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目的 探讨lncRNA FGD5-AS1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 培养正常人前列腺上皮细胞P69及前列腺癌细胞系LNCaP、DU145、PC-3;qRT-PCR检测lncRNA FGD5-AS1和miR-524-5p的表达水平;将LNCaP细胞分为si-lncRNA FGD5-AS1组、si-NC组、miR-524-5p组、miR-NC组、anti-miR-524-5p+si-lncRNA FGD5-AS1组、anti-miR-NC+si-lncRNA FGD5-AS1组;CCK-8检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆数;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FGD5-AS1和miR-524-5p的靶向关系。结果 与正常人前列腺上皮细胞P69相比,前列腺癌细胞系LNCaP、DU145、PC-3中lncRNA FGD5-AS1表达水平升高,miR-524-5p表达水平降低(P<0.05)。干扰lncRNA FGD5-AS1表达或miR-524-5p过表达后,细胞活性降低,细胞克隆数、迁移和侵袭数量减少(P<0.... 相似文献
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摘要:目的:研究长链非编码RNA(lncRNA) EGFR-AS1对微小RNA-577(miR-577)的靶向关系及对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR(q PCR)检测卵巢癌组织中lncRNA EGFR-AS1和miR-577表达。Lnc Base Predicted v.2预测和双荧光素酶报告实验分析lncRNA EGFR-AS1与miR-577的靶向关系。卵巢癌细胞SKOV3中转染si-EGFR-AS1或miR-577,噻唑蓝(MTT)和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。si-EGFR-AS1和anti-miR-577共转染,观察抑制miR-577表达在干扰lncRNA EGFR-AS1表达诱导的SKOV3细胞增殖和凋亡中的作用。结果:卵巢癌组织中lncRNA EGFR-AS1表达量显著高于癌旁组织,miR-577表达量显著低于癌旁组织(P<0.01)。lncRNA EGFR-AS1与miR-577具有靶向结合位点,转染miR-577的WT-EGFR-AS1细胞荧光素酶相对活性显著低于转染miR-NC组(P<0.01)。干扰lncRNA EGFR-AS1表达明显降低SKOV3细胞24,48,72 h的吸光度(A)值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量,显著增加细胞凋亡率及p21、Bax蛋白水平(P<0.05或P<0.01)。miR-577过表达显著降低SKOV3细胞48和72 h的A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平,显著提高细胞调亡率及p21、Bax蛋白表达量(P<0.05)。与si-EGFR-AS1和anti-miR-NC共转染比较,si-EGFR-AS1和anti-miR-577共转染显著减少SKOV3的细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达量,显著提高24,48,72 h的A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平(P<0.05)。结论:lncRNA EGFR-AS1在卵巢癌中表达上调,干扰lncRNA EGFR-AS1表达可抑制卵巢癌细胞增殖,并诱导凋亡,其作用机制与靶向调控miR-577表达有关。 相似文献
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目的研究miR-654-3p对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及潜在的作用机制。方法设置胶质瘤细胞U251组、U373组,正常人星形胶质细胞NHA组;miR-NC组(转染miR-NC)、miR-654-3p组(转染miR-654-3p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-654-3p组)、si-NC组(转染si-NC)、si-NEK2组(转染si-NEK2)、miR-654-3p+pcDNA3.1组(共转染miR-654-3p和pcDNA3.1)、miR-654-3p+pcDNA3.1-NEK2组(共转染miR-654-3p和pcDNA3.1-NEK2)用脂质体法转染至胶质瘤细胞中。qRT-PCR检测miR-654-3p和NEK2 mRNA的表达水平;采用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测NEK2蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果胶质瘤U251、U373细胞与正常胶质NHA细胞相比,miR-654-3p的表达水平显著下降(P<0.05)。过表达miR-654-3p后miR-654-3p的表达水平显著... 相似文献
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目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO antisense RNA 1(TMPO-AS1)与微小RNA(miRNA)-1224-5p的靶向关系及对肝癌细胞的增殖和凋亡的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定lncRNA TMPO-AS1和miR-1224-5p在肝癌组织中的表达.生物信息学预测... 相似文献
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目的 探究FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌(RCC)ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 选取本院2017年1月—2019年12月RCC手术切除癌组织和癌旁组织60份,RT-qPCR检测组织和细胞中FOXD3-AS1和miR-135a-5p表达水平;ACHN细胞分别或联合转染si-NC、si-FOXD3-AS1-1、si-FOXD3-AS1-2、miR-NC、miR-135a-5p mimic、pcDNA3.1-FOXD3-AS1和miR-135a-5p inhibitor;行Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;行划痕闭合实验检测各组细胞迁移能力;行双荧光素酶实验检测靶向关系。建立裸鼠RCC移植瘤模型,分为si-FOXD3-AS1组和si-NC组,每组6只,建模后30 d处死测定移植瘤质量,采用免疫组织化学法检测Ki-67和E-cadherin阳性表达率。结果 与癌旁组织比较,癌组织中FOXD3-AS1表达显著上升,miR-135a-5p表达显著下降(P<0.01)。FOXD3-AS1干扰显著降低细胞活力、侵袭数目和划痕闭合率(P<... 相似文献
