消渴平合剂对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾功能及血清TNF-α和IL-6的影响研究

目的:观察消渴平合剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠肾功能及血清TNF-α和IL-6的影响,探讨其对DN的防治作用及机制。方法:复制DN大鼠模型,随机分为正常组,模型组、厄贝沙坦组和消渴平合剂高、中、低剂量组。12周时处死大鼠,观察各组大鼠24 h尿蛋白变化情况,检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG),血清中TNF-α和IL-6的水平。结果:消渴平合剂可以改善DN大鼠的一般状况,与模型组比较,消渴平合剂高、中剂量组24h尿蛋白定量、BUN、Scr、TG含量显著降低(P0.01),高剂量组与厄贝沙坦组无显著差异(P0.05);消渴平合剂高、中剂量组及厄贝沙坦组血清TNF-α和IL-6含量均较模型组下调(P0.01),消渴平合剂高剂量组与厄贝沙坦组比较无显著性差异(P0.05)。结论:消渴平合剂可用于治疗糖尿病肾病,其机制可能与抑制DN大鼠肾脏TNF-α和IL-6的激活有关。     

熊果酸对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用

目的:通过复制糖尿病肾病大鼠模型,探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用及其机制。方法:SPF级大鼠采用链脲霉素(streptozocin,STZ)及高糖高脂饲料联合复制糖尿病肾病大鼠模型,实验分为正常组,模型组,阳性药组(厄贝沙坦,15 mg·kg-1),UA高剂量组(UA-H,60 mg·kg-1)和UA低剂量组(UA-L,30 mg·kg-1);观察大鼠血糖、尿蛋白量、肾指数的变化,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和过碘酸-希夫(periodic acid-schiff,PAS)染色法观察肾脏病理变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清和肾脏中的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量,试剂盒检测肾脏组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织足细胞裂孔膜CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)和podocin蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠的血糖,24 h尿蛋白量,血清和肾脏IL-1β,IL-6及TNF-α含量,肾脏组织中MDA含量,肾指数均显著增加,体质量,肾脏组织SOD活性,肾脏中podocin,CD2AP蛋白表达量均显著降低(P0.01);与模型组比较,UA明显降低血糖值和尿蛋白量,肾指数,肾脏MDA含量,血清和肾脏IL-1β,IL-6及TNF-α水平,能够升高模型组大鼠体质量,肾脏SOD活性,肾脏中podocin,CD2AP蛋白的表达(P0.05,P0.01),逆转糖尿病所致大鼠肾小球病变。结论:UA可通过保护肾脏足细胞作用及调节裂孔膜蛋白CD2AP和podocin表达而抑制高血糖对肾脏的病理损害、降低尿蛋白和保护肾功能。     

藿朴夏苓汤对HBZY-1细胞及DN大鼠NF-κB炎症通路的影响北大核心CSCD

目的研究藿朴夏苓汤(HPXLT)对体内外核转录因子-κB(NF-κB)炎症通路的影响,探讨HPXLT对糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法体外研究:采用脂多糖(LPS)刺激大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)及Hep G2细胞,观察HPXLT对细胞炎症因子包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量及p-p65蛋白表达的影响,以免疫荧光法观察Hep G2细胞的NF-кB p65转核作用。体内研究:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65 mg·kg^(-1))方法制备DN大鼠模型。将大鼠随机分为对照组,模型组,HPXLT高、中、低剂量组(2,1,0.5 g·kg^(-1))和格列本脲组(5 mg·kg^(-1)),连续灌胃给药6周。采用ELISA法测定细胞上清液或大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6的水平;Western Blot法测定HBZY-1细胞或大鼠肾脏p65、p-p65、TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平。结果体外结果:与对照组比较,LPS组的p-p65蛋白表达显著增强,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著升高(P<0.01);与LPS组比较,HPXLT各剂量组的p-p65蛋白表达水平显著下调,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著降低(P<0.05,P<0.01);免疫荧光显示LPS诱导的炎症能促进NF-кB p65的转核,而HPXLT可显著抑制NF-кB p65转核作用。体内结果:与对照组比较,模型组大鼠血清的TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子水平及肾脏的IL-1β、TNF-α、p-p65蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠血清的TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),HPXLT高、中剂量组的IL-1β、TNF-α及p-p65蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01),各组之间的总NF-кB p65蛋白表达水平无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HPXLT可能通过抑制NF-κB炎症通路的表达,从而降低DN肾脏的炎症。     

