）的ＭｃＡｂ杂交瘤细胞株。５株单克隆抗体均为ＩｇＧ２，且均识别ＣＲＦ羧基端。ＥＬＩＳＡ交叉试验结果表明，该ＭｃＡｂ不与ＡＣＴＨ、ＦＳＨ、ＮＰＹ、ＬＨ反应。５株杂支瘤腹水效价在１０－４～１０－５，亲和常数在５×１０７ｍｏｌ／Ｌ－１～１×１０９ｍｏｌ／Ｌ－１。     

L7212白血病小鼠IL-2活性、IL-2 mRNA表达及复方中药清毒饮对其影响的研究

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠──近交系６１５小鼠ＩＬ－２活性和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血病小鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０５;其脾细胞中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达也明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０１。清毒饮显著提高ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２白血病小鼠脾细胞培养上清中的ＩＬ－２活性,Ｐ＜０．００１,并能显著提高其ｍＲＮＡ表达水平,Ｐ＜０．００１。结论：清毒饮可以作为生物反应调节剂用于白血病的临床治疗。     

内毒素性发热时大鼠脾细胞增殖反应及IL－1、IL－2活性测定

本实验用大鼠腹腔注射内毒素（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ，ＥＴ）复制发热模型。动物注射ＥＴ后８０ｍｉｎ体温上升达高峰（０．９７±０．２１℃），立即处死动物，检测大鼠脾细胞增殖反应ＩＬ－１、ＩＬ－２活性。实验结果如下：（１）ＥＴ性发热时大鼠脾细胞在无丝裂原的作用下￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入的ｃｐｍ值明显高于对照组。（２）ＥＴ组大鼠脾细胞对刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ，ＣｏｎＡ）的反应性显著高于对照组。（３）ＥＴ组大鼠脾细胞产生ＩＬ－１，ＩＬ－２的能力显著高于对照组。     

锂增强小鼠LAK细胞活性及其体内抗瘤作用的研究

本文观察了锂体外对小鼠ＬＡＫ细胞的作用及其体内抗瘤作用，以期找到一种能增强ＬＡＫ细胞活性，降低ＩＬ－２毒副作用的免疫调变剂。在ＩＬ－２诱导ＬＡＫ的同时加入ＬｉＣｌ，则能增强ＬＡＫ细胞的活性。以Ｃ５７ＢＬ／６小鼠接种Ｂ１６黑色素瘤细胞为荷瘤小鼠模型，比较了ＩＬ－２／ＬＡＫ，单独锂及ＩＬ－２／ＬＡＫ合并锂三组的抗瘤作用，结果表明，单独锂及ＩＬ－２／ＬＡＫ组与对照组相比均有抗瘤作用，但ＩＬ－２／ＬＡＫ和锂一起作用，其抗瘤作用最强，表现为能抑制肿瘤的生长及延长荷瘤小鼠的存活时间。因此，锂可望作为一种新型的免疫调节剂用于免疫性疾病及肿瘤的治疗。     

G CSF 在ATRA 诱发高白细胞症中的作用观察

全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）,完全缓解率虽高达８５％以上,但可引起重要的高白细胞症,往往危及患者生命。自１９９３年我们对此特殊现象已进行了多方面探讨,比较肯定的是血清ＧＣＳＦ与外周ＷＢＣ升高具相关性。本文对ＧＣＳＦ与其白细胞之间关系做了进一步观察。按２×１０５ｍｏｌ／Ｌ和２×１０６ｍｏｌ／Ｌ两个ＡＴＲＡ浓度在体外进行ＨＬ６０细胞常规细胞培养,ＭＴＴ法测定增殖性变化。０１ｍｌＨＬ６０细胞（２×１０６／ｍｌ）在ＡＴＲＡ１０６ｍｏｌ／Ｌ（终浓度）条件下,本…     

犬蛔虫（Toxocaracanis）对感染鼠的细胞免疫和IL－1、IL－2免疫调节作用的影响

应用犬蛔虫（Ｔ．ｃａｒｎｉｓ）的感染性虫卵口饲感染Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ鼠，体外培养后观察脾细胞的免疫学变化。感染第１－４周的脾细胞用ＣｏｎＡ刺激，Ｔ细胞的增殖反应，ＩＬ－２的诱生均明显地受到抑制，而且感染鼠脾细胞抑制了正常鼠脾细胞对ＣｏｎＡ的反应。感染鼠的脾细胞经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１０过柱后，Ｔ细胞则不显示被抑制作用。表明影响Ｔ细胞被抑制作用的是感染鼠的巨噬细胞。相反，感染第１－４周的鼠所产生的ＩｇＧ和ＩｇＭ等抗体的Ｂ细胞活性增强；用ＬＰＳ刺激巨噬细胞诱生的白介素（ＩＬ）ＩＬ－１也增多。