前脂肪细胞在小肠黏膜下层的生长与增殖

背景：研究表明前脂肪细胞能定向分化为脂肪细胞,具有很强的增殖能力。小肠黏膜下层具有良好的生物相容性,是理想的组织工程支架材料。 目的：将体外培养的前脂肪细胞与小肠黏膜下层复合,观察前脂肪细胞在小肠黏膜下层上的生长和增殖情况。 方法：将体外培养的前脂肪细胞接种在小肠黏膜下层上作为材料组,设置在孔板内培养的细胞作为对照组,在不同时间点用MTT法检测前脂肪细胞的相对数量并绘制生长曲线,观察前脂肪细胞在不同培养条件下的增殖能力。流式细胞仪检查两组前脂肪细胞的增殖和凋亡情况,并观察不同时间点前脂肪细胞生长和黏附情况。 结果与结论：从生长曲线可以看出,接种13 d后小肠黏膜下层上的前脂肪细胞数高于孔板内培养的前脂肪细胞数(P < 0.05),具有良好的增殖能力。小肠黏膜下层上的细胞比孔板培养的细胞有更强的增殖能力(P < 0.05),两组前脂肪细胞均无明显凋亡。由此可知,前脂肪细胞在小肠黏膜下层具有良好黏附和生长的能力。小肠黏膜下层与前脂肪细胞有良好的生物相容性。 关键词：前脂肪细胞;小肠黏膜下层;细胞增殖;生长;黏附;组织工程;生物相容性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.010     

3T3-L1前脂肪细胞的体外培养及胰岛素样生长因子1对其增殖、分化的作用

背景：前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞，如果能够找到可以强力促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物，在脂肪组织移植的同时使用，则有希望提高脂肪组织的移植效果。 目的：摸索体外培养经典的3T3-L1前脂肪细胞的最佳培养环境并积累培养经验，观察胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响，并探求胰岛素样生长因子1的最佳作用剂量。 设计、时间及地点：以细胞为对象的对照观察实验，于2007-10/2008-02在辽宁医学院科学实验中心完成。 材料：3T3-L1前脂肪细胞株购于上海中科院生命科学院；胰岛素样生长因子1购于美国Biological公司。 方法：根据3T3-L1前脂肪细胞的体外培养条件分为6组：空白对照组应用含体积分数为0.1的胎牛血清的标准高糖DMEM培养基培养；各实验组分别应用含有5，10，20，50，100 μg/L胰岛素样生长因子1的含体积分数为0.1的胎牛血清的高糖DMEM培养基培养。 主要观察指标：倒置显微镜下观察各组3T3-L1前脂肪细胞的生长、增殖及分化情况并拍照记录。待细胞铺满瓶底达到单层汇合时，应用流式细胞仪检测细胞周期，应用四甲基偶氮唑盐比色法测定3T3-L1前脂肪细胞的增殖率；应用油红Ｏ染色提取法测定3T3-L1前脂肪细胞内脂肪含量的增殖率。 结果：①倒置显微镜下观察分化前3T3-L1前脂肪细胞呈梭形，胞浆内无脂滴，分化后3T3-L1前脂细胞呈圆形，胞浆内含有大量的脂滴，脂滴聚集于核周，被油红O染成橙红色，形成“戒环”样形态。②四甲基偶氮唑盐比色法和油红O染色提取法检测结果均显示，不同剂量的胰岛素样生长因子1组中3T3-L1前脂肪细胞的增殖率及细胞内脂肪含量的增殖率均高于空白对照组（P < 0.05），胰岛素样生长因子1 20 μg/L组对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化作用最为明显（P < 0.05）；流式细胞仪的分析结果与四甲基偶氮唑盐比色法及油红O染色提取法的检测结果基本一致。 结论：体外细胞培养实验表明，胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化有明显促进作用，其促进作用与浓度并非成正比，而是达到一定剂量后，其促进作用不再增加，而这个剂量接近本实验的最佳剂量值，即20 μg/L。     