糖肾清2号方对糖尿病肾病小鼠AMP激活蛋白激酶信号通路的影响

目的观察糖肾清2号方对糖尿病肾病模型小鼠AMP激活蛋白激酶(AMPK)信号通路的影响。方法采用自发性2型糖尿病模型KK-Ay小鼠,予高脂饲料诱导3周诱导糖尿病肾病模型。造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性药组,中药大、中、小剂量组,以C57BL/6J小鼠设为正常组,每组各6只。正常组及模型组予去离子水0.1 mL/(10 g·d),阳性药组予缬沙坦13.33 mg/(kg·d),中药大、中、小剂量组分别按照糖肾清2号方生药量40.66、20.33、10.17 g/(kg·d)剂量灌胃。各组小鼠每日灌胃1次,连续干预治疗12周后取血清及肾脏。采用RT-PCR技术检测肾脏组织AMPK-α1、NF-κB P65、TNF-α、IL-6 mRNA转录水平。Western blot技术、免疫组化法测定肾脏组织AMPK-α1、NF-κB P65蛋白表达水平。ELISA法检测血清TNF-α、IL-6蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组AMPK-α1 mRNA转录水平及蛋白表达水平明显下调(P0.01),NF-κB P65、IL-6、TNF-αmRNA转录水平及蛋白表达水平明显上调(P0.01)。与模型组比较,中药大、中、小剂量组AMPK-α1 mRNA及蛋白表达均有上调(P0.05,P0.01),NF-κB P65、IL-6、TNF-αmRNA及蛋白表达水平均明显下调(P0.05,P0.01)。与阳性药组比较,中药各组AMPK-α1 mRNA转录水平及蛋白表达水平明显下调(P0.01),NF-κB P65、TNF-α、IL-6 mRNA水平均明显上调(P0.01),NF-κB P65、IL-6蛋白表达水平均明显上调(P0.05,P0.01);中药大、中剂量组TNF-α蛋白表达水平明显下调(P0.05)。结论糖肾清2号方对肾脏的保护作用可能与激活AMPK-α1活性,间接抑制NF-κB活性从而抑制炎症反应有关。     

六味地黄丸防治大鼠糖尿病肾病的实验研究

目的:观察足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和podocin在糖尿病肾病发病机制中的作用,探讨六味地黄丸(LWDHW)保护糖尿病肾病大鼠肾脏的机制。方法:SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,1周后,按血糖浓度将成模的糖尿病大鼠随机分为:模型组(STZ,8只)、治疗组(STZ+LWDHW,8只),另设正常组(Control,8只)。治疗组给予六味地黄丸灌胃,模型组、正常组给予等量生理盐水,持续观察8周。治疗第8周末,称大鼠体重,计算肾系数,观察肾脏病理改变;检测24h尿蛋白总量、血尿素氮、血肌酐;免疫印迹检测nephrin和podocin在肾组织中的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖,体重明显下降(P<0.01),肾系数,24h尿蛋白总量,血尿素氮,血肌酐明显升高(P<0.01);模型组大鼠肾小球肥大、毛细血管基底膜增厚,系膜基质增生,肾小管上皮细胞空泡样变,见蛋白管型;nephrin和podocin蛋白表达减少(P<0.01)。治疗组血糖、体重无明显改变;肾系数,24h尿蛋白总量,血尿素氮,血肌酐明显降低(P<0.05);病理改变明显减轻;大鼠肾组织nephrin和podocin表达明显增加(P<0.05)。结论:六味地黄丸可能通过增加足细胞nephrin和podocin表达发挥保护糖尿病肾病大鼠肾脏的作用。     

