糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中能量代谢相关基因的表达及其意义

目的：比较正常大鼠和糖尿病心肌病大鼠心肌组织中基因表达的差异，探讨糖尿病性心肌病的发病机制。方法：（1）实验大鼠分为两组（正常对照组和糖尿病心肌病组）；（2）从心肌组织中抽提mRNA，经逆转录分别用Cy3,Cy5荧光标记，获得两组动物来源的cDNA探针；（3）cDNA 探针与基因表达谱芯片杂交，结果经扫描后并用软件进行统计分析。结果：能量代谢相关基因表达水平在糖尿病心肌病组明显下调，结论：能量代谢障碍可能在糖尿病性心肌病发病机制中起重要作用。     

糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中能量代谢相关基因的表达及其意义

目的比较正常大鼠和糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中基因表达的差异,探讨糖尿病性心肌病的发病机制。方法(1)实验大鼠分为两组(正常对照组和糖尿病性心肌病组);(2)从心肌组织中抽提mRNA,经逆转录分别用Cy3﹑Cy5荧光标记,获得两组动物来源的cDNA探针;(3)cDNA探针与基因表达谱芯片杂交,结果经扫描后并用软件进行统计分析。结果能量代谢相关基因表达水平在糖尿病性心肌病组明显下调。结论能量代谢障碍可能在糖尿病性心肌病发病机制中起重要作用。     

自发性高血压大鼠心肌胰岛素样生长因子-1受体基因表达与心血管细胞增殖

目的：观察自发性高血压大鼠（SHR）心肌胰岛素样生长因子－1（IGF－1）受体基因表达水平，探讨其与心血管细胞增殖的病理机制以及福辛普利和氯沙坦治疗的影响。方法：24只SHR随机分3组，分别予福辛普利、氯沙坦和安慰剂灌胃治疗9周。检测尾动脉血压，测量心肌IGF－1受体mRNA水平并观察心肌、主动脉组织学改变。结果：福辛普利组与氯沙坦组血压均显著低于对照组；其IGF－1受体mRNA水平均显著低于对照组，且血压与IGF－1受体mRNA水平呈正相关；光、电镜显示两治疗组较对照组心血管细胞增殖明显减轻，氯沙坦组增殖减轻更明显。结论：心肌IGF－1受体基因表达水平异常升高是导致SHR心血管细胞增殖的原因之一；福辛普利与氯沙坦均可有效控制血压，可能通过下调SHR心肌IGF－1受体的基因表达水平，抑制其心血管细胞增殖。     

糖尿病大鼠心肌超微结构及钙离子调控蛋白基因表达的改变

目的:研究糖尿病心肌细胞的结构变化及Ca2 调控蛋白基因表达的改变.方法:经大鼠尾静脉注射四氧嘧啶(40 mg/kg ) 复制糖尿病大鼠模型,对照组注射生理盐水,分别于2、4、6周处死,取心尖部组织行普通光镜及透射电镜观察大鼠心肌结构的改变.应用逆转录-聚合酶反应技术以肌动蛋白为内参,测定钙离子调控蛋白基因表达的改变.结果:4周、6周大鼠的心脏/体重比显著大于正常对照组.电镜下糖尿病组大鼠心肌细胞的亚细胞器出现重构,表现为肌原纤维含量明显减少,排列紊乱,内质网扩张,线粒体变性等改变.6周的糖尿病组大鼠心肌肌浆网Ca2 -ATP酶的 mRNA表达无明显变化,但磷酸受纳蛋白的mRNA表达显著高于对照组,1,4,5三磷酸肌醇受体2型,兰尼碱受体2型的mRNA表达显著低于对照组.结论:糖尿病大鼠心肌细胞的亚细胞器出现重构,肌浆网磷酸受纳蛋白的mRNA表达增加,RyR2、IP3R2的mRNA表达下降.     

