孔雀绿指示的实时显微形态观察法快速检测结核分枝杆菌

目的探讨孔雀绿指示的实时显微形态观察法在结核分枝杆菌(MTB)快速检测中的应用价值。方法将去污染MTB阳性痰标本接种于微孔液体培养板中,37℃培养,第5天每天用倒置显微镜观察微孔培养板内MTB菌落形态以及微孔变色情况,观察到变色微孔里特异的索状生长结构表示有MTB生长。将同一份标本同时接种于罗氏固体培养基。将液体培养法的检测结果与罗氏固体培养法检测结果比较,分析孔雀绿指示的实时显微形态观察法检测MTB的敏感性、特异性、耗时。结果与两种方法所有阳性结果比较,孔雀绿指示的实时显微形态观察法检测MTB的敏感性为93.5%,特异性为100%,耗时9d。罗氏固体培养法敏感性为76%,特异性为100%,耗时24d。阳性孔变色的时间中位数为9.3d。结论孔雀绿指示的实时显微形态观察法检测MTB具有很高的敏感性和特异性,且需时较短、不需特殊仪器设备,可作为MTB快速检测方法。     

噬菌体生物扩增法快速检测痰结核分枝杆菌的临床应用

目的：评价噬菌体生物扩增法（PhaB）检测痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法：应用PhaB法、BACTEC MGIT960法检测105例痰标本中结核分枝杆菌。结果：PhaB法、BACTECMGIT960法阳性标本例数分别为944、41;以培养结果为评价标准,PhaB的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为87．8％、87．5％、81．8％、91．8％。结论：PhaB测定痰中结核菌只需18～24h,具有较高的敏感性和特异性,可作为临床结核分枝杆菌的快速检测方法。     

苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点判断凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药性的评价

目的 评价苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点在判断凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）甲氧西林耐药性中的准确性。方法 苯唑西林（1μg）和头孢西丁（30μg）纸片扩散法测定149株临床分离的CNS对甲氧西林的耐药性，量取两种纸片的抑菌环直径。对苯唑西林组分别以≤14mm、≤15mm、≤16mm、≤17mm（CLSI／NCCLS2004标准）为耐药折点，对头孢西丁组分别以≤21mm、22mm、≤23mm、≤24mm（CLSI／NCCLS2004年标准）为耐药折点，与mecA基因检测结果比较，评价两种纸片扩散法在各折点对耐甲氧西林CNS判断的敏感性和特异性。结果 与mecA基因检测结果比较，苯唑西林纸片扩散法在不同的耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为52．3％、75．0％、90．9％、100％，特异性都为100％，判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为66．7％、79．0％、90．1％、97．5％，特异性分别为100％、100％、100％、94．4％；头孢西丁纸片扩散法在不同耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为45．5％、70．1％、90．9％、100％，特异性都为100％，判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为83．6％、91．8％、97．3％、100％，特异性都为100％。结论 苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林CNS的现行耐药折点标准在判断表皮葡萄球菌和非表皮葡萄球菌CNS的甲氧西林耐药性中都有很高的敏感性和特异性，适用于CNS对甲氧西林耐药性的判断。对于非表皮葡萄球菌CNS，头孢西丁纸片扩散法较苯唑西林纸片扩散法结果更可靠。     

噬菌体检测技术(PhaB)检测抗结核药物乙胺丁醇的耐药性

目的探讨噬菌体检测技术(PhaB)在检测抗结核药物乙胺丁醇耐药性中的价值。方法应用PhaB测定30株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对乙胺丁醇(E)的耐药性,并与罗氏药敏结果比较。结果PhaB检测E药敏结果与罗氏药敏结果符合率为90%。如以绝对浓度法为判断标准,则PhaB检测E药敏的敏感性为95.6%,特异性为71.4%,阳性预测值(PPV)为91.6%,阴性预测值(NPV)为83.2%,准确性为90%。结论PhaB检测E药敏结果与绝对浓度法符合率较高,可作为结核分枝杆菌耐药性的快速筛选方法。     

矽肺结核痰标本结核分支杆菌快速培养药敏的临床分析总结

目的评价Bactec-MGIT960对矽肺结核的诊断价值。方法Bactec-MGIT960对90例矽肺结核患者痰标本进行结核杆菌快速培养和药敏．并与改良7H9法、改良L-J罗氏培养法作了比较。结果Bactec-MGIT960、改良7H9和L-J罗氏培养法平均8．8、22．1和32．6d。培养阳性率分别为67．6％、64．4％和53．3％。Bactec-MGIT960法药物敏感试验结果与其它检测方法相比，吻合率在90％以上。结论Bactec-MGIT960快速培养结合改良7H9快速药敏有助于临床诊断。     

三种不同方法检测结核分枝杆菌药物敏感性分析

目的探讨仪器液体比例法（BacT／ALERT 3D与MGIT960系统）与L—J比例法测试结核分枝杆菌药物敏感性结果的一致性。方法用BacT/ALERT3D快速药敏法、MGIT960快速药敏法、L—J比例法同时对107株结核分枝杆菌进行INH、SM、RFP及EMB四种抗结核药物的耐药性测定。结果（1）INH、SM、RFP及EMB用BacT／ALERT3D法、MGIT960法、L—J比例法药敏测试结果一致率分别为：93％、90％、95％、90％。（2）BacT／ALERT3D法、MGIT960法、L—J比例法对INH、SM、RFP、EMB的耐药率分别是：27％、28％、24％;12％、13％、19％;25％、25％、22％;7％、6％、9％。三种方法四种药物的耐药性均无显著性差异（P〉0．05）.（3）BacT／ALERT3D法、MGIT960法、L—J比例法完成药敏测试平均时间为10．5天、7．7天、28天,经统计存在差异显著性（P〈0．00）.结论BacT/ALERT3D法、MGIT960法、L-J比例三法对INH、SM、RFP、EMB药敏测试结果具有高的可比性。MGIT960法药敏检测时间最短。     