六味地黄丸对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1-smad通路的影响

目的观察六味地黄丸对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1-smad通路的影响,探讨其治疗糖尿病肾病的作用机制。方法链脲佐菌素腹腔注射法建立大鼠糖尿病肾病模型,将造模成功大鼠随机分为模型组和六味地黄丸组,另设正常对照组。六味地黄丸组大鼠六味地黄丸灌胃,模型组和正常对照组大鼠等剂量生理盐水灌胃,治疗8周。治疗第8周末取材,检测各组大鼠体重、肾系数、血糖、血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白量。HE染色检测各组大鼠肾组织病理改变。Western blot检测大鼠肾组织TβR-Ⅰ、smad2、p-smad2、smad3、p-smad3、α-SMA的改变。结果与模型组相比,六味地黄丸组大鼠体重、肾系数增加,血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白量降低;HE染色发现模型组肾小球体积缩小,见结节样硬化,系膜基质增生,肾小管上皮细胞空泡样变,可见蛋白管型,间质纤维组织增生,六味地黄丸组病变有所改善。Western blot检测发现与正常组相比,模型组大鼠肾组织TβR-Ⅰ、p-smad2、p-smad3、α-SMA表达增加(P0.01),六味地黄丸组大鼠肾组织TβR-Ⅰ、p-smad2、p-smad3、α-SMA表达较模型组降低(P0.05)。结论六味地黄丸可以延缓糖尿病肾病进展,保护肾脏功能。其机制可能与抑制TGF-β1-smad信号通路相关。     

车前子不同炮制品抗大鼠膜性肾病的比较

目的:比较车前子生品和盐炙品水煎液抗大鼠膜性肾病的活性。方法:热回流法提取车前子不同炮制品;选用改良的Border法应用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)建立大鼠膜性肾病模型,在给药的第6周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),尿素氮(BUN),肌酐(SCr)水平;采用电镜和光镜观察肾脏病理形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠肾组织肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,转化生长因子(TGF)-β1,核转录因子-κB(NF-κB)p65的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠的尿蛋白、肾指数、血清生化指标、肾脏免疫调节因子具有极显著差异(P0.01),肾脏病理形态变化明显;与模型组比较,贝那普利组、盐炙品3个剂量组和生品高剂量组均可显著降低模型大鼠尿蛋白、肾指数(P0.05,P0.01),使血清生化指标呈显著差异(P0.05,P0.01),病理形态结果显示,大鼠肾脏病变有明显的改善,4种细胞因子表达显著降低(P0.01,P0.05);与生品高剂量组比较,贝那普利组和盐炙品高、中剂量组尿蛋白量显著降低(P0.05,P0.01),贝那普利组和盐炙品高剂量组肾指数显著降低(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中BUN,SCr,TC,TG的含量显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01),低剂量组仅BUN显著低于生品高剂量组(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中TP显著升高(P0.05),贝那普利组对肾脏4种免疫调节因子的表达显著降低(P0.01),盐炙品3个剂量组中TNF-α,IL-1β的积分吸光度(IA)显著降低(P0.01),盐炙品高剂量组TGF-β1,NF-κB p65的IA表达显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01)。结论:车前子盐炙品对膜性肾病大鼠的肾保护作用和对肾脏中免疫调节因子的调节作用均优于生品,可继续深入车前子盐炙品的物质基础和药效机制研究。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏组织中单核细胞趋化蛋白1表达的影响

目的:探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响,分析其对2型糖尿病肾病大鼠炎症的作用。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,每组16只。左肾切除+一次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4周、8周处死大鼠各半,测血糖、24小时尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测肾脏组织中MCP-1的变化特点。结果:苦瓜总皂苷治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高,差异有统计学意义(P0.05);苦瓜总皂苷治疗组与模型组相比,白介素1α(IL-1α)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)明显降低,差异有统计学意义(P0.05)免疫组化、RT-PCR和Western Blot可见:与模型组相比,治疗组大鼠肾脏组织MCP-1表达明显降低(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织MCP-1的表达,进而降低炎症反应,改善肾功能,最终调节2型糖尿病肾病的症状。     