碱性成纤维细胞生长因子对人前脂肪细胞增殖和分化的影响

背景：以前的观点认为碱性成纤维细胞生长因子通过促进移植脂肪内的血管再生来提高脂肪的存活率,但其对脂肪细胞的影响没有明确的定论。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对人前脂肪细胞增殖和诱导分化的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外培养,对比观察,于2006-03/2007-12在武警医学院完成。 材料：获取腹部吸脂术患者的脂肪组织标本10例,男1例,女9例,年龄21~45岁。 方法：通过分离、培养和自然纯化过程,获取人前脂肪细胞。实验随机分为碱性成纤维细胞生长因子组和对照组,对照组细胞单纯应用DMEM培养基进行培养传代,碱性成纤维细胞生长因子组使用稀释质量浓度为100 ng/L的碱性成纤维细胞生长因子DMEM培养基对细胞生长进行干预。 主要观察指标：①倒置相差显微镜观察培养后0,3,6,9,12,15 d细胞形态,并进行细胞计数,测定细胞生长曲线。②应用油红O染色,观察细胞内脂肪聚集情况,酶联免疫检测仪上测定吸光度值。 结果：接种后第1~15天,可见梭形的前脂肪细胞分裂增殖,局部融合成细胞单层,部分细胞分化,细胞内脂滴聚集增多。已有细胞变为单泡细胞,接近发育成熟。碱性成纤维细胞生长因子组和对照组细胞形态无明显差异,但碱性成纤维细胞生长因子组细胞数比对照组细胞数多44%。油红O染色后人前脂肪细胞内逐渐出现脂滴,呈暗红色,在培养后15 d细胞内脂滴浓度达到顶峰。碱性成纤维细胞生长因子组吸光度值比对照组增加300%,差异具有显著性意义(P < 0.05)。 结论：碱性成纤维细胞生长因子可以促进人前脂肪细胞的增殖及向脂肪细胞分化。     

第一鳃弓外胚间充质细胞定向脂肪细胞的分化

背景：第一鳃弓作为过渡结构,在牙颌面的发育形成过程中,发挥着重要作用。 目的：观察第一鳃弓外胚间充质细胞自我更新能力,以及体外诱导分化成为脂肪细胞的可能性。 方法：分离培养E9.5 Balb/c胎鼠第一鳃弓外胚间充质细胞,以端粒酶原位杂交和BrdU渗入实验检测外胚间充质细胞的增殖能力。相差显微镜下观察细胞形态变化和生长规律,免疫细胞化学染色鉴定细胞表面标志,cDNA探针原位杂交、免疫荧光化学染色观察细胞增殖能力,油红O染色、RT-PCR产物凝胶电泳观察细胞成脂诱导结果。 结果与结论：端粒酶原位杂交和BrdU摄取实验阳性,诱导后细胞表现出典型的脂肪细胞形态,大部分细胞油红O染色阳性,RT-PCR结果显示诱导后细胞表达了脂蛋白脂酶。提示第一鳃弓外胚间充质细胞具有较高的自我更新能力,并可定向诱导分化成为脂肪细胞。     

大鼠脂肪源性干细胞的分离培养及鉴定

背景：脂肪源性干细胞在体外易于培养,增殖快,具有多向分化潜能。 目的：构建一种体外分离培养SD大鼠脂肪源性干细胞的方法,并对其部分生物学特性与表型进行分析。 方法：切取SD大鼠腹股沟脂肪垫,应用胶原酶Ⅰ消化,分离大鼠脂肪源性干细胞,进行体外培养、传代,倒置显微镜观察细胞的生长增殖及形态变化,诱导成骨、成脂,分别行碱性磷酸酶、茜素红、von Kossa染色及油红O染色,绘制生长曲线及用流式细胞仪检测细胞表面标记。 结果与结论：体外培养的脂肪源性干细胞呈梭形,增殖活跃,传代后形态均一,多次传代后细胞仍保持较强增殖能力,生长曲线呈“S”型。成骨诱导实验组碱性磷酸酶、茜素红、von Kossa染色阳性;成脂诱导实验组油红O染色阳性;对照组均为阴性。细胞CD29,CD44,CD105表达阳性,CD31,CD45表达阴性。提示SD大鼠腹股沟脂肪垫分离的脂肪源性干细胞在体外易于分离培养和传代扩增,特定条件下可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞,并表达间充质干细胞相关的表型。     

