VEGF-A和C在人结肠癌淋巴管生成和淋巴道转移中的作用

目的分析血管内皮生长因子(VEGF)-A和VEGF-C在人结肠癌组织的表达及与结肠癌淋巴管生成和淋巴道转移的关系。方法取人结肠癌组织91例,应用免疫组化方法检测VEGF-A和VEGF-C在结肠癌组织中的表达。应用D2-40标记结肠癌组织的淋巴管,观察结肠癌组织的淋巴管生成情况。结果结肠癌组织中VEGF-A和VEGF-C的表达水平明显高于正常组织,VEGF-A和VEGF-C表达阳性的结肠癌组织的淋巴管密度(LVD)明显高于阴性组织,VEGF-A和VEGF-C的表达及LVD均与淋巴结转移及Duke's分期相关。结论结肠癌组织VEGF-A和VEGF-C过表达与结肠癌的淋巴管生成和淋巴道转移相关。     

血管生成抑制素和反应停对淋巴管内皮细胞生成的影响

目的：探讨血管生成抑制素和反应停对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响及作用机制。方法：淋巴管内皮细胞取自猪的胸导管。采用划线法和MTT法观察血管生成抑制素和反应停对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响。Hoechst染色检测细胞凋亡。结果．划线法和MTT法均显示血管生成抑制素和反应停对淋巴管内皮细胞的增殖和游走有明显的抑制作用。Hoechst染色证实,经血管生成抑制素和反应停处理后的淋巴管内皮细胞,核周围有凋亡小体。结论：血管生成抑制素和反应停对淋巴管内皮细胞的增殖和游走具有明显的抑制作用,且有剂量依赖性。血管生成抑制素和反应停具有促进细胞凋亡的作用。     

白薇根部提取物上调部分肝切除后血管再生相关蛋白的表达促进肝脏新生血管形成

目的观察白薇提取物对部分肝切除后血管再生过程的影响,探讨其调节作用的相关分子及机制。方法昆明种小鼠20只,随机分为对照组、白薇组。两组分别采用一次性切除部分肝左外叶。实验组则在术后开始灌胃给药白薇提取液(50 g/kg),2次/d。术后1~8 d,每天处死2组小鼠各1只,取肝左外叶。免疫组织化学技术检测血管内皮生长因子C(VEGF-C)、VEGF-A、淋巴管内皮透明质酸受体1(LYVE-1)、CD34的表达。结果与对照组相比,白薇组中CD34表达明显升高,分布范围扩大,VEGF-C、VEGF-A、LYVE-1的表达早期下降,后期则显著增加。结论白薇上调VEGF-A、VEGF-C、LYVE-1的表达,促进血管新生。     

VEGF在胃癌中的表达及临床意义

血管内皮生长因子(VEGF)具有高度特异性、在生理性及病理性血管生成中具有重要作用，而且还促使癌细胞脱落进人血管或向邻近纤维蛋白和结缔组织基质扩散，为肿瘤浸润转移创造条件。本文选取消化道常见肿瘤胃癌，应用SP免疫组化法，检测人胃癌组织中VEGF表达与胃癌临床病理指标的关系，为预测胃癌预后和肿瘤抗血管生成疗法，提供理论依据。     

APCP对人胃腺癌细胞HGC-27生长及血管内皮生长因子的影响

目的体外应用CD73(5’-核酸酶)特异性抑制剂APCP(alpha,beta-methylene adenosine-5’- diphosphate,5’-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷),探讨其对人胃腺癌细胞HGC-27细胞生长及其对血管内皮生长因子VEGF-C、VEGF-D表达的影响。方法体外培养HGC-27细胞达指数生长,设正常组和APCP不同浓度干预组,倒置显微镜观察各组细胞生长状态,MTT法检测各组细胞活性,免疫组化法观测两组细胞VEGF-C、VEGF- D的表达及其积分光密度。结果同正常组相比,随药物浓度增加,APCP各干预组细胞在生长方面表现为生长缓慢,胞浆皱缩,细胞界线模糊,细胞数量减少(P<0.05);各干预组细胞内VEGF-C、VEGF-D的表达低于正常对照组(P<0.05)。结论APCP抑制HGC-27细胞生长,细胞数量减少,降低细胞内VEGF-C、VEGF-D的表达。     