蒙药那仁满都拉治疗系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

目的:探究蒙药那仁满都拉对系膜增生性肾小球肾炎大鼠尿液PRO、BIL血清IL-6、TNF-α及肾脏病理改变的影响。方法:56只Wistar雄性大鼠随机分为正常组和模型组,模型组大鼠采用邹氏改良的慢性血清病大鼠模型的方法复制系膜增生性肾小球肾炎模型,取32只造模成功的大鼠,随机分为模型组、那仁满都拉低、高剂量组和六味地黄丸组,每组8只。那仁满都拉低、高剂量组分别按1.5 g/(kg·d)、4.5 g/(kg/d)灌胃;六味地黄丸组按1.0 g/(kg·d)灌胃;正常组和模型组灌服等量蒸馏水,连续给药3周。3周后检测各组大鼠尿液PRO、BIL的含量;末次给药12 h后麻醉大鼠,腹主动脉取血,测定血清IL-6、TNF-α含量;处死大鼠取右肾脏组织进行HE染色,在光学显微镜下观察其病理变化。结果:那仁满都拉低、高剂量组尿液PRO含量和血清IL-6和TNF-α的含量均低于模型组(P0.01或P0.05),那仁满都拉高剂量组尿液BIL含量低于模型组(P0.05);那仁满都拉各给药组随剂量增大肾脏组织的病理改变减轻,肾小球系膜细胞增生减轻,炎细胞浸润、蛋白管型、细胞管型、玻璃样变和空泡变逐渐减少。结论:蒙药那仁满都拉可降低系膜增生性肾小球肾炎大鼠血清IL-6、TNF-α及尿液PRO、BIL含量,减轻大鼠肾脏病理改变。     

青风藤提取物对糖尿病肾病大鼠的保护作用及对ANGPTL-4表达的影响

目的:探究青风藤(CS)提取物对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠的保护作用及对血管生成素样蛋白-4 (ANGPTL-4)表达水平的影响。方法:将大鼠分为假手术组、模型组、阿托伐他汀组、CS提取物低、中、高剂量组;全自动生化分析仪检测大鼠血清中空腹血糖(FBG)、尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;重量法测定大鼠肾指数; HE染色检测肾组织病理学改变;蛋白免疫印迹(WB)检测肾组织中ANGPTL-4表达情况。结果:CS提取物中、高剂量组FBG、尿蛋白、Scr、BUN、IL-6、IL-8、TNF-α、肾指数及肾组织中ANGPTL-4表达水平显著低于阿托伐他汀组和模型组(P0. 05);随CS提取物剂量增加,FBG、尿蛋白、Scr、BUN、IL-6、IL-8、TNF-α、肾指数及肾组织中ANGPTL-4表达水平显著降低(P0. 05),呈剂量依赖性。结论:CS提取物能够降低肾组织中ANGPTL-4表达水平,对DN大鼠肾脏具有保护作用,为DN的临床治疗提供一定的理论基础。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾性炎性损伤的保护作用

目的观察分析雷公藤多苷改善糖尿病肾病大鼠肾性炎性损伤的保护效果。方法选择75只雄性SD大鼠作为研究对象,包含10只大鼠为对照组,另外65只大鼠为模型组,通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型,共64只大鼠成功,并采用随机数字抽取表法将成功的大鼠分为模型组、雷公藤多苷组和罗格列酮组,雷公藤多苷组又分为9mg/kg、18mg/kg。观察分析给药后不同组大鼠的尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白量、血清中IL-1β水平,血清IL-17水平、IFN-y水平。结果模型组与对照组相比,其尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白量含量、血清IL-1β、血清IL-17、IFN-y水平含量显著升高,数据比较差异具有统计学意义(P0.05);9mg/kg雷公藤多苷组、18mg/kg雷公藤多苷组和罗格列酮组与模型组相比,尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白量含量显著降低,数据比较差异具有统计学意义(P0.05)。18mg/kg雷公藤多苷组和罗格列酮组与模型组相比,血清IL-1β、血清IL-17、IFN-y水平显著降低,数据比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论雷公藤多苷改善糖尿病肾病大鼠肾性炎性损伤效果显著,能够明显降低血清和肾脏炎性因子水平,实现对肾脏的保护,具有较高的研究价值。     

