骨髓基质干细胞移植治疗脑和脊髓损伤的研究进展

骨髓基质干细胞具有多向分化潜能,取材、培养简便,组织相容性好,易于基因操作等特点,已广泛应用于脑和脊髓损伤的实验研究和临床应用研究。笔者对国内外应用移植骨髓基质干细胞治疗脑和脊髓损伤的研究进展进行综述。     

骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对脊髓损伤与修复的作用与机制及细胞移植的方法与途径。方法:实验组为将体外培养SD大鼠的MSCs经绿色荧光蛋白(GFP)转染标记后显微注射于脊髓横断模型的脊髓损伤处,并以无血清培养基注射动物为对照组。12周后观察移植细胞的分化情况,并通过行为学、组织学及免疫组化的方法评价脊髓功能变化。结果:实验组MSCs移植12周后,脊髓功能明显恢复。结论:骨髓间充质干细胞移植对脊髓的损伤修复具有明显作用。     

组织移植治疗脊髓损伤实验研究的进展

组织移植治疗脊髓损伤的实验研究近年来取得了一定进展，造模方法主要有Allen's法，脊髓半切洞法，主要采用自体周围神经移植、胚胎中枢组织移植和非细胞组织移植。     

益气活血中药对小鼠放射损伤骨髓基质细胞生长的影响

目的：研究不同类型中药对放射损伤骨髓基质细胞（BMSC）的影响。方法：吸收5．0Gyx线200只小鼠分成a、b、c、d、e组,腹腔内分别注射健脾益气、补肝肾、活血化瘀、益气活血中药及生理盐水,取不同时间股骨BMSC进行培养,观察集落（CFU－F）形成情况。结果：伤后不同时间BMSC在不同培养时间CFD－F数目,a、b与e组,c、d与e组有显著差异（P＜0．05）,d组CFU－F数目明显高于c组（P＜0．01）。结论：益气活血中药能减轻及治疗骨髓基质细胞的放射损伤。     

组织移植治疗脊髓损伤实验研究的进展

组织移植治疗脊髓损伤的实验研究近年来取得了一定进展 ,造模方法主要有Allen’s法 ,脊髓半切洞法 ,主要采用自体周围神经移植、胚胎中枢组织移植和非神经组织移植     

中药干预骨髓基质细胞移植心肌再生的实验研究

急性心肌梗死是心肌的急性缺血性坏死,病情凶险,病死率较高.目前认为,心肌细胞缺乏增殖分化能力,心肌梗死后心肌细胞不能再生,只能由肉芽组织取代,最后形成瘢痕组织.     

川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞FAK表达的影响

探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞焦点黏附激酶（FAK）表达的影响及其意义。利用流式细胞仪检测骨髓基质细胞的细胞周期及凋亡率，蛋白质免疫印迹（Western blot)法检测骨髓基质细胞中FAK的表达水平，放射损伤后骨髓基质细胞明显阻滞于G0－G1期，凋亡率增加，同时FAK的表达明显下降，用川芎嗪注射治疗后骨髓基质细胞S期合成活跃，凋亡率下降，FAK的表达增加，川芎嗪改善放射损伤小鼠骨髓微环境，促进骨髓基质细胞增生可能是通过增强FAK的表达实现的。     

中医药治疗急性脊髓损伤的实验研究

根据急性脊髓损伤的“继发性损害”学说,采用改良A11en氏撞击装置,造成大白鼠急性脊髓挫伤的一致性的标准动物模型。随机分为4组,以Gale的联合行为记分法和Noble的形态计量分析法进行疗效观察。结果表明治疗组神经功能恢复及组织形态学均明显优于对照组(P<0.01)。分析认为中医药疗法是通过改善局部微循环与缺血缺氧状态,减轻了出血、水肿等病理变化,阻断继发性病变的发生发展而促进脊髓神经功能恢复的。     

不同时间干细胞移植对于脊髓损伤大鼠的作用

目的:比较脊髓损伤后不同时间神经干细胞移植对于大鼠功能恢复的治疗效果方法:33只雌性SD大鼠用于本次实验,4只进行椎板切除作为假手术对照组,其余进行胸9水平脊髓半切.脊髓半切大鼠分为5组,分别在脊髓损伤后1、3、7、14和30d进行神经干细胞移植.行为学测试用于评价行为恢复.结果:在3、7、14d接受干细胞移植的大鼠有较高的BBB测试的分值并在网格测试中较少摔倒.脊髓损伤后第7d干细胞移植的大鼠行为功能恢复的最好.结论:不同时间移植神经干细胞的行为恢复效果不同.脊髓损伤后从第3天至第14天进行神经干细胞移植能获得治疗效果.损伤后1周移植的效果最好.     