血管内皮生长因子-A与血管内皮生长因子-C在非小细胞肺癌中表达及与淋巴结转移的相关性

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-A和VEGF-C在非小细胞肺癌(non-small lung cancer,NSCLC)中的表达及与淋巴管生成、转移的关系.方法 以60例肺癌组织作为实验组,20例肺正常组织作为参考组,采用免疫组织化学方法检测其中的VEGF-A和VEGF-C两种蛋白表达,以D2-40 及CD34分别标记组织淋巴管和血管中的内皮细胞,并记录淋巴管的密度,血管作为对比,结合NSCLC临床、病理参数系统分析.结果 ①肺癌组织内VEGF-A蛋白阳性的表达率为73.33%(44/60)明显高于肺正常组织25.00%(5/20)(χ2=14.7641,P=0.0001),VEGF-C蛋白的阳性表达率为83.33%(50/60) 明显高于肺正常组织30.00%(6/20)(χ2=20.3175,P =0.0001).②肺癌组织VEGF-A蛋白阳性的表达高于癌旁周围组织(χ2=4.4815,P=0.0343),癌组织内VEGF-C蛋白阳性的表达高于癌旁周围组织(χ2=8.5333,P=0.0035).③VEGF-A与VEGF-C蛋白的表达和患者的性别、年龄大小、分化的程度、肿瘤大小、组织学无关,但淋巴结转移与PTNM分期呈显著相关(χ2=6.3736,P=0.0116)和(χ2=6.6516,P=0.0099).④VEGF-A蛋白阳性组织中微淋巴管密度(microlymphatic vessel density,MLVD)显著高于阴性组织(t=-7.2735,P<0.005),VEGF-C蛋白阳性的组织中MLVD 显著高于阴性组织(t=6.9338,P<0.005).MLVD与淋巴结转移和PTNM分期显著相关(t=-12.1146,P<0.05).结论 NSCLC组织中VEGF-A与VEGF-C二者蛋白的表达可能通过促进增加淋巴管生成从而促进淋巴结的转移.因此,在NSCLC中VEGF-A和VEGF-C蛋白可作为评估淋巴结转移的重要标记因子.     

食管癌血管内皮生长因子和受体的表达及在癌转移中的作用

目的观察人食管癌组织和淋巴管中血管内皮生长因子(VEGF-C)及其受体-3(VEGFR-3)的表达,探讨食管癌的淋巴道转移机制。方法取临床手术切除的食管癌组织,用免疫组化方法检测人食管癌早期和进展期癌细胞或淋巴管对VEGF-C及其VEGFR-3的表达情况。结果在食管癌的癌细胞中可见VEGF-C阳性表达,阳性颗粒主要定位于肿瘤细胞胞浆内。淋巴管内皮细胞仅见VEGFR-3阳性表达,VEGFR-3在血管和癌细胞中也存在少量阳性表达。进展期食管癌VEGF-C和VEGFR-3的表达率和表达强度均强于早期。结论食管癌癌细胞VEGF-C的表达和淋巴管内皮细胞上VEGFR-3的表达均与肿瘤进展呈正相关,推测VEGF-C通过受体VEGFR-3促进食管癌组织淋巴管生成,从而引起癌淋巴道转移。     

血管内皮生长因子C及血管内皮生长因子受体3在人直肠腺癌中的表达及其意义

目的:检测血管内皮生长因子C(VEGF-C)及血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)在人直肠癌组织和淋巴结中的表达,探讨VEGF-C在人直肠癌发生、发展和淋巴结转移中的作用.方法:选用31例手术切除并经病理切片确诊为直肠腺癌的癌组织石蜡标本,采用免疫组织化学方法检测VEGF-C及VEGFR-3在癌组织和淋巴结内的表达.结果:在31例直肠腺癌组织的癌细胞质中,VEGF-C显色阳性者54.8%;VEGFR-3显色阳性者64.5%;在14例淋巴结中,VEGF-C显色阳性者71.4%;VEGFR-3显色阳性者64.3%.结论:VEGF-C和VEGFR-3在直肠癌组织和淋巴结中均有较高表达,VEGF-C通过与VEGFR-3结合,促使淋巴管内皮细胞增殖、迁移并形成新的淋巴管,导致癌细胞转移.     