藿朴夏苓汤对HBZY-1细胞及DN大鼠NF-κB炎症通路的影响

目的研究藿朴夏苓汤(HPXLT)对体内外核转录因子-κB(NF-κB)炎症通路的影响,探讨HPXLT对糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法体外研究:采用脂多糖(LPS)刺激大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)及Hep G2细胞,观察HPXLT对细胞炎症因子包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量及p-p65蛋白表达的影响,以免疫荧光法观察Hep G2细胞的NF-кB p65转核作用。体内研究:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65 mg·kg~(-1))方法制备DN大鼠模型。将大鼠随机分为对照组,模型组,HPXLT高、中、低剂量组(2,1,0.5 g·kg~(-1))和格列本脲组(5 mg·kg~(-1)),连续灌胃给药6周。采用ELISA法测定细胞上清液或大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6的水平;Western Blot法测定HBZY-1细胞或大鼠肾脏p65、p-p65、TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平。结果体外结果:与对照组比较,LPS组的p-p65蛋白表达显著增强,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著升高(P0.01);与LPS组比较,HPXLT各剂量组的p-p65蛋白表达水平显著下调,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著降低(P0.05,P0.01);免疫荧光显示LPS诱导的炎症能促进NF-кB p65的转核,而HPXLT可显著抑制NF-кB p65转核作用。体内结果:与对照组比较,模型组大鼠血清的TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子水平及肾脏的IL-1β、TNF-α、p-p65蛋白表达水平均显著升高(P0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠血清的TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子水平均显著降低(P0.05,P0.01),HPXLT高、中剂量组的IL-1β、TNF-α及p-p65蛋白表达水平均明显下调(P0.05,P0.01),各组之间的总NF-кB p65蛋白表达水平无明显改变,差异无统计学意义(P0.05)。结论 HPXLT可能通过抑制NF-κB炎症通路的表达,从而降低DN肾脏的炎症。     

尿血消1号对湿热型肾性血尿大鼠血清TNF-α、IL-6及尿红细胞的影响

目的探究血TNF-α和血IL-6在湿热型肾性血尿大鼠中的表达及尿血消1号对肾性血尿的干预机制。方法72只大鼠随机分成6组,即空白对照组、模型对照组、肾炎四味胶囊组、尿血消1号低、中、高剂量组,每组12只。除空白对照组外,余各组予牛血清白蛋白(BSA)基础上加饮食及环境因素制造湿热型肾性血尿模型,造模共12周,造模成功后予相应药物干预2周,检测各组大鼠尿红细胞计数、24h尿蛋白定量、血TNF-α及血IL-6的水平,并观察肾脏病理结构的变化。结果与空白对照组相比,模型对照组及各治疗组尿红细胞计数明显增多、24h尿蛋白定量、血TNF-α及血IL-6的水平明显升高(P0.01);与模型对照组比较,肾炎四味胶囊组尿红细胞计数明显减少、24h尿蛋白定量、血TNF-α及血IL-6的水平明显降低(P0.01);尿血消1号低剂量尿红细胞计数、24h尿蛋白定量、血TNF-α及血IL-6水平变化与肾炎四味胶囊组比较,差异无统计学意义(P0.05);尿血消1号低剂量与尿血消1号中剂量组相比,尿血消1号中剂量组尿红细胞计数减少、24h尿蛋白定量、血TNF-α及血IL-6的水平减低(P0.05);尿血消1号高剂量组与尿血消1号中剂量对比,尿红细胞计数减少、24h尿蛋白定量、血TNF-α及血IL-6的水平降低(P0.05),从肾脏病理可观察到各治疗组的炎症细胞浸润及肾脏系膜增生情况均比模型对照组程度轻。结论尿血消1号对湿热型肾性血尿有一定的治疗作用,其作用机制可能通过抑制血TNF-α、血IL-6的生成从而达到治疗及保护肾脏的作用。     