神经干细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究

为探讨NSCs的移植对损伤脊髓功能恢复有无促进作用,本研究采用BBB评分、皮层诱发电位和辣根过氧化物酶（horseradishperoxidase,HRP）逆行追踪技术,观察了NSCs移植后脊髓功能的变化,以探讨NSC。移植在恢复损伤脊髓功能中的作用,以期为临床提供参考。     

未分化骨髓基质干细胞体外抑制淋巴细胞增殖反应的初步研究

目的:研究犬未分化骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外抑制淋巴细胞增殖的作用。方法:从犬骨髓组织中分离获取骨髓基质干细胞,体外培养至第二代,1×105细胞/孔BMSCs刺激异体淋巴细胞,观察淋巴细胞增殖情况。以植物血凝素(PHA,2ug/mL)刺激淋巴细胞后,分别以1×102～5细胞/孔数量的异体BMSCs加入反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。分别以1×102～5细胞/孔数量的"第三者"BMSCs加入双向混合淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。通透性隔离腔培养的BMSCs加入双向混合淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。结果:BMSCs刺激同种异体淋巴细胞体外增殖作用不明显;BM-SCs可明显抑制PHA刺激的淋巴细胞增殖(P<0.05);"第三者"BMSCs可明显抑制双向混合淋巴细胞反应(P<0.05),抑制作用呈BMSCs细胞数量依赖性;隔离腔培养的BMSCs也可明显抑制双向混合淋巴细胞反应(P<0.05)。结论:犬未分化BMSCs在体外具有抑制淋巴细胞增殖的作用,具有一定的调节淋巴细胞反应的能力。     

芍药苷对人骨髓基质细胞HFCL蛋白质表达的作用

目的检测芍药苷对人骨髓成纤维样基质细胞系HFCL增殖及蛋白质表达的影响,探讨芍药苷补血作用的分子机制。方法采用流式细胞术和蛋白质组学方法测定芍药苷对HFCL细胞周期及蛋白质表达的影响。结果芍药苷能促进HFCL由G0/G1期进入S期,提高增殖指数,使HFCL的9种蛋白质表达上调,5种下调。上调的蛋白质有Ras相关核蛋白、核纤层蛋白A/C、异柠檬酸脱氢酶、磷酸丙糖异构酶、ATP合酶、核蛋白体蛋白质P2和CCT;下调的蛋白质有人类cc趋化因子和Bax。结论芍药苷能促进HFCL增殖,作用于HFCL多个靶点,促进细胞结构蛋白质的合成和蛋白质分子伴侣的表达,促进HFCL的能量代谢,抑制HFCL凋亡,间接发挥补血作用。     

电针对急性脊髓损伤大鼠氧化应激反应的影响

目的:观察电针对脊髓损伤后大鼠氧化应激反应的影响.方法:采用Allen's法制备急性脊髓损伤模型.动物分为假手术组、模型组、电针组.电针组造模成功后电针治疗14天,选用双心腧、双脾腧作为治疗穴位,测定脊髓中的SOD、MDA和GSH-Px含量变化.结果:电针组SOD、GSH-Px含量均有不同程度的上升,与模型组相比有显著...     

脊髓星形胶质细胞机械性损伤的体外培养模型

目的：建立机械性损伤引起星形胶质细胞反应性增生的体外培养模型,方法：体外分离培养新生Wistar大鼠脊髓的星形胶质细胞,培养至16d进行划伤实验,分为划伤组和对照组（未划伤）;每组有7个时间点,分别为划伤后0,2h,6h,12h,24h,48h,72h。用免疫组织化学的方法进行染色,观察划伤组和对照组星形胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达;并且进行半定量图像分析。结果：从划伤后2h-72h,同对照组相比,划伤组星型胶质细胞明显增生,细胞内GFAP的表达明显增高。结论：星形胶质细胞反应性增生的体外培养划伤模型能模拟髓组织受到机械损伤后,胶质细胞反应性增生及细胞内GFAP表达升高的过程。     

电针在脊髓损伤修复中的应用基础研究概况

本文就电针对脊髓损伤修复作用的应用基础研究进展作一概述,共综合32篇文献的内容,从电针治疗脊髓损伤的方法、取穴部位、应用基础研究现状、电针治疗的作用机制等方面做了归纳总结,为临床应用电针治疗脊髓损伤提供实验依据。     