直肠腺癌VEGF-C及VEGFR-3的表达与淋巴转移的关系

目的为探讨癌细胞淋巴管转移机理,观察血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在直肠腺癌组织及淋巴管的表达。方法取人直肠腺癌手术材料30例,用免疫组化方法检测癌区和癌周正常区VEGF-C和VEGFR-3的表达情况。结果VEGF-C主要表达在直肠腺癌的癌细胞胞浆,VEGFR-3主要在淋巴管内皮细胞有阳性表达,两者在癌区的表达率均高于正常区直肠组织;癌区淋巴管的平均面密度(33.81±5.67)高于正常区平均面密度(20.13±3.27)。结论VEGF-C和VEGFR-3在人直肠腺癌中的过表达,可能与淋巴管增生和扩张,促进癌细胞的淋巴转移有关。     

血管内皮生长因子-C和血管内皮生长因子受体-3在侵袭性甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体(VEGFR3)在侵袭性甲状腺乳头状癌组织中的表达,探讨甲状腺乳头状癌细胞淋巴管转移机理.方法 用免疫组化方法检测VEGF-C和VEGFR3在人侵袭性甲状腺乳头状癌和非侵袭性甲状腺乳头状癌中的表达情况,并进行比较和分析.结果 在侵袭性和非侵袭性甲状腺乳头状癌中均可见到VEGF-C和VEGFR3阳性表达,但在侵袭性甲状腺乳头状癌组织VEGF-C (x2=4.738,P=0.030)和VEGFR3(x2=11.951,P=0.010)的表达率和表达强度均高于非侵袭性甲状腺乳头状癌.结论 VEGF-C和VEGFR3在侵袭性甲状腺乳头状癌细胞中高表达,并且可能与此肿瘤的侵袭性相关.     

IFN-β和angiostatin对猪淋巴管内皮细胞生成的影响

目的探讨IFN-β和angiostatin分别在离体和在体条件下对淋巴管内皮细胞生成的影响。方法淋巴管在体抑制实验观察活体被切断的淋巴管应用抑制因子后的再生情况,应用光镜、透射电镜、共聚焦显微镜观察离体猪胸导管内皮细胞的形态结构,应用MTT法来确定IFN-β对淋巴管内皮细胞生成的抑制作用,采用Hoechst法检测细胞凋亡。结果手术切断兔前或后肢淋巴管5d后,生理盐水侧的淋巴管已愈合,angiostatin侧仍有大量染料渗漏。培养的胸导管内皮细胞的突出结构特点是胞质内有较多吞饮小泡以及从细胞膜上发出许多长突起。MTT法显示IFN-β对离体淋巴管内皮细胞的增殖有明显的抑制作用,IFN-β可引起细胞凋亡。结论 Angiostatin对在体淋巴管的愈合有抑制作用,IFN-β对离体淋巴管内皮细胞的增殖有明显的抑制作用并促进细胞凋亡。     

血管内皮生长因子C促进HeLa宫颈癌细胞粘着斑激酶活性的研究

目的探讨粘着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）介导血管内皮细胞生长因子C（vascular endothelial growth factor C,VEGF—C）促宫颈癌恶性进展的作用。方法提取不同病理分期的宫颈癌组织标本蛋白．采用Western-blot检测VEGF．C及FAK蛋白的表达情况。在体外培养宫颈癌细胞株HeLa细胞,采用Western—blot测定VEGF—C对FAK蛋白的表达和磷酸化的调控作用。结果随着宫颈癌恶性程度的增高,VEGF-C、FAK蛋白及磷酸化FAK蛋白表达水平均随之增加。与正常宫颈组织比较,宫颈原位癌（CIN）组织中VEGF．C、FAK、磷酸化FAK蛋白表达分别增加了（48±10）％、（78±14）％、（83±15）％,P〈0．05;宫颈鳞癌Ⅰ期各蛋白增高幅度分别为（104±22）％、（121±28）％、（143±30）％（P〈0．01）;宫颈鳞癌Ⅱ期（未放疗、化疗）各蛋白表达增高更为显著,其幅度分别为（195±28）％、（186±22）％、（204±31）％,P〈0．001。在培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞上,VEGF—C（100μg／L）处理24h后,可显著增高FAK蛋白、磷酸化FAK蛋白的表达,该作用可被VEGF—C单克隆抗体明显抑制。结论VEGF—C、FAK蛋白表达与宫颈癌恶性程度密切相关,VEGF—C可能通过上调FAK表扶殛苴磷酪化水平而但讲宫颈癌的熏忡讲犀     