神经生长因子基因在大鼠心肌组织中的表达

目的：观察神经生长因子（NGF）基因在生后不同时期大鼠心肌组织中的表达,方法：采用RT－PCR方法,半定量分析生后1天、15天、30天、60天、120天,360天大鼠心肌组织中NGFmRNA含量。结果：大鼠生后1天,心肌组织即NGFmRNA的表达;随着生后发育过程,表达量逐步增加,30天时达峰值;此后随鼠龄的增加,表达量呈级慢下降趋势,结论：大鼠心肌组织中NGFmRNA的表达量,随鼠龄的增加,而呈现出先升后降的动态变化趋势。     

糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中S腺苷蛋氨酸合成酶基因的表达及其意义

目的 比较正常大鼠和糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中基因表达的差异，探讨糖尿病性心肌病的发病机制。方法 实验大鼠分为两组：对照组和糖尿病性心肌病组。从心肌组织中抽提mRNA，经逆转录分别用Cy3、Cy5荧光标记，获得两组动物来源的cDNA探针。cDNA探针与基因表达谱芯片杂交，结果由扫描仪扫描并用软件进行分析统计。结果 S腺苷蛋氨酸合成酶的表达水平在糖尿病性心肌病时明显上调。结论 S腺苷蛋氨酸合成酶通过影响糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中高半胱氨酸的含量在糖尿病性心肌病发病机制中起重要作用。     

Kkay小鼠Ⅱ型糖尿病相关基因的表达谱研究

目的：研究KkayⅡ型糖尿病小鼠与正常小鼠肝脏差异表达的基因,为人类Ⅱ型糖尿病及其慢性并发症的防治提供依据。方法：以包含8192条小鼠的cDNA基因表达谱芯片研究Kkay Ⅱ型糖尿病小鼠肝脏的基因表达谱。结果：共筛选出差异表达基因154条,包括全长基因68条,表达序列标识（EST）86条;其中40条基因表达增加,114条表达降低。结论：Ⅱ型糖尿病发病机制复杂,不仅有糖、脂肪及蛋白质等物质的代谢紊乱,更重要的是由此可能导致了许多功能蛋白质的异常。     

黄芪多糖对STZ糖尿病大鼠物质代谢和心功能的影响

黄芪具有益气固表、补气升阳、扶正固本的作用。黄芪多糖 (ａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｄｅ ,ＡＰＳ)是从黄芪中分离提纯的有效成分。现代药学研究表明ＡＰＳ具有调节血糖、保护心血管系统、改善心肌血性损伤的作用[1～ 4 ] 。本研究观察ＡＰＳ对ＳＴＺ糖尿病大鼠物质代谢和心脏机械功能的作用。材料和方法动物　 2月龄的雄性ＳＤ大鼠 ,体重 180～ 2 0 0ｇ ,由上海市计划生育研究所ＢＫ公司提供 ,实验期间饲养于计生所动物房。试剂　ＳＴＺ购自Ｓｉｇｍａ公司 ;ＡＰＳ由中国科学院上海生理研究所提供 ;胰岛素、Ｃ肽放免…     

Chemerin基因在自发性2型糖尿病大鼠脂肪组织中表达的研究

目的：研究网膜及皮下脂肪组织中Chemerin在自发性2型糖尿病OLETF大鼠中的基因表达水平,探讨Chemerin与肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病发病关系的机制。方法：4周龄正常不出现糖尿病的LETO大鼠10只作为对照组,4周龄OLETF大鼠10只,2型糖尿病的OLETF大鼠9只,于42周时处死。取网膜及皮下脂肪组织,以实时荧光定量法检测网膜及皮下脂肪组织Chemerin基因的表达水平。皓果：模型组的网膜及皮下脂肪组织Chemerin的基因表达明显高于LETO对照组（P〈0．01）;模型组大鼠网膜脂肪组织Chemerin的基因表达明显高于皮下脂肪组织（P〈0．01）。结论：脂肪因子Chemerin基因表达水平的变化是肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病发病的机制之一。     