长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性及其限制性

背景：间充质干细胞具有多向分化能力、免疫调节能力,并可在体外进行长期培养扩增,但其体外长期培养的生物学活性变化特点及其限制性仍不十分清晰。 目的：观察体外长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性变化特点及其限制性。 方法：无菌收集剖宫产新生儿脐带,经胶原酶Ⅱ消化后,用黏附生长选择法获取人脐带间充质干细胞,胰酶消化传代;取第3代细胞进行流式分析,脂肪和成骨诱导鉴定;收集不同代的细胞分别用MTT法、流式细胞仪和爬片分析法检测细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率及黏附能力。 结果与结论：人脐带间充质干细胞的细胞表型CD105+/CD29+/CD44+/CD31-/CD34-/CD45-/HLADR-,可诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞;传代培养第3~23代细胞形态无明显变化,生长曲线基本一致,第28代后细胞增长缓慢;流式分析发现第33代细胞较第3代G0/G1减少17.9%、S+G2/M增加103.4%、细胞凋亡率增加316.7%,差异均有显著性意义(P < 0.01),第3~18代细胞间G0/G1、S+G2/M、细胞凋亡率和黏附细胞数差异均无显著性意义(P > 0.05)。提示在体外长期培养环境中,随着传代次数的递增,人脐带间充质干细胞的增殖及黏附能力下降,细胞凋亡率增加,总的生物活性呈逐渐下降趋势,其最佳生物活性期出现在培养第3~18代之间。     

小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化过程中过氧化物酶增殖物激活受体γ与CCAAT/增强子结合蛋白α的表达

背景：目前关于脂肪细胞分化的分子作用机制的研究较少。过氧化物酶增殖物激活受体和CCAAT/增强子结合蛋白家族的转录调控因子可诱导前脂肪细胞表达促进其分化成熟的多个转录因子,但其作用机制却罕见报道。 目的：观察小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞过程中过氧化物酶增殖物激活受体γ和CCAAT/增强子结合蛋白α的表达,以及在脂肪细胞分化过程中的变化。 方法：体外培养3T3-L1前脂肪细胞,采用经典激素鸡尾酒诱导法诱导细胞分化,诱导剂为1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、地塞米松和胰岛素。诱导后0,2,4,6和8 d,用油红O染色和染色比色法分析脂肪细胞的分化程度,采用实时PCR和Western blot技术检测不同时间点的过氧化物酶增殖物激活受体γ和CCAAT/增强子结合蛋白α的表达。 结果与结论：在前体脂肪细胞的分化过程中,随时间的延长相对脂肪含量、过氧化物酶增殖物激活受体γ与CCAAT/增强子结合蛋白α表达水平均明显升高(P < 0.01)。说明在小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞过程中,过氧化物酶增殖物激活受体γ与CCAAT/增强子结合蛋白α对细胞分化可能起促进作用。 关键词：脂肪细胞;细胞培养;细胞分化;过氧化物酶增殖物激活受体γ;CCAAT/增强子结合蛋白α     

p38MAPK信号通路与应力介导成肌细胞的凋亡*

背景：在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。 目的：在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,研究p38MAPK信号通路在成肌细胞凋亡中的作用及其机制。 方法：将体外培养的C2C12细胞分为对照组和SB203580组,SB203580组中加入 20 mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。应用细胞应力加载装置Flecell Strain Unit-5000T给细胞提供15%的力值,分别施加0,6,12,24 h的周期性张应力。每分钟10个循环,每循环包括3 s牵张,3 s松弛。Hoechst 33258染色观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测促凋亡基因bax mRNA的表达;Western blot检测信号通路中p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达。 结果与结论：随着加力时间的延长,细胞逐渐出现核固缩及凋亡小体,凋亡率增加(P < 0.05),bax mRNA表达增多(P < 0.05);细胞p38MAPK和p-p38MAPK蛋白均在加力6 h达到最低,此后逐渐升高。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制加力引起的细胞凋亡,减少bax mRNA及p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达(P < 0.05)。说明p38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的作用。     