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目的 探讨长链非编码RNA癌症易感基因19(lncRNA CASC19)通过miR-152-3p/高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤发生发展的影响.方法 实验设置si-NC组、si-CASC19组、pcDNA-NC组、pcDNA-CASC19组、miR-NC组、miR-152-3p组、anti-miR-NC组、a... 相似文献
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目的 探讨circRASSF2对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法 逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测37例乳腺癌及癌旁组织中circRASSF2和miR-1343-3p表达水平;将乳腺癌MDA-MB-231细胞分为si-circRASSF2组、si-NC组、miR-NC组、miR-1343-3p组、si-circRASSF2+anti-miR-1343-3p组、si-circRASSF2+anti-miR-NC组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;Western blot检测Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白相对表达水平;双荧光素酶报告实验检测circRASSF2和miR-1343-3p的靶向关系。结果 与癌旁组织比较,乳腺癌组织中circRASSF2表达水平升高,miR-1343-3p表达水平降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-circRASSF2组MDA-MB-231细胞OD值降低,... 相似文献
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目的 探讨长链非编码RNA ZFPM2反义RNA1(ZFPM2-AS1)对miR-515-5p的靶向调控作用以及对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic和3种胆管癌细胞(RBE、HuCCT1、TFK1)中ZFPM2-AS1和miR-515-5p的... 相似文献
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目的 探讨长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(PSMA3-AS1)调节miR-140-3p/DEAD box p68 RNA解旋酶(DDX5)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 qRT-PCR、Western blot、免疫组化法分别检测40例肺癌组织和细胞系中PSMA3-AS1、miR-140-3p、DDX5表达。将A549细胞分为:control组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+inhibitor-NC组、si-PSMA3-AS1+miR-140-3p inhibitor组,qRT-PCR检测转染效率;MTT法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及DDX5蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与PSMA3-AS1和DDX5的关系;构建肺癌裸鼠模型,分为si-NC... 相似文献
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目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA 1(OSER1-AS1)和miR-373-3p在动脉粥样硬化(AS)患者血清、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)中的表达及其对AngⅡ诱导HASMCs增殖与迁移的影响。方法 以41例体检健康者为对照,采用RT-qPCR法测定41例AS血清中OSER1-AS1、miR-373-3p表达。体外培养HASMCs,经1×10-7 mol/L AngⅡ干预24 h后,采用RT-qPCR法测定细胞中OSER1-AS1、miR-373-3p表达。分别转染OSER1-AS1小干扰RNA、miR-373-3p模拟物或共转染OSER1-AS1小干扰RNA与miR-373-3p抑制剂至HASMCs,再用1×10-7 mol/L AngⅡ干预24 h,采用CCK-8法、Transwell小室实验分别测定细胞增殖活性和迁移情况,采用Western blot法测定增殖、迁移相关蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因实验测定OSER1-AS1与miR-373-3p的靶向... 相似文献
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目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)人蛋白酶体α亚基3型反义RNA1(PSMA3-AS1)通过调控微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响。方法 选取20例非小细胞肺癌标本和20例健康志愿者肺部上皮样本。购买人体正常的肺部上皮细胞H1299、H358、A549及NC-LH2073.采用实时荧光RT-PCR检测LncRNA PSMA3-AS1、miR-27b-3p表达,构建抑制LncRNA PSMA3-AS1表达的A549细胞,采用MTT法、流式细胞仪、Transwell检测细胞增殖、凋亡、迁移情况,Western Blot法检测细胞周期蛋白-D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达变化。结果 与人体正常肺上皮组织相比,非小细胞肺癌组织中LncRNA PSMA3-AS1表达升高,miR-27b-3p表达下降(P<0.05)。与BEAS-2B组相比,H1299组、H358组、NC-LH2073组、A549组中LncRNA PSMA3-AS1水平上升,miR-27b-3p水平降... 相似文献
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