三丫苦对胰岛素抵抗模型大鼠脂肪细胞炎症因子的影响

目的 观察三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞炎症因子的影响.方法 将40只SD雄性大鼠随机分为4组;正常对照组、模型对照组、三丫苦组、罗格列酮组,建立高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠模型.检测各组大鼠TC、TG、FBG、FINS等指标的变化,清醒状态下高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验检测葡萄糖输注率,ELISA法检测脂肪细胞炎症因子TNF-α、IL-6和MCP-1.结果 与正常对照组比较,模型对照组TC、TG、FBG、FINS均升高(P＜0.01),葡萄糖输注率降低(P＜0.01).给予三丫苦后,大鼠TC、TG、FBG、FINS降低(P＜0.01或P＜0.05),GIR水平升高(P＜0.05),与罗格列酮组比较,TC和TG降低(P＜0.05).与正常对照组比较,模型对照组TNF-α、IL-6和MCP-1含量均显著升高(P＜0.01).与模型对照组比较,三丫苦组和罗格列酮组TNF-α、IL-6和MCP-1含量均有不同程度的降低(P＜0.01或P＜0.05).与罗格列酮比较,三丫苦组MCP-1含量降低(P＜0.05).结论 三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞炎症因子有一定调节作用.     

柴芪汤对代谢综合征模型大鼠血清TNF-α及IL-6水平的影响

目的:观察柴芪汤对饮食诱发的代谢综合征(MS)模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平的影响,探讨柴芪汤改善代谢综合征的作用机制。方法:将32只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、柴芪汤组和罗格列酮组,除正常组外其他各组用高盐高脂高糖饮食喂养8周,用药组从造模第1天开始给予柴芪汤[5.67 g/(kg·d)]、罗格列酮混悬液[3 mg/(kg·d)]灌胃干预,8周后检测大鼠血清血糖及胰岛素,评价胰岛素抵抗情况,并采用ELISA法检测各组大鼠血清中TNF-α及IL-6的水平。结果:模型组大鼠血糖(FBG)、胰岛素、胰岛素抵抗指数(IRI)、血清TNF-α及IL-6水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P0.05);用药组各项指标低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);大鼠血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数柴芪汤组与罗格列酮组比较,差异无统计学意义(P0.05),柴芪汤组TNF-α及IL-6水平较罗格列酮组明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:柴芪汤可能通过影响血清TNF-α和IL-6水平而改善MS,早期使用柴芪汤可干预MS的形成。     

益气解毒活络中药对早期糖尿病肾病大鼠单核细胞趋化蛋白-1和肿瘤坏死因子-α mRNA的影响

目的:通过观察益气解毒活络中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的影响,以探讨益气解毒活络中药复方防治早期糖尿病肾病的效果及其作用机制,并深入探讨早期糖尿病肾病发生发展的病理机制。方法:将实验用大鼠分为正常对照组、模型组、中药复方预防组、中药低剂量治疗组、中药高剂量治疗组及阳性西药对照组,采用高糖高脂饲料喂养结合一次尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的造模方法复制出糖尿病肾病模型,各药物组干预4周后取肾脏,用Real-time PCR法测试各组MCP-1 mRNA和TNF-αmRNA的表达情况,最后进行组间比较。结果:模型组大鼠MCP-1mRNA和TNF-αmRNA含量均比正常对照组明显上升(P0.01),经药物干预后,各组大鼠上述两项指标的mRNA含量均比模型组显著降低(P0.01)。结论:益气解毒活络中药复方防治DN发生发展的药理机制可能是通过降低MCP-1 mRNA和TNF-αmRNA的高表达来实现;DN的发病机制可能与肾组织中MCP-1 mRNA和TNF-αmRNA的异常表达密切相关。     