体外压力刺激对大鼠“足三里”穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1的影响

背景：腧穴筋膜结缔组织成纤维细胞是针推治疗操作过程中的主要受力组织细胞之一，细胞生物学行为的调整对腧穴发挥治疗作用的功能关系密切。 目的：通过体外实验观察压力刺激对大鼠“足三里”穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1的影响。 方法：体外培养大鼠“足三里”穴筋膜组织成纤维细胞，随机分为空白对照组和压力刺激组。压力刺激组对细胞实施50kPa压力刺激，每次加力2 h，每8 h1次，共6次；空白对照组不加压。检测细胞外培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1含量的变化，并计算基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的变化。 结果与结论：“足三里”穴筋膜组织成纤维细胞压力作用后，培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E2含量均增加(P < 0.05或0.01)，基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值增大(P < 0.05)，胰岛素样生长因子1变化无显著性意义。结果证实，压力刺激对腧穴筋膜组织成纤维细胞基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E2合成释放的调节，以及对基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的提高，可能是腧穴接受针灸推拿治疗后发挥“疏经通脉”作用的细胞生物力学原理之一。     

p38MAPK与新生大鼠成骨细胞的增殖、分化和凋亡

背景：p38MAPK是MAPK信号转导途径的通道之一。但是,p38MAPK如何参与成骨细胞增殖、分化的调控,是否与成骨细胞的凋亡有关,目前尚未见相关文献报道。 目的：观察p38MAPK对新生大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响。 设计、时间及地点：单一样本观察,细胞学体外对比观察,于2007-05/2008-03在解放军兰州军区总院骨科研究所细胞培养室完成。 材料：新生24 h SD大鼠9只用于分离成骨细胞;SB203580(p38MAPK的阻断剂)为Sigma公司产品。 方法：取新生SD大鼠头盖骨成骨细胞。药物刺激组分别加入不同浓度(1×10-6,1×10-7,1×10-8 mol/L )的17β-雌二醇、葛根素;含阻断剂组提前30 min添加10 μmol/LSB203580阻断信号转导通路,再加药物;设空白对照组。 主要观察指标：作用72 h后用四甲基偶氮唑盐法与对硝基苯磷酸法测定细胞的增殖能力和碱性磷酸酶活性,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡。 结果：加入17β-雌二醇或葛根素药物后,成骨细胞的增殖、分化明显增强,与空白对照组比较差异有显著性意义(P < 0.05);阻断p38MAPK信号转导通路后,细胞增殖未受明显抑制(P > 0.05);分化受到明显抑制,与未阻断组比较差异具有非常显著性意义(P < 0.01)。流式细胞仪分析结果显示,与对照组相比,药物组细胞早期凋亡率明显降低(P < 0.05);与药物刺激组相比,含阻断剂组细胞早期凋亡率无明显变化(P > 0.05)。 结论：17β-雌二醇、葛根素能促进成骨细胞的增殖和分化并抑制其凋亡;p38MAPK在成骨细胞分化过程中发挥重要作用,对成骨细胞的增殖、凋亡无明显影响。     

纤维蛋白胶对脂肪干细胞增殖和存活的影响

摘要 背景：尽管有很多生物支架材料被用于携带种子细胞，但纤维蛋白胶与脂肪干细胞二者在体外的共培养研究及种子细胞在支架材料中的增殖存活评价没有统一的标准。 目的：探讨纤维蛋白胶对体外培养的大鼠脂肪干细胞的增殖和存活性，为可注射组织工程化心肌治疗心肌梗死提供实验依据。 方法：分离培养大鼠脂肪干细胞，通过流式细胞术检测其免疫表型，将脂肪干细胞与纤维蛋白胶共培养，用噻唑蓝比色法及LIVE/DEAD荧光双染色检测脂肪干细胞在纤维蛋白胶中的增殖和存活性。 结果与结论：大鼠脂肪干细胞表型特征为CD90、CD105阳性，CD34、CD45阴性，噻唑蓝比色结果显示，纤维蛋白胶中的脂肪干细胞增殖活性高于常规培养组(P < 0.05)，LIVE/DEAD荧光双染色显示脂肪干细胞在纤维蛋白胶中生长良好，24，72 h的细胞存活率均在90%以上，死亡率小于7%。结果提示，大鼠脂肪干细胞在纤维蛋白胶中增殖和存活良好，可用纤维蛋白支架携带脂肪干细胞用于可注射心肌组织工程研究。 关键词：脂肪干细胞；纤维蛋白胶；细胞培养；增殖；存活 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.002     

Non-linearity of visual evoked potentials in cerveau isolé and midpontine pretrigeminal cats