用基因芯片研究卡托普利对糖尿病大鼠肾脏增殖相关基因表达的影响及其意义

目的比较卡托普利干预与非干预糖尿病大鼠之间肾脏增殖相关基因表达的差异,探讨卡托普利在非糖尿病肾病阶段是否可以通过抗增殖对肾脏起保护作用。方法糖尿病大鼠分为卡托普利干预组和非干预组（对照组）。干预组予卡托普利口服15周。干预结束后将大鼠处死,从肾脏皮质抽提mRNA,干预组与对照组逆转录分别用Cy5和Cy3标记,成为两组cDNA探针。cDNA探针与基因芯片杂交,扫描仪扫描,用软件分析Cy5和Cy3两种荧光信号的强度和比值。结果6个。肾脏增殖相关基因在两组问有差异表达。结论卡托普利在非糖尿病。肾病阶段可以抑制增殖,对肾脏起保护作用。     

大豆异黄酮对糖尿病大鼠心肌钙调控蛋白基因表达的影响

目的:探讨大豆异黄酮对糖尿病大鼠心肌细胞肌浆网钙调控蛋白基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照(NC)组、糖尿病对照(DC)组、大豆异黄酮治疗(ST)组和尼尔雌醇治疗(NT)组。后3组腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备糖尿病模型。第7周起,NC、DC组予0.5%羧甲基纤维素钠10 m.lkg-1.d-1,ST组予大豆异黄酮120 m l.kg-1.d-1,NT组予尼尔雌醇混悬液每周0.2 mg/kg灌胃2次。第12周末记录离体心室内压曲线并分析。取心室肌组织,应用RT-PCR技术测定钙调控蛋白的基因表达。结果:与NC组比,DC组大鼠左心室收缩压、平均压、室内压最大上升/下降速率降低(P<0.01);与DC组比,ST组、NT组以上指标均增高(P<0.01)。而左心室舒张末压,DC组明显高于NC组(P<0.01);ST组、NT组均低于DC组(P<0.01)。与NC组比,DC组大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA)、兰尼碱受体2型(RyR₂)、1,4,5三磷酸肌醇受体2型(IP₃R₂)mRNA表达降低,但受磷蛋白(PLB)mRNA表达增高(P<0.01)。与DC组比,ST组、NT组大鼠心肌SERCA、RyR₂、IP₃R₂mRNA表达增高,而PLB mRNA表达降低(P<0.01)。结论:大豆异黄酮可以改善糖尿病大鼠左心室功能,可能与其上调心肌SERCA、RyR₂、IP₃R₂mRNA的表达和下调PLB mRNA的表达有关。     

卡托普利对糖尿病性心肌病大鼠心肌组织能量代谢和炎症反应的影响

目的 探讨卡托普利保护心肌组织的作用机制。方法 (1)将糖尿病性心肌病大鼠分为对照组和治疗组,治疗组每天给予卡托普利1.5 mg/kg·b.w.,口服15 w;(2)从动物心肌组织中抽提mRNA,经逆转录分别用Cy3、Cy5荧光标记,获得两组动物来源的cDNA探针;(3)cDNA探针与基因表达谱芯片杂交,结果由扫描仪扫描并用软件进行分析统计。结果 (1)脂肪酸b氧化相关基因、线粒体电子质子偶联和氧化磷酸化相关基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)依赖的白三烯B4羟基脱氢酶基因在治疗组中表达明显上调。(2)二甲基精氨酸水解酶基因在干预治疗组中表达明显下调。结论 卡托普利可能通过改善病变心肌的能量供应、抑制炎症反应对糖尿病性心肌病心肌组织起保护作用。     