人参皂苷Rb1干预长春新碱抑制骨髓基质细胞增殖的研究

目的:探讨人参皂苷Rb1(GS Rb1)促进小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)生长及干预长春新碱(VCR)抑制小鼠BMSCs增殖的作用。方法:正常对照组,GS Rb1(1.0、5.0、10.0、15.0μg/ml)诱导BMSCs增殖组,VCR(2.5、5.0、10.0、15.0μg/ml)抑制BM-SCs增殖组,GS Rb1干预VCR抑制BMSCs增殖组,应用MTT法测定BMSCs增殖。结果:①与正常对照组比较,GS Rb1 1.0～10.0μg/ml随浓度升高其促进BMSCs增殖也增加,GS Rb1为10.0μg/ml时差异具有显著性(P<0.05);VCR 2.5～15.0μg/ml随浓度的升高抑制BMSCs增殖也增强,VCR 5.0～15.0μg/ml时差异具有显著性(P<0.05);GS Rb1 1.0～15μg/ml各组与VCR 5.0～15.0μg/ml各组比较,以及GS Rb1 10.0μg/ml组与VCR 2.5μg/ml组比较其BMSCs增殖显著增加(P均<0.05)。②GS Rb1 5.0μg/ml、10.0μg/ml1、5.0μg/ml分别与VCR 5.0μg/ml培养,其能显著干预VCR对BMSCs增殖的抑制(P均<0.05)。结论:长春新碱明显抑制骨髓基质细胞生长;人参皂苷Rb1可促进骨髓基质细胞生长且具有干预长春新碱对骨髓基质细胞增殖的抑制作用。     

丹参与神经生长因子对脊髓损伤保护作用的实验研究

目的:探讨静脉注射丹参结合局部应用神经生长因子对兔脊髓损伤(SCI)的保护作用.方法: 58只成年日本大耳白兔,随机分成四组,A组10只,作为正常组;B、C、D组各16只,分别作对照组、地塞米松(Dex)治疗组和丹参结合神经生长因子(NGF)治疗组.结果:地塞米松对脊髓伤区血流量(SCBF),、丙二醛(MDA)含量及超过氧化物歧化酶(SOD)活性改善不明显,而使用丹参结合神经生长因子治疗后,脊髓伤区SCBF增高、MDA含量下降,SOD活性增高.结论: 丹参结合神经生长因子对脊髓损伤具有保护作用,且疗效较地塞米松明显,为临床治疗提供依据.     

微量元素在急性脊髓损伤中的变化

目的：观察急性性脊髓损伤后脊髓组织和血清中微量元素（铜锌）含量的变化,研究微量元素与急性脊髓损伤的关系,并探讨其可能的发一机理,方法：用改良Allen 氏脊髓损伤模型,选用家兔36只,打击能量为120gcf,用原了光谱法测定伤前,伤后6h,24h,48h,72h和6d时脊髓组织和历清中的铜锌的含量,结果：脊髓损伤后血清和脊髓组织中铜含量升高,而锌含量则持续性下降,结论：脊髓损伤后血清和脊髓组织中铜含量升高和锌含量下降在脊髓继发性损伤过程中可能起着重要作用。     

OMgP蛋白在大鼠急性脊髓损伤中的表达及其意义

目的：探讨轴突生长抑制因子OMgP在急性脊髓损伤中的意义。方法：建立脊髓全横断损伤模型，采用组织学和免疫组织化学技术，检测35只在不同时期脊髓损伤大鼠脊髓损伤区OMgP的变化。结果：损伤组脊髓损伤后第1天灰质内出现片状出血、中央区碎裂，轴突断裂及脱髓鞘改变；第3天神经元肿胀，逐渐形成空洞，胶质细胞减少；1周残存神经元减少，胶质细胞增生；3周脊髓损伤区出现囊腔样变。免疫荧光组织化学显示脊髓损伤后1天即可见到髓鞘中OMgP的表达，3天后达到高峰，到3周后逐渐恢复到对照组水平。结论：OMgP可能在脊髓损伤中扮演着重要作用。     

淫羊藿苷对骨髓间充质成骨性活性强于金雀异黄酮

目的:比较研究金雀异黄酮与淫羊藿苷对体外培养原代大鼠骨髓间充质细胞(rats bone marrow stromal cell,rBMSC)成骨性分化的影响.方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质细胞,筛选最佳的药物浓度;采用终浓度为1×10-5mol·L-1的金雀异黄酮和淫羊藿苷对体外培养原代大鼠骨髓间充质细胞进行干预;在药物干预后的第3,6,9,12,15天后测定碱性磷酸酶活性(alkaline pbosphatase,ALP)和3,6,9,12,15 d测定钙含量;第12天进行钙化结节茜素红染色;在药物干预后第12,24,48,72,96 h Real-time RT-PCR检测OXS,Runx-2,骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP-2)和Collagen-Ⅰ mRNA的表达水平.结果:浓度为1 ×10-5 mol·L-1金雀异黄酮和淫羊藿苷可提高ALP活性最高,增加Ca含量,调节骨代谢活性Runx-2,OXS,BMP-2和Collagen-Ⅰ mRNA的表达水平,淫羊藿苷比金雀异黄酮的成骨性作用更强一些.结论:在促进体外培养骨髓间充质细胞成骨性分化作用方面淫羊藿苷较强于金雀异黄酮.