Characteristics of the visual evoked responses to the flickering flash stimulation were studied in the cerveau isolé and midpontine pretrigeminal cats. The flash stimulation frequency was changed stepwise between 1 and 30 Hz in increasing and decreasing order. In all cases of both preparations, with drawing of fixed sweep speed of 200 msec in whole length, P1 and N1 latencies in the successive response slightly prolonged progressively 1 to about 20 Hz and thereafter shortened about 20-30 Hz stimulus frequencies in the course of the increasing phase, and vice versa in the course of the decreasing phase. Moreover, no difference in each latency (P1, N1, P2, N2) was found at the same stimulus frequency during increasing and decreasing phases. In the amplitude taken from the P1-N1 component, the peak was found in 5-9 Hz frequency bands. This peak was higher during the decreasing phase than during the increasing phase, which indicated a hysteresis phenomenon. A peak of power for the 1st harmonics was found at 3-6 Hz driving frequency bands, and that of the 2nd harmonics at 6-10 Hz. In the state without flash stimulus, no peaks or valleys in the power spectrum were found in specific frequencies, for example 3-10 Hz. The peak in the amplitude and that in the power spectrum at 3-10 Hz stimulus frequency bands suggested an entrainment phenomenon induced by forced oscillation. The phenomena of entrainment and hysteresis suggest the existence of a non-linear structure in the oscillation generating systems of visual evoked response.     

低氧增强骨髓间充质干细胞对缺氧诱导心肌细胞凋亡的可能性

背景：骨髓间充质干细胞移植入缺血心肌后存活率低,而低氧有可能增强骨髓间充质干细胞的增殖,促进其存活。 目的：体外模拟心肌细胞缺血微环境,探索低氧预处理后,骨髓间充质干细胞对持续缺氧诱导的心肌细胞凋亡的保护作用。 方法：取第4代SD大鼠骨髓间充质干细胞用于制备条件培养液。取胚胎大鼠心肌细胞株,随机分成4组：对照组：心肌细胞正常培养组;模型组：心肌细胞单纯缺氧;骨髓间充质干细胞组：心肌细胞与骨髓间充质干细胞条件培养液共缺氧;低氧组：心肌细胞与骨髓间充质干细胞低氧条件培养液共缺氧。MTT检测各组细胞活力变化,Annexin V-FITC双染标记心肌细胞凋亡,免疫组化检测各组Bax和Bcl-2蛋白的表达。 结果与结论：免疫组化显示,低氧组的Bcl-2表达较其他各组增强,而Bax的表达比模型组和骨髓间充质干细胞组减弱,Bcl-2/Bax比值最大。与对照组和骨髓间充质干细胞组相比,低氧组的细胞活力高(P < 0.05),凋亡率降低(P < 0.05)。提示低氧可能是通过增强旁分泌机制,从而对Bax和Bcl-2进行调节,对心肌细胞凋亡有保护效应。     

红花黄色素可促进人脐静脉内皮细胞的增殖*

背景：心血管疾病的发生、发展与内皮细胞增生及凋亡有关。 目的：观察红花黄色素对血管内皮细胞模型的保护作用。 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞,先采用红花黄色素进行干预,随后采用溶血卵磷脂体外诱导建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,并设置对照组。 结果与结论：与对照组比较,溶血卵磷脂干预的人脐静脉内皮细胞增殖减弱(P < 0.05),细胞凋亡增加(P < 0.05),一氧化氮浓度降低(P < 0.01),而经红花黄色素干预后上述现象均可被逆转(P < 0.05)。结果证实,红花黄色素可通过促进内皮细胞增殖,抑制其凋亡并增加一氧化氮浓度对溶血卵磷脂诱导的内皮细胞损伤起保护作用。     

Impaired synaptic potentiation processes in the hippocampus of aged, memory-deficient rats

A series of neurophysiological experiments was performed on the Schaffercommissural system of the hippocampus of aged and young anesthetized Fischer rats. The aged Fischer rats were previously found to exhibit retention performance deficits. No obvious differences were found between aged and young animals in amplitude, latency, stimulation threshold, or wave forms of typical synaptic responses when these were elicited by control (0.3 Hz) stimulation pulses. Further, the temporal curves of facilitation during a paired-pulse series were not different in aged and young animals. However, aged and young synapses showed consistently different responses during repetitive stimulation. Synapses of aged animals were deficient in frequency potentiation processes during 12 Hz stimulation; and the aged animals exhibited a delayed rise of post-tetanic synaptic potentiation following a 5 sec, 100 Hz stimulation train. Moreover, aged synapses ‘exhausted’ more rapidly during continous 4Hz stimulation. Throughout these studies a biphasic pattern of potentiation was observed during repetitive stimulation (brief potentiation, depression, renewed potentiation). Aged animals were deficient primarily in development of the second phase of potentiation. This pattern suggests an age-related impairment of some secondary process of potentiation. leading to an increased tendency to synaptic depression during and after stimulation. The possibility that the impaired hippocampal synaptic plasticity may be related to reported deficient behavioral plasticity in the aged animals is considered.     