Vascular endothelial growth factor A and C gene expression in endometriosis

Angiogenesis is essential for the pathogenesis of endometriosis. Gene expression levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) A and C in 10 eutopic endometrial, 23 normal peritoneal, and 62 endometriotic tissues surgically obtained from 47 women with endometriosis (group 2) were compared with those in 12 control eutopic endometrial and 9 normal peritoneal tissues from 15 women without endometriosis (group 1). VEGF-A mRNA expression levels in eutopic endometrium of group 2 were higher than those of group 1 throughout the menstrual cycle (P <0.01) and increased in the secretory phase. VEGF-A gene expression in peritoneal endometriotic lesion was statistically higher than that in normal peritoneum (P <0.01) and similar to that in eutopic endometrium of group 2. In contrast, gene expression levels of VEGF-C were relatively lower than those of VEGF-A in each lesion, and no cyclic variation was found. VEGF-A and C mRNA expression levels were significantly higher in ovarian endometriomas >6 cm in size than in those <6 cm in size. Immunohistochemical expression of VEGF-A and C was detected in the cytoplasm of glandular epithelial and stromal cells of ovarian endometrioma. These results suggest that endometriosis may arise from eutopic endometrium with higher levels of angiogenic activity possibly induced by VEGF-A in women with endometriosis. Moreover, VEGF-C as well as VEGF-A may be involved in the pathogenesis of ovarian endometrioma.     

siRNA干扰Ezrin基因对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的探讨细胞膜与细胞骨架连接蛋白埃兹（Ezrin）对人脐静脉内皮细胞生长和转移能力的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞,选择3对小干扰RNA（siRNA）序列下调Ezrin的表达,实时定量PCR和Western-blot印迹法分别检测Ezrin mRNA和蛋白表达水平的变化。BrdU ELISA法检测Ezrin siRNA干扰后细胞增殖能力的改变,伤口愈合实验检测Ezrin siRNA干扰后细胞迁移能力的变化,流式细胞术检测Ezrin siRNA干扰后细胞凋亡能力。结果实时定量PCR和Western-blot印迹结果显示,siRNA干扰后Ezrin的基因和蛋白水平均显著下调;BrdU法显示Ezrin siRNA干扰后细胞生长速率降低（P〈0.05）,划痕实验显示Ezrin siRNA干扰后细胞迁移率降低（P〈0.05）,流式细胞仪检测显示Ezrin siRNA干扰后细胞凋亡率升高。结论 Ezrin蛋白可影响脐静脉内皮细胞的增殖和迁移能力,推测其在血管功能和肿瘤研究中可能具有重要意义。     

血管内皮生长因子C和Smad4的表达与膀胱癌淋巴管生成之间的关系

目的观察血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和Smad4在膀胱癌的表达,分析VEGF-C和Smad4的表达与膀胱癌淋巴管生成及膀胱癌进展之间的关系。方法取膀胱癌病例56例,其中浅表性膀胱癌(Tis,Ta,T1)32例,浸润性膀胱癌(T2以上)24例。应用免疫组化法和Western blot技术观察VEGF-C和Smad4在膀胱癌组织内的表达。以D2-40作为淋巴管内皮特异性标记物,检测膀胱癌组织内的淋巴管密度(LVD)。结果VEGF-C表达于肿瘤细胞的胞浆内,Smad4表达于肿瘤细胞的胞浆和胞核内。VEGF-C的表达水平与膀胱癌淋巴管密度呈正相关(P0.05),Smad4的表达水平与膀胱癌淋巴管密度呈负相关(P0.05)。VEGF-C和Smad4的表达呈负相关,VEGF-C的高表达和Smad4的低表达与膀胱癌淋巴管生成之间呈显著的相关性。Western blot检测结果表明,VEGF-C在浸润性膀胱癌组织内的表达量与其在浅表性膀胱癌组织内的表达量未见显著差异(P0.05),而Smad4在浅表性膀胱癌组织内的表达量明显高于其在浸润性膀胱癌组织内的表达量(P0.05)。结论 VEGF-C和Smad4在膀胱癌组织内表达水平呈负相关,Smad4可能通过调节VEGF-C蛋白的表达而抑制膀胱癌淋巴管生成。     

苹果酸舒尼替尼抑制膀胱癌T24细胞系的体外增殖

 摘要：目的：探讨苹果酸舒尼替尼对人膀胱癌T24细胞系体外增殖的影响。方法：取人膀胱癌T24细胞系悬液, 分别加入浓度为0.625、1.25、2.5、5、10 和 20μmol/L的苹果酸舒尼替尼,分别于24、48、72 h进行处理,用细胞毒抑制实验（MTT法）检测药物对其生长的影响。结果：苹果酸舒尼替尼可浓度依赖性抑制人膀胱癌细胞系T24细胞增殖,当药物浓度>5μmol/L时,苹果酸舒尼替尼与顺铂比较,对T24细胞系具有更强的抑制作用（P<0.05）。这种抑制作用随着药物培育时间延长（24、48、72ｈ）而增强,表现为IC50值显著降低, 但其抑制能力与顺铂比较无显著差别（P>0.05）。结论：苹果酸舒尼替尼可呈浓度和时间依赖地抑制膀胱癌T24细胞系增殖。