伴有高血压的糖尿病大鼠大血管病变SMC增殖早期基因表达谱的研究

目的:建立糖尿病大血管病变平滑肌细胞(SMC)增殖早期基因表达谱.方法:以自发性高血压大鼠(SHR)为对照,以STZ诱导SHR构建伴有高血压的糖尿病大鼠模型为实验组,分别在1周、2周、4周时抽提胸主动脉中膜的总RNA,获得两组cDNA的探针,与含有4 096条大鼠全长基因的cDNA表达谱芯片杂交,扫描芯片荧光信号图像,对差异表达基因数据进行生物信息学分析.结果:1周时有差异表达的基因321条,160条基因表达下降(ratio<0.5),161条基因表达上升(ratio>2).2周、4周时上述数据分别为414、238、176和403、202、201.分级聚类分析归为8类,3期全部高表达已知基因13条,其中4条持续升高的基因(CD74、Irf1、GAP43、CD36)都与细胞增殖有关.CYP2E1基因的表达大幅上调(ratio 1 w=34.54; ratio 2 w=24.82; ratio 4 w=33.57).结论:糖尿病大血管病变SMC增殖是多基因综合改变的结果,细胞增殖相关基因高表达是主要病理基础,CYP2E1基因可能是糖尿病大血管病变SMC增殖较重要或关键的基因.     

针刺内关穴对急性心肌缺血大鼠缺血心肌基因表达谱的影响

[目的] 研究针刺对急性心肌缺血大鼠缺血心肌基因表达谱的影响.[方法] 建立左前降支冠状动脉结扎大鼠心肌缺血模型,分组干预后分离提取缺血心肌总RNA,与大鼠全基因表达谱芯片杂交后进行检测,对筛选得到的针刺治疗过程中的差异表达基因,利用基因功能分类体系寻找和分析显着富集差异表达基因的复合功能分类,从基因功能水平探索针刺对急性心肌缺血模型大鼠缺血心肌基因表达谱的影响.[结果] 发现心肌缺血24 h后表达上调的398条基因中,经过间断针刺内关穴3次,24 h后其中298条基因(占表达上调基因的74.87%)的表达出现不同程度的下调趋势;心肌缺血24 h后表达下调的338条基因中,经过间断针刺内关穴3次,24 h后其中188条基因(占总下调基因的55.62%)的表达出现不同程度的上调趋势,表明针刺内关穴对缺血心肌差异表达基因有良性调节趋势.针对筛选出来的差异表达基因蛋白磷酸酶1B(Ppm1b)、琥珀酸辅酶A连接酶(Suclg1)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶2(Got2)、苹果酸脱氢酶(Mdhl)、丙酮酸脱氢酶磷酸酶同工酶(PDP1)、延胡索酸水合酶(Fh)、羟肽酶b2(Cpb2)、酪氨酸单氧化酶激活蛋白酶(Ywhaz)、S100钙结合蛋白a9(S100A9)、Na+/K+转运ATP酶B1亚基(Atp1b1)、肌钙蛋白I(TnI)、肌球蛋白轻链激酶3(Myl3)、肌集钙蛋白2(Casq2)、肌红蛋白(Mb),其功能模块主要涉及氧化磷酸化、线粒体电子传递、电子传递偶联三磷酸腺苷(ATP)合成、能量代谢、磷酸盐代谢过程、单价无机阳离子转运、辅酶代谢过程等.[结论] 针刺内关穴可能是通过影响上述基因,从而对急性心肌缺血发挥保护作用.     

褪黑素对早期糖尿病大鼠心肌非酶糖基化及氧化应激反应的影响

目的：研究褪黑素(Mel)对糖尿病大鼠氧化应激反应和非酶糖基化反应的影响。方法：用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型。正常大鼠、糖尿病大鼠及用褪黑素治疗8周的糖尿病大鼠各10只,应用荧光法测定心肌组织糖基化终末产物(AGEs)含量,应用比色法测定心肌组织及血清丙二醛(MDA)含量,乳胶免疫聚集抑制法测定糖化血红蛋白(HbA1c)含量,计算心脏质量指数。结果：与正常大鼠比较,糖尿病大鼠各指标升高,而褪黑素组血清MDA以及心肌组织中AGEs、MDA含量和心脏质量指数均较糖尿病组下降。结论：褪黑素能抑制糖尿病大鼠心肌非酶糖基化和氧化应激反应。     