金匮肾气汤对糖尿病肾病大鼠HMGB1和自噬信号Beclin1表达的影响

目的:探讨金匮肾气汤(JKSQ)对糖尿病肾病(DN)大鼠高迁移率族蛋白B(HMGB1)和自噬信号Beclin1表达的影响。方法:60只大鼠随机分为对照组、模型组和JKSQ高、中、低剂量组(3.6g/kg/d、1.8g/kg/d、0.9g/kg/d),各12只,均采用高脂饲料联合腹腔注射40mg/kg链脲佐菌素复制DN模型。药物干预3周后,测定空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24h尿蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)和IL-1β水平;Western Blot测定HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、微管相关蛋白I轻链3-I(LC3-I)、LC3-Ⅱ、Beclin 1和p62蛋白表达。结果:与对照组比,模型组大鼠FBG、24h尿蛋白、BUN、Scr、TNF-α、IL-6和IL-1β水平升高(P0.05),HMGB1、TLR4和p62蛋白表达升高(P0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin 1蛋白表达下降(P0.05);与模型组比,JKSQ高剂量组大鼠FBG、24h尿蛋白、BUN、Scr、TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低(P0.05),HMGB1、TLR4和p62蛋白表达下降(P0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin 1蛋白表达升高(P0.05)。结论:JKSQ可以抑制HMGB1蛋白表达,促进Beclin 1介导的自噬,减轻DN大鼠肾组织损伤。     

葛根素注射液对早期糖尿病肾病患者TNF-α和IL-6的影响

目的:探讨葛根素注射液对早期糖尿病肾病患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的影响.方法:将76例早期DN患者随机分为对照组和治疗组各38例,对照组采用常规西药治疗,治疗组在此基础上加用葛根素注射液治疗,连用15 d.采用ELISA法检测两组患者治疗前后血清TNF-α和IL-6水平,同时观察空腹血糖、血脂、24 h尿蛋白等指标的变化.结果:治疗后,治疗组患者血清TNF-α和IL-6水平与与治疗前比较均明显下降(P＜0.01),而对照组与治疗前比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:葛根素注射液可能通过减低DN患者血清TNF-α和IL-6水平,抑制炎症反应,起到对糖尿病肾病的保护作用.     

丹参酮对DN大鼠炎症因子水平影响的实验研究

目的:观察丹参酮对糖尿病肾病(DN)大鼠炎症因子水平的影响.方法:将DN模型大鼠随机分成治疗组11例和对照组12例,另选取10只健康大鼠作为健康组,分别予丹参酮、蒸馏水3mL灌胃,1次/d,连续4周.分别于治疗前后检测各组大鼠TGF-β1、IL-6、TNF-α及NF-κB表达水平,进行统计学分析.结果:与健康组比较,治疗组与对照组各项指标均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),说明造模成功;治疗组治疗后各项指标均明显降低,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:丹参酮可明显降低DN大鼠炎症因子水平,延缓糖尿病肾病进程.     

基于病证结合探讨血瘀证糖尿病肾病大鼠肾损害与内质网应激的关系

目的:观察血瘀证对糖尿病肾病(DKD)大鼠的肾损害以及对内质网应激(ERS)的影响,探讨DKD血瘀证大鼠肾损害与ERS之间的关系。方法:选用50只SPF级雄性SD大鼠,用高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法建立DKD大鼠模型。随机分为正常组、糖尿病组、糖尿病+血瘀证组,其中糖尿病+血瘀证组(0.05 mg·kg-1)采用右旋糖酐法制备。观察各组大鼠一般情况、血液流变学指标,24 h尿蛋白含量、肌酐、肾脏病理学变化;免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),活化转录因子6(ATF6)和肾脏纤维化指标纤维连接蛋白(FN),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,糖尿病组大鼠出现多饮多食多尿、体质量减轻,血液流变学指标全血黏度和血浆黏度均明显升高(P0.05,P0.01),24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮显著上升(P0.01),肾脏病理加重,肾组织的GRP78,ATF6,FN和α-SMA的mRAN及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);经过右旋糖酐法制备血瘀证模型后,糖尿病+血瘀证组大鼠死亡率增加,体征变化较糖尿病组更加明显,全血黏度、血浆黏度,24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮等较糖尿病组显著升高(P0.01),同时病理改变较糖尿病组加重,肾组织的GRP78,ATF6,FN,α-SMA的mRNA及蛋白表达较糖尿病组明显升高(P0.05,P0.01)。结论:在病证结合模型下,血瘀证可能明显加重糖尿病肾病大鼠肾脏病理损害,且与增强糖尿病肾病大鼠肾脏组织的ERS有关。