GeneXpert MTB/RIF技术在MDR-TB及RIF耐药性诊断中的应用价值

目的:探讨利福平耐药实时荧光定量PCR技术(GeneXpert MTB/RIF技术)在多重耐药结核杆菌(MDR-TB)及利福平(RIF)耐药性诊断中的应用价值.方法:选取2019-01～ 12我院收治的120例疑似肺结核患者,采集痰标本分别开展痰涂片镜检、分枝杆菌分离培养检查法(罗氏培养)与药敏试验、PCR法检测结核杆菌以及GeneXpert检查.结果:本组患者中确诊肺结核93例,痰涂片镜检、分枝杆菌分离培养检查法(罗氏培养)与药敏试验、PCR法检测结核杆菌以及GeneXpert检查的检测特异度均超过90％;相较于痰涂片镜检,Xpert检测具备更高的检测敏感性(P＜0.05);分枝杆菌分离培养检查法(罗氏培养)与药敏试验、Xpert法检测敏感性差异无统计学意义(P＞0.05);RIF耐药性显示肺结核分枝杆菌的耐药性不超过10.00％;将分枝杆菌分离培养检查法(罗氏培养)与药敏试验作为金标准,检测出MDR-TB共8株,GeneXpert MTB/RIF技术对MDR-TB的检出率为87.50％.结论:GeneXpert MTB/RIF技术在MDR-TB及RIF耐药性诊断中的应用效果确切,可作为MDR-TB检测的主要方法.     

BACTEC-MGIT 960快速药敏与罗氏比例法药敏检测方法对比

目的:比较BACTEC-MGIT960全自动分枝杆菌快速药敏与罗氏比例法药敏检测方法的一致性。方法:平行检测住院患者分枝杆菌临床分离株245株的利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)的药物敏感性。结果:经对比检测,BACT-MGIT960全自动分枝杆菌药敏测定可在4~13 d内检测RFP,INH,SM,EMB的药物敏感性,平均7.8d。与罗氏比例法药敏的符合率分别达到98.78%,97.55%,96.73%,96.73%。平均符合率为97.45%。结论:BACTEC-MGIT 960分枝杆菌液体药敏系统,可快速准确获得药敏检测结果,尤其适用于临床分离株的快速药敏筛检。     

基因芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性

目的研究基因芯片在检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性中的应用。方法根据与利福平和异烟肼耐药相关的4条基因上的11个位点和30种单核苷酸多态性设计制作芯片,用芯片检测结核分枝杆菌的基因突变,从而判断其耐药性。结果用基因芯片在110株异烟肼耐药株中检测出85侏（73．3％）,在30株异烟肼敏感株中检测出22株（73．3％）,在94株利福平耐药株中检测出77株（81．9％）,在46株利福平敏感株中检测出40株（87．0％）。芯片检测结果与部分样本的测序结果完全相符。结论用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,该法快速、精确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。     

Xpert MTB/RIF试验在县(区)基层结核病实验室诊断疑似肺结核中的应用价值

目的 :探索Xpert MTB/RIF试验在县(区)基层结核病实验室诊断疑似肺结核中的应用价值.方法 :选取2015年3—6月在惠州市博罗县慢性病防治站就诊的疑似肺结核患者的痰样本110份,分别进行涂片抗酸染色法、固体培养法和比例法药敏、Xpert MTB/RIF试验检测.以固体培养法检测结果为标准,评估涂片抗酸染色法和Xpert MTB/RIF试验检测痰样本中结核分枝杆菌的敏感度及特异性;以比例法药敏试验检测结果为标准,评估Xpert MTB/RIF试验检测结核分枝杆菌对利福平耐药的敏感度和特异性.结果 :在110份痰样本中,结核分枝杆菌培养阳性的有48份,阳性率为43.64%.以固体培养法检测结果为标准,涂片抗酸染色法检测的敏感度为83.33%,低于Xpert MTB/RIF试验检测的91.67%,但差异无统计学意义(χ2=1.5238,P>0.05);特异性为90.32%,稍高于Xpert MTB/RIF试验检测的88.70%,但差异也无统计学意义(χ2=0.0859,P>0.05).以固体培养法检测结果为标准,涂片抗酸染色法和Xpert MTB/RIF试验检测的K值分别为0.752和0.821,涂片抗酸染色法和Xpert MTB/RIF试验检测结果与固体培养法检测结果均具有较好的一致性.以比例法药敏试验检测结果为标准,Xpert MTB/RIF试验检测结核分枝杆菌对利福平耐药的敏感度和特异性分别为87.50%和94.59%.结论 :Xpert MTB/RIF试验检测操作简单、快速,可用于检测结核分支杆菌及其对利福平的耐药性,检测结果具有较高的敏感度和特异性,且与固体培养法检测结果有较好的一致性,具有在县(区)基层结核病实验室推广应用的潜力.