爱迪诱导U251细胞凋亡及相关基因表达的实验研究

目的　以人类成神经胶质瘤细胞系U2 5 1为实验对象 ,研究爱迪 (AD)诱导细胞凋亡的规律 ,并初步探讨了其内在的分子机制。方法　将爱迪分为 7 5mg/ml(A组 )、15mg/ml(B组 )、30mg/ml(C组 )、6 0mg/ml(D组 ) 4个浓度组 ,以顺铂 (DDP) 0 .4μg/ml为阳性对照组 (E组 ) ,另设一阴性对照组 (F组 ) ,观察光镜下细胞的形态变化 ,采用An nexinV PI双标记流式细胞仪凋亡检测法 ,观察爱迪诱导细胞凋亡的情况 ;采用ABC免疫组化法检查p5 3、Bcl 2和PCNA基因的表达。结果　爱迪对U2 5 1细胞具有诱导凋亡的作用 ,在 2 4h和 48h范围内 ,爱迪诱导U2 5 1细胞凋亡率与作用时间无明显关系 (P >0 .0 5 ) ,与药物浓度密切相关 (P <0 .0 1)。在爱迪浓度为 30mg/ml时 ,其凋亡率最大 ,2 4h和 48h分别为 2 0 87%和 2 0 0 9%。但爱迪浓度为 15mg/ml以上时 ,p5 3、Bcl 2、PCNA基因表达均与对照组有明显差异 ,在爱迪浓度为 30mg/ml时 ,p5 3表达高达 73 3 % ,Bcl 2降低为 2 0 9% ,随着药物浓度的增加 ,PCNA表达下降。结论　爱迪有诱导U2 5 1细胞凋亡的作用 ,其诱导凋亡依赖于p5 3基因 ,并伴有Bcl 2、PCNA基因的下调     

御糖丸对糖尿病大鼠心肌酶及过氧化物酶体增殖剂活化受体αmRNA表达的影响

目的研究中药御糖丸对糖尿病大鼠心肌能量代谢酶、过氧化物酶体增殖剂活化受体α（PPARα）mRNA表达的影响,探讨该药物防治糖尿病心肌病发生的疗效及可能机制。方法采用SD大鼠腹腔注射STZ方法建立实验动物模型,成模后将大鼠模型分为模型组、御糖丸高、中、低剂量组,造模后8周分别按实验要求灌胃治疗,正常对照组灌生理盐水,连续4周。高效液相色谱法测定大鼠心肌组织肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定心肌组织PPAR mRNA表达。结果空白模型组大鼠心肌CK、LDH、SDH活性普遍降低,指标明显低于正常对照组（P〈0.01）,御糖丸各剂量组指标较空白模型组均有提升,但中剂量组和高剂量组提高显著（P〈0.05）。空白模型组PPAR mRNA表达水平显著低于正常对照组（P〈0.01）,御糖丸各剂量组PPARa mRNA表达水平均高于空白模型组（P〈0.05）,但中高剂量组提高较为显著（P〈0.01）。结论中成药御糖丸能够提升糖尿病大鼠心肌酶CK,LDH,SDH的活性和上调PPARa mRNA表达水平,对改善心肌能量代谢和保护心肌组织具有良好作用。     

核仁素在糖尿病性心肌病中的表达

目的：探讨核仁素在糖尿病性心肌病中的表达情况。方法：实验分为对照组和II型糖尿病性心肌病模型组 (模型组);模型组采用高脂高糖饲料持续喂养(第5,6周于小鼠腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素)构建,第8周末测定小鼠 血糖,第20周末测定两组小鼠空腹血糖值并计算心脏质量与体质量的比值,观察心肌形态学病理改变,采用免疫组织 化学法和Western印迹检测心肌核仁素的表达水平。结果：糖尿病模型组小鼠较对照组空腹血糖值明显升高(P<0.05); 模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱,出现断裂及溶解;免疫组织化学染色及Western印迹显示模型组小鼠心肌核仁 素蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05)。结论：核仁素可能在糖尿病性心肌病的发生和发展中起着一定的作用。