Effect of neuromuscular electrical stimulation frequency on muscles of the tongue

Introduction: Neuromuscular electrical stimulation (NMES) for the treatment of swallowing disorders is delivered at a variety of stimulation frequencies. We examined the effects of stimulation frequency on tongue muscle plasticity in an aging rat model. Methods: Eighty‐six young, middle‐aged, and old rats were assigned to either bilateral hypoglossal nerve stimulation at 10 or 100 Hz (5 days/week, 8 weeks), sham, or no‐implantation conditions. Muscle contractile properties and myosin heavy chain (MyHC) composition were determined for hyoglossus (HG) and styloglossus (SG) muscles. Results: Eight weeks of 100‐Hz stimulation resulted in the greatest changes in muscle contractile function with significantly longer contraction and half‐decay times, the greatest reduction in fatigue, and a transition toward slowly contracting, fatigue‐resistant MyHC isoforms. Discussion: NMES at 100‐Hz induced considerable changes in contractile and phenotypic profiles of HG and SG muscles, suggesting higher frequency NMES may yield a greater therapeutic effect. Muscle Nerve, 2018     

吡咯喹啉醌与神经干细胞的增殖

背景：目前国内外学者主要应用生长因子样物质来促进神经干细胞的分裂与增殖,所以作者推测吡咯喹啉醌小分子化合物也能促进神经干细胞的分裂增殖。 目的：体外观察氧化还原酶辅酶吡咯喹啉醌促进鼠成体神经干细胞增殖的作用。 方法：体外培养Wistar胎鼠成体神经干细胞成球体后,于培养液中加入1×10-8 mol/L吡咯喹啉醌,对照组加入同等剂量的Hanks溶液。应用流式细胞仪测细胞周期增殖率,应用免疫组化法和Western Blot测周期蛋白激酶(CDK2)和周期蛋白激酶抑制剂(P27)的表达。 结果与结论：与对照组相比,吡咯喹啉醌处理16 h和24 h后,S期和G2期细胞数的比例显著增高,而细胞的凋亡率降低;CDK2蛋白的表达显著增强,而P27的表达显著降低。结果显示低浓度的吡咯喹啉醌即能促进鼠成体神经干细胞的增殖。     

Parkinson's disease and pathological oscillatory activity: Is the beta band the bad guy? — New lessons learned from low-frequency deep brain stimulation

A number of studies have identified pathological neural oscillations in Parkinson's disease and it is widely agreed that these excessive synchronizations are linked to the motor symptoms of Parkinson's disease (PD). However, it is still under debate if there exists a single frequency having a critical negative influence on PD symptoms and what this frequency might be. To provide experimental evidence for a causal link between beta oscillations and bradykinesia, C. C. Chen and coauthors stimulated patients with Parkinson's disease with different low frequencies while the patients were performing a grip force task [C. C. Chen, W. Y. Lin, H.L. Chan, Y.T. Hsu, P.H. Tu, S.T. Lee, S.M. Chiou, C.H. Tsai, C.S. Lu, P. Brown: Stimulation of the subthalamic region at 20 Hz slows the development of grip force in Parkinson's disease, Exp. Neurology, 2011]. In their study the authors could demonstrate a 15% slowing in the grip force task during 20 Hz stimulation, but not during stimulation with other frequencies. The finding of 20 Hz being the driving pathological frequency contrasts with previous studies using e.g. finger tapping, where 5 and 10 Hz had the largest influence. Thus, this study provides evidence that there is no single pathological oscillation frequency that is responsible for all Parkinsonian symptoms. Instead, the results indicate that the modulation of very specific frequencies leads to changes in specific performance parameters evaluated in particular tasks. In this respect, this study also provides more physiological evidence on the involvement of the STN in dynamic force production. Taken together, the study adds a further piece to the puzzle of understanding the pathophysiology of Parkinson's disease and the mechanisms of deep brain stimulation.